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农杆菌介导的枳壳转化系统建立研究初报 被引量:9
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作者 韩美丽 李耿光 +3 位作者 贺红 张银东 张兰英 陆荣生 《广西植物》 CAS CSCD 北大核心 2000年第1期47-51,共5页
以枳壳为对象 ,进行了农杆菌介导的上胚轴转化系统建立研究 ,得到了携带柑桔衰退病病毒外壳蛋白基因的枳壳转化植株。研究表明 :枳壳各类外植体中 ,上胚轴是较好的转化材料 ;上胚轴出芽部位主要在形态学上端。以卡那霉素为选择剂 ,外植... 以枳壳为对象 ,进行了农杆菌介导的上胚轴转化系统建立研究 ,得到了携带柑桔衰退病病毒外壳蛋白基因的枳壳转化植株。研究表明 :枳壳各类外植体中 ,上胚轴是较好的转化材料 ;上胚轴出芽部位主要在形态学上端。以卡那霉素为选择剂 ,外植体水平面放置时 ,选择剂的剂量是 50~ 70mg/ L。转化研究中发现感染液中乙酰丁香酮 10 0μmol/ L的加入促进转化外植体 Gus表达阳性率的提高。延迟 1a的选择培养 ,有助于 Gus阳性芽的增多。所得 Gus阳性无性系经 Southern blot杂交检测 ,证明外源基因已稳定整合到了植物基因组中 ,所得 展开更多
关键词 枳壳 农杆菌 抗病育种 衰退病病毒外壳蛋白基因
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农杆菌介导枳壳转化系统的建立及PCR鉴定 被引量:7
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作者 贺红 韩美丽 李耿光 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期171-174,共4页
目的 建立农杆菌介导的枳壳转化体系。方法 以枳壳实生苗上胚轴为转化外植体 ,农杆菌 Ti质粒上插入了外源目的基因——柑桔衰退病病毒外壳蛋白基因 (CTV - cp) ,转化植株用 GUS (β-葡萄苷酸酶 )染色及 PCR进行鉴定。结果 枳壳转化... 目的 建立农杆菌介导的枳壳转化体系。方法 以枳壳实生苗上胚轴为转化外植体 ,农杆菌 Ti质粒上插入了外源目的基因——柑桔衰退病病毒外壳蛋白基因 (CTV - cp) ,转化植株用 GUS (β-葡萄苷酸酶 )染色及 PCR进行鉴定。结果 枳壳转化试验中 ,2 0 d苗龄的外植体转化再生率较高 ;外植体与农杆菌共培养时间以 2~ 3d为宜 ;乙酰丁香酮能较大提高转化效率 ,转化再生频率为 2 7.5 %。转化获得的抗性植株中 ,GU S反应呈阳性所占比例为 70 .0 %。 PCR分析证实外源目的基因已整合到枳壳转化株的核基因组中。结论 成功地建立了农杆菌介导的枳壳转化系统 ,为利用基因工程的手段进行枳壳的抗病育种奠定了基础。 展开更多
关键词 农杆菌 枳壳 遗传转化 聚合酶链式反应 PCR
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农杆菌介导的抗菌肽基因转入枳壳影响因素研究 被引量:5
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作者 韩美丽 陆荣生 +1 位作者 杜晓莉 吴耀军 《西南农业学报》 CSCD 2006年第1期77-80,共4页
以枳壳上胚轴为对象,进行了农杆菌介导的抗菌肽shivaA基因转化影响因素研究。研究结果表明:枳壳卡那霉素选择浓度为60μg/mL;抑菌抗菌素选用头孢噻肟钠较为合适。农杆菌再悬浮液与共培养基中100μMAs的加入可提高转化频率;延迟选择不利... 以枳壳上胚轴为对象,进行了农杆菌介导的抗菌肽shivaA基因转化影响因素研究。研究结果表明:枳壳卡那霉素选择浓度为60μg/mL;抑菌抗菌素选用头孢噻肟钠较为合适。农杆菌再悬浮液与共培养基中100μMAs的加入可提高转化频率;延迟选择不利于转化率的提高。所得抗性植株经PCR、Southern检测,证实目的基因已整合到植物基因组中。 展开更多
关键词 农杆菌 枳壳 转化
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枸桔挥发油化学成分研究
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作者 刘谦光 高永吉 +2 位作者 张尊听 陈战国 王明珍 《陕西师大学报(自然科学版)》 CSCD 1992年第1期88-89,共2页
1 实验1.1 材料和仪器枸桔(Poncirus trifoliata Raf.)1989年9月采自陕西汉中地区,经本校生物系黄可副教授鉴定.枸桔挥发油用自制的水蒸汽蒸馏一溶剂萃取装置提取,以精馏石油醚(收集60℃以下馏分)为溶剂.仪器,日本岛津 GC-16A 气相色谱... 1 实验1.1 材料和仪器枸桔(Poncirus trifoliata Raf.)1989年9月采自陕西汉中地区,经本校生物系黄可副教授鉴定.枸桔挥发油用自制的水蒸汽蒸馏一溶剂萃取装置提取,以精馏石油醚(收集60℃以下馏分)为溶剂.仪器,日本岛津 GC-16A 气相色谱仪和CR-3A 色谱数据处理机;英国 VG 公司 ZAB-HS 色谱一质谱联用仪;ALPHA CENTAURI FT 红外光谱仪;FX-90Q 核磁共振仪. 展开更多
关键词 枸桔 挥发油 化学成分
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杂草发酵物对枳生长和VA菌根形成的影响 被引量:9
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作者 杨晓红 李道高 +1 位作者 石井孝昭 门屋一臣 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期336-338,共3页
在具有高密度VAM真菌生长的枳 (PoncirustrifoliataRaf.)苗的培养土中分别加入 1%的 4种杂草的发酵物 ,70d后测量结果表明 :枳菌根感染率普遍较高 ,但与对照相比 ,杂草发酵物在显著促进枳苗生长的同时降低了枳菌根感染率 ,其中发酵杂草... 在具有高密度VAM真菌生长的枳 (PoncirustrifoliataRaf.)苗的培养土中分别加入 1%的 4种杂草的发酵物 ,70d后测量结果表明 :枳菌根感染率普遍较高 ,但与对照相比 ,杂草发酵物在显著促进枳苗生长的同时降低了枳菌根感染率 ,其中发酵杂草处理对生长的促进作用更大 ,降低菌根感染率更低 ;高氮也降低菌根感染水平 ;过高的菌根感染率导致寄生 。 展开更多
关键词 杂草发酵物 VA菌根形成 生长
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农杆菌介导的GUS基因在枳壳中的转移 被引量:4
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作者 贺红 韩美丽 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2000年第4期295-297,共3页
用枳壳 Poncirus trifoliata Raf.实生苗的上胚轴为材料 ,探索以根癌农杆菌介导的 GU S基因在枳壳中的转移 ,结果表明 :抑菌剂选择头孢霉素较好 ;卡那霉素作为选择试剂 ,浓度为 5 0 m g/ L;外植体与农杆菌共培养时间以 2~ 3d为宜。GU ... 用枳壳 Poncirus trifoliata Raf.实生苗的上胚轴为材料 ,探索以根癌农杆菌介导的 GU S基因在枳壳中的转移 ,结果表明 :抑菌剂选择头孢霉素较好 ;卡那霉素作为选择试剂 ,浓度为 5 0 m g/ L;外植体与农杆菌共培养时间以 2~ 3d为宜。GU S基因瞬时表达检测 ,80 %的外植体呈阳性反应 ;GUS基因稳定表达检测 ,抗性植株中 ,GU S反应呈阳性所占比例为 70 .0 %。 展开更多
关键词 枳壳 农杆菌 GUS基因
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农杆菌介导的枳壳转基因条件优化途径建立研究 被引量:1
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作者 韩美丽 陆荣生 +1 位作者 杜晓莉 吴耀军 《广西农学报》 2005年第3期37-40,50,共5页
本文以枳壳上胚轴为对象,进行了农杆菌介导的抗菌肽shivaA基因转化影响因素研究,得到了转基因植株。研究结果表明:枳壳上胚轴的卡那霉素选择浓度为60μg/ml;采用头孢噻肟钠为农杆菌抑制剂较好。共培养基3天,共培养基中补充As100μM、0.5... 本文以枳壳上胚轴为对象,进行了农杆菌介导的抗菌肽shivaA基因转化影响因素研究,得到了转基因植株。研究结果表明:枳壳上胚轴的卡那霉素选择浓度为60μg/ml;采用头孢噻肟钠为农杆菌抑制剂较好。共培养基3天,共培养基中补充As100μM、0.5%脯氨酸对转化率的促进作用最大;延迟选择不利于转化率的提高。 展开更多
关键词 农杆菌介导 优化途径 枳壳 转基因植株 头孢噻肟钠 基因转化 卡那霉素 研究结果 上胚轴 培养基 转化率 抑制剂 脯氨酸
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枳壳组织培养和植株再生研究 被引量:4
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作者 贺红 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 1998年第12期824-825,共2页
以枳壳PoncirustrifoliataRaf.实生苗上胚轴为材料进行离体培养,BA1mg/L时,出芽率最高(86.0%),BA浓度升高,出芽率随之下降;苗龄为20d的实生苗,其外植体易于出芽;实生苗培养中照光与否对出芽无太大影响;外植体取材部位,... 以枳壳PoncirustrifoliataRaf.实生苗上胚轴为材料进行离体培养,BA1mg/L时,出芽率最高(86.0%),BA浓度升高,出芽率随之下降;苗龄为20d的实生苗,其外植体易于出芽;实生苗培养中照光与否对出芽无太大影响;外植体取材部位,以实生苗的中部及下部较好,出芽率可达95%以上。 展开更多
关键词 枳壳 上胚轴 离体培养 植株再生 组织培养
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氮肥对枳生长和根系发育的影响 被引量:1
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作者 吴会会 黄光明 《长江大学学报(自然科学版)》 CAS 2021年第1期122-126,共5页
以枳(Poncirus trifoliata L.Raf)实生苗为试验材料,采用温室盆栽方式研究了硝态氮(NO-3-N)、铵态氮(NH+4-N)和酰胺态氮(CO(NH2)2-N)对枳生长、生物量以及根系构型的影响,以期为含以上三种单一形态氮素的氮肥在柑橘栽培中的施用提供参... 以枳(Poncirus trifoliata L.Raf)实生苗为试验材料,采用温室盆栽方式研究了硝态氮(NO-3-N)、铵态氮(NH+4-N)和酰胺态氮(CO(NH2)2-N)对枳生长、生物量以及根系构型的影响,以期为含以上三种单一形态氮素的氮肥在柑橘栽培中的施用提供参考。结果表明,与对照相比,NO-3-N、NH+4-N和CO(NH2)2-N均显著提高了枳地上部鲜重、地下部鲜重、地上部干重、根系总长、根系总体积和一级侧根数,NO-3-N和NH+4-N还显著提高了株高、地下部干重、根系表面积、根平均直径和侧根总数;此外,NO-3-N和CO(NH2)2-N显著提高了一级侧根和二级侧根平均根长,只有NO-3-N显著提升了叶片数、主根长和二级侧根数,NH+4-N显著提高了主根直径同时显著降低了主根长和二级侧根平均根长。其中,NO-3-N对枳生长的促进效应最显著。各类单一态氮素对枳生长发育的影响均不相同,在生产中应按实际情况合理施用以满足不同条件下枳对氮素的需求。 展开更多
关键词 氮素形态 枳(poncirus trifoliata L.raf)实生苗 根系形态
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