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负载TGF-β_(3)及BMSCs的Pluronic F-127复合凝胶在兔上颌窦提升中成骨及成血管作用的研究 被引量：2
1
作者 张艳波 王雪峰 +3 位作者 韩尚志 张兴乐 王鹏 霍峰 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第11期1472-1478,共7页
目的制备负载TGF-β_(3)及BMSCs的Pluronic F-127复合凝胶,观察其体内、外成骨及成血管作用。方法取新西兰大白兔胫骨及股骨骨髓,分离培养BMSCs并传代,取第3代细胞经成骨、成脂诱导培养鉴定后用于后续实验。采用L-DMEM培养基溶解Pluroni... 目的制备负载TGF-β_(3)及BMSCs的Pluronic F-127复合凝胶,观察其体内、外成骨及成血管作用。方法取新西兰大白兔胫骨及股骨骨髓,分离培养BMSCs并传代,取第3代细胞经成骨、成脂诱导培养鉴定后用于后续实验。采用L-DMEM培养基溶解Pluronic F-127粉末、TGF-β_(3),分别制备Pluronic F-127凝胶、TGF-β_(3)+Pluronic F-127凝胶、BMSCs+Pluronic F-127凝胶、TGF-β_(3)+BMSCs+Pluronic F-127凝胶。取第3代BMSCs,分别采用L-DMEM培养基(A组)、成骨诱导液(B组)、含Pluronic F-127凝胶的成骨诱导液(C组)、含TGF-β_(3)+Pluronic F-127凝胶的成骨诱导液(D组)培养14 d后,ALP染色和茜素红染色观测成骨情况;另采用含Pluronic F-127凝胶的L-DMEM培养基(实验组)、L-DMEM培养基(对照组)培养1、2、3、4 d,MTT法检测细胞增殖情况。取10只新西兰兔制备上颌窦提升模型后,于每只兔骨缺损处注入Pluronic F-127凝胶(A组)、TGF-β_(3)+Pluronic F-127凝胶(B组)、BMSCs+Pluronic F-127凝胶(C组)、TGF-β_(3)+BMSCs+Pluronic F-127凝胶(D组),于第8周取材行影像学检查、HE染色观察新骨形成情况,免疫组织化学染色观察骨组织VEGF及BMP-2表达情况,Western blot检测骨组织VEGF、抑瘤素M(oncostatin M,OSM)及BMP-4蛋白表达。结果成骨、成脂诱导鉴定示分离培养细胞为BMSCs。体外实验染色显示D组ALP活性及茜素红浓度高于其他组(P<0.05);MTT法检测示随着时间延长,两组吸光度(A)值均逐渐升高,各时间点组间比较差异均无统计学意义(P>0.05)。体内实验影像学检查示D组成骨密度及成骨连续性最好,新骨体积占比优于其他组(P<0.05);HE染色示与其他组比较,D组骨小梁致密且排列规则,其上分布大量成骨细胞和破骨细胞,可见大量新骨形成;免疫组织化学染色示D组BMP-2、VEGF呈强阳性表达(P<0.05);Western blot检测D组VEGF、OSM及BMP-4蛋白相对表达量高于其他组(P<0.05)。结论负载TGF-β_(3)及BMSCs的Pluronic F-127复合凝胶中� 展开更多
关键词 骨组织工程 TGf-β_(3) BMSCS pluronic f-127凝胶 上颌窦提升 成骨 成血管 兔
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