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荧光假单胞菌胞外蛋白酶的纯化及特性研究
被引量:
10
1
作者
张书文
刘鹭
+3 位作者
李红娟
孙洁
崔文明
吕加平
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2012年第9期206-210,共5页
采用硫酸铵沉淀、DEAE-Sepharose FF离子交换层析、Sephacryl S-100 HR凝胶过滤层析方法对从原料乳中分离出一株荧光假单胞菌胞外耐热蛋白酶进行纯化及特性研究。将纯化后的单一蛋白酶进行SDS-PAGE分子质量测定,并考察最适温度、最适pH...
采用硫酸铵沉淀、DEAE-Sepharose FF离子交换层析、Sephacryl S-100 HR凝胶过滤层析方法对从原料乳中分离出一株荧光假单胞菌胞外耐热蛋白酶进行纯化及特性研究。将纯化后的单一蛋白酶进行SDS-PAGE分子质量测定,并考察最适温度、最适pH值、热稳定性、金属离子对其酶活性的影响及对该蛋白酶的氨基酸种类分析。纯化后蛋白酶的分子质量为47kD,经纯化后蛋白酶比活力提高了近61.38倍;最适温度和pH值分别为30℃和7.0;二硫苏糖醇对蛋白酶活性具有一定的抑制作用,Fe2+可以促进蛋白酶活性的提高;该酶具有较强耐热性,原酶液经130℃热处理3min后,残留酶活仍超过原酶液的47.67%;该蛋白酶氨基酸组成中甘氨酸(Gly)、丙氨酸(Ala)和谷氨酸(Glu)的含量占明显优势,其中Gly含量最高,物质的量分数高达42%。
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关键词
荧光假单胞菌
蛋白酶
纯化
特性
牛乳
腐败
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职称材料
荧光假单胞杆菌胞外蛋白酶的纯化及热稳定性
被引量:
8
2
作者
母智深
白英
+1 位作者
赵广华
胡小松
《高等学校化学学报》
SCIE
EI
CAS
CSCD
北大核心
2008年第4期762-766,共5页
从原料乳中分离获得一株荧光假单胞菌Rm12,该菌株分泌的胞外蛋白酶具有很强的耐热性,其发酵上清液经过硫酸铵沉淀、阴离子层析、疏水层析和分子排阻层析纯化得到SDS-PAGE均一蛋白酶,经鉴定确认该酶是一种新的金属蛋白酶,命名为Ht12,对H...
从原料乳中分离获得一株荧光假单胞菌Rm12,该菌株分泌的胞外蛋白酶具有很强的耐热性,其发酵上清液经过硫酸铵沉淀、阴离子层析、疏水层析和分子排阻层析纯化得到SDS-PAGE均一蛋白酶,经鉴定确认该酶是一种新的金属蛋白酶,命名为Ht12,对Ht12的基本特性和热稳定性进行了研究.结果表明,此蛋白酶分子量为45000,含有较高的脯氨酸和二硫键,N末端氨基酸残基序列为MSKVKDKAIVSAAQAS,Mn2+对蛋白酶活力有促进作用.该蛋白酶具有较高的热稳定性,于160℃加热20s,保留活力3.8%.
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关键词
荧光假单孢杆菌
耐热蛋白酶
金属蛋白酶
原料乳
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职称材料
题名
荧光假单胞菌胞外蛋白酶的纯化及特性研究
被引量:
10
1
作者
张书文
刘鹭
李红娟
孙洁
崔文明
吕加平
机构
中国农业科学院农产品加工研究所
出处
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2012年第9期206-210,共5页
基金
农业部公益性行业科研专项(200903043)
国家自然科学基金项目(31071575)
文摘
采用硫酸铵沉淀、DEAE-Sepharose FF离子交换层析、Sephacryl S-100 HR凝胶过滤层析方法对从原料乳中分离出一株荧光假单胞菌胞外耐热蛋白酶进行纯化及特性研究。将纯化后的单一蛋白酶进行SDS-PAGE分子质量测定,并考察最适温度、最适pH值、热稳定性、金属离子对其酶活性的影响及对该蛋白酶的氨基酸种类分析。纯化后蛋白酶的分子质量为47kD,经纯化后蛋白酶比活力提高了近61.38倍;最适温度和pH值分别为30℃和7.0;二硫苏糖醇对蛋白酶活性具有一定的抑制作用,Fe2+可以促进蛋白酶活性的提高;该酶具有较强耐热性,原酶液经130℃热处理3min后,残留酶活仍超过原酶液的47.67%;该蛋白酶氨基酸组成中甘氨酸(Gly)、丙氨酸(Ala)和谷氨酸(Glu)的含量占明显优势,其中Gly含量最高,物质的量分数高达42%。
关键词
荧光假单胞菌
蛋白酶
纯化
特性
牛乳
腐败
Keywords
pseudomonads
fluorescens
protease
purification
characterization
milk
spoilage
分类号
Q814.1 [生物学—生物工程]
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职称材料
题名
荧光假单胞杆菌胞外蛋白酶的纯化及热稳定性
被引量:
8
2
作者
母智深
白英
赵广华
胡小松
机构
中国农业大学食品与营养工程学院
内蒙古农业大学食品科学与工程学院
出处
《高等学校化学学报》
SCIE
EI
CAS
CSCD
北大核心
2008年第4期762-766,共5页
基金
中国教育部“新世纪优秀人才基金”(批准号:NCET-04-0134)资助
文摘
从原料乳中分离获得一株荧光假单胞菌Rm12,该菌株分泌的胞外蛋白酶具有很强的耐热性,其发酵上清液经过硫酸铵沉淀、阴离子层析、疏水层析和分子排阻层析纯化得到SDS-PAGE均一蛋白酶,经鉴定确认该酶是一种新的金属蛋白酶,命名为Ht12,对Ht12的基本特性和热稳定性进行了研究.结果表明,此蛋白酶分子量为45000,含有较高的脯氨酸和二硫键,N末端氨基酸残基序列为MSKVKDKAIVSAAQAS,Mn2+对蛋白酶活力有促进作用.该蛋白酶具有较高的热稳定性,于160℃加热20s,保留活力3.8%.
关键词
荧光假单孢杆菌
耐热蛋白酶
金属蛋白酶
原料乳
Keywords
pseudomonads
fluorescens
Heat-stable
protease
Metalloprotease
Raw
milk
分类号
O629 [理学—有机化学]
Q55 [理学—化学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
荧光假单胞菌胞外蛋白酶的纯化及特性研究
张书文
刘鹭
李红娟
孙洁
崔文明
吕加平
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2012
10
下载PDF
职称材料
2
荧光假单胞杆菌胞外蛋白酶的纯化及热稳定性
母智深
白英
赵广华
胡小松
《高等学校化学学报》
SCIE
EI
CAS
CSCD
北大核心
2008
8
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