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哺乳动物细胞单抗生产的载体策略
1
作者 黄超宾 申会涛 +3 位作者 杨立元 孟思 刘泽 高辉 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期66-77,共12页
抗体药物在生物医药行业所占比重持续增加,抗体高效表达需要在合适的系统中进行,载体在这一过程中尤其重要,可以参与一系列抗体生产步骤:搭配合适的元件来筛选阳性、高表达克隆,选择轻重链的最优表达比例,稳定基因转录,增强翻译效率,对... 抗体药物在生物医药行业所占比重持续增加,抗体高效表达需要在合适的系统中进行,载体在这一过程中尤其重要,可以参与一系列抗体生产步骤:搭配合适的元件来筛选阳性、高表达克隆,选择轻重链的最优表达比例,稳定基因转录,增强翻译效率,对抗体进行正确的翻译后修饰等。对哺乳动物细胞表达载体构建所涉及的启动子、增强子、绝缘子、支架/基质附着区、信号肽、多顺反子策略、筛选系统、加尾信号以及用于增强目的基因表达所涉及的遗传工具等研究进展进行讨论,以期全面了解哺乳动物细胞重组抗体表达所涉及关键点,克服与之相关的挑战,进而推动抗体疗法发展。 展开更多
关键词 单抗 启动子 增强子 绝缘子 支架/基质附着区 信号肽 内部核糖体进入位点 2A肽 筛选系统 加尾信号 遗传工具
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高等植物mRNA3’端形成机制
2
作者 郑成超 温孚江 《山东农业大学学报（自然科学版）》 CSCD 2000年第1期110-114,共5页
植物mRNA3’端加工在基因表达调控中起重要作用,本文着重综述了该领域的最新研究进展。在对动、植物系统进行比较的基础上,提出了Poly(A)信号和Poly(A)信号上游GU丰富区是影响植物mRNA3’端加工的主要顺式作用元件。
关键词 植物 mRNA3′端加工 poly(A)信号 转录 表达调控
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秀丽隐杆线虫全身性与组织特异性表达重组载体的构建
3
作者 周前进 姜小磊 +1 位作者 张红丽 杜爱芳 《浙江大学学报（农业与生命科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期16-26,共11页
利用PCR技术从秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans)基因组DNA中扩增获得Act-1基因的核心启动子序列、T07F10基因的核心启动子序列与3UTR的Poly(A)信号序列以及从表达载体pEGFP-N1上扩增获得SV40早期mRNA的Poly(A)信号序列与EGFP基因.... 利用PCR技术从秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans)基因组DNA中扩增获得Act-1基因的核心启动子序列、T07F10基因的核心启动子序列与3UTR的Poly(A)信号序列以及从表达载体pEGFP-N1上扩增获得SV40早期mRNA的Poly(A)信号序列与EGFP基因.以克隆载体pBluescript SK+为基本骨架,分别构建由Act-1基因的核心启动子序列、T07F10基因的核心启动子序列调控的、EGFP作为报告基因的秀丽隐杆线虫全身性表达重组载体和组织特异性表达重组载体,为研究不同类型载体在秀丽隐杆线虫体内的表达模式提供基础. 展开更多
关键词 秀丽隐杆线虫 核心启动子 EGFP基因 poly(A)信号 全身性表达 组织特异性表达
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Poly(A)信号及3’非转译区对IL-2Rα表达调控的影响
4
作者 邹全明 朱锡华 +1 位作者 李昌本 赵寿元 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1992年第4期223-227,共5页
将IL-2Ra cDNA3’端系列缺失克隆的重组质粒导入CHO细胞,经DNA、RNA及蛋白质印迹分析表明:缺3’非转译区(3’UTR)及Poly(A)信号序列的缺失子DNA,可以整合到受体细胞染色体上,但不能形成稳定的mRNA及表达rIL-2Ra;IL-2Ra cDNA上1297bp处的... 将IL-2Ra cDNA3’端系列缺失克隆的重组质粒导入CHO细胞,经DNA、RNA及蛋白质印迹分析表明:缺3’非转译区(3’UTR)及Poly(A)信号序列的缺失子DNA,可以整合到受体细胞染色体上,但不能形成稳定的mRNA及表达rIL-2Ra;IL-2Ra cDNA上1297bp处的ATTAAA序列独立地显示出Poly(A)信号功能,相应的缺失子DNA能转录形成稳定的mRNA和表达rIL-2Ra。结果表明:poly(A)尾是位于3’端的转译调控因子,3’UTR与IL-2Ra cDNA的表达调控密切相关。 展开更多
关键词 3'UTR 表达 调控 白细胞介素2 受体
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正向和反向SV40 poly(A)信号序列对上游基因表达的影响
5
作者 侯兵 金华君 +2 位作者 刘文超 钱其军 吕赛群 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期630-633,共4页
目的研究正向和反向SV40poly(A)信号在3种常用细胞株中对上游基因表达的调控作用,为基因表达研究中载体poly(A)信号的选择提供依据。方法将F-Luc与R-Luc两种荧光素酶基因插入同一质粒,构建带有双荧光素酶报告基因的载体Dual-Luc。在F-Lu... 目的研究正向和反向SV40poly(A)信号在3种常用细胞株中对上游基因表达的调控作用,为基因表达研究中载体poly(A)信号的选择提供依据。方法将F-Luc与R-Luc两种荧光素酶基因插入同一质粒,构建带有双荧光素酶报告基因的载体Dual-Luc。在F-Luc基因后分别插入正向和反向互补的SV40poly(A)信号序列,得到2个带有不同SV40poly(A)信号的载体Dual-Luc2、Dual-Luc3。将其分别转染常用的3类细胞株293、L-02和HeLa细胞,应用双荧光素酶标仪和反转录聚合酶链反应(RT-PCR)法测定报告基因(F-Luc)的表达量,以R-Luc基因的表达量作对照。结果成功构建携带正向和反向互补SV40poly(A)序列的双荧光素酶载体Dual-Luc2、Dual-Luc3;双荧光素酶标仪检测表明,在293细胞中,Dual-Luc2、Dual-Luc3的F-Luc/R-Luc比值分别为3.25±0.43、3.03±0.14,差异无统计学意义(P>0.05);在L-02细胞中,Dual-Luc2、Dual-Luc3的F-Luc/R-Luc比值分别为6.16±0.39、3.83±0.39,差异有统计学意义(P<0.05);在HeLa细胞中,Dual-Luc2、Dual-Luc3的F-Luc/R-Luc比值分别为1.21±0.10、0.66±0.02,差异有统计学意义(P<0.05)。RT-PCR检测与荧光素酶检测结果一致。结论不同细胞中poly(A)信号序列对上游基因的调控作用存在差异;poly(A)信号对上游基因的调控作用主要发生于转录水平。 展开更多
关键词 SV40poly(A)加尾信号序列 基因表达 双荧光素酶报告系统
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微孢子虫PolyA位点的预测
6
作者 孙康 杨明 +2 位作者 马立 李田 赵玉芳 《西南大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期138-143,共6页
多聚腺苷酸化是真核细胞内形成成熟mRNA的一个重要步骤,其位点的预测对基因组序列中编码基因的发掘具有重要的参考价值.本研究以缺乏有效基因预测方法的微孢子虫基因组为对象,根据该物种的基因表达偏好设计了一个算法,对其PolyA位点进... 多聚腺苷酸化是真核细胞内形成成熟mRNA的一个重要步骤,其位点的预测对基因组序列中编码基因的发掘具有重要的参考价值.本研究以缺乏有效基因预测方法的微孢子虫基因组为对象,根据该物种的基因表达偏好设计了一个算法,对其PolyA位点进行预测分析.首先,采用k阶核苷酸频率形式和位置权重矩阵形成初始的特征,然后用PCA降低特征空间的维数,得到的数据用机器学习方法进行分析,产生一个较好的分类结果.其中基于支持向量机的实验得到的敏感度(Sp)和ACC分别达到了87.33%和85.14%,这在微孢子虫的PolyA位点预测上取得了较为理想的效果,并为以后机器学习算法在微孢子虫基因预测领域做了很好的尝试. 展开更多
关键词 polyA信号 微孢子虫 位置权重矩阵 机器学习
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基于改进FRFT的多相码信号检测与参数估计
7
作者 胡鑫磊 赵立新 +1 位作者 张国毅 田润澜 《科学技术与工程》 北大核心 2015年第15期178-182,194,共6页
针对低信噪比下多相码信号的检测与参数估计问题,提出了基于扩展分数阶傅里叶变换(EFRFT)的多相码检测与参数估计方法。该方法根据多相码信号多条时频脊线平行的特点,通过改进分数阶傅里叶变换(FRFT)的核函数,积累了各脊线的能量,从而... 针对低信噪比下多相码信号的检测与参数估计问题,提出了基于扩展分数阶傅里叶变换(EFRFT)的多相码检测与参数估计方法。该方法根据多相码信号多条时频脊线平行的特点,通过改进分数阶傅里叶变换(FRFT)的核函数,积累了各脊线的能量,从而完成了多相码信号的检测与参数估计。仿真实验证实该方法在低信噪比条件下可以有效检测多相码信号,同时也可以准确估计信号的调制参数。 展开更多
关键词 信号检测 参数估计 多相码信号 分数阶傅里叶变换 低信噪比
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一种改进的多相码信号参数估计法 被引量：4
8
作者 李建 张国毅 张旭洲 《现代防御技术》 北大核心 2013年第4期88-93,共6页
目前,对由频率导出的一类多相码脉压雷达信号(Frank码和P1～P4码)进行参数估计是电子对抗侦察技术中的难点之一。针对此问题,提出一种基于改进的分数阶傅里叶变换(FrFT)的多相码信号参数估计方法。该法利用积分二次相位函数将FrFT的二... 目前,对由频率导出的一类多相码脉压雷达信号(Frank码和P1～P4码)进行参数估计是电子对抗侦察技术中的难点之一。针对此问题,提出一种基于改进的分数阶傅里叶变换(FrFT)的多相码信号参数估计方法。该法利用积分二次相位函数将FrFT的二维搜索转换为2次一维搜索,较大减少了计算量。仿真表明,该法能在较小的计算量下达到与RWT和RAT法相当的估计精度。 展开更多
关键词 多相码信号 参数估计 分数阶傅里叶变换 积分二次相位函数
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用于多相和正交信号产生的RF互耦振荡器原理
9
作者 王健 谭俊 Omar Wing 《微电子学》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期624-627,630,共5页
　文章证明了以一定方式相互耦合的多个相同子系统构成的系统在一定条件下能够产生多相或正交振荡信号。根据这一理论,作为例子,给出了一个RC多相互耦振荡器,并推导出了其保持稳定振荡的条件。此外,对于四相位,即正交相位,的情况,也给... 　文章证明了以一定方式相互耦合的多个相同子系统构成的系统在一定条件下能够产生多相或正交振荡信号。根据这一理论,作为例子,给出了一个RC多相互耦振荡器,并推导出了其保持稳定振荡的条件。此外,对于四相位,即正交相位,的情况,也给出了具体的数值结果,与前面的理论分析相一致。 展开更多
关键词 多相信号产生 正交信号产生 互耦振荡器 射频电路
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