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苎麻酶法脱胶的研究进展 被引量:34
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作者 肖丽 王贵学 陈国娟 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期101-105,共5页
苎麻酶脱胶法是一种高效能、优质量、无污染的脱胶方法 ,它是直接利用微生物发酵后期产生的胞外酶或酶制剂降解苎麻的胶质 ,使得苎麻纤维释放出来。到目前为止 ,国内外的科研人员在这方面已经进行了大量的研究 ,筛选了许多不同的脱胶菌 ... 苎麻酶脱胶法是一种高效能、优质量、无污染的脱胶方法 ,它是直接利用微生物发酵后期产生的胞外酶或酶制剂降解苎麻的胶质 ,使得苎麻纤维释放出来。到目前为止 ,国内外的科研人员在这方面已经进行了大量的研究 ,筛选了许多不同的脱胶菌 ,包括需氧菌和厌氧菌等用于苎麻的脱胶。相比化学脱胶 ,苎麻的酶脱胶具有提高精干麻的质量、大幅度降低环境污染等显著的优点 ,是苎麻脱胶未来的主要发展方向 ,有着不可估量的前途。同时 ,随着酶脱胶技术在工业化生产中的推广应用 ,酶的使用量势必大幅度增加 ,从而将带动酶工业的发展。 展开更多
关键词 苎麻 脱胶 果胶酶 半纤维素酶
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植物果胶裂解酶的研究现状及展望 被引量:11
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作者 陈乐天 王慧婷 +1 位作者 韩靖鸾 栾莹 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期71-77,共7页
果胶是一种结构性多聚糖,也是植物细胞壁的主要成分。果胶裂解酶(PL)则是一类通过β反式消除作用切割α 1,4 糖苷键,降解去甲酯化果胶产生寡聚糖的酶类。PL 的研究将有助于了解植物细胞壁的代谢网络并促进其在食品、造纸、纺织和生物能... 果胶是一种结构性多聚糖,也是植物细胞壁的主要成分。果胶裂解酶(PL)则是一类通过β反式消除作用切割α 1,4 糖苷键,降解去甲酯化果胶产生寡聚糖的酶类。PL 的研究将有助于了解植物细胞壁的代谢网络并促进其在食品、造纸、纺织和生物能源等行业中的工业化应用。本文总结了 30 年来植物果胶裂解酶基因(PL)的鉴定及功能研究的进展情况,归纳了 PL 在植物生长发育、花器官发育、果实成熟软化、植物与病原微生物的相互作用以及过敏性反应中的生物学功能,并对 PL 的未来研究进行了展望。 展开更多
关键词 植物细胞壁 果胶 果胶裂解酶 果胶裂解酶基因
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高产果胶酶细菌的筛选及其Pel基因克隆 被引量:11
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作者 李琦 谢达平 +2 位作者 戴小阳 刘正初 王文芳 《湖南农业科学》 2009年第3期1-3,6,共4页
用透明圈法筛选50份产果胶酶菌株,通过PCR方法从菌株的基因组DNA克隆果胶酶Pel基因,Pel基因与PMD18-T载体连接后转化到大肠杆菌DH52α,用菌落PCR方法和透明圈法筛选阳性重组菌株。结果表明,成功筛选出一株透明圈大的T85-166菌株,初酶液... 用透明圈法筛选50份产果胶酶菌株,通过PCR方法从菌株的基因组DNA克隆果胶酶Pel基因,Pel基因与PMD18-T载体连接后转化到大肠杆菌DH52α,用菌落PCR方法和透明圈法筛选阳性重组菌株。结果表明,成功筛选出一株透明圈大的T85-166菌株,初酶液果胶酶活力达213.30U/ml,克隆了877bp的Pel基因片段并在大肠杆菌DH52α中有表达,其表达产物具有生物学活性。 展开更多
关键词 果胶酶 筛选 克隆 欧文氏杆菌
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利用温控载体构建碱性果胶酯裂解酶工程菌 被引量:9
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作者 诸葛斌 堵国成 +4 位作者 沈微 诸葛健 陈坚 唐雪明 王春 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期657-659,共3页
从筛选出的Bacillus subtilisWSHB04-02菌株中扩增出编码碱性果胶酯裂解酶的结构基因PL,将其插入载体pET22b(+)多克隆位点,得到带有前导序列PelB重组质粒pET22b(+)PL。以pET22b(+)PL为模板扩增出带前导序列的碱性果胶酯裂解酶的结构基因... 从筛选出的Bacillus subtilisWSHB04-02菌株中扩增出编码碱性果胶酯裂解酶的结构基因PL,将其插入载体pET22b(+)多克隆位点,得到带有前导序列PelB重组质粒pET22b(+)PL。以pET22b(+)PL为模板扩增出带前导序列的碱性果胶酯裂解酶的结构基因PL,将其插入温控载体pHsh,重组载体在大肠杆菌JM109中得到表达。其表达量与以T7为启动子的重组菌BL21DE3[(pET22b(+)PL]相比,表达量相近。SDS-PAGE分析显示表达产物的分子量均为43kDa,同核酸序列测定所推导的值相符。研究表明利用pHsh构建的JM109(pHsh PL)诱导表达好,诱导方式简单廉价,这对该酶的大规模发酵具有重要意义。 展开更多
关键词 碱性果胶酯裂解酶 pHsh 基因 表达
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苹果树腐烂病菌果胶裂解酶基因Vmpl4的致病功能研究 被引量:9
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作者 许春景 孙迎超 +3 位作者 吴玉星 冯浩 高小宁 黄丽丽 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期19-25,共7页
【目的】通过研究苹果树腐烂病菌果胶裂解酶(pectate lyase,PL)基因Vmpl4敲除突变体的致病力、对果胶的利用和基因敲除后家族内其他基因的表达水平变化,探明Vmpl4在致病过程中的作用。【方法】采用q RT-PCR技术检测Vmpl4在野生菌株03-8... 【目的】通过研究苹果树腐烂病菌果胶裂解酶(pectate lyase,PL)基因Vmpl4敲除突变体的致病力、对果胶的利用和基因敲除后家族内其他基因的表达水平变化,探明Vmpl4在致病过程中的作用。【方法】采用q RT-PCR技术检测Vmpl4在野生菌株03-8与寄主互作过程中的表达水平及Vmpl4敲除后PL家族内其他基因的表达水平,通过Doublejoint PCR构建基因敲除载体,并通过PEG介导原生质体遗传转化获取转化子、PCR及Southern blot验证基因敲除突变体。利用苹果叶片和枝条离体接种方法检测突变体致病力;接种至PDA及果胶培养基,观察突变体的营养生长和对果胶的利用情况。【结果】Vmpl4在病菌侵染过程中上调表达高达10.20倍;通过验证得到1个基因敲除突变体,其在叶片和枝条上的致病力均显著降低,在果胶培养基上生长速率也明显降低,Vmpl4敲除后家族内4个基因在病菌侵染过程中表达水平显著上调。【结论】果胶裂解酶基因Vmpl4通过降解果胶参与致病过程,PL家族内其他基因与Vmpl4在病菌致病性方面共同发挥作用。 展开更多
关键词 苹果树腐烂病菌 果胶裂解酶 基因敲除 致病力
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欧文氏菌T85-166果胶酶基因克隆与序列分析 被引量:8
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作者 李琦 戴小阳 +3 位作者 刘正初 谢达平 王文芳 宋娟 《湖南农业科学》 2009年第7期8-10,共3页
根据果胶酶Pel基因在欧文氏菌基因组上的分布特点,通过合理设计引物,从欧文氏菌株T85-166克隆出3个果胶酶Pel基因(Pel-1、Pel-2和Pel-3),它们分别编码372、373和374个氨基酸。序列分析表明,Pel-1前105及后100个氨基酸序列与Pel-2完全相... 根据果胶酶Pel基因在欧文氏菌基因组上的分布特点,通过合理设计引物,从欧文氏菌株T85-166克隆出3个果胶酶Pel基因(Pel-1、Pel-2和Pel-3),它们分别编码372、373和374个氨基酸。序列分析表明,Pel-1前105及后100个氨基酸序列与Pel-2完全相同,但与Pel-3有较大差异,而中间170个左右的氨基酸序列与Pel-3则高度相似。初步构建了3个Pel基因的工程菌。 展开更多
关键词 果胶酶 果胶酸裂解酶 欧文氏菌 克隆 PCR
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产果胶酸裂解酶的耐盐碱性菌株分离及培养条件 被引量:7
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作者 赵庆新 韩丰敏 《南京师大学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期89-93,共5页
从江苏省沿海滩涂国家丹顶鹤自然保护区盐碱土样中,分离得到一株果胶酸裂解酶产生菌ZQX8,经形态、生理生化特征和16SrDNA鉴定,初步鉴定为枯草芽孢杆菌.该株菌的最佳培养条件为37℃、pH6.5、0.1~0.25mol/LNaCl,但在pH7~9之间,0.5~1.0m... 从江苏省沿海滩涂国家丹顶鹤自然保护区盐碱土样中,分离得到一株果胶酸裂解酶产生菌ZQX8,经形态、生理生化特征和16SrDNA鉴定,初步鉴定为枯草芽孢杆菌.该株菌的最佳培养条件为37℃、pH6.5、0.1~0.25mol/LNaCl,但在pH7~9之间,0.5~1.0mol/LNaCl浓度下仍然能较好的生长,表现出一定的耐盐性和耐碱性.该菌分泌的胞外果胶酸裂解酶的最佳底物为果胶酸,在培养基中酶活达到4U/mL.该果胶酸裂解酶在40~60℃,pH8~10的碱性条件下酶活较高,在600mmol/LNaCl存在的条件下,也能保持较高的酶活,显示该酶具有一定的耐碱性和耐盐性. 展开更多
关键词 盐碱土 枯草芽孢杆菌 果胶酸裂解酶 耐盐性 耐碱性
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辣椒疫霉菌果胶裂解酶PL101基因的克隆及生物信息学分析 被引量:7
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作者 王会征 兰玉彬 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第12期4021-4028,共8页
【背景】辣椒疫病是一种世界性土传病害,严重影响世界各国辣椒生产,并带来巨大经济损失。果胶裂解酶(pectate lyase,PL)作为一类重要的细胞壁降解酶类是该病的重要致病因子。【目的】对果胶裂解酶基因进行克隆,并对其生物信息学特性进... 【背景】辣椒疫病是一种世界性土传病害,严重影响世界各国辣椒生产,并带来巨大经济损失。果胶裂解酶(pectate lyase,PL)作为一类重要的细胞壁降解酶类是该病的重要致病因子。【目的】对果胶裂解酶基因进行克隆,并对其生物信息学特性进行相关分析,进一步阐明该酶的作用机制。【方法】根据辣椒疫霉菌全基因组序列,以高致病菌株SD33为模板扩增PL101基因的全长cDNA序列,并对其理化性质、跨膜区、亲疏水性、结构域等生物学特性进行分析。【结果】除获得PL101相关生物学特性信息外,还对PL101进行三维结构建模,获得可信度较高的蛋白结构,并确定PL101可能的催化位点为Asp183、Arg212、Arg272三个氨基酸。【结论】对PL101基因的克隆及相关生物学特性的分析为进一步阐明PL功能特性提供参考。 展开更多
关键词 辣椒疫霉菌 果胶裂解酶 克隆 生物信息学
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森林草莓‘Ruegen’果胶裂解酶基因的克隆及荧光定量表达分析 被引量:7
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作者 周鹤莹 张玮 +3 位作者 张卿 沈元月 秦岭 邢宇 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期455-461,共7页
根据森林草莓(Fragaria vesca)果胶裂解酶(Pectate lyase)基因序列信息设计引物,克隆了森林草莓‘Ruegen’的果胶裂解酶基因PLA、PLB和PLC。利用MEGA5.0软件将这3个基因编码的氨基酸序列与其他植物的果胶裂解酶氨基酸序列进行聚类分析,... 根据森林草莓(Fragaria vesca)果胶裂解酶(Pectate lyase)基因序列信息设计引物,克隆了森林草莓‘Ruegen’的果胶裂解酶基因PLA、PLB和PLC。利用MEGA5.0软件将这3个基因编码的氨基酸序列与其他植物的果胶裂解酶氨基酸序列进行聚类分析,同时采用荧光定量PCR的方法对‘Ruegen’植株不同器官及不同发育时期果实的果胶裂解酶基因表达量进行分析。结果表明:PLA、PLB和PLC在其植株各器官中均有表达,且在发育后期果实中的表达量明显高于其他器官,结合进化树以及果实发育过程中果胶裂解酶活性变化,推测果胶裂解酶基因对草莓果实发育后期的软化具有调节作用。 展开更多
关键词 森林草莓 果胶裂解酶基因 基因克隆 荧光定量表达分析
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Ethylene†and fruit softening 被引量:7
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作者 Greg Tucker Xueren Yin +6 位作者 Aidi Zhang MiaoMiao Wang Qinggang Zhu Xiaofen Liu Xiulan Xie Kunsong Chen Don Grierson 《Food Quality and Safety》 SCIE 2017年第4期253-267,共15页
This review is concerned with the mechanisms controlling fruit softening.Master genetic regulators switch on the ripening programme and the regulatory pathway branches downstream,with separate controls for distinct qu... This review is concerned with the mechanisms controlling fruit softening.Master genetic regulators switch on the ripening programme and the regulatory pathway branches downstream,with separate controls for distinct quality attributes such as colour,flavour,texture,and aroma.Ethylene plays a critical role as a ripening hormone and is implicated in controlling different facets of ripening,including texture change,acting through a range of transcriptional regulators,and this signalling can be blocked using 1-methylcyclopropene.A battery of at least seven cell-wall-modifying enzymes,most of which are synthesized de novo during ripening,cause major alterations in the structure and composition of the cell wall components and contribute to the softening process.Significant differences between fruits may be related to the precise structure and composition of their cell walls and the enzymes recruited to the ripening programme during evolution.Attempts to slow texture change and reduce fruit spoilage by delaying the entire ripening process can often affect negatively other aspects of quality,and low temperatures,in particular,can have deleterious effects on texture change.Gene silencing has been used to probe the function of individual genes involved in different aspects of ripening,including colour,flavour,ethylene synthesis,and particularly texture change.The picture that emerges is that softening is a multi-genic trait,with some genes making a more important contribution than others.In future,it may be possible to control texture genetically to produce fruits more suitable for our needs. 展开更多
关键词 Cell walls ETHENE pectate lyase POLYGALACTURONASE Tomato.
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儿茶素对棉枯萎病菌胞壁降解酶的抑制及在棉花抗病性中的作用 被引量:4
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作者 宋凤鸣 郑重 +1 位作者 童贤明 葛秀春 《真菌学报》 CAS CSCD 北大核心 1996年第4期297-303,共7页
在含有儿茶素的培养液中棉枯萎病菌(Fusarium oxysporum f. sp. vasinfectum)的多聚半乳糖醛酸酶(PG)和果胶裂解酶(PL)活性明显降低。儿茶素可明显抑制初步纯化的PG和PL活性以及它们对棉苗组织的浸软作用。对棉苗组织中儿茶素含量的测... 在含有儿茶素的培养液中棉枯萎病菌(Fusarium oxysporum f. sp. vasinfectum)的多聚半乳糖醛酸酶(PG)和果胶裂解酶(PL)活性明显降低。儿茶素可明显抑制初步纯化的PG和PL活性以及它们对棉苗组织的浸软作用。对棉苗组织中儿茶素含量的测定结果表明:抗病品种棉苗组织中儿茶素含量较高;氟乐灵处理可诱发棉苗产生对枯萎病的诱导抗性,同时也提高棉苗组织中的儿茶素的含量;枯萎病菌侵染后棉苗组织中儿茶素含量明显升高,以抗病品种棉苗和氟乐灵诱发处理棉苗组织中儿茶素含量的增加更为明显。棉苗组织提取液中的酚类物质可抑制PG和PL的活性,且证明这种抑制作用主要是由儿茶素引起。提取液对PG和PL活性的抑制作用与棉苗组织中儿茶素的含量呈直接的正相关关系。因此,作者认为棉苗组织中的儿茶素可能通过对病菌PG和PL等胞壁降解酶的抑制而与棉花对枯萎病的抗病性及氟乐灵诱发的诱导抗性有关。 展开更多
关键词 棉花枯萎病 儿茶素 抗病性 果胶 降解酶
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禾谷镰孢菌果胶裂解酶PelA的生物学功能分析 被引量:6
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作者 姚昇华 贾雷杰 +2 位作者 张晓伟 张栋 许玲 《植物生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期243-252,共10页
果胶裂解酶是果胶酶的重要成员之一,能够通过β-消除作用,催化降解(1→4)-α-D-聚半乳糖醛酸。本研究首次鉴定出禾谷镰孢菌中的一个果胶裂解酶PelA,并在体外检测了其生化特性。PelA基因(FGSG_02386)的cDNA被克隆并进行了原核表达,同时... 果胶裂解酶是果胶酶的重要成员之一,能够通过β-消除作用,催化降解(1→4)-α-D-聚半乳糖醛酸。本研究首次鉴定出禾谷镰孢菌中的一个果胶裂解酶PelA,并在体外检测了其生化特性。PelA基因(FGSG_02386)的cDNA被克隆并进行了原核表达,同时构建了单基因敲除突变体。将重组质粒pET-28a(+)-PelA转化蛋白表达菌株大肠杆菌BL21表达目的蛋白,纯化后的蛋白具有果胶裂解酶活性。酶活性测定结果显示,该酶的活性受到外界环境因素如温度、钙离子浓度和pH条件的影响,其最适反应条件为50℃,CaCl2浓度0.5 mmol·L-1,pH 8.5。在侵染小麦胚芽鞘时PelA单基因突变体的毒力较野生型菌株并没有出现明显变化。 展开更多
关键词 果胶裂解酶 禾谷镰孢菌 小麦胚芽鞘
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Genome-wide identification of the pectate lyase(PEL)gene family members in Malvaceae,and their contribution to cotton fiber quality
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作者 Qian Deng Zeyu Dong +5 位作者 Zequan Chen Zhuolin Shi Ting Zhao Xueying Guan Yan Hu Lei Fang 《Journal of Integrative Agriculture》 SCIE CAS CSCD 2024年第10期3264-3282,共19页
Pectin is a major constituent of the plant cell wall.Pectate lyase(PEL,EC 4.2.2.2)uses anti-β-elimination chemistry to cleave theα-1,4 glycosidic linkage in the homogalacturonan region of pectin.However,limited info... Pectin is a major constituent of the plant cell wall.Pectate lyase(PEL,EC 4.2.2.2)uses anti-β-elimination chemistry to cleave theα-1,4 glycosidic linkage in the homogalacturonan region of pectin.However,limited information is available on the comprehensive and evolutionary analysis of PELs in the Malvaceae.In this study,we identified 597PEL genes from 10 Malvaceae species.Phylogenetic and motif analyses revealed that these PELs are classified into six subfamilies:Clades I,II,III,IV,Va,and Vb.The two largest subfamilies,Clades I and II,contained 237 and222 PEL members,respectively.The members of Clades Va and Vb only contained four or five motifs,far fewer than the other subfamilies.Gene duplication analysis showed that segmental duplication played a crucial role in the expansion of the PEL gene family in Gossypium species.The PELs from Clades I,IV,Va,and Vb were expressed during the fiber elongation stage,but nearly all PEL genes from Clades II and III showed no expression in any of the investigated fiber developmental stages.We further performed single-gene haplotype association analysis in 2,001G.hirsutum accessions and 229 G.barbadense accessions.Interestingly,14 PELs were significantly associated with fiber length and strength traits in G.barbadense with superior fiber quality,while only eight GhPEL genes were found to be significantly associated with fiber quality traits in G.hirsutum.Our findings provide important information for further evolutionary and functional research on the PEL gene family members and their potential use for fiber quality improvement in cotton. 展开更多
关键词 MALVACEAE pectate lyase(PEL) Gossypium species fiber quality
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碱性果胶酯裂解酶工程菌的构建 被引量:5
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作者 诸葛斌 堵国成 +1 位作者 沈微 陈坚 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期547-549,共3页
从本研究室筛选的BacillussubtilisWSHB04-02菌株中扩增出编码碱性果胶酯裂解酶的结构基因PL,将其插入大肠杆菌分泌表达载体pET22b(+)多克隆位点,得到重组载体pET22b(+)PL.序列分析表明,所获PL基因与已报道的B.subtilisSO113的PL基因的... 从本研究室筛选的BacillussubtilisWSHB04-02菌株中扩增出编码碱性果胶酯裂解酶的结构基因PL,将其插入大肠杆菌分泌表达载体pET22b(+)多克隆位点,得到重组载体pET22b(+)PL.序列分析表明,所获PL基因与已报道的B.subtilisSO113的PL基因的同源性为98%.重组载体在大肠杆菌BL21(DE3)中得到表达.SDS-PAGE分析显示,表达产物的分子量(Mr)均为43×103,同核酸序列测定所推导的值相符.该工程菌经IPTG诱导后,胞内酶活为8U/mL.研究发现,碱性果胶酯裂解酶不仅在胞内有酶活,胞外也有酶活,说明所构建的表达体系可使该酶向胞外分泌. 展开更多
关键词 碱性果胶酯裂解酶 基因 表达
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蜡样芽孢杆菌HDYM-02果胶质降解酶的诱导及亚麻脱胶应用 被引量:4
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作者 那金 张历 +1 位作者 葛菁萍 赵丹 《黑龙江大学自然科学学报》 CAS 2018年第4期467-472,共6页
为了挖掘具有亚麻脱胶潜力的微生物资源并验证其在温水沤麻中的脱胶效果,本文首先考察了蜡样芽胞杆菌(Bacillus cereus) HDYM-02产果胶质降解酶的能力。结果表明,魔芋粉和果胶能显著诱导供试菌株产生两种果胶质降解酶,其中果胶裂解酶的... 为了挖掘具有亚麻脱胶潜力的微生物资源并验证其在温水沤麻中的脱胶效果,本文首先考察了蜡样芽胞杆菌(Bacillus cereus) HDYM-02产果胶质降解酶的能力。结果表明,魔芋粉和果胶能显著诱导供试菌株产生两种果胶质降解酶,其中果胶裂解酶的活力最大值分别为(1 678. 33±3. 68)和(1 602. 67±14. 01) U·mL^(-1),果胶酸裂解酶的活力最大值分别为(670. 67±5. 31)和(488. 33±4. 92) U·mL^(-1)。进而构建加菌沤麻体系,沤麻液中的果胶裂解酶和果胶酸裂解酶的活力最大值分别为(721. 86±16. 02)和(213. 99±0. 70) U·mL^(-1),显著高于不加菌的自然对照组(P <0. 05)。同时,加菌组亚麻纤维失重率达到16%,亚麻原茎中的果胶和果胶酸利用率分别为(85. 88±0. 69)%和(63. 09±2. 16)%,均显著高于自然对照组(P <0. 05),比自然对照组分别提高了1. 12和1. 85倍。结果表明,供试菌株B. cereus HDYM-02可同时产生两种果胶质降解酶,这两种酶能高效去除亚麻胶质组分,在亚麻生物脱胶领域有广阔的应用前景。 展开更多
关键词 果胶质降解酶 蜡样芽孢杆菌 果胶裂解酶 果胶酸裂解酶 亚麻
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大丽轮枝菌果胶裂解酶PL1家族基因VdPL1-4的致病功能研究 被引量:1
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作者 姜明 谭明琪 +2 位作者 王丹 张丹丹 陈捷胤 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期19-31,共13页
大丽轮枝菌Verticillium dahliae引起的黄萎病是一种传播迅速且为害广泛的土传维管束真菌病害。大丽轮枝菌分泌的水解酶在侵染中发挥重要作用,尤其是纤维素酶和果胶酶。大丽轮枝菌果胶裂解酶包括PL1、PL3、PL4、PL9和PL11 5个家族,其中... 大丽轮枝菌Verticillium dahliae引起的黄萎病是一种传播迅速且为害广泛的土传维管束真菌病害。大丽轮枝菌分泌的水解酶在侵染中发挥重要作用,尤其是纤维素酶和果胶酶。大丽轮枝菌果胶裂解酶包括PL1、PL3、PL4、PL9和PL11 5个家族,其中PL1家族成员数目最多,但对该家族的致病功能还未见系统研究。本研究明确大丽轮枝菌PL1家族共包含17个成员,且多数成员在侵染早期上调表达,其中VdPL1-4和VdPL1-8在侵染早期强烈诱导表达。挑选VdPL1-4构建缺失突变体,发现VdPL1-4缺失后菌株对棉花的致病力显著下降,对复杂碳源(果胶、羧甲基纤维素、淀粉)的利用能力受限,该基因回补后菌株的毒力和碳源利用能力均得以恢复。信号肽介导的分泌活性验证表明VdPL1-4为分泌蛋白。以上研究表明,VdPL1-4是重要毒力因子,研究结果为后续系统解析果胶裂解酶在病原致病过程中发挥的作用提供了理论依据。 展开更多
关键词 大丽轮枝菌 果胶裂解酶 PL1家族 毒力
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香蕉果实果胶裂解酶基因cDNA克隆及序列分析 被引量:5
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作者 庄军平 苏菁 陈维信 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期227-231,共5页
利用已报道果胶裂解酶基因的保守序列设计简并引物,进行RT-PCR,得到1个大约1300bp的香蕉果胶裂解酶基因cDNA片段,命名为MA-pl。DNA序列分析表明:MA-pl片段全长1277bp,包含1个882bp的开放读码框(ORF),编码294个氨基酸;其具有所有果胶裂... 利用已报道果胶裂解酶基因的保守序列设计简并引物,进行RT-PCR,得到1个大约1300bp的香蕉果胶裂解酶基因cDNA片段,命名为MA-pl。DNA序列分析表明:MA-pl片段全长1277bp,包含1个882bp的开放读码框(ORF),编码294个氨基酸;其具有所有果胶裂解酶共有的保守区域:钙协调部位(Asp72,Asp74,Asp96,andAsp100)、酶活性位点(Arg152,Pro154,Arg157)及3个重要的结构域(motifI:WVDH,motifII:DGLVDAVMGSTAITVSNNYF,motifIII:LYQRMPRCRHGYFHVVWNDY);MA-pl氨基酸序列与草莓-1、葡萄、草莓-2、拟南芥、苹果、香蕉(banana-1)的相似性分别为85.8%、74.2%、79.7%、78.6%、72.4%和71.4%。 展开更多
关键词 香蕉果实 果胶裂解酶 CDNA克隆 序列分析
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耐热果胶裂解酶基因pel9A的克隆和表达 被引量:5
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作者 甄东晓 王树英 +1 位作者 严群 李华钟 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期112-115,共4页
利用PCR技术从耐热梭状芽孢杆菌(Clostridium stercorarium)中扩增得到产耐热果胶裂解酶的结构基因pel9A,并将其克隆于表达载体pET28a中,最后将此重组质粒转化到受体菌E.coliBL-21中进行表达。诱导条件为:37℃诱导5 h,IPTG浓度为0.8 mmo... 利用PCR技术从耐热梭状芽孢杆菌(Clostridium stercorarium)中扩增得到产耐热果胶裂解酶的结构基因pel9A,并将其克隆于表达载体pET28a中,最后将此重组质粒转化到受体菌E.coliBL-21中进行表达。诱导条件为:37℃诱导5 h,IPTG浓度为0.8 mmol/L。重组菌经IPTG诱导和SDS-PAGE分析表达的蛋白质的相对分子质量为130 000,与预期相对分子质量相符。细胞经超声破碎后,测得果胶酶的比酶活为15 U/mg粗蛋白。 展开更多
关键词 果胶裂解酶 耐热梭状芽孢杆菌 重组质粒 大肠杆菌BL-21 表达
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Pectate lyase is a factor in the adaptability for Heterodera glycines infecting tobacco 被引量:2
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作者 TIAN Zhong-ling SHI Hong-li +1 位作者 Munawar Maria ZHENG Jing-wu 《Journal of Integrative Agriculture》 SCIE CAS CSCD 2019年第3期618-626,共9页
The soybean cyst nematode, Heterodeara glycines, is a serious pathogen of soybean, and reported to be the host of a wide range of Fabaceae. In the present study, the host specificity and reproductivity of two populati... The soybean cyst nematode, Heterodeara glycines, is a serious pathogen of soybean, and reported to be the host of a wide range of Fabaceae. In the present study, the host specificity and reproductivity of two populations of H. glycines collected from soybean and tobacco were identified and characterized. The comparative identity between β-1,4-endoglucanase, pectate lyase and chorismate mutase of H. glycines parasitizing on soybean and tobacco were 99, 97 and 98%, respectively. The qR T-PCR analysis indicated that the expression of pectate lyase 2 gene was significantly higher in second-stage juveniles of H. glycines Henan population parasitizing on tobacco than that of H. glycines Shanxi population parasitizing on soybean. In addition, the pectic acid content of cell wall was significantly higher(45%) in the roots of tobacco than the roots of soybean. Our results indicate that the changes in transcript parasitism genes may be a result of long-term evolution illustrating how a plant-parasitic nematode adapts to the host environment for optimal infestation and survival. 展开更多
关键词 s: HETERODERA GLYCINES TOBACCO parasitism genes β-1 4-endoglucanase pectate lyase CHORISMATE mutase pectic acid
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Locus TUTOU2 determines the panicle apical abortion phenotype of rice(Oryza sativa L.)in tutou2 mutant 被引量:3
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作者 ZHU Zi-chao LUO Sheng +2 位作者 LEI Bin LI Xian-yong CHENG Zhi-jun 《Journal of Integrative Agriculture》 SCIE CAS CSCD 2022年第3期621-630,共10页
Rice panicle apical abortion(PAA)is a detrimental agronomic trait resulting in spikelet number reduction and yield loss.To understand its underlying molecular mechanism,we identified one recessive PAA mutant tutou2 fr... Rice panicle apical abortion(PAA)is a detrimental agronomic trait resulting in spikelet number reduction and yield loss.To understand its underlying molecular mechanism,we identified one recessive PAA mutant tutou2 from the offspring of tissue cultures.The mutation locus was finely mapped to a 75-kb interval on the long arm of chromosome 10.Sequence analysis revealed a single nucleotide substitution of A to T at the 941 position of LOC_Os10g31910 in tutou2,resulting in an amino acid change from isoleucine to phenylalanine.Complementation analysis showed that the degenerated panicle phenotype in tutou2 was rescued in the transgenic lines.A phenotype similar to tutou2 can also be obtained by LOC_Os10g31910 knockout in wild-type rice.These results suggested that LOC_Os10 g31910 is the causative locus TUTOU2 responsible for the tutou2 PAA phenotype and probably also the locus of DEL1,previously documented as a leaf senescence gene.The significant phenotypic differences between del1 and tutou2 suggest that the locus DEL1/TUTOU2 plays roles in both leaf and panicle development which were not considered fully in previous studies. 展开更多
关键词 Oryza sativa L. panicle apical abortion pectate lyase-like gene cloning DEL1
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