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虎杖PcMYB1基因实时荧光定量PCR检测方法的建立 被引量：1
1
作者 林艳丽 李鲁汉 +6 位作者 廖辉 覃建兵 伍翔 王岩岩 吴端阳 张鸿杰 柳忠玉 《长江大学学报（自然科学版）》 CAS 2020年第3期91-94,I0007,共5页
为建立实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测虎杖(Polygonum cuspidatum)转录因子PcMYB1基因表达的方法,将PcMYB1基因的ORF片段亚克隆于pUC19载体,得到重组质粒pUC19-PcMYB1,再以pUC19-PcMYB1作为标准样品,建立目的基因的标准曲线,优化qRT-PCR... 为建立实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测虎杖(Polygonum cuspidatum)转录因子PcMYB1基因表达的方法,将PcMYB1基因的ORF片段亚克隆于pUC19载体,得到重组质粒pUC19-PcMYB1,再以pUC19-PcMYB1作为标准样品,建立目的基因的标准曲线,优化qRT-PCR反应体系与反应条件,分析qRT-PCR的灵敏度。结果表明,在qRT-PCR体系中,退火温度为54.1℃时检测结果最好;构建的目的基因标准曲线,其循环阈值与模板拷贝数对数值呈良好的线性关系,扩增效率为92.3%;该方法最低可检测101copies/μL的目的基因。 展开更多
关键词 虎杖(Polygonum cuspidatum) pcmyb1基因 MYB转录因子 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)
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