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赭曲霉毒素A模拟表位的筛选及免疫学鉴定
被引量:
2
1
作者
王耀
胡骁飞
+5 位作者
裴亚峰
赵东
刘运超
张改平
李志西
邓瑞广
《核农学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第9期1271-1277,共7页
从噬菌体随机七肽库中筛选得到赭曲霉毒素A的模拟表位,并以其替代毒素标品建立赭曲霉毒素A免疫学快速检测方法。以纯化的抗赭曲霉毒素A单克隆抗体(OTA mAb)为配基,亲和筛选融合表达在丝状M13噬菌体次要衣壳蛋白(PⅢ)上的随机七肽库,以EL...
从噬菌体随机七肽库中筛选得到赭曲霉毒素A的模拟表位,并以其替代毒素标品建立赭曲霉毒素A免疫学快速检测方法。以纯化的抗赭曲霉毒素A单克隆抗体(OTA mAb)为配基,亲和筛选融合表达在丝状M13噬菌体次要衣壳蛋白(PⅢ)上的随机七肽库,以ELISA方法鉴定阳性克隆,并以筛选的模拟表位建立赭曲霉毒素A的ELISA检测方法。经过4轮亲和筛选,共得到22株与OTA mAb特异结合的阳性噬菌体克隆,且该结合都能够被OTA标品阻断,DNA测序及多肽核心序列分析后,得到赭曲霉毒素A的模拟表位的主要序列为:MPLWXDL,X为任意氨基酸,以阳性噬菌体克隆建立的竞争ELISA检测方法,线性范围为250~8000pg/ml。基于制备的OTA mAb,利用噬菌体随机七肽库可成功筛选到赭曲霉毒素A的模拟表位,并能够替代OTA标品建立直接竞争模式的免疫学快速检测方法。
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关键词
噬菌体随机七肽库
赭曲霉毒素A
模拟表位
单克隆抗体
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职称材料
MUC1抗原的表位预测及模拟位的筛选
被引量:
6
2
作者
杨清浩
王祥卫
+1 位作者
金燕
张立新
《重庆医学》
CAS
CSCD
2005年第5期686-688,693,共4页
目的预测MUC1抗原的B细胞表位,从噬菌体随机多肽文库筛选及鉴定MUC1抗原的模拟位。方法联合运用多种方法对MUC1的二级结构和表面特性,如理化性质、亲水性、可塑性、溶剂可及性及免疫原性等方面进行分析,预测MUC1的抗原表位。利用纯化获...
目的预测MUC1抗原的B细胞表位,从噬菌体随机多肽文库筛选及鉴定MUC1抗原的模拟位。方法联合运用多种方法对MUC1的二级结构和表面特性,如理化性质、亲水性、可塑性、溶剂可及性及免疫原性等方面进行分析,预测MUC1的抗原表位。利用纯化获得的BC2抗体筛选噬菌体随机7肽库,夹心ELISA分析噬菌体克隆,测定阳性克隆DNA序列,竞争性抑制实验鉴定阳性噬菌体克隆。结果MUC1存在有多个潜在的抗原表位位点,可能的蛋白质抗原表位区域:110,2454,6577,8491,108134,140156,159174,179196,199210,220233,237265,270299,316337,351362,369396,411420,445502。经3轮筛选,获得了30个阳性克隆,DNA序列分析并推导出氨基酸序列:TAPDLRP、SAPDLRP、AAPDSRP及LAPDFRP4个噬菌体展示肽克隆抑制率均在50%以上。结论应用多参数预测MUC1抗原的B细胞表位,为进一步研究MUC1结构和功能、选择表达新型MUC1分子奠定了基础。所得序列TAPDLRP、SAPDLRP、AAPDSRP及LAPDFRP模拟MUC1抗原表位。
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关键词
MUC1抗原
B细胞表位
模拟表位
噬菌体随机
7
肽库
抗体
下载PDF
职称材料
噬菌体随机肽库筛选MUC1抗原模拟表位
被引量:
2
3
作者
杨清浩
王祥卫
+1 位作者
金燕
张立新
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第13期1332-1334,共3页
目的噬菌体随机多肽文库筛选及鉴定MUC1抗原的模拟表位。方法利用纯化获得的BC2抗体筛选噬菌体随机7肽库,通过夹心ELISA分析噬菌体克隆,测定阳性克隆DNA序列并进行同源性及氨基酸分析,竞争性抑制实验鉴定噬菌体克隆。结果经3轮筛选,获得...
目的噬菌体随机多肽文库筛选及鉴定MUC1抗原的模拟表位。方法利用纯化获得的BC2抗体筛选噬菌体随机7肽库,通过夹心ELISA分析噬菌体克隆,测定阳性克隆DNA序列并进行同源性及氨基酸分析,竞争性抑制实验鉴定噬菌体克隆。结果经3轮筛选,获得了30个阳性克隆,DNA序列分析并推导出氨基酸序列:TAPDLRP、SAPDLRP、AAPDSRP及LAPDFRP。鉴定结果表明:4个噬菌体展示肽克隆抑制率均在50%以上。结论所得序列TAPDLRP、SAPDLRPAAPDSRP及LAPDFRP模拟MUC1抗原表位。
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关键词
MCU1抗原
模拟表位
噬菌体随机
7
肽库
抗体
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职称材料
运用噬菌体随机七肽库筛选与CRN特异结合的多肽
被引量:
1
4
作者
李淑珍
赵珩
+1 位作者
生吉萍
曲桂芹
《中国农学通报》
CSCD
北大核心
2010年第24期75-79,共5页
CORYNE(CRN)对拟南芥(Arabidopsis thaliana)茎尖分生组织干细胞的分裂分化的调控具有重要作用。为了研究与CRN胞内激酶区相互作用的肽,探讨与CRN胞内激酶区相互作用的关键位点。采用了亲和淘选噬菌体随机七肽库的方法,通过4轮亲和淘选...
CORYNE(CRN)对拟南芥(Arabidopsis thaliana)茎尖分生组织干细胞的分裂分化的调控具有重要作用。为了研究与CRN胞内激酶区相互作用的肽,探讨与CRN胞内激酶区相互作用的关键位点。采用了亲和淘选噬菌体随机七肽库的方法,通过4轮亲和淘选后随机挑取10个克隆进行DNA测序,经ELISA鉴定后,得到1个与CRN胞内激酶区特异结合的七肽,其序列为TLTELVR。研究结果表明,利用噬菌体展示技术成功淘选到了与CRN胞内激酶区特异结合的七肽,为进一步研究与CRN胞内激酶区相互作用的分子奠定了基础。
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关键词
CRN
结合肽
噬菌体随机七肽库
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职称材料
题名
赭曲霉毒素A模拟表位的筛选及免疫学鉴定
被引量:
2
1
作者
王耀
胡骁飞
裴亚峰
赵东
刘运超
张改平
李志西
邓瑞广
机构
河南省农业科学院/农业部动物免疫学重点实验室
西北农林科技大学食品科学与工程学院
出处
《核农学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第9期1271-1277,共7页
基金
农业部公益性行业(农业)科研专项(201203040)
河南省扶持企业自主创新资金项目
河南省农业科学院科技发展及示范推广专项基金
文摘
从噬菌体随机七肽库中筛选得到赭曲霉毒素A的模拟表位,并以其替代毒素标品建立赭曲霉毒素A免疫学快速检测方法。以纯化的抗赭曲霉毒素A单克隆抗体(OTA mAb)为配基,亲和筛选融合表达在丝状M13噬菌体次要衣壳蛋白(PⅢ)上的随机七肽库,以ELISA方法鉴定阳性克隆,并以筛选的模拟表位建立赭曲霉毒素A的ELISA检测方法。经过4轮亲和筛选,共得到22株与OTA mAb特异结合的阳性噬菌体克隆,且该结合都能够被OTA标品阻断,DNA测序及多肽核心序列分析后,得到赭曲霉毒素A的模拟表位的主要序列为:MPLWXDL,X为任意氨基酸,以阳性噬菌体克隆建立的竞争ELISA检测方法,线性范围为250~8000pg/ml。基于制备的OTA mAb,利用噬菌体随机七肽库可成功筛选到赭曲霉毒素A的模拟表位,并能够替代OTA标品建立直接竞争模式的免疫学快速检测方法。
关键词
噬菌体随机七肽库
赭曲霉毒素A
模拟表位
单克隆抗体
Keywords
phage
random
7
peptide
library
Ochratoxin
A
mimicking
epitope
monoclonal
antibody
分类号
TS207.4 [轻工技术与工程—食品科学]
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职称材料
题名
MUC1抗原的表位预测及模拟位的筛选
被引量:
6
2
作者
杨清浩
王祥卫
金燕
张立新
机构
第三军医大学新桥医院泌尿科
北京军事医学科学院
出处
《重庆医学》
CAS
CSCD
2005年第5期686-688,693,共4页
基金
国家863课题资助项目(2002AA214111)
文摘
目的预测MUC1抗原的B细胞表位,从噬菌体随机多肽文库筛选及鉴定MUC1抗原的模拟位。方法联合运用多种方法对MUC1的二级结构和表面特性,如理化性质、亲水性、可塑性、溶剂可及性及免疫原性等方面进行分析,预测MUC1的抗原表位。利用纯化获得的BC2抗体筛选噬菌体随机7肽库,夹心ELISA分析噬菌体克隆,测定阳性克隆DNA序列,竞争性抑制实验鉴定阳性噬菌体克隆。结果MUC1存在有多个潜在的抗原表位位点,可能的蛋白质抗原表位区域:110,2454,6577,8491,108134,140156,159174,179196,199210,220233,237265,270299,316337,351362,369396,411420,445502。经3轮筛选,获得了30个阳性克隆,DNA序列分析并推导出氨基酸序列:TAPDLRP、SAPDLRP、AAPDSRP及LAPDFRP4个噬菌体展示肽克隆抑制率均在50%以上。结论应用多参数预测MUC1抗原的B细胞表位,为进一步研究MUC1结构和功能、选择表达新型MUC1分子奠定了基础。所得序列TAPDLRP、SAPDLRP、AAPDSRP及LAPDFRP模拟MUC1抗原表位。
关键词
MUC1抗原
B细胞表位
模拟表位
噬菌体随机
7
肽库
抗体
Keywords
Mucin
1
antigene
mimic
epitope
phage
display
random
7
peptide
library
antibody
分类号
R73-36 [医药卫生—肿瘤]
下载PDF
职称材料
题名
噬菌体随机肽库筛选MUC1抗原模拟表位
被引量:
2
3
作者
杨清浩
王祥卫
金燕
张立新
机构
第三军医大学新桥医院泌尿外科
北京军事医学科学院附属
出处
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第13期1332-1334,共3页
基金
国家"863"课题基金资助项目(2002AA214111)~~
文摘
目的噬菌体随机多肽文库筛选及鉴定MUC1抗原的模拟表位。方法利用纯化获得的BC2抗体筛选噬菌体随机7肽库,通过夹心ELISA分析噬菌体克隆,测定阳性克隆DNA序列并进行同源性及氨基酸分析,竞争性抑制实验鉴定噬菌体克隆。结果经3轮筛选,获得了30个阳性克隆,DNA序列分析并推导出氨基酸序列:TAPDLRP、SAPDLRP、AAPDSRP及LAPDFRP。鉴定结果表明:4个噬菌体展示肽克隆抑制率均在50%以上。结论所得序列TAPDLRP、SAPDLRPAAPDSRP及LAPDFRP模拟MUC1抗原表位。
关键词
MCU1抗原
模拟表位
噬菌体随机
7
肽库
抗体
Keywords
Mucin
1
mimic
epitope
phage
display
random
7
peptide
library
antibody
分类号
R373.9 [医药卫生—病原生物学]
R392.11 [医药卫生—基础医学]
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职称材料
题名
运用噬菌体随机七肽库筛选与CRN特异结合的多肽
被引量:
1
4
作者
李淑珍
赵珩
生吉萍
曲桂芹
机构
中国农业大学食品科学与营养工程学院
出处
《中国农学通报》
CSCD
北大核心
2010年第24期75-79,共5页
基金
国家自然科学基金资助项目(30571296
30671471)
中澳合作项目(ACIARPHT/1999/081)
文摘
CORYNE(CRN)对拟南芥(Arabidopsis thaliana)茎尖分生组织干细胞的分裂分化的调控具有重要作用。为了研究与CRN胞内激酶区相互作用的肽,探讨与CRN胞内激酶区相互作用的关键位点。采用了亲和淘选噬菌体随机七肽库的方法,通过4轮亲和淘选后随机挑取10个克隆进行DNA测序,经ELISA鉴定后,得到1个与CRN胞内激酶区特异结合的七肽,其序列为TLTELVR。研究结果表明,利用噬菌体展示技术成功淘选到了与CRN胞内激酶区特异结合的七肽,为进一步研究与CRN胞内激酶区相互作用的分子奠定了基础。
关键词
CRN
结合肽
噬菌体随机七肽库
Keywords
CRN
specific
binding
peptide
the
phage
display
random
7
-mer
peptide
library
分类号
Q946 [生物学—植物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
赭曲霉毒素A模拟表位的筛选及免疫学鉴定
王耀
胡骁飞
裴亚峰
赵东
刘运超
张改平
李志西
邓瑞广
《核农学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012
2
下载PDF
职称材料
2
MUC1抗原的表位预测及模拟位的筛选
杨清浩
王祥卫
金燕
张立新
《重庆医学》
CAS
CSCD
2005
6
下载PDF
职称材料
3
噬菌体随机肽库筛选MUC1抗原模拟表位
杨清浩
王祥卫
金燕
张立新
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2005
2
下载PDF
职称材料
4
运用噬菌体随机七肽库筛选与CRN特异结合的多肽
李淑珍
赵珩
生吉萍
曲桂芹
《中国农学通报》
CSCD
北大核心
2010
1
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职称材料
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