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青霉P-1产植酸酶发酵条件的研究
1
作者 黄方一 钟毅 聂启明 《武汉生物工程学院学报》 2010年第1期5-8,共4页
研究了碳源、氮源等对青霉(Penicillium)P-1液体发酵产植酸酶的影响。最佳碳源为蔗糖,最佳氮源为蛋白胨和硝酸铵。最适发酵产酶条件为培养温度30℃,发酵培养基最适pH 5,摇瓶装液量10%,接种量4%,摇床转速120 r/min,培养时间96 h,最高酶... 研究了碳源、氮源等对青霉(Penicillium)P-1液体发酵产植酸酶的影响。最佳碳源为蔗糖,最佳氮源为蛋白胨和硝酸铵。最适发酵产酶条件为培养温度30℃,发酵培养基最适pH 5,摇瓶装液量10%,接种量4%,摇床转速120 r/min,培养时间96 h,最高酶活性可达78 U/L。 展开更多
关键词 青霉(penicillium)p-1 植酸酶 产酶条件 酶活性
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刺五加内生青霉鲨烯合酶基因的克隆与序列分析 被引量：1
2
作者 邢朝斌 何闪 +3 位作者 朱金丽 龙月红 梁能松 李宝财 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第8期1136-1144,共9页
【目的】克隆刺五加内生青霉Penicillium minioluteum P116-1a的鲨烯合酶(Squalene synthase,SS)基因。【方法】采用cDNA 5末端快速扩增(Rapid Amplification ofcDNA 5 Ends,5 RACE)技术扩增P.minioluteum P116-1a SS基因的全长cDNA序列... 【目的】克隆刺五加内生青霉Penicillium minioluteum P116-1a的鲨烯合酶(Squalene synthase,SS)基因。【方法】采用cDNA 5末端快速扩增(Rapid Amplification ofcDNA 5 Ends,5 RACE)技术扩增P.minioluteum P116-1a SS基因的全长cDNA序列和DNA序列;运用生物信息学方法对该基因进行分析,预测其编码蛋白的结构与功能;并通过RT-PCR法和SDS-PAGE法检测SS的表达情况。【结果】P.minioluteum P116-1a的SS基因含有4个外显子和3个内含子,开放阅读框长1 416 bp,编码471个氨基酸,预测蛋白含67.73%的α螺旋,5.31%的延伸链,2.97%的β折叠,23.99%的无规则卷曲,含有鲨烯合酶和八氢番茄红素合成酶的特异性识别区域,定位于内质网膜。与P.marneffei和Talaromyces stipitatus中SS蛋白的氨基酸同源性达90%以上。不同温度下SS的表达情况不同。【结论】首次在刺五加内生青霉P.minioluteum P116-1a中克隆到SS基因,为进一步研究P.minioluteum P116-1a提高刺五加皂苷含量的机制奠定基础。 展开更多
关键词 penicillium minioluteum p116-1a 鲨烯合酶 克隆 5’RACE技术
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基于关键酶靶点基因研究内生青霉P116-1a提高刺五加皂苷含量的机制 被引量：2
3
作者 龙月红 杨果 +1 位作者 李非非 邢朝斌 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期155-159,共5页
为了探明刺五加鲨烯合酶(squalene synthase,SS)、鲨烯环氧酶(squalene epoxidase,SE)和β-香树酯醇合成酶(β-amyrin synthase,β-AS)基因家族各成员中靶点基因在内生青霉P116-1a提高皂苷含量的作用机制,我们利用Real time PCR法检测... 为了探明刺五加鲨烯合酶(squalene synthase,SS)、鲨烯环氧酶(squalene epoxidase,SE)和β-香树酯醇合成酶(β-amyrin synthase,β-AS)基因家族各成员中靶点基因在内生青霉P116-1a提高皂苷含量的作用机制,我们利用Real time PCR法检测了回接P116-1a对刺五加SS、SE和β-AS基因家族各成员表达的影响;应用分光光度法测定总皂苷含量变化,并以SPPS17.0软件进行相关性分析。结果表明,回接菌株P116-1a后,SS1的表达量显著降低(p<0.05),SS2呈先高后低的变化趋势。SE1的表达量显著提高(p<0.05)。回接的早期,P116-1a显著抑制了SE2的表达(pAS2<0.05),之后回复正常。β-AS1呈现先高后低的变化趋势与SS1的变化趋势相似;β-基因的表达量显著提高(p<0.05)。菌株P116-1a显著提高了刺五加的皂苷含量(p<0.05)。SS2、SE1和β-AS2的表达量变化与刺五加的皂苷含量变化呈显著的正相关关系。我们初步判断,SS2、SE1和β-AS2是P116-1a提高刺五加皂苷含量的作用靶点基因。 展开更多
关键词 刺五加 内生青霉 皂苷类 靶点基因 五加鲨烯合酶 鲨烯环氧酶 β-香树酯醇合成酶
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从桔青霉M71生产核酸酶P_1及酶活提高途径的研究 被引量：14
4
作者 娄永江 吴汉民 王海洪 《宁波大学学报（理工版）》 CAS 1997年第3期21-28,共8页
由桔青霉Ｍ７１在２８±１℃下用深层通气搅拌发酵产生的核酸酶Ｐ１能降解热变性ＤＮＡ和酵母ＲＮＡ成为５＇－脱氧核苷酸和５－核苷酸。培养过程中酶活力高峰期在７０－９５ｈ之间，该酶对热变性ＤＮＡ和酵母ＲＮＡ的活力分别高达... 由桔青霉Ｍ７１在２８±１℃下用深层通气搅拌发酵产生的核酸酶Ｐ１能降解热变性ＤＮＡ和酵母ＲＮＡ成为５＇－脱氧核苷酸和５－核苷酸。培养过程中酶活力高峰期在７０－９５ｈ之间，该酶对热变性ＤＮＡ和酵母ＲＮＡ的活力分别高达１５５ｕｎｉｔ／ｍｌ和３６９ｕｎｉｔ／ｍｌ，其最适作用温度为７５℃，最适ｐＨ值为５．０，在７０℃以下１ｈ之内稳定。发酵过程中控制接种量、氧气供应量、ｐＨ值及添加适量的Ｚｎ２＋，Ｆｅ２＋，Ｓｎ２＋，ＳＬ－Ｃｙｓｔｅｉｎｅ，Ｔｗｅｅｎ８０。 展开更多
关键词 桔青霉 核酸酶p_1 5'-脱氧核苷酸 5'-单核苷酸
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