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碳酸镧咀嚼片体外磷结合试验的一般考虑 被引量:3
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作者 张丹 马婧怡 +4 位作者 李敏 刘淑洁 高丽丽 翟颖奇 杨进波 《中国新药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期110-113,共4页
碳酸镧咀嚼片于2004年由美国FDA批准上市,作为一种磷结合剂用于降低终末期肾病患者血清磷酸盐。碳酸镧是胃肠道(GI)局部作用药物,口服吸收率非常低,不适合采用常规的体内药动学(PK)终点方法评价生物等效性。FDA认为,体外溶出试验和磷酸... 碳酸镧咀嚼片于2004年由美国FDA批准上市,作为一种磷结合剂用于降低终末期肾病患者血清磷酸盐。碳酸镧是胃肠道(GI)局部作用药物,口服吸收率非常低,不适合采用常规的体内药动学(PK)终点方法评价生物等效性。FDA认为,体外溶出试验和磷酸盐结合研究可用于证明碳酸镧生物等效性。本文在FDA个药指南和文献资料基础上,从方法学、实验设计、数据分析等方面对碳酸镧咀嚼片体外磷结合研究进行探讨,旨在为相关仿制药的研究提供参考。 展开更多
关键词 碳酸镧咀嚼片 生物等效性 磷结合 仿制药
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FDA对磷结合剂的体外等效性评价要求 被引量:6
2
作者 石靖 《中国新药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第21期2588-2592,共5页
口服磷酸盐结合剂是终末期慢性肾脏病者高磷酸盐血症的重要治疗手段之一。由于其口服不吸收,等效性的研究方法和要求与普通的口服固体制剂不同。作者查阅FDA近年来发布的已上市的常见磷结合制剂的个药指南和体外评价研究文章,对此类制... 口服磷酸盐结合剂是终末期慢性肾脏病者高磷酸盐血症的重要治疗手段之一。由于其口服不吸收,等效性的研究方法和要求与普通的口服固体制剂不同。作者查阅FDA近年来发布的已上市的常见磷结合制剂的个药指南和体外评价研究文章,对此类制剂的体外等效性评价要求进行了综述,并结合文献数据和审评情况总结了需要关注的问题,以期为此类产品的开发提供有益的参考。 展开更多
关键词 磷结合剂 生物等效性 醋酸钙 碳酸镧 司维拉姆
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碳酸司维拉姆磷酸盐结合能力的测定
3
作者 张碧珊 欧嘉娜 《智慧健康》 2024年第12期44-46,共3页
目的建立碳酸司维拉姆磷酸盐结合能力的离子色谱(IC)测定方法。方法采用赛默飞AS11-HC离子色谱柱(250mm×4mm),淋洗液为10mmol/L氢氧化钾溶液,检测器为电导检测,抑制电流为25mA,流速为1.0mL/min,柱温为25℃,进样体积为25μL。结果... 目的建立碳酸司维拉姆磷酸盐结合能力的离子色谱(IC)测定方法。方法采用赛默飞AS11-HC离子色谱柱(250mm×4mm),淋洗液为10mmol/L氢氧化钾溶液,检测器为电导检测,抑制电流为25mA,流速为1.0mL/min,柱温为25℃,进样体积为25μL。结果磷酸根在0.10~0.18mmol/L范围内的线性良好(r=0.9999),碳酸司维拉姆磷酸盐结合能力的测定结果为5.6mmol/g,RSD为0.8%。结论本法快速、准确、可靠,可用于碳酸司维拉姆磷酸盐结合能力的测定。 展开更多
关键词 碳酸司维拉姆 磷酸盐结合能力 离子色谱法
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溶磷菌Pseudomonas sp. wj1的Pst系统鉴定及pstS基因功能分析 被引量:4
4
作者 杨雪 岳胜天 +3 位作者 武志海 付丽 于人杰 杨美英 《中国农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期40-48,共9页
为明确溶磷菌wj1的无机磷酸盐(Pi)的转运机制,对溶磷菌wj1磷酸盐特异性转运系统(Pst)进行生物信息学分析并与土壤中常见细菌的Pst系统进行比较,通过亚克隆构建溶磷菌wj1pstS蛋白的原核表达系统,利用钼酸铵分光光度法测定诱导表达的pstS... 为明确溶磷菌wj1的无机磷酸盐(Pi)的转运机制,对溶磷菌wj1磷酸盐特异性转运系统(Pst)进行生物信息学分析并与土壤中常见细菌的Pst系统进行比较,通过亚克隆构建溶磷菌wj1pstS蛋白的原核表达系统,利用钼酸铵分光光度法测定诱导表达的pstS蛋白对磷酸盐的结合率。结果表明:溶磷菌wj1的Pst系统是由pstS、pstC、pstA、pstB和phoU 5个基因组成,且依次分布于染色体上,这种结构与土壤中常见细菌的大多数菌属相似。溶磷菌wj1的pstS蛋白位于细胞质外,是一种具有信号肽的可溶性蛋白,其空间结构是由2个球状结构域组成。与绿脓假单胞菌的pstS蛋白结构相比,溶磷菌wj1pstS蛋白的活性中心位于两个球状结构域的裂缝中,其中有9个氨基酸参与Pi特异性结合,1个氨基酸通过疏水作用维持蛋白与Pi的结合。溶磷菌wj1pstS蛋白在大肠杆菌中过量表达后,使得重组大肠杆菌的无机磷酸盐吸收率显著提高,表明溶磷菌wj1pstS蛋白具有结合Pi的能力,但菌浓度不变时Pi浓度的增加会抑制溶磷菌wj1pstS蛋白对Pi的结合。 展开更多
关键词 溶磷菌 磷酸盐特异性转运系统 pstS蛋白 磷酸盐结合率
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Comparison of Binding Parameter Constants between Sevelamer Carbonate Tablets and Renvela Tablets by a Validated Ion Chromatography Method 被引量:1
5
作者 Venkata Vivekanand Vallapragada Gopichand Inti +2 位作者 Sreenivas Reddy Geevanagari Sudhakar Rao Vidiyala Sreeramulu Jadi 《American Journal of Analytical Chemistry》 2013年第5期213-220,共8页
Sevelamer Carbonate is a crossolinked polymeric amine, it is the active ingredient in Renvela Tablets. Sevelamer Carbonate is indicated for the control of hyperphosphatamiea in patients with end-stage renal disease. T... Sevelamer Carbonate is a crossolinked polymeric amine, it is the active ingredient in Renvela Tablets. Sevelamer Carbonate is indicated for the control of hyperphosphatamiea in patients with end-stage renal disease. The binding parameter constants of Sevelamer Carbonate were determined using the Langmuir approximation for the dosage form at pH 4.0 and 7.0 by Ion Chromatography. An Ion Chromatogrpahy method has been developed to estimate free phosphate in in-vitro phosphate binding study of Sevelamer Carbonate Tablets. The method is selective and capable of detecting phosphate in the presence of placebo matrix. The method has been validated with a lower limit of quantitation of 0.2 mM for Phosphate. A linear response function was established in the range of concentrations 0.2 - 30.0 mM (r > 0.99) for Phosphate. The intra and inter day precision values for Phosphate met the acceptance as per Food and Drug Administrations guidelines. Phosphate was stable in the set of stability studies viz. bench-top and autosampler. The developed method was applied to in-vitro phosphate binding studies of Sevelamer Carbonate Tablets. 展开更多
关键词 binding PARAMETER CONSTANTS Ion Chromatography In-Vitro phosphate binding Study LANGMUIR Approximation
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浅析以体外结合试验作为评价指标的仿制药生物等效性评价方法 被引量:2
6
作者 刘倩 南楠 +2 位作者 马玲云 牛剑钊 许鸣镝 《药物评价研究》 CAS 2019年第12期2377-2381,共5页
研究美国食品药品监督管理局(FDA)对以体外结合试验作为生物等效性评价指标的仿制药品种,分析其关键质量属性及生物等效性试验的要求及相关指导原则,并结合文献数据和FDA审评情况总结了需要关注的问题,以期为此类产品的开发提供有益的参... 研究美国食品药品监督管理局(FDA)对以体外结合试验作为生物等效性评价指标的仿制药品种,分析其关键质量属性及生物等效性试验的要求及相关指导原则,并结合文献数据和FDA审评情况总结了需要关注的问题,以期为此类产品的开发提供有益的参考,为我国该类仿制药研发和正在开展的仿制药质量和疗效一致性评价提供技术支持。 展开更多
关键词 体外结合试验 磷结合剂 胆酸结合剂 生物等效性试验 仿制药质量和疗效一致性评价
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过表达NHE1通过上调钙蛋白酶活性降低RAW264.7细胞ABCA1蛋白表达 被引量:4
7
作者 莫显刚 王兰 +5 位作者 郭静 洪伟 龙世棋 张莉 向凝 杨涓 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期12-16,共5页
目的探讨过表达钠氢交换体1(NHE1)对RAW264.7细胞三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)蛋白表达的影响。方法采用Ad NHE1腺病毒感染RAW264.7细胞,Western blot法检测NHE1-EGFP融合蛋白的表达,激光共聚焦显微镜技术检测NHE1-EGFP融合蛋白细... 目的探讨过表达钠氢交换体1(NHE1)对RAW264.7细胞三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)蛋白表达的影响。方法采用Ad NHE1腺病毒感染RAW264.7细胞,Western blot法检测NHE1-EGFP融合蛋白的表达,激光共聚焦显微镜技术检测NHE1-EGFP融合蛋白细胞内定位,酸负载p H回复检测NHE1活性,Western blot法检测NHE1-EGFP融合蛋白对RAW264.7细胞ABCA1蛋白水平及钙蛋白酶(calpain)活性的影响,加入calpain抑制剂N-乙酰基-L-亮氨酰-L-亮氨酰-L-正亮氨酸(ALLN),Western blot法检测肝脏X受体激动剂TO-901317诱导ABCA1蛋白表达水平的影响。结果 Ad NHE1腺病毒感染RAW264.7细胞后,高表达NHE1-EGFP融合蛋白,定位在细胞质及细胞膜。NHE1-EGFP融合蛋白可降低ABCA1蛋白的表达水平并提高calpain活性,而calpain抑制剂ALLN能阻断ABCA1蛋白表达水平降低。结论 NHE1过表达通过上调calpain活性而降低ABCA1蛋白表达水平。 展开更多
关键词 钠氢交换体1(NHE1) 钙蛋白酶(calpain) RAW264.7细胞 三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1) TO-901317
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Comparison of Binding Parameter Constants between Sevelamer HCl Tablets and Renagel Tablets by a Validated Inductively Coupled Plasma-Optical Emission Spectrometry (ICP-OES) Method
8
作者 Venkata Vivekanand Vallapragada Gopichand Inti +2 位作者 Ajay Kanyadhara Sudhakar Rao Vidiyala Sreeramulu Jadi 《American Journal of Analytical Chemistry》 2012年第12期820-827,共8页
Sevelamer Hydrochloride is a crossolinked polymeric amine;it is the active ingredient in Renagel Tablets. Sevelamer Hydrochloride is indicated for the control of hyperphosphatamiea in patients with end-stage renal dis... Sevelamer Hydrochloride is a crossolinked polymeric amine;it is the active ingredient in Renagel Tablets. Sevelamer Hydrochloride is indicated for the control of hyperphosphatamiea in patients with end-stage renal disease. The binding parameter constants of Sevelamer Hydrochloride were determined using the Langmuir approximation for the dosage form at pH 4.0 and 7.0 by Inductively Coupled Plasma-Optical Emission Spectrometry. An ICP-OES method has been developed to estimate free phosphate in In-Vitro phosphate binding study of Sevelamer HCl Tablets. The method is selective and capable of detecting phosphate in the presence of placebo matrix. The method has been validated with a lower limit of quantitation of 0.2 mM for Phosphate. A linear response function was established for the range of concentrations 0.2 - 25.0 mM (r > 0.99) for Phosphate. The intra and inter day precision values for Phosphate met the acceptance as per Food and Drug Administrations guidelines. Phosphate was stable in the set of stability studies viz. bench-top and autosampler. The developed method was applied to in-vitro phosphate binding studies of Sevelamer HCl Tablets. 展开更多
关键词 binding PARAMETER CONSTANTS ICP-OES In-Vitro phosphate binding Study Langmuir Approximation Renagel TABLETS Quantitation
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碳酸司维拉姆片体外磷结合生物等效性研究技术要点 被引量:1
9
作者 刘淑洁 张丹 +4 位作者 马婧怡 李芳 王克栈 刘力力 贺锐锐 《中国医药导刊》 2021年第11期877-880,共4页
碳酸司维拉姆片为磷结合剂,属于胃肠道局部作用药物,国内外药品监管机构均推荐采用体外磷酸盐结合研究方法来考察其生物等效性。体外磷结合研究通过动力学结合研究以及平衡结合研究来评估受试制剂和参比制剂结合磷酸盐的速度和能力。本... 碳酸司维拉姆片为磷结合剂,属于胃肠道局部作用药物,国内外药品监管机构均推荐采用体外磷酸盐结合研究方法来考察其生物等效性。体外磷结合研究通过动力学结合研究以及平衡结合研究来评估受试制剂和参比制剂结合磷酸盐的速度和能力。本研究基于国家药品监督管理局以及美国食品药品管理局(FDA)、欧洲药品管理局(EMA)发布的相关技术指导原则,总结碳酸司维拉姆片体外磷结合生物等效性研究的要点,同时将其与碳酸镧咀嚼片和醋酸钙片进行对比,分析试验设计出发点,提出物质检测方法及要点、生物等效性评价指标及结果分析,以期为此类药物的仿制药研究提供一定参考。 展开更多
关键词 碳酸司维拉姆片 生物等效性 磷结合剂 磷酸盐结合 仿制药研究
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A Validated Inductively Coupled Plasma-Optical Emission Spectrometry (ICP-OES) Method to Estimate Free Calcium and Phosphorus in In Vitro Phosphate Binding Study of Eliphos Tablets 被引量:1
10
作者 Venkata Vivekanand Vallapragada Gopichand Inti J.Sri Ramulu 《American Journal of Analytical Chemistry》 2011年第6期718-725,共8页
An ICP-OES method has been developed to estimate Calcium and Phosphorous in In vitro phosphate binding study of Eliphos Tablets. The method is selective and is capable of detecting calcium and phosphorous in the prese... An ICP-OES method has been developed to estimate Calcium and Phosphorous in In vitro phosphate binding study of Eliphos Tablets. The method is selective and is capable of detecting calcium and phosphorous in the presence of other trace elements. The method has been validated using RF power of 1500 watts, plasma flow of 15L/min, Nebuliser flow of 0.8 L/min and plasma view at radial mode for calcium and axial mode for phosphorus. The wavelength was monitored for calcium and phosphorous at 317.933 nm and 213.677 nm respectively. The method has been validated in terms of specificity, precision, linearity, accuracy, limit of quantification and ruggedness. The In vitro binding studies were performed for Eliphos Tablets at eight dif- ferent phosphate concentrations by incubating at 37.0?C and analysis was performed using the validated method to estimate free calcium and phosphorus. The objective of the study is to provide an alternate In vitro method to estimate the binding capacity of calcium acetate tablets to avoid the expensive in-vivo bio clinical studies. 展开更多
关键词 ICP-OES phosphate binding STUDY Quantification Eliphos TABLETS Free Calcium
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含磷酸结合口袋的BRCT结构域功能位点预测 被引量:1
11
作者 盛自章 黄京飞 《Zoological Research》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期509-514,共6页
BRCT(BRCA1C-terminus)是真核生物DNA损伤修复系统重要的信号传导和蛋白靶向结构域。为了探讨含磷酸结合口袋的BRCT与磷酸化配体结合的机制,对XRCC1BRCT1、PTIP BRCT4、ECT2BRCT1和TopBP1BRCT1进行了结构保守性和表面静电势分析。结果显... BRCT(BRCA1C-terminus)是真核生物DNA损伤修复系统重要的信号传导和蛋白靶向结构域。为了探讨含磷酸结合口袋的BRCT与磷酸化配体结合的机制,对XRCC1BRCT1、PTIP BRCT4、ECT2BRCT1和TopBP1BRCT1进行了结构保守性和表面静电势分析。结果显示,4个BRCT的磷酸结合口袋周围所存在的结构保守并带正电势的沟槽很可能是其功能位点,并且类似的沟槽在含磷酸结合口袋的BRCT中普遍存在。沟槽两侧及底部均带有极性氨基酸残基,两侧带正电荷,而底部疏水。这说明沟槽与配体的结合以静电和疏水相互作用为主。沟槽主要位于单个BRCT中,而且4个BRCT的沟槽在形状和电荷分布上都不同,说确明BRCT配体特异性主要由单个BRCT决定。磷酸结合口袋位于沟槽中心,说明沟槽可能同时结合磷酸化残基的N端和C端附近残基。 展开更多
关键词 BRCT结构域 磷酸结合口袋 DNA损伤修复 表面静电势
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甘油醛-3-磷酸脱氢酶与辅酶类似物ATP及底物磷酸结合特性的晶体学研究
12
作者 王兆捷 宋时英 林政炯 《生物物理学报》 CSCD 北大核心 1998年第4期609-616,共8页
气相扩散共晶生长法培养出P.versicolor龙虾肌ATP-D-甘油醛-3-磷酸脱氢酶(ATP-GAPDH)的晶体。用同步辐射X光源-磷光储屏-Weissenberg照相机系统收集了一套2.0分辨率的衍射数据。用同... 气相扩散共晶生长法培养出P.versicolor龙虾肌ATP-D-甘油醛-3-磷酸脱氢酶(ATP-GAPDH)的晶体。用同步辐射X光源-磷光储屏-Weissenberg照相机系统收集了一套2.0分辨率的衍射数据。用同晶差值傅立叶法解析了其结构。精化后的结构模型最终R因子为0.197,与标准键长、键角的均方根偏差为0.016°和3.20°。PvATP-GAPDH结构总体上和Pvapo-GAPDH相似。ATP分子的占有率较低,并表现出一定程度的无序性,提示ATP与酶蛋白结合的稳定性较低,表明NAD+的尼克酰胺核苷部分与蛋白质分子的作用在辅酶与蛋白质的稳定结合中起关键作用。ATP-GAPDH中每个亚基只有一个磷酸结合位点(Pi)。认为无机磷酸结合位点Pi的形成不依赖于NAD+,而底物磷酸结合位点PS的形成则依赖于NAD+的存在。 展开更多
关键词 GAPPH 晶体结构 ATP 磷酸结合位点
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磷酸锆结合多孔氮化硅的增强与高温结构稳定性
13
作者 李美娟 刘城 +2 位作者 陈海坤 殷子乾 沈强 《武汉理工大学学报》 CAS 北大核心 2020年第8期9-13,共5页
采用磷酸铵盐部分取代磷酸,利用它们分解温度的不同和气相传质作用,控制磷酸锆结合多孔氮化硅陶瓷中的磷酸锆结合相逐级生成,巩固多孔陶瓷的孔壁结构,增强氮化硅晶粒之间的结合。结果表明:通过600℃埋烧后,所制备的多孔氮化硅陶瓷具有... 采用磷酸铵盐部分取代磷酸,利用它们分解温度的不同和气相传质作用,控制磷酸锆结合多孔氮化硅陶瓷中的磷酸锆结合相逐级生成,巩固多孔陶瓷的孔壁结构,增强氮化硅晶粒之间的结合。结果表明:通过600℃埋烧后,所制备的多孔氮化硅陶瓷具有较高的孔隙率,且孔壁中Si_(3)N_(4)晶粒均具有完整的连接结合;经1400℃高温热处理后,多孔陶瓷中的磷酸锆部分分解使材料的孔隙率进一步增大,且主要物相仍为α-Si_(3)N_(4)晶粒,只有少量的α-β相转变;热处理后材料结构稳定且具有较高的力学强度,孔隙率60%样品的抗弯强度超过50MPa,且随着孔隙率的降低而增强显著。 展开更多
关键词 多孔氮化硅陶瓷 磷酸锆结合 高温结构稳定性 力学强度 高温热处理
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新型治疗高磷血症药物比沙洛姆的合成工艺改进
14
作者 司鸽 张代铭 +2 位作者 王剑平 吴辉 郑忠辉 《中国药物化学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第7期419-422,共4页
目的制备新型磷结合剂比沙洛姆并优化其合成工艺。方法以1,4-丁二胺为起始原料,经加成、氢化、共聚反应得到目标物比沙洛姆。结果与结论目标物比沙洛姆的结构经固体核磁共振氢谱和碳谱、红外光谱分析、元素分析、X-粉末衍射谱、扫描电... 目的制备新型磷结合剂比沙洛姆并优化其合成工艺。方法以1,4-丁二胺为起始原料,经加成、氢化、共聚反应得到目标物比沙洛姆。结果与结论目标物比沙洛姆的结构经固体核磁共振氢谱和碳谱、红外光谱分析、元素分析、X-粉末衍射谱、扫描电镜图谱确证。改进后的合成工艺条件温和、操作简便、成本低、产品质量稳定,路线总收率79.1%,适合工业化生产。 展开更多
关键词 比沙洛姆 化学合成 高磷血症治疗剂 磷酸结合聚合物
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柴胡加龙骨牡蛎汤对慢性应激抑郁大鼠海马BDNF/TrkB/CREB通路的影响 被引量:34
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作者 王钦 蔡萧君 +4 位作者 李宇 吴圆圆 胡杨 李文丽 余真真 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第21期37-46,共10页
目的:基于脑源性神经营养因子(BDNF)/络氨酸激酶B(TrkB)/环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREB)途径探讨柴胡加龙骨牡蛎汤对慢性应激抑郁大鼠海马的影响。方法:取60只SD大鼠,其中10只作为空白组,余50只建立慢性应激抑郁大鼠模型后,随机分为5组... 目的:基于脑源性神经营养因子(BDNF)/络氨酸激酶B(TrkB)/环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREB)途径探讨柴胡加龙骨牡蛎汤对慢性应激抑郁大鼠海马的影响。方法:取60只SD大鼠,其中10只作为空白组,余50只建立慢性应激抑郁大鼠模型后,随机分为5组,即模型组,盐酸氟西汀组(0.003 g·kg^(-1)),柴胡加龙骨牡蛎汤低、中、高剂量组(1.625,3.25,6.5 g·kg^(-1))。连续灌胃给药8周,1次/d,分别于造模前、造模后及给药后进行行为学实验评估大鼠抑郁状态。苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠海马形态学变化,免疫组织化学法(IHC)检测大鼠海马组织中BDNF蛋白表达,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测大鼠海马组织中BDNF,TrkB,CREB mRNA表达,蛋白免疫印迹法(Western blot)定量检测大鼠海马组织中BDNF,TrkB,CREB蛋白表达。结果:与空白组比较,模型组大鼠糖水偏嗜率明显降低(P<0.05),水平得分、垂直得分明显降低(P<0.05),不动时间明显增加(P<0.05),漂浮时间显著增加(P<0.05),HE染色结果显示海马神经元结构损伤,免疫组织化学染色中BDNF表达明显降低(P<0.05),BDNF,TrkB,CREB mRNA及蛋白表达明显降低(P<0.05);与模型组比较,盐酸氟西汀组及柴胡加龙骨牡蛎汤低、中、高剂量组大鼠糖水偏嗜率明显升高(P<0.05),水平得分、垂直得分明显增加(P<0.05),不动时间明显减少(P<0.05),漂浮时间明显减少(P<0.05),海马神经元结构明显复原,免疫组织化学染色中BDNF表达明显增加(P<0.05),BDNF,TrkB,CREB mRNA及蛋白表达明显增加(P<0.05)。结论:柴胡加龙骨牡蛎汤能显著改善经慢性应激刺激后大鼠的抑郁样行为,增强海马组织神经元的再生与修复,其机制可能与上调大鼠海马BDNF/TrkB/CREB信号通路有关。 展开更多
关键词 柴胡加龙骨牡蛎汤 抑郁 海马 脑源性神经营养因子(BDNF)/络氨酸激酶B(TrkB)/环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREB) 机制研究
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基于BDNF/CREB信号通路探讨巴戟天对慢性应激抑郁大鼠海马神经元损伤的影响 被引量:4
16
作者 王钦 刁丽梅 蔡萧君 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2024年第2期69-74,I0017,共7页
目的研究巴戟天对慢性应激抑郁大鼠海马神经元损伤及脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)/细胞内环磷腺苷效应元件结合蛋白(cyclic adenosine phosphate response element binding protein,CREB)信号通路的影... 目的研究巴戟天对慢性应激抑郁大鼠海马神经元损伤及脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)/细胞内环磷腺苷效应元件结合蛋白(cyclic adenosine phosphate response element binding protein,CREB)信号通路的影响。方法从40只SD大鼠随机选取其中10只为正常组,对其余大鼠构建慢性不可预知温和应激模型后,再将其分为3组,即模型组,盐酸氟西汀组(3.17 mg·kg^(-1)),巴戟天组(3.17 g·kg^(-1))。持续灌胃后给药8周,1次/d,并先后在造模前、造模后和给药后开展了行为学实验,以判断大鼠的抑郁情况。通过苏木素-伊红染色(hematoxylin-eosin staining,HE)研究大鼠海马形态学改变,用免疫组织化学法(Immunohistochemistry,IHC)测定大鼠海马BDNF蛋白表达,用HE染色研究大鼠海马组织病理损伤并评分,用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR,RT-PCR)测定大鼠海马BDNF、TrkB、CREB mRNA相对表达,用蛋白免疫印迹法(western blot,WB)测定大鼠海马BDNF、TrkB、CREB蛋白的相对表达。结果与正常组比较,模型组大鼠活动总路程显著减少(P<0.05),自主游泳时间显著减少(P<0.05),悬尾挣扎时间显著减少(P<0.05)。HE染色结果中表明海马神经元组织受到破坏,病理损伤评分显著下降(P<0.05),免疫组织化学染色中海马BDNF表现显著下降(P<0.05),BDNF、TrkB、CREB mRNA的基因相对表达显著下降(P<0.05);与模型组对比,盐酸氟西汀组和巴戟天组大鼠活动的总里程明显提高(P<0.05),自主游泳时间显著增加(P<0.05),悬尾挣扎时间显著增加(P<0.05),HE染色结果表明海马神经元组织明显复原,病理损伤评分增加(P<0.05),免疫组织化学染色中BDNF表现显著增加(P<0.05),BDNF、TrkB、CREB mRNA的基因相对表达明显增加(P<0.05)。结论经慢性应激刺激后,巴戟天可能通过激活BDNF/TrkB/CREB信号通路对抑郁大鼠海马神经元损伤发挥神经保护作用,改善其抑郁样行为。 展开更多
关键词 巴戟天 抑郁 海马 脑源性神经营养因子(BDNF)/环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREB) 机制研究
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五味子乙素对慢性应激抑郁大鼠海马BDNF/TrkB/CREB通路的影响 被引量:6
17
作者 王钦 蔡萧君 +4 位作者 吴圆圆 李宇 王彤 余真真 李文丽 《药物评价研究》 CAS 2022年第5期895-901,共7页
目的 研究五味子乙素对慢性应激抑郁大鼠海马脑源性神经营养因子(BDNF)/酪氨酸激酶B(TrkB)/环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREB)信号通路的影响。方法 40只SD大鼠随机选择10只作为对照组,其余大鼠采用慢性不可预知温和应激(chronic unpredic... 目的 研究五味子乙素对慢性应激抑郁大鼠海马脑源性神经营养因子(BDNF)/酪氨酸激酶B(TrkB)/环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREB)信号通路的影响。方法 40只SD大鼠随机选择10只作为对照组,其余大鼠采用慢性不可预知温和应激(chronic unpredictable mild stress,CUMS)结合孤养制备抑郁症模型,造模结束后随机分为3组:模型组、盐酸氟西汀(3 mg·kg^(-1))组、五味子乙素(5 mg·kg^(-1))组,每天ig给药1次,连续8周。分别于造模前、造模后及给药后进行旷场、悬尾、强迫游泳行为学实验;通过苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠海马形态学改变;免疫组织化学染色(IHC)法观察大鼠海马BDNF蛋白表达;实时荧光定量PCR (qRT-PCR)法检测大鼠海马BDNF、 TrkB、 CREB mRNA相对表达量;Western blotting检测大鼠海马BDNF、TrkB、CREB蛋白相对表达量。结果 与对照组比较,模型组大鼠旷场实验水平、垂直得分显著降低(P<0.05),悬尾不动时间和强迫游泳漂浮时间显著增加(P<0.05);HE染色结果 显示海马神经元结构损伤,IHC结果 显示海马BDNF表达明显降低;海马BDNF、TrkB、CREB mRNA及蛋白相对表达显著降低(P<0.05)。与模型组比较,盐酸氟西汀及五味子乙素组大鼠水平、垂直得分显著增加(P<0.05),不动时间和漂浮时间显著减少(P<0.05);海马神经元结构明显复原,海马组织中BDNF染色明显增加;BDNF、TrkB、 CREB mRNA和蛋白相对表达量显著增加(P<0.05)。结论 五味子乙素可以改善慢性应激抑郁大鼠抑郁样行为、海马区神经元数量及形态,其机制可能与上调BDNF/TrkB/CREB信号通路有关。 展开更多
关键词 五味子乙素 抑郁 慢性不可预知温和应激 海马 脑源性神经营养因子(BDNF)/酪氨酸激酶B(TrkB)/环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREB)
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异源表达盐单胞属(Halomonas)周质磷酸盐结合蛋白基因PBP降低转基因烟草砷积累研究
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作者 黄仁权 袁婷 +1 位作者 宋拉拉 秦利军 《中国农学通报》 2024年第12期70-79,共10页
为探讨PBP基因在异源烟草中的生物学功能,筛选出低砷(As)积累亲本烟草种质。以转PBP基因烟草T2代种子和野生型烟草(Nicotiana tabacum K326)种子为材料,利用Real-time PCR分析外源PBP的时空表达模式,测定As胁迫下转基因烟株抗氧化酶(AO... 为探讨PBP基因在异源烟草中的生物学功能,筛选出低砷(As)积累亲本烟草种质。以转PBP基因烟草T2代种子和野生型烟草(Nicotiana tabacum K326)种子为材料,利用Real-time PCR分析外源PBP的时空表达模式,测定As胁迫下转基因烟株抗氧化酶(AOEs)活性变化及分析转基因烟草株系中As积累差异。AOEs活性测定表明,As胁迫第5天时CK植株中SOD和POD酶活性达到极值,分别为80.25 U/g和152.02 U/g,显著高于转基因植株;在胁迫后期(3~5 d)CK植株中H2O2和MDA含量也显著高于转基因植株。另外,在第7天和14天时转基因植株中As含量比CK植株均显著降低。离子转运蛋白基因表达分析表明,As胁迫不仅诱导转基因植株PBP基因表达显著上调,而且也引起转基因和CK植株中HAK1和PHT4等通道蛋白基因的显著上调,且CK植株中HAK1和PHT4的平均表达水平为转基因植株的1.5倍和3.75倍。外源PBP基因导入可有效降低转基因烟草对As的积累。 展开更多
关键词 盐单胞属 周质磷酸盐结合蛋白 PBP基因 转基因烟草 低As积累
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A Novel Toxicological Evaluation of TiO2 Nanoparticles on DNA Structure0 被引量:4
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作者 朱融融 汪世龙 +2 位作者 张蕤 孙晓宇 姚思德 《Chinese Journal of Chemistry》 SCIE CAS CSCD 2007年第7期958-961,共4页
TiO2 has been tested to be toxic to DNA under the photo-irradiation of ultraviolet A (UVA). However, in the dark conditions, after several days of treatment with TiO2 in aqueous solution, the interaction between TiO... TiO2 has been tested to be toxic to DNA under the photo-irradiation of ultraviolet A (UVA). However, in the dark conditions, after several days of treatment with TiO2 in aqueous solution, the interaction between TiO2 and two types of DNA was detected and the mechanisms were studied by the methods of gel-electrophoresis, IR spectroscopy and TEM. The results showed that the DNA would be bound to TiO2; the ratio of binding was related to the concentration and the treating time; the mechanism of binding is related to phosphate groups of DNA. Besides, DNA with different structure showed different degree of binding. These findings showed a new possible way through which the TiO2 nanoparticles interact with DNA. 展开更多
关键词 TiO2 nanoparticle DNA damage phosphate group binding
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腧穴“解郁方”对慢性不可预测轻度应激抑郁大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴及BDNF/TrkB/CREB通路的影响
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作者 王文瑞 韩文华 +1 位作者 董爱爱 王维峰 《中西医结合心脑血管病杂志》 2024年第8期1416-1422,共7页
目的:观察腧穴“解郁方”对慢性不可预测轻度应激(CUMS)抑郁大鼠下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴和脑源性神经营养因子(BDNF)/酪氨酸激酶B受体(TrkB)/环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(CREB)信号通路的影响。方法:40只无特定病原体(SPF)级Sprague ... 目的:观察腧穴“解郁方”对慢性不可预测轻度应激(CUMS)抑郁大鼠下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴和脑源性神经营养因子(BDNF)/酪氨酸激酶B受体(TrkB)/环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(CREB)信号通路的影响。方法:40只无特定病原体(SPF)级Sprague Danley(SD)雄性大鼠随机分为空白组(10只)、模型组(10只)、西药组(10只)、针刺组(10只),除空白组外,其余3组连续28 d构建CUMS抑郁大鼠模型,造模成功后,西药组连续14 d灌胃盐酸帕罗西汀混悬液,每日1次;针刺组针刺百会、太冲、神门,每日1次,每次20 min,连续针刺14 d。苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠海马病理变化,酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)、促肾上腺皮质激素(ACTH)、皮质醇(CORT)水平;免疫组化(IHC)检测海马BDNF、TrkB表达情况,蛋白质免疫印迹法(Western Blot)及实时荧光定量-聚合酶链式反应(PCR)测定海马BDNF、TrkB、CREB蛋白及mRNA的表达。结果:与空白组比较,模型组血清CRH、ACTH和CORT含量上升(P<0.01),海马病理损伤严重,海马BDNF、TrkB平均光密度降低(P<0.01),BDNF、TrkB、CREB蛋白及mRNA明显下降(P<0.05或P<0.01)。与模型组比较,针刺组血清CRH、ACTH、CORT含量下降(P<0.05),海马病理损害明显减轻,BDNF、TrkB平均光密度明显增加(P<0.05),BDNF、CREB、TrkB蛋白及mRNA表达水平上升(P<0.05)。结论:腧穴“解郁方”可能通过调节HPA轴和调控BDNF/TrkB/CREB信号通路,改善CUMS诱导的大鼠抑郁样行为。 展开更多
关键词 抑郁症 慢性不可预测轻度应激 腧穴“解郁方” 下丘脑-垂体-肾上腺轴 脑源性神经营养因子/酪氨酸激酶B受体/环磷酸腺苷反应元件结合蛋白信号通路 海马 实验研究
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