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一种基于OmpA的分泌型原核表达载体的构建及应用 被引量：1
1
作者 蒋玉亮 兰萍 +4 位作者 李艳 余赟 毛明星 杨亚琼 杨平 《成都医学院学报》 CAS 2016年第4期409-412,共4页
目的构建大肠杆菌周质分泌型表达载体并验证其表达效果。方法以pUC18-lpp为基础载体,构建含有核糖体结合元件(RBS)、信号肽(OmpA)、多克隆位点(MCS)的分泌型表达载体pUC-OmpA;通过分子克隆获得含有密码子优化的人生长激素(hGH)编码序列... 目的构建大肠杆菌周质分泌型表达载体并验证其表达效果。方法以pUC18-lpp为基础载体,构建含有核糖体结合元件(RBS)、信号肽(OmpA)、多克隆位点(MCS)的分泌型表达载体pUC-OmpA;通过分子克隆获得含有密码子优化的人生长激素(hGH)编码序列的pUC-OmpA-hGH,转化大肠杆菌JM109菌株并验证周质分泌性质。结果经IPTG诱导后,SDS-PAGE、Western印迹分析结果显示周质空间有hGH重组表达产物,分子量约为22kD,大小与预期一致,周质hGH约占菌体总hGH的43%。结论成功构建了基于OmpA信号肽的周质分泌型表达系统,为实现生物活性蛋白的原核表达奠定了基础。 展开更多
关键词 原核表达 周质分泌 信号肽
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