猪伪狂犬病病毒GZ-Z1株的分离鉴定 被引量：15

1

作者 曾智勇 周莉 +7 位作者 汤德元 梁海英 刘志杰 李谦 肖超能 王彬 王凤 甘振磊 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期459-463,共5页

为获得1株猪伪狂犬病病毒贵州分离株,将贵阳市某猪场送检的流产胎儿病料经一系列处理后接种Vero细胞,并对分离毒株分别进行了病毒理化特性、电镜形态观察、中和试验、动物接种试验、核酸检测等鉴定。当盲传至第3代时,出现细胞变圆变亮... 为获得1株猪伪狂犬病病毒贵州分离株,将贵阳市某猪场送检的流产胎儿病料经一系列处理后接种Vero细胞,并对分离毒株分别进行了病毒理化特性、电镜形态观察、中和试验、动物接种试验、核酸检测等鉴定。当盲传至第3代时,出现细胞变圆变亮、脱落、呈拉网状特征的细胞病变;分离毒不耐酸和热,对5-碘脱氧尿核苷和有机溶剂氯仿敏感,能被伪狂犬病病毒标准阳性血清中和;透射电镜下可见位于囊泡中呈近圆形、有囊膜、150～180 nm大小的成熟病毒粒子,在胞核中可见衣壳呈晶格状排列的病毒包涵体以及空心、实心2种无囊膜的病毒粒子;将分离毒株接种家兔,能引起家兔奇痒、麻痹死亡;PCR扩增产物经测序证明系PRV gD基因的部分序列。结果表明,成功分离获得了1株猪伪狂犬病病毒贵州株。 展开更多

关键词 猪伪狂犬病病毒 分离 鉴定

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2013-2018年广西地区猪伪狂犬病病毒gB、gE与TK基因遗传变异分析 被引量：14

2

作者 赵硕 王若木 +7 位作者 党佳佳 许力士 秦树英 薛辉 韦祖樟 陈樱 欧阳康 黄伟坚 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期810-819,共10页

为了解广西近年猪伪狂犬病(PR)流行情况及猪伪狂犬病病毒(PRV)流行株gB、gE、TK基因的遗传变异特点,于2013-2018年采集广西各地区疑似PR发病猪靶组织714份,进行PRV的PCR检测及病毒分离鉴定,并运用DNAStar、MEGA 6.0等生物学软件对分离毒... 为了解广西近年猪伪狂犬病(PR)流行情况及猪伪狂犬病病毒(PRV)流行株gB、gE、TK基因的遗传变异特点,于2013-2018年采集广西各地区疑似PR发病猪靶组织714份,进行PRV的PCR检测及病毒分离鉴定,并运用DNAStar、MEGA 6.0等生物学软件对分离毒株gB、gE、TK基因进行遗传变异分析。结果显示:样品检测阳性率为24.5%(175/714),共分离获得PRV流行株38株。受检猪群普遍存在PRV感染,经典毒株及变异毒株并存,而且以变异毒株为主。广西流行株不同亚群PRV在gB、gE、TK基因上均存在相同的氨基酸变异特点,与国内变异株亲缘关系较近。推测广西流行株存在两种不同重组变异形式产生的PRV重组毒株,分别为疫苗株gB基因和变异株gE基因重组产生的重组毒株,以及经典株的TK基因被疫苗株(HB98)的TK基因替换而产生的重组毒株。近年广西受检猪场较普遍存在PRV感染,而且PRV流行株以变异毒株为主,可能存在两种不同重组变异形式产生的重组毒株,猪场需重视及实施针对性PR免疫防控计划。 展开更多

关键词 猪伪狂犬病病毒(prv) GB基因 GE基因 TK基因 序列分析 遗传变异

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2013～2018年江西省猪伪狂犬病病毒流行株gE和gB基因遗传变异分析 被引量：10

3

作者 高映雪 蒋新华 +4 位作者 周荷田 罗锋 杨丹凤 万文忠 邓舜洲 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2020年第1期164-173,共10页

为掌握江西省猪伪狂犬病病毒(PRV)的分子流行病学及遗传变异情况,本研究运用实验室已建立的PCR方法对2013~2018年采集自江西南昌、宜春、赣州、吉安、九江、上饶、抚州、新余8个地区的PRV阳性猪病料进行gE和gB基因扩增,并对PCR产物进行... 为掌握江西省猪伪狂犬病病毒(PRV)的分子流行病学及遗传变异情况,本研究运用实验室已建立的PCR方法对2013~2018年采集自江西南昌、宜春、赣州、吉安、九江、上饶、抚州、新余8个地区的PRV阳性猪病料进行gE和gB基因扩增,并对PCR产物进行测序和序列分析。结果显示,共获得64株PRV的gE基因序列和12株PRV的gB基因序列;gE基因遗传进化树表明,64株PRV同属一个大分支,与亚洲毒株及近年来国内分离株亲缘关系较近,全部为GⅠ型,而与GⅡ型的欧美经典毒株亲缘关系较远;江西毒株gE基因与19株参考毒株的核苷酸和氨基酸序列同源性分别为97.2%~100%和94.6%~100%;gB基因与11株参考毒株的核苷酸和氨基酸序列同源性分别为98.2%~100%和96.5%~100%;相较于Bartha-K61疫苗株,江西流行毒株的gB基因存在碱基缺失、插入和位点突变现象。本研究从分子流行病学角度证实了江西省PRV的流行与变异情况,为江西省科学防控PRV提供理论依据。 展开更多

关键词 猪伪狂犬病病毒(prv) 分子流行病学 GE基因 GB基因 遗传变异

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CSFV、PRV和PRRSV多重PCR检测方法的建立及其应用 被引量：9

4

作者 顾文源 范京惠 +3 位作者 邸晶美 罗尚星 刘宝京 左玉柱 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期193-197,共5页

由猪瘟病毒(CSFV)、伪狂犬病病毒(PRV)和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的繁殖障碍性疫病在中国的不断暴发,增加了猪的发病率和死亡率。为了建立同时检测这3种病毒的多重PCR方法,本研究根据GenBank中这3种病毒的参考基因序列设计引... 由猪瘟病毒(CSFV)、伪狂犬病病毒(PRV)和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的繁殖障碍性疫病在中国的不断暴发,增加了猪的发病率和死亡率。为了建立同时检测这3种病毒的多重PCR方法,本研究根据GenBank中这3种病毒的参考基因序列设计引物,并对反应中的影响因素进行优化,建立了同时检测CSFV、PRV和PRRSV的多重PCR方法。该方法扩增的基因片段大小分别为570(CSFV),232 (PRRSV)和173bp(PRV)。敏感性和特异性试验结果显示,该方法对3种病毒的核酸最低检出量分别为23.88(CSFV),13.10(PRRSV)和14.60pg(PRV),对大肠杆菌(Ec.oli)、沙门菌(Salmonella)、猪乙型脑炎病毒(JEV)及猪圆环病毒2型(PCV2)的检测结果均为阴性。对2015年5月至2016年1月收集的168份临床样本检测结果显示,CSFV阳性率为24.4%,PRRSV阳性率为21.4%,提示河北省该段时间内引起猪繁殖障碍性疫病的主要病原为CSFV和PRRSV。经多重PCR检测为PRRSV、PRV或CSFV阳性的临床样本,再次使用商品化的试剂盒进行检测,符合率为100.0%。这些结果表明,本试验建立的多重PCR方法省时、高效,可用于PRRSV、PRV和CSFV感染的临床诊断。 展开更多

关键词 猪瘟病毒 伪狂犬病病毒 猪繁殖与呼吸综合征病毒 多重PCR

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猪伪狂犬病毒C株的分离鉴定 被引量：10

5

作者 高俊锋 赖志 +4 位作者 舒银辉 漆世华 马晶晶 吴碧清 龚建培 《上海农业学报》 CSCD 2015年第1期32-36,共5页

在流行病学调查中分离到的1株伪狂犬病毒,命名为猪伪狂犬病毒C株,并对其进行鉴定、纯化。在gE和gI基因段上设计特异性引物进行PCR检测,闽A株在5 000 bp处出现目的条带,该毒株在1 500 bp附近出现目的条带,对目的条带测序,扩增产物大小为1... 在流行病学调查中分离到的1株伪狂犬病毒,命名为猪伪狂犬病毒C株,并对其进行鉴定、纯化。在gE和gI基因段上设计特异性引物进行PCR检测,闽A株在5 000 bp处出现目的条带,该毒株在1 500 bp附近出现目的条带,对目的条带测序,扩增产物大小为1 538 bp,在第989—4 468位基因缺失,缺失片段大小为3 570 bp,该缺失片段包含了伪狂犬病病毒的主要毒力基因(gE基因),除此缺失片段外,分别在第873、4 665、4 666、4 950位发生了碱基突变,同猪伪狂犬病病毒Bartha K61同源性为95.0%—96.0%,与PRV Bartha K61不是同一个毒株。用该毒株对部分省市分离到的伪狂犬毒株和标准毒株闽A株进行中和试验,中和指数为708—6 761,该毒株可完全中和临床分离的伪狂犬病毒株,故可用作候选疫苗毒株。 展开更多

关键词 猪伪狂犬病病毒 C株 中和试验 分离鉴定

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复方天门冬多糖注射液对猪伪狂犬病疫苗免疫效果的影响 被引量：7

6

作者 杨楷 潘贵珍 +3 位作者 胡庭俊 马浚杰 曾芸 黄明 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期2081-2086,共6页

【目的】明确复方天门冬多糖注射液对猪伪狂犬病疫苗免疫效果的影响,为有效防控猪伪狂犬病提供理论依据。【方法】选择30头不带野毒感染的三元杂交猪,随机分为6组,每组5头,分别设为猪伪狂犬病疫苗+复方天门冬多糖注射液(高、中、低)剂量... 【目的】明确复方天门冬多糖注射液对猪伪狂犬病疫苗免疫效果的影响,为有效防控猪伪狂犬病提供理论依据。【方法】选择30头不带野毒感染的三元杂交猪,随机分为6组,每组5头,分别设为猪伪狂犬病疫苗+复方天门冬多糖注射液(高、中、低)剂量组(I^III)、猪伪狂犬病疫苗+瘟毒清药物对照组(IV)、猪伪狂犬病疫苗对照组(V)和空白对照组(VI),以探讨复方天门冬多糖注射液对猪接种伪狂犬病疫苗后抗体水平和血清细胞因子的影响。【结果】复方天门冬多糖注射液中剂量组(II)的血清抗体水平相对较稳定,其平均抗体阻断率基本维持在50%左右。至给药后第28 d,II组的血清IL-2水平升至108.75±34.15 pg/m L,且在整个试验过程均维持在90.00 pg/m L以上,前后波动不明显;在血清总蛋白和白蛋白方面,注射给药前均以II组的水平较低,分别为56.22±7.04和28.11±3.52 g/L,至给药后第28 d则以II组的水平最高,分别为80.50±2.43和40.25±1.21 g/L,均显著高于V组和VI组(P<0.05);血清溶菌酶水平方面,以II组和III组的血清溶菌酶水平波动较小,均维持在50.00μg/m L以上。各处理组间的血清XOD活性与NO水平差异均不显著(P>0.05)。【结论】复方天门冬多糖注射液对猪伪狂犬病疫苗有增效作用,其临床推荐用法用量为:接种猪伪狂犬病疫苗后按0.125 m L/kg的剂量进行肌内注射,1次/d,连用3 d。 展开更多

关键词 复方天门冬多糖注射液 猪伪狂犬病 疫苗 抗体水平 血清细胞因子

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NRF2激动剂衣康酸4-辛酯对猪伪狂犬病病毒的抑制作用研究

7

作者 方春艳 杨发誉 +4 位作者 朱紫祥 郑海学 包世俊 魏衍全 张石磊 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第11期1421-1429,共9页

为筛选高效抑制猪伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)的小分子抑制剂,首先利用流式细胞分析技术结合小分子药物库筛选出对PRV具有高效抑制活性的小分子药物,并利用CCK-8法检测其对PK15细胞活力的影响。其次,利用Western-blot检测PRV ... 为筛选高效抑制猪伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)的小分子抑制剂,首先利用流式细胞分析技术结合小分子药物库筛选出对PRV具有高效抑制活性的小分子药物,并利用CCK-8法检测其对PK15细胞活力的影响。其次,利用Western-blot检测PRV g B蛋白、TCID_(50)测定PRV滴度等方法检测小分子药物对PRV的抑制作用。最后,利用Western-blot检测小分子药物抑制PRV生命周期的具体阶段。结果显示,流式细胞术分析筛选出的对PRV抑制最明显的3种小分子药物中,Cyanosafracin B、Staurosporine对PK15细胞有很强的细胞毒性,而衣康酸4-辛酯(4-OI)在300μmol/L的浓度下对PK15细胞基本无毒性。4-OI对不同MOI的PRV均表现出较强的抑制作用,表现为PRV子代病毒滴度的降低、PRV g B蛋白的表达水平下降,并呈剂量依赖性。4-OI及其靶蛋白Nuclear factor erythroid 2-related factor 2(NRF2)能够抑制PRV在细胞内的复制,而不影响PRV吸附PK15细胞及其内化过程。本研究表明4-OI是一种潜在的高效抑制PRV的小分子药物,为PRV防控提供了新的参考依据。 展开更多

关键词 药物筛选 衣康酸4-辛酯(4-OI) 猪伪狂犬病病毒(prv) 抗病毒作用

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新疆地区4种猪病多重PCR检测方法的建立与初步应用 被引量：3

8

作者 张勋 § +8 位作者 吴鹏 李世震 伏寅峰 许追 梁田 杨素芳 陈新凯 齐亚银 盛金良 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2015年第10期2612-2618,共7页

本试验旨在建立一种可同时检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)、猪圆环病毒2型(porcine circovirus type 2,PCV2)、猪伪狂犬病病毒(porcine pseudorabies virus,PRV)、猪肺炎支原... 本试验旨在建立一种可同时检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)、猪圆环病毒2型(porcine circovirus type 2,PCV2)、猪伪狂犬病病毒(porcine pseudorabies virus,PRV)、猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae,Mh)的多重PCR检测方法。参考相关文献合成PRRSV、PCV2、PRV、Mh的特异性引物,通过对反应条件优化、特异性、敏感性测定,建立了可同时检测以上4种猪多发传染病的PCR诊断方法。扩增的片段长度分别为424bp(PRRSV)、490bp(PCV2)、298bp(PRV)和360bp(Mh),对其他常见猪病病原无特异性扩增,采用Multiplex PCR Master Mix对PRRSV、PCV2、PRV、Mh的核酸最低检出量为3个拷贝。采用多重PCR方法对60份临床样本反复检测,与单重PCR相比,4种病原符合率均为100%。结果表明,建立的多重PCR诊断方法可用于猪群中上述4种病原的单一或混合感染的快速鉴别诊断和流行病学调查。 展开更多

关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 猪圆环病毒2型 猪伪狂犬病病毒 猪肺炎支原体 多重PCR 检测

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螺旋藻多糖对PRV感染小鼠脾脏氧化应激的调节作用

9

作者 赵雯 宾秀娟 +4 位作者 童艳梅 施君 周博武 曹迷霞 胡庭俊 《饲料工业》 CAS 北大核心 2024年第23期90-96,共7页

试验旨在探究螺旋藻多糖(PSP)对猪伪狂犬病毒(PRV)感染小鼠脾脏氧化应激的调节作用。将120只BALB/c小鼠随机分5组,分别为高剂量螺旋藻多糖组分1(PSP-1,4 mg)组、中剂量PSP-1(2 mg)组、低剂量PSP-1(1 mg)组、PRV组和空白对照组。高、中... 试验旨在探究螺旋藻多糖(PSP)对猪伪狂犬病毒(PRV)感染小鼠脾脏氧化应激的调节作用。将120只BALB/c小鼠随机分5组,分别为高剂量螺旋藻多糖组分1(PSP-1,4 mg)组、中剂量PSP-1(2 mg)组、低剂量PSP-1(1 mg)组、PRV组和空白对照组。高、中、低剂量PSP-1组及PRV组第1天经腹腔注射PRV溶液,空白对照组经腹腔注射灭菌生理盐水。随后1~6 d,高、中、低剂量PSP-1组分别灌胃相应剂量PSP-1,PRV组和空白对照组灌胃灭菌生理盐水,第7天剖杀。采用试剂盒法测定小鼠脾脏丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)含量以及超氧化物歧化酶(SOD)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)酶活性;通过H.E.染色观察小鼠脾脏病理变化;通过免疫组化检测小鼠脾脏中血红素加氧酶-1(HO-1)、iNOS表达。结果显示,与PRV组相比,高剂量PSP-1组小鼠脾脏中MDA、NO含量及iNOS活性极显著降低(P<0.05),SOD活性极显著升高(P<0.05);H.E.染色结果显示,高、中、低剂量PSP-1处理后,小鼠脾脏病理变化有不同程度减轻;免疫组化结果显示,高、中、低剂量PSP-1处理PRV感染小鼠后,脾脏中HO-1的表达有不同程度的升高,iNOS的表达有不同程度的降低。说明PSP-1能够减轻PRV感染小鼠脾脏的损伤,缓解PRV感染小鼠引起的氧化应激。 展开更多

关键词 螺旋藻多糖 猪伪狂犬病毒 氧化应激 脾脏 免疫组化

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3种猪繁殖障碍性病毒Real-time PCR快速检测方法的建立 被引量：3

10

作者 赵绪永 马辉 +1 位作者 宁豫昌 赵丽 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2012年第12期27-33,共7页

【目的】建立可同时检测猪伪狂犬病毒(PRV)、猪细小病毒(PPV)和猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)的多重实时荧光定量PCR方法。【方法】根据GenBank数据库中PRV、PPV和PCV2的核苷酸序列,设计3对特异性引物和探针,以10倍系列稀释的阳性质粒为模板,优... 【目的】建立可同时检测猪伪狂犬病毒(PRV)、猪细小病毒(PPV)和猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)的多重实时荧光定量PCR方法。【方法】根据GenBank数据库中PRV、PPV和PCV2的核苷酸序列,设计3对特异性引物和探针,以10倍系列稀释的阳性质粒为模板,优化反应条件,建立检测PRV、PPV和PCV2的多重Real-time PCR方法,并对其敏感性、重复性和特异性进行检验;分别采用单项和多重Real-time PCR方法,对临床收集的42份疑似病料进行检测,比较2种方法的符合率。【结果】特异性和灵敏度试验表明,建立的多重Real-time PCR检测方法具有高度特异性,与其他病原无明显交叉反应;检测灵敏度高,可检出1.0×101拷贝/μL的阳性质粒或1TCID50/mL的病毒样品。用多重Real-time PCR对42份临床疑似病料进行检测,其检测结果与单重Real-time PCR结果完全一致,表明多重Real-time PCR方法是可行的。【结论】建立了可同时检测PRV、PPV和PCV2的多重Real-time PCR方法,该法具有快速、灵敏、特异和重复性好等优点。 展开更多

关键词 猪伪狂犬病毒 猪细小病毒 猪圆环病毒Ⅱ型 多重实时荧光定量PCR

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含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(caspase-1)对猪伪狂犬病毒复制的影响 被引量：2

11

作者 马英先 常雯茹 +7 位作者 张爽 翟云云 李佳佳 曾磊 李国利 明胜利 万博 杜永坤 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期159-168,共10页

猪伪狂犬病是伪狂犬病毒(Pseudorabies virus,PRV)感染引起的一种烈性接触性传染病,其感染宿主会触发机体先天免疫应答,引起I型干扰素(Type I interferon,IFN-1)和炎性细胞因子等细胞因子的产生,为研究可诱导产生炎性细胞因子的含半胱... 猪伪狂犬病是伪狂犬病毒(Pseudorabies virus,PRV)感染引起的一种烈性接触性传染病,其感染宿主会触发机体先天免疫应答,引起I型干扰素(Type I interferon,IFN-1)和炎性细胞因子等细胞因子的产生,为研究可诱导产生炎性细胞因子的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(Cysteinyl aspartate specific proteinase 1,caspase-1)的基因敲除对PRV复制的影响,本试验利用近年来发展迅速的一项规律性短重复回文序列簇/Cas9核酸酶(Clustered regulatory interspaced short palindromic repeat/CRISPR associated system 9,CRISPR/Cas9)基因定点修饰技术构建猪肾上皮细胞(Porcine kidney epithelial cells,PK15)caspase-1基因稳定敲除细胞系,并通过T7核酸酶检测敲除效率;细胞毒性(Cell counting kit-8,CCK-8)试剂盒检测PK15敲除caspase-1增殖影响;采用流式细胞术检测PRV-GFP感染PK15以及PK15-caspase-1^(-/-)的增殖差异;实时荧光定量PCR(Real-time quantitative PCR,RT-PCR)检测PRV-gB、TK及白细胞介素1β(Interleukin-1β,IL-1β)、IFN-β、干扰素刺激基因(Interferon-stimulated genes 20,ISG20)mRNA的表达;Western Blot检测PRV-gB蛋白表达;滴度测定检测子代病毒滴度。结果表明,2对特异性单链引导RNA(Single guide RNA,sgRNA)均能对caspase-1进行基因编辑,但经T7核酸酶酶切进行基因编辑效率分析结果表明sgRNA2的基因编辑效率较高;CCK-8试剂盒检测细胞活力结果表明caspase-1基因敲除对PK15以及PK15-caspase-1^(-/-)细胞活力无影响(P>0.05);流式细胞仪检测结果表明PRV-GFP在PK15-caspase-1^(-/-)中的增殖显著低于PK15细胞(P<0.05);定量RT-PCR结果表明PRV-gB、TK基因在PK15-caspase-1^(-/-)的mRNA表达显著低于PK15细胞(gB:P<0.05,TK:P<0.05),而IFN-β、ISG20基因在PK15-caspase-1^(-/-)的mRNA表达显著高于PK15细胞(gB:P<0.05,TK:P<0.05);Western Blot结果表明,PRV的gB蛋白在PK15-caspase-1^(-/-)的表达显著低于PK15细胞(P<0.05);滴度测定结果表明,敲除caspase-1能够抑制PRV子代� 展开更多

关键词 CRISPR/Cas9 含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(caspase-1) 猪肾上皮细胞(PK15) 猪伪狂犬病毒(prv)

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伪狂犬病病毒感染对幼鼠血液生理生化指标及生殖器官的影响 被引量：3

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作者 张雅伦 舒相华 +8 位作者 张莹 李宛容 祝正玲 张智慧 潘琼 黄鑫 罗班乾 李鲜 宋春莲 《畜牧与兽医》 CAS 北大核心 2022年第11期106-114,共9页

为探究伪狂犬病病毒(PRV)感染对幼鼠血液生理生化指标及生殖器官的影响,试验将12只3周龄的SPF级幼鼠随机分为空白组、滴鼻组和肌注组。攻毒后分别在0、6、24、36、48及60 h眼球静脉采血,测定8项血液生理指标、4项生化指标,并在60 h观察... 为探究伪狂犬病病毒(PRV)感染对幼鼠血液生理生化指标及生殖器官的影响,试验将12只3周龄的SPF级幼鼠随机分为空白组、滴鼻组和肌注组。攻毒后分别在0、6、24、36、48及60 h眼球静脉采血,测定8项血液生理指标、4项生化指标,并在60 h观察临床症状、病理变化,采集睾丸、子宫和卵巢,显微观察病理变化,免疫组化定位PRV并测定其病毒载量。结果显示,血液生理指标滴鼻组血小板(PLT)在48 h、60 h分别显著高于肌注组和空白组(P<0.05),60 h极显著高于肌注组(P<0.01)。肌注组白细胞总数(WBC)、淋巴细胞数(LYM)、单核细胞数(MONO)均在60 h时极显著高于空白组(P<0.01);中性粒细胞(GRAN)、血红蛋白(HGB)分别在60 h、6 h显著高于空白组(P<0.05)。血液生化指标滴鼻组免疫球蛋白A(IgA)在24 h显著低于空白组(P<0.05),极显著低于肌注组(P<0.01);补体C3 60 h时极显著低于空白组(P<0.01),肌注组补体C3 24 h、36 h、60 h均显著高于滴鼻组(P<0.05)。显微观察发现,睾丸间质充血,曲精小管内炎症细胞浸润;子宫内膜增厚充血、嗜酸性粒细胞浸润。抗原定位均可见PRV分布于睾丸间质、子宫肌层结缔组织、内膜。结果表明,2种接毒方式幼鼠均可感染PRV;幼鼠发生免疫反应,血液生理指标白细胞系统指标变化明显,生化指标中补体C3变化最明显;PRV在睾丸、子宫、卵巢中均有分布,且均有严重损伤。 展开更多

关键词 伪狂犬病病毒 幼鼠 血液生理生化指标 生殖器官

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猪伪狂犬病病毒SD-1株在几种不同细胞上的增殖效果比较 被引量：3

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作者 朱绍辉 单虎 +6 位作者 张浩 张国雨 李超 夏伟 王晓丽 魏笑笑 董瑞娥 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2012年第11期92-94,165,共4页

为了选择增殖猪伪狂犬病病毒SD-1株的最适细胞系,试验采用BHK-21、PK-15、CEF和Vero细胞作为该毒株的接种对象,并将该毒株在这几种细胞上的增殖情况进行了比较,观察病变时间和病变特点,分别测定其毒价(TCID50),并采用PRV阳性血清(抗体... 为了选择增殖猪伪狂犬病病毒SD-1株的最适细胞系,试验采用BHK-21、PK-15、CEF和Vero细胞作为该毒株的接种对象,并将该毒株在这几种细胞上的增殖情况进行了比较,观察病变时间和病变特点,分别测定其毒价(TCID50),并采用PRV阳性血清(抗体效价为1∶128)对接种组进行中和试验。结果表明:猪伪狂犬病病毒SD-1株在BHK-21、PK-15、CEF和Vero传代细胞上均能产生明显的细胞病变(CPE),开始出现病变的时间分别为接毒后12,15,20,24小时;其在4种细胞上的TCID50分别为1×10-7.3/0.1 mL、1×10-6.3/0.1 mL、1×10-6.7/0.1 mL、1×10-5.7/0.1 mL,且中和组均无任何细胞病变。因此,建议选用BHK-21细胞作为猪伪狂犬病病毒SD-1株的增殖细胞系。 展开更多

关键词 猪伪狂犬病病毒 细胞系 增殖 比较

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猪伪狂犬病毒Guizhou-DY株gE基因的克隆及生物信息学分析 被引量：2

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作者 郝飞 汤德元 +6 位作者 罗险峰 曾智勇 李春燕 甘振磊 王凤 刘建 王洪光 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第8期15-19,191,共6页

为了研究伪狂犬病毒gE蛋白的结构及其在免疫保护中的功能,试验根据GenBank中猪伪狂犬病毒(PRV)GDSH株(登录号为EF552427)gE全基因序列设计引物,对伪狂犬病病毒gE基因进行PCR扩增、克隆及生物信息学分析。结果表明:PCR扩增基因全长1 734 ... 为了研究伪狂犬病毒gE蛋白的结构及其在免疫保护中的功能,试验根据GenBank中猪伪狂犬病毒(PRV)GDSH株(登录号为EF552427)gE全基因序列设计引物,对伪狂犬病病毒gE基因进行PCR扩增、克隆及生物信息学分析。结果表明:PCR扩增基因全长1 734 bp,编码577个氨基酸,与Yangsan株对应序列同源性为99.4%,测序结果已提交GenBank,登录号为JX417716;Guizhou-DY株gE蛋白是一种不稳定的疏水性蛋白,柔性区域呈散在性分布,以T转角和无规则卷曲为主,具有2个疏水区,在100～400位氨基酸残基处抗原性指标较高,基因序列保守性强;经预测,gE全基因不能在大肠杆菌表达系统中得到高效表达。 展开更多

关键词 猪伪狂犬病毒(prv) gE蛋白 生物信息学分析

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伪狂犬病病毒贵州分离株与疫苗株遗传进化和抗原表位分析 被引量：1

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作者 张婧旭 徐玉 +6 位作者 梁海英 曾智勇 汤德元 王彬 徐松平 万娟 祝羊 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期1093-1106,共14页

【目的】了解贵州省猪群伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus,PRV)毒株与疫苗株的分子特征,探究贵州省PRV变异株的遗传演化情况并对比其与疫苗株抗原差异性。【方法】通过分子克隆和生物信息学技术对本实验室在2015-2021年间贵州省分离到的... 【目的】了解贵州省猪群伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus,PRV)毒株与疫苗株的分子特征,探究贵州省PRV变异株的遗传演化情况并对比其与疫苗株抗原差异性。【方法】通过分子克隆和生物信息学技术对本实验室在2015-2021年间贵州省分离到的5株PRV毒株的gB、gC、gD基因和商品化疫苗株(C株和HB2000株)进行克隆测序,利用本实验室序列库中的2株PRV贵州株及GenBank上登录的疫苗毒株序列,进行系统遗传进化和B细胞线性抗原表位差异性分析。【结果】结果显示,7株贵州株与疫苗株gB、gC、gD全基因组的核苷酸序列相似性分别为98.1%~100%、94.7%~100%和98.8%~100%,7株贵州株与疫苗株gB、gC、gD全基因组的氨基酸序列相似性分别为96.4%~100%、90.9%~100%和97.0%~100%;氨基酸替换分析结果显示,7株PRV贵州株和疫苗毒株间gB、gC、gD基因存在56、68和23处氨基酸位点差异,其中gC基因氨基酸位点差异最大;GZQX2017株缺失gE基因,在遗传进化树中GZQX2017株与Bartha-K61、Becker和NIA3等国外株位于同一大进化分支,属于PRVⅠ型;其余6株贵州株gE基因在第48和496位各插入1个天冬氨酸(D),符合流行变异株的基因特征,与国内流行PRV变异株位于另一大进化分支,属于PRVⅡ型;以GZQX2017株gB、gC、gD全基因作为目标基因,以Bartha-K61株作为主要亲本、Fa株作为次要亲本,gB、gC全基因均能检测到重组信号,gD全基因重组信号不明显;相比Bartha-K61株,gB、gC、gD蛋白抗原表位数量和位点存在差异。【结论】7株PRV贵州株中,GZQX2017株与疫苗Bartha-K61株、C株属于PRVⅠ型,GZQX2017株可能是由Bartha-K61株为主要亲本进行重组产生的gE基因自然缺失株,后续有望将其作为候选疫苗株进行进一步研究;其余6株贵州株与Fa株、HB2000株等属于PRVⅡ型,具有流行变异毒株的流行特征。本研究结果对了解中国贵州省流行PRV毒株分子特征具有十分重要的意义。 展开更多

关键词 猪伪狂犬病病毒(prv) 变异株 遗传进化 抗原表位 重组信号

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猪伪狂犬病病毒HB-11株的分离鉴定及gC基因的分析 被引量：2

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作者 马晶晶 吴碧清 +3 位作者 高俊锋 郑良益 舒银辉 赖志 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2018年第8期28-32,共5页

将某猪场发病死亡猪的脑和肺组织接种BHK-21细胞,连传5代均出现典型细胞病变,表明分离到1株病毒,病毒含量为108. 33TCID50/mL。该毒株能被猪伪狂犬病病毒标准阳性血清中和,接种家兔、小鼠和仔猪均出现典型伪狂犬病症状,表明分离株为猪... 将某猪场发病死亡猪的脑和肺组织接种BHK-21细胞,连传5代均出现典型细胞病变,表明分离到1株病毒,病毒含量为108. 33TCID50/mL。该毒株能被猪伪狂犬病病毒标准阳性血清中和,接种家兔、小鼠和仔猪均出现典型伪狂犬病症状,表明分离株为猪伪狂犬病病毒,命名为PRV HB-11株。gC基因的遗传进化分析显示,HB-11株与近年来流行的变异株同源性为99. 3%~99. 4%,与Bartha株的同源性为94. 8%,其gC基因序列相对于Bartha株序列有7个连续氨基酸的插入(158AAASTPA164),该突变插入的生物学意义有待于进一步研究。 展开更多

关键词 猪伪狂犬病病毒 分离 鉴定 GC基因

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与自噬相关蛋白Becline 1相互作用的猪伪狂犬病毒蛋白的筛选与鉴定

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作者 侯琳琳 孙明霞 +7 位作者 王海明 汤艳东 刘永刚 涂亚斌 姜成刚 王淑杰 王刚 蔡雪辉 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2017年第2期14-17,287,共5页

为了对与自噬相关蛋白Becline 1相互作用的猪伪狂犬病毒蛋白进行筛选和鉴定,试验进行了pull-down、Shotgun质谱分析和免疫共沉淀(Co-IP)以及激光共聚焦检测。结果表明:病毒蛋白UL36与Becline 1之间可能存在相互作用关系;UL36-1与Beclin... 为了对与自噬相关蛋白Becline 1相互作用的猪伪狂犬病毒蛋白进行筛选和鉴定,试验进行了pull-down、Shotgun质谱分析和免疫共沉淀(Co-IP)以及激光共聚焦检测。结果表明:病毒蛋白UL36与Becline 1之间可能存在相互作用关系;UL36-1与Becline 1蛋白之间具有稳定的相互作用关系,相互作用区域位于UL36的去泛素酶区域;UL36-1与Becline 1共定位于胞浆中。说明自噬相关蛋白Becline 1与猪伪狂犬病毒蛋白UL36的去泛素酶区域存在相互作用。 展开更多

关键词 猪伪狂犬病毒 自噬 Becline 1 UL36 pull—down 蛋白相互作用

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多重PCR方法用于检测猪圆环病毒2型、猪细小病毒、猪伪狂犬病病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒诊断方法的建立 被引量：9

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作者 岳丰雄 崔尚金 +2 位作者 冉多良 戚亭 周盛华 《养猪》 2010年第3期41-44,共4页

本文建立了一种能够同时检测猪圆环病毒2型(PCV2)、猪细小病毒(PPV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的多重PCR方法(mPCR)。借助于Oligo6.0引物设计软件,设计了4对引物分别用于扩增PCV2ORF2基因353bp片段、PPVNS-... 本文建立了一种能够同时检测猪圆环病毒2型(PCV2)、猪细小病毒(PPV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的多重PCR方法(mPCR)。借助于Oligo6.0引物设计软件,设计了4对引物分别用于扩增PCV2ORF2基因353bp片段、PPVNS-1基因271bp片段、PRRSVMN基因美洲型434bp片段、PRVgB基因194bp片段。通过人为混合以上4种病毒进行特异性及敏感性试验,结果表明,该方法具有很好的特异性和敏感性。对猪瘟病毒、大肠杆菌和双蒸水的PCR扩增结果均为阴性;该mPCR方法对PPV的最低检测量为8.64×10-3μg,PRV的最低检测量为2.36×10-3μg,PRRSV的最低检测量为3.68×10-3μg,PCV2的最低检测量为2.90×10-4μg。该方法的建立对临床上PCV2、PPV、PRV、PRRSV的鉴别诊断以及以上这4种病毒的流行病学调查具有十分重要的意义。 展开更多

关键词 多重PCR方法 猪圆环病毒2型 猪细小病毒 猪伪狂犬病病毒 猪繁殖与呼吸综合征病毒

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云南省楚雄地区散养户猪伪狂犬病野毒感染的血清学调查 被引量：6

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作者 吴程华 高洪 +5 位作者 严玉霖 赵汝 刘欢欢 董骎 谭瑞 杨培昌 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2015年第5期150-151,共2页

为了解云南省楚雄地区散养户猪伪狂犬病病毒(PRV)野毒感染的情况,试验从楚雄地区9个散养户随机采集154份血清样本,并应用间接ELISA方法对血清样本进行PRVg E抗体检测。结果表明:在154份猪血清中,抗PRV g E抗体的阳性率为25.32%。说明楚... 为了解云南省楚雄地区散养户猪伪狂犬病病毒(PRV)野毒感染的情况,试验从楚雄地区9个散养户随机采集154份血清样本,并应用间接ELISA方法对血清样本进行PRVg E抗体检测。结果表明:在154份猪血清中,抗PRV g E抗体的阳性率为25.32%。说明楚雄地区散养户PRV野毒株感染率偏高。 展开更多

关键词 猪 散养户 猪伪狂犬病病毒(prv)野毒株 猪伪狂犬病病毒gE抗体 血清学调查 酶联免疫吸附试验(ELISA) 阳性率

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新型含N-吡啶联吡唑类二聚体衍生物的合成及抗猪伪狂犬病毒(PRV)活性评价

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作者 侯学会 姚晨 +4 位作者 宋锦清 杨菲菲 何张旭 陈晓培 张京玉 《有机化学》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2024年第5期1558-1567,共10页

猪伪狂犬病毒(PRV)不仅感染多种脊椎动物,还可直接感染人类,导致神经和呼吸系统严重受损,引起了人们对PRV跨物种传播的担忧,然而,针对PRV的特异性抗病毒药物很少.运用分子拼接和电子等排的原理,设计合成了25个含N-吡啶联吡唑类二聚体衍... 猪伪狂犬病毒(PRV)不仅感染多种脊椎动物,还可直接感染人类,导致神经和呼吸系统严重受损,引起了人们对PRV跨物种传播的担忧,然而,针对PRV的特异性抗病毒药物很少.运用分子拼接和电子等排的原理,设计合成了25个含N-吡啶联吡唑类二聚体衍生物,并测试了目标化合物对PRV病毒的抑制效果.初步生物活性测试数据显示,大多数化合物在10μmol/L浓度下表现出较强的抗PRV病毒活性,且对猪源肾上皮细胞(PK-15)具有无毒性或者低毒性.此类新型含N-吡啶联吡唑类二聚体衍生物可作为潜在抗PRV病毒的先导化合物进一步优化和开发. 展开更多

关键词 N-吡啶联吡唑 二聚体 抗猪伪狂犬病毒(prv)活性

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