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靶向马铃薯StProDH1基因的CRISPR/Cas9 sgRNA表达载体构建
1
作者
李世贵
杨江伟
+3 位作者
朱熙
王树林
张宁
司怀军
《分子植物育种》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第3期841-845,共5页
CRISPR/Cas9基因编辑系统已成为许多作物基因功能研究和品种改良的重要工具。脯氨酸(Pro)在植物响应干旱胁迫方面起着重要作用,脯氨酸脱氢酶ProDH是脯氨酸分解途径中的限速酶。为了研究StProDH1在马铃薯脯氨酸代谢中的作用,本研究以StPr...
CRISPR/Cas9基因编辑系统已成为许多作物基因功能研究和品种改良的重要工具。脯氨酸(Pro)在植物响应干旱胁迫方面起着重要作用,脯氨酸脱氢酶ProDH是脯氨酸分解途径中的限速酶。为了研究StProDH1在马铃薯脯氨酸代谢中的作用,本研究以StProDH1为靶基因,构建了表达马铃薯脯氨酸脱氢酶g RNA的CRISPR/Cas9基因敲除系统,在StProDH1基因5'端第一个外显子上为靶标区域选择设计sgRNA,以p P1C.4为模板,克隆得到sgRNA克隆框,将得到的sgRNA克隆框通过同源重组技术连接到pP1C.4载体中,获得pP1C.4-Cas9-ProDH1-g RNA载体。通过设计引物特异性扩增以及测序进一步确定sgRNA准确地连入载体,这对马铃薯中脯氨酸累积及其培育抗旱马铃薯新品种具有重要意义。
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关键词
CRISPR/Cas9基因编辑系统
马铃薯
prodh
1
载体构建
原文传递
题名
靶向马铃薯StProDH1基因的CRISPR/Cas9 sgRNA表达载体构建
1
作者
李世贵
杨江伟
朱熙
王树林
张宁
司怀军
机构
甘肃农业大学生命科学技术学院
甘肃农业大学甘肃省干旱生境作物学省部共建国家重点试验室培育基地甘肃省作物遗传改良与种质创新重点试验室
出处
《分子植物育种》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第3期841-845,共5页
基金
国家自然科学基金(31660416
31460370)
甘肃农业大学"伏羲人才"计划项目(FXRC20130102)共同资助
文摘
CRISPR/Cas9基因编辑系统已成为许多作物基因功能研究和品种改良的重要工具。脯氨酸(Pro)在植物响应干旱胁迫方面起着重要作用,脯氨酸脱氢酶ProDH是脯氨酸分解途径中的限速酶。为了研究StProDH1在马铃薯脯氨酸代谢中的作用,本研究以StProDH1为靶基因,构建了表达马铃薯脯氨酸脱氢酶g RNA的CRISPR/Cas9基因敲除系统,在StProDH1基因5'端第一个外显子上为靶标区域选择设计sgRNA,以p P1C.4为模板,克隆得到sgRNA克隆框,将得到的sgRNA克隆框通过同源重组技术连接到pP1C.4载体中,获得pP1C.4-Cas9-ProDH1-g RNA载体。通过设计引物特异性扩增以及测序进一步确定sgRNA准确地连入载体,这对马铃薯中脯氨酸累积及其培育抗旱马铃薯新品种具有重要意义。
关键词
CRISPR/Cas9基因编辑系统
马铃薯
prodh
1
载体构建
Keywords
CRISPR/Cas9 gene editing system
Potato
prodh
1
Vector construction
分类号
S532 [农业科学—作物学]
Q943.2 [生物学—植物学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
靶向马铃薯StProDH1基因的CRISPR/Cas9 sgRNA表达载体构建
李世贵
杨江伟
朱熙
王树林
张宁
司怀军
《分子植物育种》
CAS
CSCD
北大核心
2019
0
原文传递
已选择
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