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海洋来源真菌Penicillium brevicompactum OUCMDZ-4920的活性产物研究 被引量:9
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作者 陈玲玲 朱统汉 +5 位作者 朱国良 刘云龙 王聪 Pawinee Piyachaturawat Arthit Chairoungdua 朱伟明 《有机化学》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2017年第10期2752-2762,共11页
通过化学与生物活性相结合的集成筛选方法,从海底沉积物样品(-68 m)中分离得到一株霉酚酸的产生菌短密青霉菌(Penicillium brevic Bompactum OUCMDZ-4920).从其寡营养发酵产物中分离获得了包括8个霉酚酸类化合物在内的11个化合物,其中... 通过化学与生物活性相结合的集成筛选方法,从海底沉积物样品(-68 m)中分离得到一株霉酚酸的产生菌短密青霉菌(Penicillium brevic Bompactum OUCMDZ-4920).从其寡营养发酵产物中分离获得了包括8个霉酚酸类化合物在内的11个化合物,其中外消旋的brevicolides A(1)和B(2)为新化合物.通过光谱分析、电子圆二色谱(ECD)、化学转化、手性拆分和Mosher反应,将其结构依次鉴定为(2'S,3'R)-(-)-brevicolide A(1a)、(2'R,3'S)-(+)-brevicolide A(1b)、(2'S,3'S)-(-)-brevicolide B(2a)、(2'R,3'R)-(+)-brevicolide B(2b)、霉酚酸(3)、3-羟基霉酚酸(4)、(S)-2-甲基-4-[5-羟基-7-甲氧基-4-甲基-1-氧亚基-6-(1,3-二氢异苯并呋喃基)]丁酸(5)、norpestaphthalides A(6)和B(7)、5,7-二甲氧基-4-甲基异苯并呋喃-1(3H)-酮(8)、6,8-二羟基-3-羟甲基-1H-异苯并吡喃-1-酮(9)、brevianamides A(10)和E(11).化合物3对小鼠白血病细胞P388、人口腔上皮癌细胞KB、人结直肠癌细胞HT29、人乳腺癌细胞MCF-7和人肺癌细胞A549表现出较好的抑制活性,IC50值为0.4~5.29μmol·L^(-1),对白色念珠菌表现出较好的抗真菌活性,最小抑菌浓度(MIC)为4.7μmol·L^(-1).合成了4个新化合物(-)-7-O-methylbrevicolide A(12a)、(+)-7-O-methylbrevicolide A(12b)、(-)-7-O-methylbrevicolide B(13a)和(+)-7-O-methylbrevicolide B(13b). 展开更多
关键词 海洋真菌 短密青霉菌 霉酚酸类似物 肿瘤细胞毒活性 抗真菌活性
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麦考酚酸产生菌液体发酵条件的优化 被引量:8
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作者 高兴蓉 姚善泾 +2 位作者 朱健 卿亚丽 张小玲 《中国医药工业杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期273-276,共4页
研究了短密青霉菌L产生麦考酚酸的发酵工艺条件,包括斜面培养基种类、初始pH、培养温度、碳氮源种类等,并通过均匀设计法优化了发酵培养基的组成。在优化条件下,揺瓶发酵单位达8565μg/ml,比优化前提高了89%。
关键词 麦考酚酸 短密青霉菌 液体发酵 均匀设计 优化
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离子注入选育霉酚酸高产菌株及其发酵条件研究 被引量:6
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作者 刘梅 张鹏 +7 位作者 崔晓兰 任晓 张华 金莹 单越琦 董悦生 石英 贺建功 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期816-819,共4页
离子注入技术是20世纪80年代兴起的一种综合诱变技术,其应用于生物工程已取得了丰硕成果,但在霉酚酸产生菌的诱变育种中的应用还未见报道。短密青霉菌(Penicillium brevicompactum)M_51是从土壤中分离得到的MPA产生菌F_663经过紫外线、... 离子注入技术是20世纪80年代兴起的一种综合诱变技术,其应用于生物工程已取得了丰硕成果,但在霉酚酸产生菌的诱变育种中的应用还未见报道。短密青霉菌(Penicillium brevicompactum)M_51是从土壤中分离得到的MPA产生菌F_663经过紫外线、微波等诱变处理得到的。为获得霉酚酸的高产工业菌株,进一步对该菌株进行了离子注入诱变处理。用15keV氮离子分5个剂量进行处理,结果显示,随离子注入剂量增加,存活率呈现较明显的下降_上升_下降的“马鞍型”变化趋势。在剂量为140×2.6×1013ions/cm2时,菌株变异率及正变率均最高,分别达到88.9%和63.4%。用HPLC定量测定发酵液中霉酚酸的含量,筛选到产霉酚酸能力提高30.1%的突变株M_163。经过连续传代试验,其遗传性状稳定。对发酵条件的优化结果显示最佳种龄为24h;用正交试验方法对发酵培养基中的碳、氮源进行优化,得到较优配方。突变株M_163在最优发酵条件下,霉酚酸摇瓶发酵单位可达2819μg/mL。野生菌株F_663的MPA产量为133μg/mL,经过5代诱变育种及发酵条件优化,产量提高了20.2倍。 展开更多
关键词 离子注入 霉酚酸 短密青霉菌 选育
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霉酚酸产生菌短密青霉菌UA-32的发酵研究 被引量:7
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作者 贾纬 陈宏 廖爱芳 《海峡药学》 2009年第9期163-165,共3页
研究短密青霉菌UA-32产生霉酚酸的发酵条件。改良了种子培养基,并对发酵所需的氨基酸、碳源进行了考察;采用正交设计优化得到发酵培养基配方。优化后的摇瓶发酵单位比优化前提高90%。
关键词 霉酚酸 短密青霉菌 发酵 正交设计
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霉酚酸产生菌原生质体转基因方法的建立 被引量:4
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作者 任志红 苏彩云 +5 位作者 闫敬 戴梦 赵颍 王红怡 代明伟 张佳 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期1226-1232,共7页
【目的】建立霉酚酸产生菌短密青霉菌的遗传转化体系。【方法】以腐草霉素抗性为选择标记,利用聚乙二醇介导原生质体融合,进行外源基因转化。【结果】聚乙二醇介导的短密青霉菌原生质体转化效率为每微克DNA 2-3个转化子;转化子的PCR检... 【目的】建立霉酚酸产生菌短密青霉菌的遗传转化体系。【方法】以腐草霉素抗性为选择标记,利用聚乙二醇介导原生质体融合,进行外源基因转化。【结果】聚乙二醇介导的短密青霉菌原生质体转化效率为每微克DNA 2-3个转化子;转化子的PCR检测结果显示外源基因已经整合到短密青霉菌基因组中,转化子抗性稳定。【结论】霉酚酸产生菌短密青霉菌转基因体系的建立为该菌进行分子生物学研究以及基因工程育种奠定了基础。 展开更多
关键词 霉酚酸 短密青霉 原生质体 基因转化
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霉酚酸高产菌株短密青霉菌的选育 被引量:3
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作者 廖爱芳 陈宏 贾纬 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期667-670,707,共5页
以短密青霉菌UH35-58为出发菌株,紫外线为诱变剂,采用摇瓶一级发酵补水工艺(64h补水20%)淘汰大量低产菌株,获得高产突变株N110-N76。用HPLC测定其发酵液的霉酚酸含量,发酵单位比出发菌株UH35-58提高120%。经过连续传代试验,该菌株的遗... 以短密青霉菌UH35-58为出发菌株,紫外线为诱变剂,采用摇瓶一级发酵补水工艺(64h补水20%)淘汰大量低产菌株,获得高产突变株N110-N76。用HPLC测定其发酵液的霉酚酸含量,发酵单位比出发菌株UH35-58提高120%。经过连续传代试验,该菌株的遗传性状稳定。 展开更多
关键词 短密青霉菌 霉酚酸 诱变育种
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根癌农杆菌介导透明颤茵血红蛋白基因(vgb)在短密青霉菌中的克隆表达 被引量:2
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作者 董玉国 王丽华 +3 位作者 徐瑞 张舰 孙爱友 魏东芝 《高校化学工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2015年第1期133-137,共5页
利用根癌农杆菌LBA4404介导,将编码透明颤菌血红蛋白的结构基因(Vitreoscilla Hemoglobin gene,vgb)导入到短密青霉ATCC16024中,用于改善菌体对氧的摄取能力,提高霉酚酸(Myhophenoilc Acid,MPA)的发酵水平,降低生产成本。通过潮霉素抗... 利用根癌农杆菌LBA4404介导,将编码透明颤菌血红蛋白的结构基因(Vitreoscilla Hemoglobin gene,vgb)导入到短密青霉ATCC16024中,用于改善菌体对氧的摄取能力,提高霉酚酸(Myhophenoilc Acid,MPA)的发酵水平,降低生产成本。通过潮霉素抗性筛选、PCR分子鉴定和MPA发酵验证等结果表明,vgb基因在短密青霉中成功获得了表达;vgb基因的表达提高了短密青霉的菌体密度,转化子MPA产量达到2.18 g·L?1,比原始菌株提高了27.5%。 展开更多
关键词 根癌农杆菌 短密青霉 VGB 霉酚酸 发酵
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聚己内酯降解真菌DSWJ1201的筛选、鉴定及产酶条件优化 被引量:2
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作者 王佳丽 崔云虹 +3 位作者 李凡 刘东波 夏洪梅 陈珊 《河北师范大学学报(自然科学版)》 CAS 2016年第6期526-532,共7页
采用唯一碳源法从土壤中分离了一株具有聚己内酯(PCL)降解能力的真菌DSWJ1201,对其进行了形态学和分子生物学鉴定,结果表明该真菌为短密青霉(Penicillium brevicompactum);结合单因素实验和正交试验对菌株产PCL解聚酶的条件进行了优化,... 采用唯一碳源法从土壤中分离了一株具有聚己内酯(PCL)降解能力的真菌DSWJ1201,对其进行了形态学和分子生物学鉴定,结果表明该真菌为短密青霉(Penicillium brevicompactum);结合单因素实验和正交试验对菌株产PCL解聚酶的条件进行了优化,结果显示出当培养温度为20℃、培养基初始pH值为7.0、装液量为250mL三角瓶装液100mL、PCL质量的浓度为0.6g/L、诱导物(吐温80)体积分数为2.5mL/L、发酵时间为5d时,菌株所产粗酶的酶活力最高.同时还发现菌株DSWJ1201具有耐冷菌的特性,且能够降解表面活性剂吐温80,因此在常温和低温条件下的废弃物处理中具有潜在的应用价值. 展开更多
关键词 聚己内酯(PCL) 短密青霉 产酶优化 耐冷菌 吐温80
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紫外分光光度法测定发酵液中麦考酚酸含量
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作者 陈俊 肖安风 +2 位作者 倪辉 杨秋明 蔡慧农 《集美大学学报(自然科学版)》 CAS 2011年第4期258-262,共5页
分别采用乙醇、乙酸乙酯、甲醇3种有机溶剂提取发酵液中的麦考酚酸(MPA),分析紫外光谱吸收特征,并建立了测定MPA含量的紫外分光光度法.结果表明:MPA甲醇溶液质量浓度在0~50 mg/L范围内与Abs304呈良好的线性关系,平均回收率为101.8%,相... 分别采用乙醇、乙酸乙酯、甲醇3种有机溶剂提取发酵液中的麦考酚酸(MPA),分析紫外光谱吸收特征,并建立了测定MPA含量的紫外分光光度法.结果表明:MPA甲醇溶液质量浓度在0~50 mg/L范围内与Abs304呈良好的线性关系,平均回收率为101.8%,相对标准偏差为1.20%.紫外分光光度法测定MPA含量简单、快速、重复性好,适用于发酵液中MPA含量的准确测定. 展开更多
关键词 短密青霉菌 麦考酚酸 紫外分光光度法 发酵液
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短密青霉NRRL 864异戊烯基转移酶PbPT的克隆表达及功能分析
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作者 孙靖然 刘长宁 +2 位作者 李荣贵 张伟 李盛英 《青岛大学学报(工程技术版)》 CAS 2016年第2期107-115,共9页
在对丝状真菌短密青霉(penicillium brevicompactum NRRL 864)的全基因组进行分析时,发现该真菌可能表达一种异戊烯基转移酶PbPT。通过反转录RT-PCR(Reverse Transcription,RT-PCR)获得真菌cDNA,并以cDNA为模版,将编码PbPT的开放阅读框... 在对丝状真菌短密青霉(penicillium brevicompactum NRRL 864)的全基因组进行分析时,发现该真菌可能表达一种异戊烯基转移酶PbPT。通过反转录RT-PCR(Reverse Transcription,RT-PCR)获得真菌cDNA,并以cDNA为模版,将编码PbPT的开放阅读框克隆到pET-28b构建表达载体pET28b-PbPT,将pET28b-PbPT转化Escherichia coli BL21(DE3)获得表达菌株,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(Isopropyl-β-D-thiogalactoside,IPTG)诱导高效表达PbPT,利用Ni-NTA树脂亲和纯化重组PbPT活性蛋白,并对该蛋白进行了底物特异性分析、产物结构鉴定以及酶促动力学分析。分析结果表明,以二甲基丙烯基二磷酸(dimethylallyl pyrophosphate,DMAPP)为供体,PbPT特异性催化异戊烯基转移至Brevianamide F的α位C上,生成Deoxybrevianamide E。Brevianamide F是合成真菌生物碱类杀虫抗生素brevianamides的重要中间体,真菌吲哚类异戊烯基转移酶家族新成员PbPT的发现。该研究为进一步寻找和阐明真菌生物碱类杀虫抗生素brevianamides的生物合成基因簇和合成途径奠定了基础。 展开更多
关键词 短密青霉 异戊烯基转移酶 丝状真菌 DMAPP 功能分析
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由Penicillium brevicompactum产生的Brevicompanine A和B的结构及植物生长调节活性
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作者 亦冰 《世界农药》 CAS 2002年第1期19-22,共4页
探明高等植物的各种各样的生理现象,是植物生理学长期研究的重要课题之一。业已知晓,植物生长调节物质是植物各种特异生理活性现象关键物质。有关这些植物生长调节物质的发现和构效关系的研究,对农药创制中先导化合物的发现也颇有价... 探明高等植物的各种各样的生理现象,是植物生理学长期研究的重要课题之一。业已知晓,植物生长调节物质是植物各种特异生理活性现象关键物质。有关这些植物生长调节物质的发现和构效关系的研究,对农药创制中先导化合物的发现也颇有价值。同时也能有助于从分子水平解明其作用机理。…… 展开更多
关键词 植物生长调节剂 调节活性 penicillium-brevicompactum BrevicompanineA BrevicompanineB 结构
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