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题名部分柿属植物TRAP标记反应体系的建立与引物筛选
被引量：2
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作者
罗纯
吴迪
张青林
罗正荣
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机构
华中农业大学园艺植物生物学教育部重点实验室
农业部热带果树生物学重点实验室/中国热带农业科学院南亚热带作物研究所
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出处
《江西农业学报》
CAS
2014年第9期1-5,共5页
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基金
国家自然科学基金(31171929)
公益性行业(农业)科研专项(201203047)
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文摘
为了建立柿属植物目标区域扩增多态性(TRAP)标记技术体系,对影响TRAP-PCR的Mg2+、dNTPs、Taq DNA聚合酶、固定引物和随机引物浓度比5个因素进行了优化。确定优化的反应体系为:模板DNA 40 ng,buffer 1×,Mg2+1.4 mmol/L,dNTPs 0.2 mmol/L,固定引物和随机引物浓度比为11∶1,Taq酶0.5 U,反应总体积为15μL。利用柿属植物EST数据库信息设计锚定引物10条,与11条随机引物组合共110对引物。利用这些引物对柿属植物6个基因型进行TRAP-PCR扩增,其中84个引物组合能扩增出清晰条带,占引物总量的76.36%;36个引物组合表现出良好的多态性扩增,并在20份柿属植物中进行了引物验证。
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关键词
柿属植物
TRAP
反应体系优化
引物筛选
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Keywords
plants in diospyros
TRAP
Reaction system optimization
Primer screening
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分类号
Q949.775.3
[生物学—植物学]
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