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血浆外泌体样小体对巨噬细胞Wnt5A—Ca2＋通路影响的初步研究 被引量：3
1
作者 李丹 任亚娜 +4 位作者 杨洁 杨懿铭 李春燕 谢如锋 范华骅 《中华血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期404-407,共4页
目的研究血浆中外泌体（exosomes）样小体对正常人巨噬细胞免疫调节作用的影响。方法采用超速离心结合膜过滤的方法，从健康献血者血浆中分离纯化外泌体样小体。通过分离健康献血者外周血单个核细胞，贴壁培养并分离巨噬细胞。外泌体样... 目的研究血浆中外泌体（exosomes）样小体对正常人巨噬细胞免疫调节作用的影响。方法采用超速离心结合膜过滤的方法，从健康献血者血浆中分离纯化外泌体样小体。通过分离健康献血者外周血单个核细胞，贴壁培养并分离巨噬细胞。外泌体样小体与巨噬细胞共孵育后，采用流式细胞术、RT—PCR、Westernblot法分别检测巨噬细胞胞质Ca^2＋、相关基因和蛋白的变化。结果外泌体样小体与巨噬细胞孵育一段时间后，巨噬细胞胞质内Ca2＋平均荧光强度上调；外泌体样小体对巨噬细胞的促炎因子如IL-1β、IL-6、TNF-α的表达有促进作用，在共培养2h时，IL-1β、TNF-α基因表达达到高峰，分别比对照组表达上调0．85倍和1．69倍，而IL-6基因表达上调水平在共培养8h时达到高峰，是对照组的3．7倍，而对抑炎因子IL-10的表达具有抑制作用；同时发现巨噬细胞表达Wnt5A受体Frizzled5，但是外泌体样小体对其基因表达没有明显影响；外泌体样小体能使钙调蛋白依赖性激酶Ⅱ（CaMKⅡ）发生磷酸化。结论血浆外泌体样小体能上调巨噬细胞炎症因子基因的表达，并且可能通过活化巨噬细胞的Wnt5A—Ca2＋信号通路促进炎性细胞因子的分泌。 展开更多
关键词 血浆外泌体样小体 巨噬细胞 WntSA.Ca^2+信号通路
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