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Porf-2基因过表达慢病毒载体的构建以及神经细胞的转染
被引量:
2
1
作者
黄国辉
杨西涛
+4 位作者
陈奎
邢进
朱亮
李泓江
冯东福
《上海交通大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第12期1809-1813,共5页
目的构建视前区调控因子2(Porf-2)与绿色荧光蛋白(GFP)共表达的慢病毒载体,包装慢病毒并体外感染神经细胞。方法根据Gen Bank中基因信息,设计Porf-2的引物,采用PCR扩增Porf-2基因片段;运用基因重组技术,双酶切Porf-2,并将其克隆至p LVX-...
目的构建视前区调控因子2(Porf-2)与绿色荧光蛋白(GFP)共表达的慢病毒载体,包装慢病毒并体外感染神经细胞。方法根据Gen Bank中基因信息,设计Porf-2的引物,采用PCR扩增Porf-2基因片段;运用基因重组技术,双酶切Porf-2,并将其克隆至p LVX-IRES-Zs Green1载体,经酶切、测序加以鉴定重组质粒。将成功构建的质粒与包装系统VSVG、Δ89质粒共转染293T细胞,包装慢病毒并测定滴度。结果经酶切和测序鉴定表明成功构建了p LVX-Porf-2-IRES-Zs Green1的基因重组慢病毒载体;将成功包装的病毒感染NG108细胞、海马原代神经元以及神经干细胞后,可观察到大量绿色荧光表达;Western blotting证实Porf-2成功过表达。结论成功构建Porf-2与GFP基因共表达的慢病毒载体、包装慢病毒,并感染NG108、海马原代神经元以及神经干细胞。
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关键词
视前区调控因子
2
绿色荧光蛋白
慢病毒
神经细胞
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职称材料
视前区调控因子-2在中枢神经系统中的研究进展
2
作者
程安东
迟俊鹏
+2 位作者
牛钰茜
徐永赛
冯东福
《医学综述》
CAS
2023年第16期3129-3133,共5页
中枢神经系统疾病严重影响人类健康和社会发展,已成为全球范围内的重大公共卫生问题。成年哺乳动物中枢神经系统再生困难,因此中枢神经系统疾病的治疗仍是重大医学难题。Rho GTP酶激活蛋白参与了细胞生长、细胞动力学、细胞膜转运和细...
中枢神经系统疾病严重影响人类健康和社会发展,已成为全球范围内的重大公共卫生问题。成年哺乳动物中枢神经系统再生困难,因此中枢神经系统疾病的治疗仍是重大医学难题。Rho GTP酶激活蛋白参与了细胞生长、细胞动力学、细胞膜转运和细胞凋亡的病理生理过程。视前区调控因子-2作为Rho GTP酶激活蛋白家族的重要成员,参与中枢神经系统中多种病理生理过程,包括神经元轴突的生长与导向、神经元树突的形成、神经干细胞的调控、肿瘤的转移等,在神经内分泌疾病、中枢神经损伤修复以及神经肿瘤等研究领域具有重要意义。
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关键词
中枢神经系统
视前区调控因子-
2
Rho
GTP酶激活蛋白
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职称材料
题名
Porf-2基因过表达慢病毒载体的构建以及神经细胞的转染
被引量:
2
1
作者
黄国辉
杨西涛
陈奎
邢进
朱亮
李泓江
冯东福
机构
上海交通大学医学院附属第三人民医院神经外科
上海交通大学医学院创伤医学研究所
出处
《上海交通大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第12期1809-1813,共5页
基金
国家自然科学基金项目(81171796)~~
文摘
目的构建视前区调控因子2(Porf-2)与绿色荧光蛋白(GFP)共表达的慢病毒载体,包装慢病毒并体外感染神经细胞。方法根据Gen Bank中基因信息,设计Porf-2的引物,采用PCR扩增Porf-2基因片段;运用基因重组技术,双酶切Porf-2,并将其克隆至p LVX-IRES-Zs Green1载体,经酶切、测序加以鉴定重组质粒。将成功构建的质粒与包装系统VSVG、Δ89质粒共转染293T细胞,包装慢病毒并测定滴度。结果经酶切和测序鉴定表明成功构建了p LVX-Porf-2-IRES-Zs Green1的基因重组慢病毒载体;将成功包装的病毒感染NG108细胞、海马原代神经元以及神经干细胞后,可观察到大量绿色荧光表达;Western blotting证实Porf-2成功过表达。结论成功构建Porf-2与GFP基因共表达的慢病毒载体、包装慢病毒,并感染NG108、海马原代神经元以及神经干细胞。
关键词
视前区调控因子
2
绿色荧光蛋白
慢病毒
神经细胞
Keywords
preoptic
regulatory
factor
-2
green
fluorescent
protein
lentivirus
neural
cell
分类号
R450 [医药卫生—治疗学]
R741 [医药卫生—临床医学]
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职称材料
题名
视前区调控因子-2在中枢神经系统中的研究进展
2
作者
程安东
迟俊鹏
牛钰茜
徐永赛
冯东福
机构
上海交通大学附属第六人民医院南院神经外科
锦州医科大学
安徽理工大学医学院
出处
《医学综述》
CAS
2023年第16期3129-3133,共5页
基金
国家自然科学基金(82271388)
上海市自然科学基金(22ZR1452700)。
文摘
中枢神经系统疾病严重影响人类健康和社会发展,已成为全球范围内的重大公共卫生问题。成年哺乳动物中枢神经系统再生困难,因此中枢神经系统疾病的治疗仍是重大医学难题。Rho GTP酶激活蛋白参与了细胞生长、细胞动力学、细胞膜转运和细胞凋亡的病理生理过程。视前区调控因子-2作为Rho GTP酶激活蛋白家族的重要成员,参与中枢神经系统中多种病理生理过程,包括神经元轴突的生长与导向、神经元树突的形成、神经干细胞的调控、肿瘤的转移等,在神经内分泌疾病、中枢神经损伤修复以及神经肿瘤等研究领域具有重要意义。
关键词
中枢神经系统
视前区调控因子-
2
Rho
GTP酶激活蛋白
Keywords
Central
nervous
system
preoptic
regulatory
factor
-2
Rho
GTPase-activating
protein
分类号
R651 [医药卫生—外科学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
Porf-2基因过表达慢病毒载体的构建以及神经细胞的转染
黄国辉
杨西涛
陈奎
邢进
朱亮
李泓江
冯东福
《上海交通大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2015
2
下载PDF
职称材料
2
视前区调控因子-2在中枢神经系统中的研究进展
程安东
迟俊鹏
牛钰茜
徐永赛
冯东福
《医学综述》
CAS
2023
0
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职称材料
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