期刊文献+
共找到137篇文章
< 1 2 7 >
每页显示 20 50 100
Current Status and Challenge of Pseudorabies Virus Infection in China 被引量:41
1
作者 Lei Tan Jun Yao +4 位作者 Yadi Yang Wei Luo Xiaomin Yuan Lingchen Yang Aibing Wang 《Virologica Sinica》 SCIE CAS CSCD 2021年第4期588-607,共20页
Pseudorabies(PR),also called Aujeszky's disease,is a highly infectious disease caused by pseudorabies virus(PRV).Without specific host tropism,PRV can infect a wide variety of mammals,including pig,sheep,cattle,et... Pseudorabies(PR),also called Aujeszky's disease,is a highly infectious disease caused by pseudorabies virus(PRV).Without specific host tropism,PRV can infect a wide variety of mammals,including pig,sheep,cattle,etc.,thereby causing severe clinical symptoms and acute death.PRV was firstly reported in China in 1950s,while outbreaks of emerging PRV variants have been documented in partial regions since 2011,leading to significant economic losses in swine industry.Although scientists have been devoting to the design of diagnostic approaches and the development of vaccines during the past years,PR remains a vital infectious disease widely prevalent in Chinese pig industry.Especially,its potential threat to human health has also attracted the worldwide attention.In this review,we will provide a summary of current understanding of PRV in China,mainly focusing on PRV history,the existing diagnosis methods,PRV prevalence in pig population and other susceptible mammals,molecular characteristics,and the available vaccines against its infection.Additionally,promising agents including traditional Chinese herbal medicines and novel inhibitors that may be employed to treat this viral infection,are also discussed. 展开更多
关键词 pseudorabies virus(prv) Diagnosis methods PREVALENCE Multiple-species infection Prevention and control measures
原文传递
2012-2013年新流行猪伪狂犬病病毒的分离鉴定及其gE、TK、gD基因序列分析 被引量:37
2
作者 余秋颖 常洪涛 +6 位作者 陈文定 陈陆 明星 郑关民 张玉娟 韩莎 王川庆 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第10期1573-1578,1583,共7页
2012年伊始,猪伪狂犬病(pseudorabies,PR)在河南省部分地区再次暴发。为探寻其中缘由,对2012年3月至2013年6月间采集的疑似PR病料接种Vero细胞并经PCR鉴定,分离到4株伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)。同时对该4株病毒的gE、TK和g... 2012年伊始,猪伪狂犬病(pseudorabies,PR)在河南省部分地区再次暴发。为探寻其中缘由,对2012年3月至2013年6月间采集的疑似PR病料接种Vero细胞并经PCR鉴定,分离到4株伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)。同时对该4株病毒的gE、TK和gD基因进行PCR扩增、克隆、测序及分析。序列分析显示:4株PRV河南分离株的gE、TK、gD基因有些核苷酸及氨基酸发生变化,不同于参考毒株;遗传进化分析显示:4株PRV河南分离株形成单独1个小亚群,与中国其他地区分离株之间的亲缘关系较近,与欧洲、南美洲分离株之间的亲缘关系较远,推测此4株河南分离毒株是新型国内流行株。 展开更多
关键词 伪狂犬病病毒 分离鉴定 gE、TK、gD基因 序列分析
原文传递
表达猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)GP5的重组伪狂犬病毒TK^-/gG^-/GP5^+的构建及其生物学特性初步探讨 被引量:26
3
作者 方六荣 肖少波 +3 位作者 江云波 牛传双 张辉 陈焕春 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期249-254,共6页
以伪狂犬病毒基因缺失标志疫苗株TK-/gG-/LacZ+为亲本株,通过同源重组,构建了表达猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)主要免疫原性蛋白GP5的重组伪狂犬病毒TK-/gG-/GP5+。经PCR、Southern杂交、Westernblot证实构建正确,并能表达GP5。同时,... 以伪狂犬病毒基因缺失标志疫苗株TK-/gG-/LacZ+为亲本株,通过同源重组,构建了表达猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)主要免疫原性蛋白GP5的重组伪狂犬病毒TK-/gG-/GP5+。经PCR、Southern杂交、Westernblot证实构建正确,并能表达GP5。同时,对重组病毒在PK-15细胞中的增殖特性进行了检测,结果与亲本株相比,增殖滴度无显著性差异。将重组病毒免疫BALB/c小鼠,2次免疫后4周,50%(3/6)小鼠产生了低水平的GP5特异性ELISA抗体,但中和抗体均小于1:4。 展开更多
关键词 伪狂犬病毒 猪繁殖与呼吸综合征 生物学特性 重组病毒 表达
下载PDF
PCR快速检测伪狂犬病病毒野毒感染 被引量:29
4
作者 周斌 苏鑫铭 +3 位作者 张素芳 贾赟 曹瑞兵 陈溥言 《中国病毒学》 CSCD 2004年第6期612-615,共4页
根据已发表的伪狂犬病病毒(PrV)gE、gI基因的序列,设计并合成了一对引物,以PrV容A株细胞培养毒为模板,筛选最佳反应条件和试剂工作浓度,建立了区分PrV野毒株和疫苗弱毒的鉴别PCR方法.该方法能从PrV容A株(RA)、上海株(SH)、鲁A株(LA)中... 根据已发表的伪狂犬病病毒(PrV)gE、gI基因的序列,设计并合成了一对引物,以PrV容A株细胞培养毒为模板,筛选最佳反应条件和试剂工作浓度,建立了区分PrV野毒株和疫苗弱毒的鉴别PCR方法.该方法能从PrV容A株(RA)、上海株(SH)、鲁A株(LA)中扩增出一条848bp的片段,但Bartha-K61株没有扩增出该片段.测序结果表明PCR扩增产物和方法的特异性.对正常细胞与其它6种引起猪病毒性疫病相关病毒进行检测,结果均为阴性,没有出现交叉反应.对PrV容A株细胞毒提取物DNA进行检测,其最低检出量为5pg.PCR对感染野毒的发病猪不同组织器官检测发现,淋巴结检出率最高,依次为脾、脑(海马角)、肺、肾、肝等.对2003~2004年期间江苏、浙江、安徽、福建、上海等省市的37个大中型猪场送检的172份病料进行PCR检测病料阳性率为20.34%(35/172),猪场阳性率为40.54%(15/37).实验结果表明所建立的PCR技术可用于伪狂犬病野毒感染的快速鉴定和流行病学调查. 展开更多
关键词 伪狂犬病毒 PCR 建立 应用
下载PDF
伪狂犬病毒流行毒株的抗原性和血清中和特性分析 被引量:26
5
作者 杨文萍 顾真庆 +4 位作者 孙海凤 董静 侯成才 白娟 姜平 《畜牧与兽医》 北大核心 2014年第10期11-14,共4页
2011年以来,我国多个省份伪狂犬病免疫猪群相继暴发伪狂犬病疫情.为了探明伪狂犬病毒(PRV)流行毒株是否存在抗原变异,本研究从3个规模猪场3种PRV商品疫苗免疫的健康猪群中采集30份血清,经检测PRVgBELISA抗体均为阳性,gE ELISA抗体均... 2011年以来,我国多个省份伪狂犬病免疫猪群相继暴发伪狂犬病疫情.为了探明伪狂犬病毒(PRV)流行毒株是否存在抗原变异,本研究从3个规模猪场3种PRV商品疫苗免疫的健康猪群中采集30份血清,经检测PRVgBELISA抗体均为阳性,gE ELISA抗体均为阴性.采用PRV新流行毒株ZJ-01株和传统的LA毒株分别进行血清中和抗体测定,结果显示,3个毒株活疫苗免疫血清与ZJ-01株中和抗体效价明显低于其与LA株中和抗体效价.同时,ZJ-01株抗血清与ZJ-01株和LA株的中和抗体效价相似,其变异系数R值为0.279~0.413,证明PRV分离毒株ZJ-01抗原性发生明显变异.本研究为伪狂犬病的防控提供了重要依据. 展开更多
关键词 交叉中和试验 抗原变异
原文传递
鉴别伪狂犬病病毒野毒与疫苗毒荧光定量PCR方法的建立 被引量:23
6
作者 赵丽 崔保安 +5 位作者 陈红英 魏战勇 郑兰兰 吕晓丽 贾艳艳 赵绪永 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期1149-1154,共6页
根据猪伪狂犬病病毒(PRV)gH、gE基因的序列,设计了两对引物及其对应的TaqMan探针,通过对引物、探针、Mg2+的浓度和样品DNA提取方法等进行优化,建立了鉴别PRV野毒与疫苗毒感染的荧光定量PCR方法。该方法线性范围为10^1-10^8拷贝/... 根据猪伪狂犬病病毒(PRV)gH、gE基因的序列,设计了两对引物及其对应的TaqMan探针,通过对引物、探针、Mg2+的浓度和样品DNA提取方法等进行优化,建立了鉴别PRV野毒与疫苗毒感染的荧光定量PCR方法。该方法线性范围为10^1-10^8拷贝/μL,达8个数量级,灵敏度可达10^1拷贝/μL,比常规PCR高100倍。用此方法对60份疑似组织样品进行检测,并与血清中和试验、常规PCR相比较,结果显示该方法具有快速、灵敏、特异、重复性好和能对样品进行定量检测等优点,并且该法以闭管的模式操作,减少了后续步骤污染的可能性,整个PCR检测过程不到2h。此方法的建立,为猪伪狂犬病病毒的早期鉴别诊断和定量分析猪伪狂犬病病毒感染程度奠定了基础。 展开更多
关键词 伪狂犬病病毒 荧光定量PCR 鉴别诊断 野毒与疫苗毒 检测
下载PDF
猪伪狂犬病毒Taqman-MGB荧光定量PCR检测方法的建立及应用 被引量:18
7
作者 郑敏 毛凝 +2 位作者 黄梅清 陈仕龙 陈少莺 《中国农学通报》 CSCD 2013年第17期37-41,共5页
建立可区分猪伪狂犬野毒株及基因缺失疫苗株的TaqMan-MGB荧光定量PCR检测方法。根据猪伪狂犬病病毒gE基因序列,设计一对特异引物和探针,通过优化反应条件,建立了可区分猪伪狂犬野毒株及基因缺失疫苗株的TaqMan-MGB荧光定量PCR检测方法,... 建立可区分猪伪狂犬野毒株及基因缺失疫苗株的TaqMan-MGB荧光定量PCR检测方法。根据猪伪狂犬病病毒gE基因序列,设计一对特异引物和探针,通过优化反应条件,建立了可区分猪伪狂犬野毒株及基因缺失疫苗株的TaqMan-MGB荧光定量PCR检测方法,同时验证该方法的特异性、敏感性、重复性,并对30份疑似病料进行临床检测。本研究所建立的TaqMan-MGB荧光定量PCR检测方法灵敏度可达2.23×10拷贝/μL,比常规PCR检测方法高100倍;与猪圆环病毒2型(PCV2)、猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖和呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪细小病毒(PPV)均无交叉反应,具有高特异性;对30份疑似病料的TaqMan荧光定量PCR和普通PCR检测阳性率分别为40%和33%,两者符合率90%。该方法灵敏度高、特异性强、重复性好,可同时检测大量样品,可适合于PRV的临床诊断和流行病学调查。 展开更多
关键词 猪伪狂犬病毒(prv) TaqMan-MGB 荧光定量PCR
下载PDF
Genome Characteristics and Evolution of Pseudorabies Virus Strains in Eastern China from 2017 to 2019 被引量:14
8
作者 Xiaofeng Zhai Wen Zhao +9 位作者 Kemang Li Cheng Zhang Congcong Wang Shuo Su Jiyong Zhou Jing Lei Gang Xing Haifeng Sun Zhiyu Shi Jinyan Gu 《Virologica Sinica》 SCIE CAS CSCD 2019年第6期601-609,共9页
Since late 2011,outbreaks of pseudorabies virus(PRV)have occurred in southern China causing major economic losses to the pig industry.We previously reported that variant PRV forms and recombination in China could be t... Since late 2011,outbreaks of pseudorabies virus(PRV)have occurred in southern China causing major economic losses to the pig industry.We previously reported that variant PRV forms and recombination in China could be the source of continued epidemics.Here,we analyzed samples from intensive pig farms in eastern China between 2017 and 2019,and sequenced the main glycoproteins(gB,gC,gD,and gE)to study the evolution characteristics of PRV.Based on the gC gene,we found that PRV variants belong to clade 2 and detected a founder effect during by the PRV epidemic.In addition,we detected inter-and intra-clade recombination;in particular,inter-clade recombination in the gB genes of strains FJ-ZXF and FJ-W2,which were recombinant with clade 1 strains.We also found specific amino-acid changes and positively selected sites,possibly associated with functional changes.This analysis of the emergence of PRV in China illustrates the need for continuous monitoring and the development of vaccines against specific variants of PRV. 展开更多
关键词 pseudorabies virus (prv) GLYCOPROTEINS FOUNDER effect EPIDEMIC Eastern China
原文传递
猪伪狂犬病病毒粤A株的分离与鉴定 被引量:7
9
作者 刘镇明 蓝天 +2 位作者 罗满林 袁少华 石迎新 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第2期76-78,共3页
从广东番禺某猪场病死仔猪中分离到一株疑为猪伪狂犬病病毒 (PRV)毒株 ,通过对其理化特性的鉴定、中和试验、实验动物回归试验、电镜观察、PCR扩增及感染力测定 ,发现其对氯仿、乙醚均敏感 ;能中和Pr闽A株标准阳性血清 ;实验兔接种该病... 从广东番禺某猪场病死仔猪中分离到一株疑为猪伪狂犬病病毒 (PRV)毒株 ,通过对其理化特性的鉴定、中和试验、实验动物回归试验、电镜观察、PCR扩增及感染力测定 ,发现其对氯仿、乙醚均敏感 ;能中和Pr闽A株标准阳性血清 ;实验兔接种该病毒后 ,发生瘙痒并麻痹致死 ;电镜观察可见病毒粒子呈不规则圆形并带有囊膜和纤突 ;PCR体外扩增可见其与闽A株在同一水平位置上有相同的电泳带 ;用Marc14 5细胞测定其毒价为 1 0 7.5TCID50 /mL 根据此分离病毒株的上述特性 。 展开更多
关键词 猪伪狂犬病病毒 中和试验 PCR检测 病原鉴定
下载PDF
多价荧光抗体监测外源病毒污染的研究 被引量:4
10
作者 邵振华 田海燕 《中国兽药杂志》 北大核心 1997年第2期1-6,T001,共7页
用猪瘟病毒(HCV)、猪细小病毒(PPV)、牛病毒性腹泻/粘膜病病毒(BVD/MDV)、伪狂犬病病毒(PrV)、兰舌病病毒(BtV)、羊口疮病毒(OV)等六种病毒,多次同时或先后强化免疫猪,制取六价高免血清;用狂犬病... 用猪瘟病毒(HCV)、猪细小病毒(PPV)、牛病毒性腹泻/粘膜病病毒(BVD/MDV)、伪狂犬病病毒(PrV)、兰舌病病毒(BtV)、羊口疮病毒(OV)等六种病毒,多次同时或先后强化免疫猪,制取六价高免血清;用狂犬病病毒(RV)免疫兔,制取RV单价高免血清。分别用异硫氰酸荧光素(FITC)标记制成荧光抗体(FA)。并按二者最佳染色价配制成七价(多价)FA。由于各病毒在其宿主细胞中复制部位和与宿主细胞相互关系各不相同,在荧光显微镜下,多价FA对其相应病毒的细胞培养物,能显示出各不相同的荧光特点,而得以检测、鉴定。用相应的多、单价高免血清作抑制染色试验,结果各病毒荧光可被一一抑制,表明了多价FA具有高度的特异性。对各病毒进行FA细胞培养物半数感染量(FA-TCID50)与常规TCID50或LD50测定比较试验,结果前者均高于后者,表明了这种荧光抗体制剂同时具有高度的敏感性。应用多价FA,对非禽源细胞苗生产中外源病毒的污染进行了中间监测,选用了与强毒荧光无区别的7种感染的细胞作阳性参照,保证了生产单位在使用中的安全,对A、B二厂生产猪瘟苗有干扰的细胞,进行抽样监测80批,结果13批污染BVDV(16.25%),1? 展开更多
关键词 多价荧光抗体 HCV PPV prv BTV 药物 病毒污染
下载PDF
表达猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5蛋白重组伪狂犬病毒的构建及其生物学特性分析(英文) 被引量:9
11
作者 田志军 仇华吉 +5 位作者 倪健强 周艳君 蔡雪辉 周国辉 王云峰 童光志 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第12期1248-1255,共8页
将猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus,PRRSV)CH1a株GP5基因插入到伪狂犬病病毒(PseudorabiesVirus,PRV)BarthaK61株TK基因中,获得了一株TK-/gE-表型的重组伪狂犬病病毒,命名为rPRVGP5。经生... 将猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus,PRRSV)CH1a株GP5基因插入到伪狂犬病病毒(PseudorabiesVirus,PRV)BarthaK61株TK基因中,获得了一株TK-/gE-表型的重组伪狂犬病病毒,命名为rPRVGP5。经生长动力学、表达动力学和间接免疫荧光证实PRRSVGP5在重组病毒中获得了表达,表达蛋白的抗原性与亲本病毒相似,rPRVGP5在不同的细胞上毒价和细胞病变与BarthaK61比较无显著差异。4只PRV抗体阴性的绵羊,每只接种106.0PFU的rPRVGP5可以完全抵抗103LD50伪狂犬病强毒S株的攻击。10头PRV、PRRSV抗体阴性的仔猪滴鼻接种rPRVGP5107.0PFU/头并在接种后63d攻击PRRSVCH1a株105.0TCID50/头,攻毒后3d和5d出现了PRRSV荧光抗体和ELISA抗体,在攻毒后14d检测到了PRRSV中和抗体,BarthaK61活疫苗组和对照组至实验结束时仍未检测到PRRSV中和抗体。这说明rPRVGP5免疫产生了针对PRRSV的回忆性免疫应答。 展开更多
关键词 猪呼吸与繁殖综合征病毒 伪狂犬病病毒 GP5 生物学特性
下载PDF
猪伪狂犬病病毒TaqMan-MGB荧光定量PCR检测方法的建立及应用 被引量:11
12
作者 刘园园 吴晖 +3 位作者 肖性龙 贾赟 吴斌 余以刚 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2009年第4期76-79,共4页
本研究针对猪伪狂犬病病毒的gE基因序列进行分析比较,设计了一条TaqMan-MGB探针,建立了区别野毒株及基因缺失疫苗株的荧光定量PCR检测方法。结果表明,该方法检测猪伪狂犬病病毒特异性强,能很好的区分猪伪狂犬病病毒与其它病毒。用该方法... 本研究针对猪伪狂犬病病毒的gE基因序列进行分析比较,设计了一条TaqMan-MGB探针,建立了区别野毒株及基因缺失疫苗株的荧光定量PCR检测方法。结果表明,该方法检测猪伪狂犬病病毒特异性强,能很好的区分猪伪狂犬病病毒与其它病毒。用该方法对83份疑似样本进行检测,与常规PCR检测法符合率达到100%,表明该方法用于检测猪伪狂犬病病毒具有良好的实用性。 展开更多
关键词 猪伪狂犬病病毒 TaqMan-MGB荧光定量PCR 检测
下载PDF
检测PCV_2、PPV、PRV疫苗株与野毒株的多重PCR方法 被引量:7
13
作者 潘群兴 陈德 +1 位作者 何孔旺 黄克和 《中国病毒学》 CSCD 2005年第6期603-606,共4页
本文建立了一种同时检测猪圆环病毒2型(PCV2)、细小病毒(PPV)、及伪狂犬病毒(PRV)疫苗株与野毒株 的多重PCR方法。根据GenBank上发表的PCV2、PPV和PRV gB、gE基因序列,针对各自保守区各设计一对特 异性引物,用这四对引物对同一样品中的P... 本文建立了一种同时检测猪圆环病毒2型(PCV2)、细小病毒(PPV)、及伪狂犬病毒(PRV)疫苗株与野毒株 的多重PCR方法。根据GenBank上发表的PCV2、PPV和PRV gB、gE基因序列,针对各自保守区各设计一对特 异性引物,用这四对引物对同一样品中的PCV2、PPV和PRV gB、gE进行检测,结果可同时扩增出269bp(PCV2)、 581bp(PPV)、372bP(PRV gB)及147bp(PRV gE)四条特异性片段。对JEV、PRRSRV、大肠杆菌和双蒸水的PCR 扩增结果均为阴性;敏感性测定结果表明,该多重PCR能检出10pg PCV2、PPV和PRV gB、gE检测敏感度分别为 106.2、103.8、10-5.8 TCID50的模板。该方法的建立对临床上进行这三种疾病的鉴别诊断和混合感染的检测具有重要 意义。 展开更多
关键词 多重聚合酶链式反应 伪狂犬病毒(prv) 细小病毒(PPV) 猪圆环病毒2型(PCV2)
下载PDF
山东省部分地区猪伪狂犬病病毒分离鉴定及其gE基因遗传变异分析 被引量:12
14
作者 古金元 马梓承 +4 位作者 彭涛 刘照虎 孟凡亮 王玉超 刘思当 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期21-24,30,共5页
自2011年下半年以来全国多个省份使用Bartha-K61疫苗(gE/gI双缺失)免疫的猪场陆续出现了母猪繁殖障碍、仔猪神经症状及死亡、伪狂犬gE抗体阴性猪群突然转阳的问题。同时有的猪场内出现犬、猫、鼠等死亡的现象,经检测都是由变异伪狂犬病... 自2011年下半年以来全国多个省份使用Bartha-K61疫苗(gE/gI双缺失)免疫的猪场陆续出现了母猪繁殖障碍、仔猪神经症状及死亡、伪狂犬gE抗体阴性猪群突然转阳的问题。同时有的猪场内出现犬、猫、鼠等死亡的现象,经检测都是由变异伪狂犬病病毒(vPRV)引起。为了解山东省猪伪狂犬病病毒(PRV)近期流行特征,本试验对2017年上半年来自山东省不同地区的12份伪狂犬疑似病料进行了PRV的分离鉴定,并对分离株的gE基因进行了序列测定及遗传变异分析。结果表明,共分离到9株PRV,其核苷酸和氨基酸序列的同源性分别为97.5%~99.4%和97.2%~99.1%,与参考毒株其核苷酸和氨基酸序列的同源性分别为97.5%~99.8%和96.8%~99.2%,并且9株分离株与国内报道的PRV变异株的核苷酸和氨基酸序列的同源性均高于欧美毒株。gE基因的遗传进化树分析表明,本试验中9株分离株相互之间遗传距离较近,与国内PRV变异株处在同一分支,而与欧美毒株遗传距离较远。 展开更多
关键词 伪狂犬病病毒 变异毒株 GE基因 遗传变异分析
原文传递
伪狂犬病毒gD基因在转基因烟草中的表达 被引量:9
15
作者 肖少波 陈焕春 +3 位作者 方六荣 李蕊 柳俊 洪文洲 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期465-468,共4页
将猪伪狂犬病毒 (pseudorabiesvirus ,PRV)最主要的保护性抗原基因gD完整编码区亚克隆到修饰的植物双元表达载体pBI 35SL中 ,使其置于强启动子CaMV 35S doubleenhancer TEV 5′UTR下游 ,构建的转基因植物双元表达质粒经农杆菌介导转化... 将猪伪狂犬病毒 (pseudorabiesvirus ,PRV)最主要的保护性抗原基因gD完整编码区亚克隆到修饰的植物双元表达载体pBI 35SL中 ,使其置于强启动子CaMV 35S doubleenhancer TEV 5′UTR下游 ,构建的转基因植物双元表达质粒经农杆菌介导转化烟草 .PCR检测叶片筛选阳性植株 ,Southern杂交进一步证实gD已整合到转基因烟草基因组中 .固相酶联斑点试验和Western印迹表明 。 展开更多
关键词 伪狂犬病毒 GD基因 转基因烟草 表达 糖蛋白D 抗原性
下载PDF
可视化LAMP快速检测猪伪狂犬病毒 被引量:10
16
作者 王树芬 王德国 +3 位作者 薛白 李学伍 赵东 张改平 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2012年第6期140-143,共4页
为快速检测猪伪狂犬病毒(PRV),利用PRV DBP基因上的一段序列设计并合成3对LAMP引物,采用一种新的荧光染料——罗丹明B衍生物作指示剂,该指示剂在反应前加到反应缓冲液里,通过优化反应条件,建立了可视化LAMP快速检测PRV的方法。结果表明... 为快速检测猪伪狂犬病毒(PRV),利用PRV DBP基因上的一段序列设计并合成3对LAMP引物,采用一种新的荧光染料——罗丹明B衍生物作指示剂,该指示剂在反应前加到反应缓冲液里,通过优化反应条件,建立了可视化LAMP快速检测PRV的方法。结果表明,63℃下恒温反应40min可得到肉眼可视结果,颜色变成蓝色判定为阳性,仍然保持紫色判定为阴性,可视化LAMP结果与电泳结果一致。建立的可视化LAMP方法可以快速、直观、准确地检测PRV。 展开更多
关键词 猪伪狂犬病毒(prv) 环介导等温扩增技术(LAMP) 罗丹明B衍生物指示剂
下载PDF
猪伪狂犬病病毒变异毒株HeNZK-2014的分离鉴定及gE基因序列分析 被引量:10
17
作者 马震原 李宁 +7 位作者 闫若潜 班付国 王淑娟 赵雪丽 谢彩华 王东方 王华俊 曹伟伟 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2017年第7期2086-2095,共10页
为了解猪伪狂犬病病毒(PRV)变异毒株的特点,本研究采集临床疑似PRV感染发病猪的淋巴结等组织样品进行PCR鉴定,选取仅PRV阳性的组织样品经研磨除菌后取上清接种于PK-15细胞进行病毒分离培养、蚀斑纯化、PCR和间接免疫荧光法(IFA)鉴定,采... 为了解猪伪狂犬病病毒(PRV)变异毒株的特点,本研究采集临床疑似PRV感染发病猪的淋巴结等组织样品进行PCR鉴定,选取仅PRV阳性的组织样品经研磨除菌后取上清接种于PK-15细胞进行病毒分离培养、蚀斑纯化、PCR和间接免疫荧光法(IFA)鉴定,采用Reed-Muench法测定PRV的TCID50,接种小鼠并观察临床症状,对纯化的PRV和死亡小鼠脑组织样品进行gE基因PCR扩增及测序分析。结果显示,PRV阳性病料接种于PK-15细胞24h后出现典型细胞病变(CPE),经3轮蚀斑纯化后PCR和IFA鉴定结果均为阳性,分离株命名为HeNZK-2014,其TCID50为10-9.77/0.1mL;以1×108个TCID50病毒悬液接种小鼠22h后可引起小鼠出现奇痒、撕咬、死亡等典型猪伪狂犬病症状,死亡小鼠脑组织样品PRV PCR检测结果为阳性;纯化病毒和死亡小鼠脑组织样品gE基因核苷酸序列同源性为100.0%,与GenBank中2011年以前登录的经典毒株位于不同分支,与2011年之后中国流行毒株位于同一分支,在第48和496位各有1个天冬氨酸(D)的插入,具有变异毒株的典型特征。本研究成功分离了1株PRV变异毒株,为进一步开展针对PRV变异毒株的疫苗及其防控研究奠定了基础。 展开更多
关键词 伪狂犬病病毒 变异毒株 分离 鉴定 GE基因 遗传变异分析
下载PDF
猪伪狂犬病毒和猪圆环病毒2型TaqMan-MGB双重荧光定量PCR检测方法的建立及应用 被引量:10
18
作者 郑敏 黄梅清 +2 位作者 毛凝 陈少莺 俞伏松 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期378-383,共6页
参照GenBank中猪伪狂犬病毒(PRV)gE基因以及猪圆环病毒2型(PCV2)中ORF2特异性序列,设计特异引物和TaqMan-MGB探针,通过优化反应条件,建立了同时检测PRV野毒株和猪圆环病毒(PCV2)的双重荧光定量PCR检测方法,并验证该方法的特异性、敏感... 参照GenBank中猪伪狂犬病毒(PRV)gE基因以及猪圆环病毒2型(PCV2)中ORF2特异性序列,设计特异引物和TaqMan-MGB探针,通过优化反应条件,建立了同时检测PRV野毒株和猪圆环病毒(PCV2)的双重荧光定量PCR检测方法,并验证该方法的特异性、敏感性、重复性。结果表明,该方法检测PRV和PCV2灵敏度分别可达2.23×101、4.5×102拷贝/μL,均比常规PCR检测方法高100倍;同时检测猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖和呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪细小病毒(PPV)、均为阴性,无交叉反应;对30份疑似病料进行检测并与普通PCR进行比较,结果显示,二者检测PRV的总符合率为96.67%,检测PCV2的总符合率为93.33%。本试验建立的TaqMan-MGB双重荧光定量PCR检测方法可同时对PRV野毒株和PCV2进行早期快速诊断,可应用于病原学监测,流行病学调查等。 展开更多
关键词 猪伪狂犬病毒 猪圆环病毒TaqMan-MGB 双重荧光定量PCR
原文传递
伪狂犬病病毒gG基因缺失通用转移载体的构建 被引量:8
19
作者 方六荣 陈焕春 +2 位作者 肖少波 王革非 马相如 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期306-309,共4页
对克隆有伪狂犬病病毒Ea株基因组DNASphI 15kb片段的质粒pBSA用SphI和KpnI消化 ,将含gG全基因及其上游PK基因、下游gD基因部分编码区约 2 .6kb的片段亚克隆到消除了EcoRI位点的载体pUC19中 ,获得重组质粒pUSK(E)。以pEGFP N1为模板 ,通... 对克隆有伪狂犬病病毒Ea株基因组DNASphI 15kb片段的质粒pBSA用SphI和KpnI消化 ,将含gG全基因及其上游PK基因、下游gD基因部分编码区约 2 .6kb的片段亚克隆到消除了EcoRI位点的载体pUC19中 ,获得重组质粒pUSK(E)。以pEGFP N1为模板 ,通过PCR扩增约 0 .3kb的SV40Poly(A)片段 ,并将其克隆到杆状病毒转座载体pFastBac1的NotI和PstI位点 ,利用pFastBac1的BamHI和PstI将含有 9个酶切位点以及SV40Poly(A)的片段亚克隆到pUSK(E)的相应位点 ,在插入的同时导致gG基因 5’端编码区约 40 0bp的缺失 ,构建了由gG启动子驱动gG部分编码区缺失的通用转移载体pgG Uni。序列分析进一步证实 :有 7个单一酶切位点可供外源基因直接插入。 展开更多
关键词 伪狂犬病病毒 gG基因 gG启动子 通用转移载体 克隆 序列分析 真核表达系统 多价基因工程疫苗 疱疹病毒科 分子生物学
下载PDF
猪伪狂犬病毒病与圆环病毒病2型混合感染的诊断 被引量:10
20
作者 刘志杰 李如举 +5 位作者 周莉 曾智勇 汤德元 王彬 甘振磊 王凤 《贵州农业科学》 CAS 北大核心 2011年第11期153-154,共2页
为诊断贵州省都匀市贵定县某猪场送检病料的感染类型,调查了其流行病学、临床症状和病理剖检特征,并采用复合PCR检测技术对其进行检测。结果表明,该猪场存在猪伪狂犬病毒病与猪圆环病毒病的混合感染。
关键词 猪伪狂犬病毒病 猪圆环病毒病 混合感染 诊断
下载PDF
上一页 1 2 7 下一页 到第
使用帮助 返回顶部