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正交设计直观分析法优化PCR条件 被引量：355
1
作者 何正文 刘运生 +2 位作者 陈立华 曹美鸿 夏家辉 《湖南医科大学学报》 CSCD 1998年第4期403-404,共2页
介绍一种ＰＣＲ最优化方法，即正交设计直观分析法，旨在摸索ＰＣＲ的最佳实验条件。结果证明该法科学而简便。
关键词 正交设计 聚合酶链反应 优化
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妊娠晚期孕妇B族链球菌带菌状况的检测及带菌对妊娠结局的影响 被引量：214
2
作者 时春艳 曲首辉 +1 位作者 杨磊 杨慧霞 《中华妇产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期12-16,共5页
目的探讨妊娠晚期孕妇B族链球菌带菌状况的检测方法及带菌对妊娠结局的影响。方法收集2008年12月—2009年6月在北京大学第一医院妇产科进行B族链球菌检测的孕妇617例，平均年龄为30．1岁，其中高龄孕妇（≥35岁）80例；经产妇41例，初产... 目的探讨妊娠晚期孕妇B族链球菌带菌状况的检测方法及带菌对妊娠结局的影响。方法收集2008年12月—2009年6月在北京大学第一医院妇产科进行B族链球菌检测的孕妇617例，平均年龄为30．1岁，其中高龄孕妇（≥35岁）80例；经产妇41例，初产妇576例；对617例孕妇于孕35—37周取阴道下1／3分泌物及肛周分泌物，应用细菌培养及实时PCR两种方法进行B族链球菌检测，并观察其妊娠结局。结果（1）B族链球菌阳性检出率：B族链球菌培养阳性21例（3，4％，21／617），实时PCR检测阳性57例（9．2％，57／617）。21例B族链球菌培养阳性孕妇，实时PCR检测均为阳性；36例实时PCR检测B族链球菌阳性、而细菌培养阴性孕妇在进行扩增测序后证实，34例为B族链球菌阳性，2例阴性。（2）实时PCR检测B族链球菌的诊断价值：实时PCR检测B族链球菌的敏感度为100％（55／55），特异度为99．6％（560／562）。（3）B族链球菌阳性的相关因素：B族链球菌阳性孕妇平均年龄为（30．4±3．6）岁，阴性孕妇平均年龄为（30．9±3．5）岁，两者年龄比较，差异无统计学意义（P〉0．05）。经产妇B族链球菌阳性率为7．3％（3／41），初产妇阳性率为9．4％（54／576），两者比较，差异无统计学意义（P〉0．05）。高龄孕妇（≥35岁）B族链球菌阳性率高于年龄〈35岁孕妇的阳性率，但差异无统计学意义（P〉0．05）。流产≥3次孕妇的B族链球菌阳性率与流产〈3次孕妇比较，差异也无统计学意义（P〉0．05）。（4）分娩方式：B族链球菌阳性孕妇的剖宫产率为54．4％（31／57），阴性孕妇的剖宫产率为44．6％（250／560），两者比较，差异无统计学意义（P〉0．05）。（5）产时情况：B族链球菌阳性孕妇的胎膜早破发生率为33．3％（19／57），阴性孕妇的胎膜早破发生率为25．0％（140／560），两者比 展开更多
关键词 妊娠并发症 感染性 链球菌感染 链球菌 无乳 妊娠末期 妊娠结局 聚合酶链反应
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新型冠状病毒核酸检测假阴性结果原因分析及对策 被引量：141
3
作者 里进 叶光明 +2 位作者 陈良君 王嘉俊 李一荣 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期221-225,共5页
2019年12月以来武汉市发现多起不明原因的病毒性肺炎病例,后经研究证实引起该肺炎的病毒是以前从未在人体中发现的新型病毒,世界卫生组织将该病毒命名为2019新型冠状病毒(2019-nCoV)。2019-nCov的核酸检测是新型冠状病毒肺炎确诊的必要... 2019年12月以来武汉市发现多起不明原因的病毒性肺炎病例,后经研究证实引起该肺炎的病毒是以前从未在人体中发现的新型病毒,世界卫生组织将该病毒命名为2019新型冠状病毒(2019-nCoV)。2019-nCov的核酸检测是新型冠状病毒肺炎确诊的必要指标之一,但最近中日友好医院出现的"三阴"病例,以及杭州报道1例7次核酸检测前6次均为阴性的病例,导致临床医生对2019-nCov核酸检测的价值产生了很大的质疑。本文对武汉大学中南医院已开展的3000多例2019-nCov核酸检测结果进行梳理,深入分析假阴性结果产生的可能原因,并探讨其解决对策,呼吁公众理性认识核酸检测。 展开更多
关键词 冠状病毒属 核酸类 聚合酶链反应 假阴性反应 质量控制
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低分子量地黄多糖对p53基因表达的影响 被引量：67
4
作者 魏小龙 茹祥斌 《中国药理学报》 CSCD 1997年第5期471-474,共4页
研究低分子量地黄多糖（ＬＲＰＳ）对ｐ５３基因表达的影响．方法：利用定量ＰＣＲ的方法检测ｐ５３基因表达的水平．结果：ＬＲＰＳ在最适抗肿瘤有效剂量２０和４０ｍｇ·ｋｇ－１条件下，Ｌｅｗｉｓ肺癌组织内ｐ５３基因的表达水... 研究低分子量地黄多糖（ＬＲＰＳ）对ｐ５３基因表达的影响．方法：利用定量ＰＣＲ的方法检测ｐ５３基因表达的水平．结果：ＬＲＰＳ在最适抗肿瘤有效剂量２０和４０ｍｇ·ｋｇ－１条件下，Ｌｅｗｉｓ肺癌组织内ｐ５３基因的表达水平分别是１５２和１４８，对照组为０４６，环磷酰胺组为１６０．ＬＲＰＳ能使Ｌｅｗｉｓ肺癌组织内ｐ５３基因的表达明显增加．结论：ＬＲＰＳ对抗癌基因ｐ５３表达的影响是其抗肿瘤作用的机制之一． 展开更多
关键词 地黄 多糖 P53基因 聚合酶链反应
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四君子汤及其单味药水煎液对脾虚大鼠肠道菌群的调节作用 被引量：107
5
作者 黄文武 彭颖 +2 位作者 王梦月 彭崇胜 李晓波 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第11期8-15,共8页
目的:探讨四君子汤及其单味药(人参、白术、茯苓、炙甘草)水煎液对脾虚大鼠肠道菌群的调节作用。方法:正常大鼠随机分为空白组、模型组、整肠生颗粒组、四君子汤组及各单味药组,连续10 d灌胃给予番泻叶水煎液塑造脾虚模型(空白组给予蒸... 目的:探讨四君子汤及其单味药(人参、白术、茯苓、炙甘草)水煎液对脾虚大鼠肠道菌群的调节作用。方法:正常大鼠随机分为空白组、模型组、整肠生颗粒组、四君子汤组及各单味药组,连续10 d灌胃给予番泻叶水煎液塑造脾虚模型(空白组给予蒸馏水),再连续7 d分别给予相应药物治疗(空白组、模型组给予蒸馏水)。收集造模前(第0天),造模结束(第11天)和治疗结束(第18天)的粪便样品,经硫酸酸化、乙醚萃取处理后采用气相色谱法分析样品中短链脂肪酸含量的变化,利用16S rDNA-聚合酶链式反应-变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE)技术分析粪便样品中肠道菌群结构的变化。结果:造模结束时,与空白组比较,各给药组大鼠粪便短链脂肪酸含量、肠道菌群多样性指数和相似性系数均显著下降(P <0. 05,P <0. 01),表明脾虚模型造模成功。治疗结束时,与模型组比较,白术组大鼠粪便短链脂肪酸含量、肠道菌群多样性指数和相似性系数均极显著升高(P <0. 01),四君子汤组、人参组和茯苓组部分指标极显著升高、部分指标显著升高(P <0. 05,P <0. 01);而炙甘草组仅多样性指数有所升高(P <0. 05),粪便短链脂肪酸含量和相似性系数则均无显著性差异。结论:四君子汤对脾虚大鼠肠道菌群的恢复调节时,白术可能发挥主要作用,人参、茯苓也发挥了一定作用。 展开更多
关键词 四君子汤 脾虚证 肠道菌群 短链脂肪酸 多样性指数 相似性指数 聚合酶链式反应
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中国人TTV部分基因的克隆及序列测定 被引量：106
6
作者 周育森 何忠平 +1 位作者 董京芳 王海涛 《军事医学科学院院刊》 CSCD 北大核心 1998年第2期81-83,共3页
目的：了解我国人群中是否存在ＴＴ病毒（ＴＴＶ）感染，分析国内ＴＴ病毒株基因结构特点。方法：用ＰＣＲ方法检测血清标本中ＴＴＶＤＮＡ，对ＴＴＶＤＮＡ阳性的标本进行序列测定。结果：１０例临床诊断为非甲至非戊型肝炎病人血清标... 目的：了解我国人群中是否存在ＴＴ病毒（ＴＴＶ）感染，分析国内ＴＴ病毒株基因结构特点。方法：用ＰＣＲ方法检测血清标本中ＴＴＶＤＮＡ，对ＴＴＶＤＮＡ阳性的标本进行序列测定。结果：１０例临床诊断为非甲至非戊型肝炎病人血清标本中，用ＰＣＲ方法检测出５例为ＴＴＶＤＮＡ阳性。将其中的一株命名为ＴＴＶＣＨ１（ＴＴＶ中国株１）并进行序列测定，该序列与日本ＴＴＶ部分基因（ＣＬＯＮ２２）相对应位置的核苷酸同源性为９８％。用ＢＬＡＳＴ程序检索了ＧｅｎＢａｎｋ＋ＥＭＢＬ＋ＰＤＢ序列库的３３２９４９个序列数据，没有发现与之有明显同源性的序列；与已知的肝炎病毒（Ａ至Ｇ）也没有明显的相关性，而只同日本报道的部分基因有很高的同源性。结论：该研究建立了检测ＴＴＶ的ＰＣＲ方法并测定了ＴＴＶ中国株的部分基因序列，首次证实在我国人群中存在ＴＴＶ的感染。 展开更多
关键词 TT病毒 聚合酶链反应 核苷酸 序列测定 肝炎病毒
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乙型肝炎病毒基因型S基因PCR-RFLP分型方法的建立 被引量：77
7
作者 阎丽 侯金林 +3 位作者 郭亚兵 王战会 林裕龙 骆抗先 《中华传染病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期224-228,共5页
目的　建立乙型肝炎病毒 (HBV)S基因聚合酶链反应 限制性片段长度多态性 (PCR RFLP)的基因型分型方法并验证其准确性。方法　比较GenBank中HBV 2 2 3株各基因型全序列的S基因氨基酸及核苷酸序列 ,设计限制性内切酶BsrI、StyI、DpnI和Hp... 目的　建立乙型肝炎病毒 (HBV)S基因聚合酶链反应 限制性片段长度多态性 (PCR RFLP)的基因型分型方法并验证其准确性。方法　比较GenBank中HBV 2 2 3株各基因型全序列的S基因氨基酸及核苷酸序列 ,设计限制性内切酶BsrI、StyI、DpnI和HpaII鉴别HBVA F基因型的方法。选择经前SPCR PFLP的方法已鉴定出的HBVB、C和D基因型标本各 3 0例 ,用此方法鉴定验证 ,并随机对HBVB、C和D基因型各 3株标本进行S基因测序证实。结果　两种PCR RFLP及S基因测序鉴定HBV基因型结果一致。结论　S基因PCR RFLP的方法能够准确鉴定HBV基因型。此方法灵敏性高 ,特异性强 ,且酶切图谱简明单一 ,易于识别 ,适宜于HBV基因型的流行病学调查。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 HBV S基因 基因型 聚合酶链反应 限制性片段长度多态性 PCR-RFLP 基因分型
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乙型肝炎病毒感染者病毒基因型和亚型分布及其临床意义 被引量：74
8
作者 李雅娟 庄辉 +7 位作者 李杰 董庆鸣 陈雅洁 牛俊奇 马为民 赵伟 赵保安 钟金群 《中华肝脏病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第10期724-729,共6页
目的研究不同类型乙型肝炎病毒(HBV)感染者中HBV基因型和亚型分布情况及其临床意义。方法应用基因型和亚型特异性引物聚合酶链反应法(PCR),对北京、长春、汉川、深圳、清远和南京等6个城市445份HBV感染者血清进行基因型及亚型分型,其中... 目的研究不同类型乙型肝炎病毒(HBV)感染者中HBV基因型和亚型分布情况及其临床意义。方法应用基因型和亚型特异性引物聚合酶链反应法(PCR),对北京、长春、汉川、深圳、清远和南京等6个城市445份HBV感染者血清进行基因型及亚型分型,其中急性肝炎7例,无症状携带者36例,慢性乙型肝炎352例,肝硬化28例,肝细胞癌22例。通过对PCR产物测序确定其基因型,以验证该法的准确性。结果445份血清中,239例(53.7%)为C型,其中13例(5.4%)为C1亚型,135例(56.5%)为C2亚型,91例(38.1%)为非C1/C2亚型;145例(32.6%)B型,其中100例(69.0%)为Ba亚型,25例(17.2%)为Bj亚型,20例(13.8%)为非Ba/Bj亚型;61例(13.7%)为B型与C型混合感染,其中6例(9.8%)为Ba与C1 亚型混合感染,3例(4.9%)为Bj与C1亚型混合感染,15例(24.6%)为Ba与C2亚型混合感染,8例(13.1%) 为Bj与C2型混合感染,11例(18.0%)为Ba与非C1/C2亚型混合感染,7例(11.5%)为Bj与非C1/C2亚型混合感染,2例(3.3%)为非Ba/Bj亚型与C1亚型混合感染,3例(4.9%)为非Ba/Bj亚型与C2亚型混合感染,6 例(9.8%)为非Ba/Bj亚型与非C1/C2亚型混合感染。未检测到其他基因型及亚型。在不同类型乙型肝炎病毒感染者中,B型、C型、B与C型混合感染及亚型分布差异有统计学意义,在肝硬化和肝细胞癌患者中C型所占比例较高(分别为78.6%和86.4%),无症状携带者中B型所占比例较高(72.2%)。但不同性别患者中,HBV 基因型和亚型分布无差异。在HBeAg阳性和阴性感染者中,HBV基因型和亚型分布差异也有统计学意义。结论该6个城市HBV感染者中,以B2和C2亚型占优势,C基因型可能与肝硬化和肝细胞癌的发生有关。 展开更多
关键词 肝炎病毒 乙型 基因型 亚型 聚合酶链反应 乙型肝炎病毒(HBV) 病毒基因型 病毒感染者 亚型分布 临床意义 HBV基因型
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鲍曼不动杆菌医院感染的危险因素及基因分型研究 被引量：71
9
作者 刘丁 陈萍 +2 位作者 陈伟 俞志海 练向群 《中华流行病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期140-142,共3页
目的　了解鲍曼不动杆菌医院感染现状及危险因素 ,并证实院内危重病人监护病房(ICU)是否存在由鲍曼不动杆菌同源性菌株引起的感染。方法　对重庆市 4所医院内由鲍曼不动杆菌引发的院内感染 1 4 0例患者的危险因素进行 1∶1病例对照研究 ... 目的　了解鲍曼不动杆菌医院感染现状及危险因素 ,并证实院内危重病人监护病房(ICU)是否存在由鲍曼不动杆菌同源性菌株引起的感染。方法　对重庆市 4所医院内由鲍曼不动杆菌引发的院内感染 1 4 0例患者的危险因素进行 1∶1病例对照研究 ;同时将近期内某院ICU分离的鲍曼不动杆菌进行M1 3 PCR扩增分型。结果　研究表明与鲍曼不动杆菌医院感染相关的危险因素依次为病情 (OR =8.691 )、免疫抑制剂 (OR =4.85)、机械通气 (OR =3 .68)、抗生素使用种类 (OR =3 .0 1 4 )。基因分型结果显示从ICU分离的 1 1株鲍曼不动杆菌 ,其中有 5株的基因型完全相同。结论病情、免疫抑制剂、机械通气和抗生素使用种类为鲍曼不动杆菌医院感染危险因素 ;院内ICU存在多重耐药鲍曼不动杆菌的感染 。 展开更多
关键词 鲍曼不动杆菌 医院感染 危险因素 基因分型 聚合酶链反应
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慢性非细菌性前列腺炎患者前列腺液革兰阴性菌16SrRNA基因的检测 被引量：72
10
作者 刘政军 朱雪阳 蒋先镇 《中华泌尿外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第7期469-471,共3页
目的　探讨慢性非细菌性前列腺炎的可能病因。　方法　应用PCR方法检测 2 4例慢性非细菌性前列腺炎患者和 10例正常人前列腺液中革兰阴性菌 16SrRNA基因。同时对 10例实验组患者行尿道分泌物PCR检查。　结果　 2 4例慢性非细菌性前列腺... 目的　探讨慢性非细菌性前列腺炎的可能病因。　方法　应用PCR方法检测 2 4例慢性非细菌性前列腺炎患者和 10例正常人前列腺液中革兰阴性菌 16SrRNA基因。同时对 10例实验组患者行尿道分泌物PCR检查。　结果　 2 4例慢性非细菌性前列腺炎患者前列腺液中革兰阴性菌16SrRNA基因阳性 13例 ,阳性率 5 4 % ;10例正常人中阳性 1例 ,阳性率 10 % (P <0 .0 1)。 10例慢性非细菌性前列腺炎尿道分泌物PCR均阴性。　结论　慢性非细菌性前列腺炎患者前列腺液革兰阴性菌 16SrRNA基因阳性率显著高于正常人。革兰阴性菌 16SrRNA基因源于前列腺而非尿道。一些目前还不能常规成功培养的细菌可能为慢性非细菌性前列腺炎的发病原因之一。 展开更多
关键词 慢性非细菌性前列腺炎 前列腺液 革兰阴性菌 16SRRNA基因 检测
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应用聚合酶链反应快速检测沙门氏菌 被引量：64
11
作者 黄金林 焦新安 +4 位作者 文其乙 潘志明 张小荣 张如宽 刘秀梵 《扬州大学学报（农业与生命科学版）》 CAS CSCD 2002年第3期4-7,11,共5页
根据沙门氏菌组氨酸转运操纵子基因序列设计引物 ,对沙门氏菌属 A～F各群中共 1 5株沙门氏菌标准菌株、2 7株沙门氏菌现场分离菌株和其他 1 0株非沙门氏菌菌株进行聚合酶链反应 (PCR)扩增 ,结果沙门氏菌均出现 495 bp特异性 DNA扩增条... 根据沙门氏菌组氨酸转运操纵子基因序列设计引物 ,对沙门氏菌属 A～F各群中共 1 5株沙门氏菌标准菌株、2 7株沙门氏菌现场分离菌株和其他 1 0株非沙门氏菌菌株进行聚合酶链反应 (PCR)扩增 ,结果沙门氏菌均出现 495 bp特异性 DNA扩增条带 ,所有对照均未出现特异条带 ,提示这对引物具有很强的沙门氏菌属特异性。PCR敏感性试验显示 ,该体系能检出 1 4pg以上的沙门氏菌 DNA。通过对 5种不同的 DNA模板提取方法的比较 ,选择操作简便、快速、成本低廉的热裂解法。采用该方法 ,对生鲜奶样进行检测 ,经与国家标准卫生检验方法相比较 ,两者符合率达 1 0 0 %。 展开更多
关键词 应用 聚合酶 链反应 沙门氏菌 人畜共患病
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香港市售蒲公英及其混淆品土公英的DNA指纹鉴别研究 被引量：41
12
作者 曹晖 毕培曦 邵鹏柱 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 1997年第4期197-200,共4页
采用分子生物技术包括任意引物聚合酶链式反应（ＡＰＰＣＲ）和随意引物扩增的多态性ＤＮＡ（ＲＡＰＤ）方法扩增蒲公英及其６种土公英混淆品的基因组ＤＮＡ，获得清晰可靠的ＤＮＡ指纹图谱。根据琼脂糖凝胶上显示的ＤＮＡ带型差异可... 采用分子生物技术包括任意引物聚合酶链式反应（ＡＰＰＣＲ）和随意引物扩增的多态性ＤＮＡ（ＲＡＰＤ）方法扩增蒲公英及其６种土公英混淆品的基因组ＤＮＡ，获得清晰可靠的ＤＮＡ指纹图谱。根据琼脂糖凝胶上显示的ＤＮＡ带型差异可鉴别蒲公英和土公英混淆品。 展开更多
关键词 药材鉴定 蒲公英 聚合酶链式反应 DNA指纹图谱
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健康儿童鼻咽部常见致病微生物携带状况及临床意义 被引量：60
13
作者 侯安存 刘玉华 +6 位作者 辛德莉 李靖 耿彬 崔红 张淑兰 许淑珍 赵高潮 《中华儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期45-49,共5页
目的　了解健康儿童鼻咽部常见致病微生物携带状况 ,探讨小儿呼吸道感染病原诊断中鼻咽分泌物检测的临床价值及依据。方法　对 2 2 94名健康儿童及患儿取咽拭子或抽吸鼻咽分泌物进行检测。其中 190 6名儿童之咽拭子标本用聚合酶链反应 (... 目的　了解健康儿童鼻咽部常见致病微生物携带状况 ,探讨小儿呼吸道感染病原诊断中鼻咽分泌物检测的临床价值及依据。方法　对 2 2 94名健康儿童及患儿取咽拭子或抽吸鼻咽分泌物进行检测。其中 190 6名儿童之咽拭子标本用聚合酶链反应 (PCR)法检测肺炎支原体 (MP) ;30 7名儿童取咽拭子行细菌培养 ;81名儿童取鼻咽分泌物 (NPS)进行呼吸道合胞病毒 (RSV)及腺病毒 (ADV)分离。同期对患儿也进行了相应病原检测。结果　 190 6名健康儿童中肺炎支原体阳性者 2 8名 ,占1 4 7%;而 5 44例急性下呼吸道感染者中阳性者 10 7例 ,占 19 6 7%,P <0 0 0 1。健康儿童中肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、A组乙型溶血性链球菌 (GAS)的平均带菌阳性率分别为 18 6 %、6 5 %、2 3%、2 0 %、2 0 %,未发现脑膜炎双球菌 ;34例急性扁桃体炎患儿GAS阳性者2 6例 ,占 76 5 %,P <0 0 0 1。 81名健康婴幼儿呼吸道合胞病毒携带者 3例 ,占 3 7%,呼吸道 3、7型腺病毒携带者 1例占 1 2 %;而 136例下呼吸道感染患儿RSV中阳性者 5 1例 ,占 37 5 %,P <0 0 0 1。结论　健康儿童鼻咽部肺炎支原体、腺病毒、呼吸道合胞病毒、A组乙型溶血性链球菌及脑膜炎双球菌的携带者均很少 ,检测阳性者 ,有重要诊断意义 ; 展开更多
关键词 鼻咽部 聚合酶链反应 健康儿童 肺炎支原体 呼吸道合胞病毒 致病微生物 呼吸道感染
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阴道加德纳菌对细菌性阴道病的病原学诊断评价 被引量：59
14
作者 李连青 朱庆义 +2 位作者 刘俊芬 李兆艾 武素梅 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期226-230,共5页
目的　探讨阴道加德纳菌对细菌性阴道病(BV)的病原学诊断价值。方法　对237例妇科门诊生殖道感染患者,采集阴道分泌物标本,用直接涂片染色、细菌分离培养、PCR和 BV试验等 4 种方法,检测阴道加德纳菌和细菌性阴道病;BV诊断按照 Amsel金... 目的　探讨阴道加德纳菌对细菌性阴道病(BV)的病原学诊断价值。方法　对237例妇科门诊生殖道感染患者,采集阴道分泌物标本,用直接涂片染色、细菌分离培养、PCR和 BV试验等 4 种方法,检测阴道加德纳菌和细菌性阴道病;BV诊断按照 Amsel金标准分组:BV组 174 例,非 BV组 63 例;另设对照组 40 例为健康体检妇女。结果　BV组174例直接涂片(线索细胞)、细菌培养、PCR和BV试验等4种方法阳性检出率分别为30.5%、51.1%、78.2%和89.7%;63例非BV组,阳性检出率分别为 6.3%、9.5%、11.1%和 28.6%,2 组比较经统计学分析,P值均<0.05,差异有显著性;40例健康对照组,只有PCR阳性检出率为12.5%,余均为阴性;23株 GV药敏试验结果甲硝唑敏感2株,替硝唑敏感3株,罗红霉素敏感3株,阿奇霉素敏感4株,克林霉素敏感 1 株。结论阴道加德纳菌在细菌性阴道病中占有主导作用,是细菌性阴道病的重要致病菌之一;BV诊断试验快速、敏感,适用于BV筛查;涂片染色检测线索细胞简单、易行,且可同时进行真菌、淋菌等检测;细菌分离培养是阴道加德纳菌鉴定的金标准。 展开更多
关键词 细菌性阴道病(BV) 阴道加德纳菌(GV) 聚合酶链反应(PCR)
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儿童百日咳发病特点及诊断中联合呼吸道病毒检测的临床意义分析 被引量：61
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作者 黄辉 邓莉 +4 位作者 肖飞 伏瑾 邓洁 王芳 杨健 《中华儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第8期580-585,共6页
目的 分析儿童百日咳的发病特点及诊断中联合呼吸道病毒检测的必要性,提高临床医生对儿童百日咳的认识,及早完善病原学诊断并规范治疗.方法 临床资料回顾性分析2015年1月至2016年12月在首都儿科研究所附属儿童医院感染门诊及住院的195... 目的 分析儿童百日咳的发病特点及诊断中联合呼吸道病毒检测的必要性,提高临床医生对儿童百日咳的认识,及早完善病原学诊断并规范治疗.方法 临床资料回顾性分析2015年1月至2016年12月在首都儿科研究所附属儿童医院感染门诊及住院的195例疑似百日咳患儿临床资料.结果 195例疑似百日咳患儿均完成呼吸道分泌物百日咳鲍特菌核酸检测,其中172例同时完成呼吸道7种病毒[呼吸道合胞病毒（RSV）、腺病毒（ADV）、流感病毒A（INFA）、流感病毒B（INFB）、副流感病毒Ⅰ型（PIV Ⅰ）、副流感病毒Ⅱ型（PIVⅡ）、副流感病毒Ⅲ型（PIVⅢ）]直接免疫荧光检测.（1）百日咳核酸检测阳性80例（阳性率41.0％）,男47例,女33例,年龄从1月龄至10岁,全部病例均有阵发性咳嗽（100.0％）,伴痉挛性咳嗽50例（62.5％）,咳嗽后呕吐9例（11.2％）,咳嗽后青紫22例（27.5％）,咳嗽后吸气性吼声13例（16.2％）,伴明显呼吸困难4例（5.0％）,胸X线片诊断为肺炎18例（22.5％）,并发百日咳脑病1例（1.2％）;（2）完成呼吸道病毒检测的172例中病毒病原阳性69例（检出阳性率40.1％）,其中RSV阳性32例（18.6％）,PIVⅢ阳性29例（16.8％）;（3）80例百日咳核酸检测阳性病例中,66例完成了呼吸道病毒检测,阳性9例（9/66,13.6％）,其中7例为PIVⅢ混合感染,临床表现为咳嗽后青紫6例,呼吸困难2例,肺部X线片诊断为肺炎3例,临床症状较普通百日咳患儿表现突出;（4）以确诊病原为分组依据,单纯百日咳组57例,RSV感染组32例,单纯PIVⅢ感染组22例,单纯百日咳组、RSV感染组、单纯PIVⅢ感染组痉挛性咳嗽分别为35例（61.4％）、7例（21.9％）、8例（36.4％）,单纯百日咳组发生率高于其他2组（x2=12.850、4.013,P＜0.05）,3组吸气性吼声分别为11例（19.3％）、1例（3.1％）、0例,单纯百日咳组发生率高于其他2组（x2=4.596、4.932,P� 展开更多
关键词 百日咳 体征和症状 聚合酶链反应 呼吸道病毒
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用聚合酶链反应检测鸭瘟病毒的研究 被引量：43
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作者 谢芝勋 谢志勤 +2 位作者 刘加波 邓显文 庞耀珊 《中国兽药杂志》 北大核心 2000年第4期10-12,共3页
根据已发表的鸭瘟病毒基因序列 ,设计并合成了一对引物 ,其扩增跨幅为 60 2 bp。用这对引物对 6株鸭瘟病毒 DNA进行扩增 ,均获得了与设计大小相符的明亮条带 ,为阳性 ,而对其它 6株禽病病原体基因扩增不出任何条带 ,为阴性。敏感试验表... 根据已发表的鸭瘟病毒基因序列 ,设计并合成了一对引物 ,其扩增跨幅为 60 2 bp。用这对引物对 6株鸭瘟病毒 DNA进行扩增 ,均获得了与设计大小相符的明亮条带 ,为阳性 ,而对其它 6株禽病病原体基因扩增不出任何条带 ,为阴性。敏感试验表明可检测到 1 0 0 fg的鸭瘟病毒 展开更多
关键词 PCR技术 检测 鸭瘟病毒 特异性试验 敏感试验
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氟西汀治疗持续的躯体形式的疼痛障碍的疗效及其作用机制 被引量：59
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作者 骆艳丽 吴文源 +7 位作者 江三多 李春波 张野 江开达 季建林 陈福国 陆峥 杨素封 《中华精神科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期111-114,共4页
目的　研究氟西汀对持续的躯体形式的疼痛障碍 (以下简称持续疼痛障碍 )的疗效及其与 5 羟色胺 (5 HT) 2A受体基因多态性的关系。方法　用氟西汀 (2 0mg/d)治疗 6 2例持续疼痛障碍患者 (病例组 ) ,共 6周。应用疼痛量表 (MOSPM)及汉... 目的　研究氟西汀对持续的躯体形式的疼痛障碍 (以下简称持续疼痛障碍 )的疗效及其与 5 羟色胺 (5 HT) 2A受体基因多态性的关系。方法　用氟西汀 (2 0mg/d)治疗 6 2例持续疼痛障碍患者 (病例组 ) ,共 6周。应用疼痛量表 (MOSPM)及汉密尔顿抑郁量表 (HAMD ;17项 )于治疗前及治疗后第 2 ,4 ,6周末进行评定 ;采用聚合酶链反应 限制性片段长度多态技术 ,测定 5 HT2A受体基因多态性 ,并与正常人对照。结果　 (1)MOSPM及HAMD评定 :氟西汀治疗的有效率均随治疗时间延长而增加 ,在治疗第 6周末分别达到 76 %和 79%。 (2 )经Z检验 ,有效组中C/C基因型 [15个 (38% ) ]和C等位基因频率 [4 5个 (5 8% ) ]高于无效组 [分别为 1个 (8% )和 6个 (2 5 % ) ],无效组中T/T基因型 [7个(5 8% ) ]和T等位基因频率 [18个 (75 % ) ]高于有效组 [分别为 9个 (2 3% )和 33个 (42 % ) ],差异均有显著性 (P <0 0 5 ) ;而T/C基因型频率两组的差异无显著性 [分别为 15个 (38% )和 4个 (33% ) ]。结论氟西汀可缓解该类患者的疼痛及抑郁症状 ,其镇痛疗效可能与 5 HT2A受体基因T10 2C多态性有关。 展开更多
关键词 疼痛 氟西汀 血清素 聚合酶链反应 限制性片段长度 基因多态性
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利用实时荧光定量PCR方法分析转基因水稻外源基因拷贝数 被引量：41
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作者 杨立桃 赵志辉 +3 位作者 丁嘉羽 张承妹 贾军伟 张大兵 《中国食品卫生杂志》 2005年第2期140-144,共5页
为分析转基因水稻外源基因拷贝数 ,利用新型、灵敏、高通量的实时荧光定量PCR方法进行转基因水稻外源基因拷贝数的分析。转基因外源基因的拷贝数通过转基因水稻外源基因 (GUS和HPT基因 )和水稻内标准SPS基因含量的比较计算获得。定量分... 为分析转基因水稻外源基因拷贝数 ,利用新型、灵敏、高通量的实时荧光定量PCR方法进行转基因水稻外源基因拷贝数的分析。转基因外源基因的拷贝数通过转基因水稻外源基因 (GUS和HPT基因 )和水稻内标准SPS基因含量的比较计算获得。定量分析了 14株T0 代的转基因水稻植株 ,得到了外源基因插入分别为 1、2、3和 4的转基因植株 ,同时利用SouthernBlot方法进行验证分析。随机选择 18个已经过定量PCR检测分析的转基因水稻植株 ,用SouthernBlot的方法分析转基因水稻植株中的HPT或GUS基因的拷贝数 ,SouthernBlot分析结果显示有 15个转基因水稻植株的分析结果与定量PCR分析的结果是一致的 ,3个植株定量PCR分析的转基因拷贝数稍高于SouthernBlot的分析结果 ,主要原因是SouthernBlot方法在同一个插入位点有多拷贝的T -DNA片段插入时 ,转基因植株的基因组在完全酶切时会产生相似的DNA片段 ,电泳分析时很难分辨清楚。定量PCR方法则完全避免了这种情况的发生 ,除非目的基因DNA片段在PCR引物处发生断裂。两种方法分析结果的比较显示定量PCR方法分析转基因拷贝数更加有效、适用。 展开更多
关键词 拷贝数 实时荧光定量PCR HPT 方法分析 外源基因 分析结果 DNA片段 转基因水稻 转基因植株 利用
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基因Ⅰ、Ⅳ型戊型肝炎病毒高灵敏度通用引物的设计和初步应用 被引量：54
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作者 葛胜祥 郭清顺 +2 位作者 李少伟 张军 夏宁邵 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期181-187,共7页
设计针对国内流行的戊型肝炎病毒(HEV)基因Ⅰ、Ⅳ型,在这两型序列的保守区域设计了一套RT-PCR引物--E引物,并将E引物与目前较常用的3对通用引物(Meng、ConORF1和ConORF2引物)比较了检测基因Ⅰ、Ⅳ型HEV的灵敏度.对基因Ⅰ型HEV,E引物能... 设计针对国内流行的戊型肝炎病毒(HEV)基因Ⅰ、Ⅳ型,在这两型序列的保守区域设计了一套RT-PCR引物--E引物,并将E引物与目前较常用的3对通用引物(Meng、ConORF1和ConORF2引物)比较了检测基因Ⅰ、Ⅳ型HEV的灵敏度.对基因Ⅰ型HEV,E引物能检出的稀释度为105,参考引物能检出的稀释度为102～104;对基因Ⅳ型HEV,E引物能检出的稀释度为102,参考引物能检出的稀释度为101～102.在17份HEV-IgM阳性血清中,E引物检出5份,检出率为29.4%;参考引物只能检出1份或2份,检出率最高为11.8%.E引物在33份HEV-IgM阳性的隐性感染血清中检出6份,阳性率18.2%;在79份HEV-IgM阳性的临床肝炎血清中检出36份,阳性率45.6%.以上结果初步表明,对于在国内流行的基因Ⅰ、Ⅳ型HEV,E引物的检测灵敏度要高于目前常用的通用引物. 展开更多
关键词 戊型肝炎病毒 基因Ⅰ型 基因Ⅳ型 聚合酶链反应 通用引物 设计 PCR
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湖北地区乙型肝炎病毒基因型分布与临床的相关性 被引量：52
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作者 雷延昌 郝友华 +5 位作者 田拥军 孟忠吉 王宝菊 田德英 赵西平 杨东亮 《中华肝脏病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期109-112,共4页
目的 了解湖北地区乙型肝炎病毒(HBV)基因型的分布及其与临床的相关性。 方法 选择湖北地区HBV DNA阳性的慢性HBV感染者190例,其中乙型肝炎表面抗原(HBsAg)携带者52例、慢性乙型肝炎56例、重型肝炎32例、肝硬化22例、原发性肝癌28例,应... 目的 了解湖北地区乙型肝炎病毒(HBV)基因型的分布及其与临床的相关性。 方法 选择湖北地区HBV DNA阳性的慢性HBV感染者190例,其中乙型肝炎表面抗原(HBsAg)携带者52例、慢性乙型肝炎56例、重型肝炎32例、肝硬化22例、原发性肝癌28例,应用多对型特异性引物-聚合酶链反应检测HBV的基因型。 结果 多对HBV型特异性引物法可快速准确鉴定HBV的基因型。190份HBV DNA阳性血清标本中,B基因型140例(73.7％),C基因型42例(22.1％),BC混合型8例(4.2％),未发现A、D和E基因型;B基因型在重型肝炎和肝癌患者中占绝对优势,分别为87.5％和89.3％,显著高于HBsAg携带者的67.3％;B基因型患者血清丙氨酸氨基转移酶水平(253.1±306.7)U／L高于C基因型患者的(154.1±192.9)U／L,差异有统计学意义(P<0.05);除HBsAg携带者外的慢性HBV感染者中,B基因型患者血清抗-HBe阳性率50.5％(53／105)显著高于C基因型的18.5％(5／27),P<0.01。 结论 多对型特异性引物同时进行聚合酶链反应的基因分型方法可用于HBV基因型的流行病学调查;湖北地区存在HBV的B、C和BC混合基因型,B型为本地区的优势基因型并在严重肝病和肝癌中的比例较高,基因型的分布可能有较大的地区差异。 展开更多
关键词 慢性HBV感染 B基因 C基因 乙型肝炎病毒基因型 临床 HBSAG携带者 HBVDNA 结论 优势 准确
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