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地龙的多重位点特异性PCR鉴别 被引量：17
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作者 田娜 魏艺聪 +4 位作者 袁媛 金艳 杨全 赵玉洋 蒋超 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第17期124-129,共6页
目的:近年来,中药材地龙的商品价格不断上涨,市场的混伪品随之增加。其主要鉴别特征在药材中大部分丢失,难以区分。因此,急需建立一种准确、稳定的中药材地龙基原鉴别方法。方法:根据地龙及其混伪品的COI基因序列差异找到变异位点,从而... 目的:近年来,中药材地龙的商品价格不断上涨,市场的混伪品随之增加。其主要鉴别特征在药材中大部分丢失,难以区分。因此,急需建立一种准确、稳定的中药材地龙基原鉴别方法。方法:根据地龙及其混伪品的COI基因序列差异找到变异位点,从而设计参环毛蚓、通俗环毛蚓、威廉环毛蚓及栉盲环毛蚓的特异性鉴别引物,优化反应体系并进行耐受性和适用性的考察和验证。在此基础上将特异性引物组合,构建多重聚合酶链式反应(PCR)体系,从而建立了一种高效准确、操作简便、专属性强、重复性好的中药材地龙及其常见混伪品的多重位点PCR鉴别方法。结果:在该方法下广地龙基原参环毛蚓可得到366 bp片段,沪地龙基原通俗环毛蚓和威廉环毛蚓可得到487 bp片段,栉盲环毛蚓可得到475 bp片段,其他混伪品均无条带。将之组合形成的多重PCR可在一次鉴定操作中根据条带位置同时鉴别沪地龙和广地龙。结论:该文所建立的多重位点特异性PCR鉴别方法可准确鉴别中药材地龙真伪。 展开更多
关键词 地龙 多重位点特异性聚合酶链式反应 分子鉴别 混伪品 参环毛蚓 通俗环毛蚓 威廉环毛蚓 栉盲环毛蚓
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基于指纹图谱和化学计量学研究沪地龙基原间质量差异
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作者 李雷 史建伍 +5 位作者 刘兰玉 李奇璋 吴宇 于海征 张汉明 张磊 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2024年第21期7462-7473,共12页
目的 应用指纹图谱和化学计量学分析方法,比较沪地龙药材基原(通俗环毛蚓Pheretima vulgaris、威廉环毛蚓P.guillelmi或栉盲环毛蚓P. pectinifera)间质量差异,筛选差异性标志物,为建立沪地龙质量标准提供参考。方法 应用高效液相色谱法... 目的 应用指纹图谱和化学计量学分析方法,比较沪地龙药材基原(通俗环毛蚓Pheretima vulgaris、威廉环毛蚓P.guillelmi或栉盲环毛蚓P. pectinifera)间质量差异,筛选差异性标志物,为建立沪地龙质量标准提供参考。方法 应用高效液相色谱法建立沪地龙水溶性成分指纹图谱,运用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”(2012版)软件比较相似度;应用聚类分析、正交偏最小二乘判别分析和主成分分析法对3个基原间所测得的6种水溶性成分含量进行比较分析,并依据主成分得分对各批次样本进行综合性评价。结果 相似度评价结果,通俗环毛蚓与威廉环毛蚓的相似度为0.987;栉盲环毛蚓与通俗环毛蚓的相似度为0.697,与威廉环毛蚓的相似度为0.717。聚类分析方法不能区分3个基原。正交偏最小二乘判别分析结果显示,通俗环毛蚓和威廉环毛蚓不能区分,但二者能与栉盲环毛蚓区分,差异性成分为尿苷和鸟苷。主成分分析综合评分共有19批样本大于平均分值,其中栉盲环毛蚓11批、通俗环毛蚓6批、威廉环毛蚓2批;产地为上海市13批,江苏省2批,浙江省1批,安徽省2批。结论 沪地龙3个基原间存在差异,其中通俗环毛蚓与威廉环毛蚓在水溶性成分种类和含量方面相似度高,但二者均与栉盲环毛蚓存在差异。 展开更多
关键词 沪地龙 HPLC指纹图谱 通俗环毛蚓 威廉环毛蚓 栉盲环毛蚓 化学计量学 质量评价 尿苷 鸟苷
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