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三种无缝克隆试剂盒连接效率的比较
被引量:
2
1
作者
邢体坤
王斌
+5 位作者
郭冰峰
宋路萍
杨振苹
荆新蕊
郝一楠
张静静
《中国医药科学》
2020年第17期74-77,共4页
目的比较生工生物工程(上海)股份有限公司、厂家A和厂家B三种无缝克隆试剂盒连接效率,为文库构建选择试剂盒提供参考。方法本研究采用Nco I和Xho I酶切pET26b获得线性化载体,PCR扩增制备线性化片段。无缝隙克隆反应体系转化感受态大肠杆...
目的比较生工生物工程(上海)股份有限公司、厂家A和厂家B三种无缝克隆试剂盒连接效率,为文库构建选择试剂盒提供参考。方法本研究采用Nco I和Xho I酶切pET26b获得线性化载体,PCR扩增制备线性化片段。无缝隙克隆反应体系转化感受态大肠杆菌,菌落PCR鉴定三种重组试剂盒连接阳性率。结果生工生物工程(上海)股份有限公司、厂家A和厂家B三种无缝克隆试剂盒分别长出107、86和16个克隆,阳性率分别为90.91%、72.73%和43.75%。结论从试剂盒性价比,转化总克隆数量和阳性克隆率等方面考虑,生工生物工程(上海)股份有限公司的无缝克隆试剂盒为文库构建的最佳选择。
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关键词
无缝克隆
阳性克隆率
限制性内切酶
PCR扩增
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职称材料
题名
三种无缝克隆试剂盒连接效率的比较
被引量:
2
1
作者
邢体坤
王斌
郭冰峰
宋路萍
杨振苹
荆新蕊
郝一楠
张静静
机构
华兰生物工程股份有限公司研发中心
华兰基因工程有限公司质量控制部
华兰生物工程股份有限公司血制研发部
出处
《中国医药科学》
2020年第17期74-77,共4页
基金
“重大新药创制”科技重大专项(2018ZX09736010)。
文摘
目的比较生工生物工程(上海)股份有限公司、厂家A和厂家B三种无缝克隆试剂盒连接效率,为文库构建选择试剂盒提供参考。方法本研究采用Nco I和Xho I酶切pET26b获得线性化载体,PCR扩增制备线性化片段。无缝隙克隆反应体系转化感受态大肠杆菌,菌落PCR鉴定三种重组试剂盒连接阳性率。结果生工生物工程(上海)股份有限公司、厂家A和厂家B三种无缝克隆试剂盒分别长出107、86和16个克隆,阳性率分别为90.91%、72.73%和43.75%。结论从试剂盒性价比,转化总克隆数量和阳性克隆率等方面考虑,生工生物工程(上海)股份有限公司的无缝克隆试剂盒为文库构建的最佳选择。
关键词
无缝克隆
阳性克隆率
限制性内切酶
PCR扩增
Keywords
Seamless
cloning
positive
clone
rate
Restriction
endonuclease
PCR
amplification
分类号
Q785 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
三种无缝克隆试剂盒连接效率的比较
邢体坤
王斌
郭冰峰
宋路萍
杨振苹
荆新蕊
郝一楠
张静静
《中国医药科学》
2020
2
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