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不同因素对包埋质量的影响 被引量：2
1
作者 张睿 罗锦 +2 位作者 朱正鹏 马健波 徐佳佳 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2022年第6期611-616,共6页
目的 改良包埋操作细节,以期提升包埋质量。方法 比较采用不同包埋模具温度、不同第一次注蜡量、冷台添加水与否、不同加盖包埋底盒方式、不同二次注蜡角度在组织包埋合格率、撬出蜡块甲级率、HE切片组织结构完整性、细胞显示效果、免... 目的 改良包埋操作细节,以期提升包埋质量。方法 比较采用不同包埋模具温度、不同第一次注蜡量、冷台添加水与否、不同加盖包埋底盒方式、不同二次注蜡角度在组织包埋合格率、撬出蜡块甲级率、HE切片组织结构完整性、细胞显示效果、免疫组织化学染色效果的差异。结果 通过预热包埋模具至70℃、减少第一次注蜡量、在冷台上加入少量的水、待模具侧壁的石蜡稍凝固后再加盖包埋底盒、二次注蜡时将包埋模具连同包埋盒倾斜10°~25°等条件可显著提高包埋合格率、蜡块质量甲级率、切片组织结构完整性、细胞显示效果和免疫组化染色优良率。结论 通过在包埋过程中延缓或加速石蜡凝固,控制注蜡量、调整注蜡角度等可显著提升包埋质量。 展开更多
关键词 石蜡包埋 改良方法 质量
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半套式PCR检测石蜡包埋组织中猪圆环病毒2型方法的探讨 被引量：3
2
作者 聂立欣 孔小明 +2 位作者 罗满林 亓文宝 崔建鑫 《动物医学进展》 CSCD 2004年第1期80-82,共3页
半套式 PCR是采用一对半特异性引物对目的基因进行扩增的一种方法 ,该方法较常规 PCR的更敏感和更特异。本试验即采用该种方法 ,从石蜡包埋组织中提取圆环病毒 DNA进行 PCR扩增 ,来检测猪圆环病毒。结果表明组织石蜡切片经二甲苯脱蜡 ,... 半套式 PCR是采用一对半特异性引物对目的基因进行扩增的一种方法 ,该方法较常规 PCR的更敏感和更特异。本试验即采用该种方法 ,从石蜡包埋组织中提取圆环病毒 DNA进行 PCR扩增 ,来检测猪圆环病毒。结果表明组织石蜡切片经二甲苯脱蜡 ,蛋白酶 K消化 ,利用半套式 PCR方法 ,得到 43 2 bp的特异性扩增产物 ,从而建立了一种新的检测圆环病毒的方法 。 展开更多
关键词 半套式PCR检测 石蜡 包埋组织 猪圆环病毒 多系统衰竭综合征 临床症状
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优化细小穿刺组织石蜡包埋质量的研究 被引量：3
3
作者 林倩 方庆全 《中国临床解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第4期465-469,共5页
目的优化细小穿刺组织石蜡包埋方法,以期提高其包埋质量。方法通过实验,分别比较不同温度的包埋模具、冷台添加水与否、不同包埋角度、不同二次注蜡角度等条件对细小穿刺组织包埋合格率、包埋时间、切片组织结构完整性、折叠、皱褶、刀... 目的优化细小穿刺组织石蜡包埋方法,以期提高其包埋质量。方法通过实验,分别比较不同温度的包埋模具、冷台添加水与否、不同包埋角度、不同二次注蜡角度等条件对细小穿刺组织包埋合格率、包埋时间、切片组织结构完整性、折叠、皱褶、刀痕、细胞显示效果、网状纤维染色效果的影响。结果 （1）使用预热至66℃的包埋模具包埋合格率显著高于常温包埋模具（χ~2=5.26,P〈0.05）;切片组织结构完整性、细胞透明度、核质对比清晰度、网状纤维完整性均分别优于常温组（P均〈0.05）。（2）包埋机冷台添加少量水使包埋合格率与包埋效率均显著优于未添加水者（P均〈0.05）;切片组织结构完整性、细胞透明度、核质对比清晰度、网状纤维完整性均分别优于未添加水者（P均〈0.05）。（3）包埋时穿刺组织与包埋模具长轴呈30°~45°角者无折叠、无皱褶、细胞透明度、核质对比清晰度、纤维完整性、网状纤维与胶原纤维对比度均分别优于穿刺组织与包埋模具长轴垂直者（P均〈0.05）;切片组织结构完整性、无刀痕、细胞透明度、纤维完整性均分别优于穿刺组织与包埋模具长轴平行者（P均〈0.05）。（4）二次注蜡时包埋模具倾斜10°~25°角的包埋合格率显著高于未倾斜者（χ2=4.82,P〈0.05）;组织结构完整性、细胞透明度、核质对比清晰度、纤维完整性均分别优于未倾斜者（P均〈0.05）。结论优化包埋模具温度、包埋机冷台、包埋组织角度、二次注蜡角度等条件,可显著提高细小穿刺组织包埋合格率、包埋效率、后续切片质量、细胞显示效果、网状纤维染色效果。 展开更多
关键词 优化 细小 穿刺组织 石蜡包埋 质量
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PCR扩增石蜡包埋小鼠组织p53基因突变热点片段 被引量：2
4
作者 戴文涛 袁晶 陈学敏 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期24-26,共3页
目的　扩增石蜡包埋小鼠组织 p5 3基因第 5、7外显子。方法　用 3种方法提取DNA ,比较提取效果 ,用聚合酶链式反应 (PCR)扩增相应片段。结果　用二甲苯脱蜡 ,蛋白酶K消化 12 0小时可获得较好的DNA提取物。结论　用该提取物为模板扩增小鼠p5
关键词 聚合酶链式反应 石蜡包埋 小鼠 P53基因
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石蜡包埋肾肿瘤标本VHL基因突变研究 被引量：1
5
作者 杨志波 刘倩 任常山 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第5期366-367,共2页
目的：研究石蜡包埋肾肿瘤标本ＶＨＬ基因突变情况。方法：采用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ银染法分析３８ 例肾透明细胞癌、１０ 例肾颗粒细胞癌、１０ 例肾盂移行细胞癌、１０ 例肾胚瘤ＶＨＬ基因突变情况。结果：９ 例肾透明细胞癌ＶＨＬ基因... 目的：研究石蜡包埋肾肿瘤标本ＶＨＬ基因突变情况。方法：采用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ银染法分析３８ 例肾透明细胞癌、１０ 例肾颗粒细胞癌、１０ 例肾盂移行细胞癌、１０ 例肾胚瘤ＶＨＬ基因突变情况。结果：９ 例肾透明细胞癌ＶＨＬ基因外显子２ 发生突变，突变率为２３％ ，其他３ 种肾肿瘤均未发现ＶＨＬ基因突变。结论：ＶＨＬ基因突变与肾透明细胞癌的发生关系密切。 展开更多
关键词 肾肿瘤 标本 石蜡包埋 VHL基因 基因突变
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宫颈病变组织中HPV-DNA的检测及临床意义分析
6
作者 李新敏 王志刚 +1 位作者 古雅丽 陈慧萍 《中国医学工程》 2014年第11期1-2,4,共3页
目的探讨宫颈病变组织中HPV感染类型及病毒载量。方法 284例组织分为慢性子宫颈炎组、CINⅠ级组、CINⅡ级组、CINⅢ级组、浸润性鳞状细胞癌组、腺癌组和外阴尖锐湿疣组,应用表面等离子谐振(SPR)技术对每组进行HPV类型及载量的检测。结果... 目的探讨宫颈病变组织中HPV感染类型及病毒载量。方法 284例组织分为慢性子宫颈炎组、CINⅠ级组、CINⅡ级组、CINⅢ级组、浸润性鳞状细胞癌组、腺癌组和外阴尖锐湿疣组,应用表面等离子谐振(SPR)技术对每组进行HPV类型及载量的检测。结果 HPV总阳性率72.54%;高危型中以HPV16、45和18亚型为主,分别占39.81%、24.76%和9.22%;低危型中以HPV6和11亚型为主,分别占20.87%和6.80%。多重感染率占26.21%,主要以双重感染为主85.19%;而外阴尖锐湿疣占多重感染比例高达40.74%。从慢性子宫颈炎到宫颈鳞状细胞癌发展过程中,HPV阳性率呈上升趋势,且病毒平均载量也呈上升趋势。CINⅡ级组、CINⅢ级组、鳞状细胞癌组和外阴尖锐湿疣组分别与慢性子宫颈炎组之间比较统计学差异有显著性意义(P<0.05);而CINⅠ级组和腺癌组分别与慢性子宫颈炎组之间比较统计学差异无显著性意义(P>0.05)。在慢性子宫颈炎组、CINⅢ级组及鳞状细胞癌组中均以感染HPV16亚型为主,且平均载量呈上升趋势。结论宫颈病变与HPV感染密切相关,随着病变程度的增加病毒载量增加。 展开更多
关键词 宫颈癌 宫颈鳞状上皮内瘤变 人乳头瘤病毒 石蜡包埋
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多重聚合酶链反应分析石蜡包埋组织多肿瘤抑制基因探讨
7
作者 胡春萍 黄健 王国华 《广西医科大学学报》 CAS 2000年第5期791-793,共3页
目的 :建立一种敏感、特异和快速检测石蜡包埋组织中多肿瘤抑制基因 (MTS1 )的方法。方法 :利用改良的 DNA制备方法 ,成功的从甲醛固定、石蜡包埋组织中提取出 DNA,同时用建立的多重聚合酶链反应 (PCR)进行检测。结果 :30例石蜡包埋的... 目的 :建立一种敏感、特异和快速检测石蜡包埋组织中多肿瘤抑制基因 (MTS1 )的方法。方法 :利用改良的 DNA制备方法 ,成功的从甲醛固定、石蜡包埋组织中提取出 DNA,同时用建立的多重聚合酶链反应 (PCR)进行检测。结果 :30例石蜡包埋的正常组织与新鲜组织提取的 DNA经 PCR扩增后 ,电泳图谱都出现 5 36 bp和 310 bp带 ,即结果相同。结论 :只要提取、纯化得当 ,石蜡包埋组织在分子生物学研究领域中将有重要应用价值。 展开更多
关键词 石蜡包埋 多肿瘤抑制基因 DNA PCR
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石蜡包埋的石棉肺癌组织的基因组DNA的快速提取法
8
作者 付德辰 刘秉慈 +3 位作者 缪庆 王海华 尤宝荣 马旭 《卫生研究》 CAS CSCD 北大核心 1996年第4期204-205,共2页
建立了从少量石蜡包埋的组织切片中快速提取石棉肺癌组织中的基因组ＤＮＡ的水煮脱蜡法，克服了传统的二甲苯脱蜡法的周期长、成本高和毒性大的缺点。所得到的基因组ＤＮＡ中，长片段占较大的比例，总量可足够用作１０～２０次ＰＣＲ扩... 建立了从少量石蜡包埋的组织切片中快速提取石棉肺癌组织中的基因组ＤＮＡ的水煮脱蜡法，克服了传统的二甲苯脱蜡法的周期长、成本高和毒性大的缺点。所得到的基因组ＤＮＡ中，长片段占较大的比例，总量可足够用作１０～２０次ＰＣＲ扩增反应的模板。 展开更多
关键词 石蜡包埋 石棉 DNA提取 肺肿瘤
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福尔马林固定石蜡包埋组织中DNA提取 被引量：32
9
作者 谭卓毅 丁梅 王保捷 《法医学杂志》 CAS CSCD 2006年第6期455-458,共4页
由于甲醛介导的DNA损伤和石蜡对DNA提取的阻碍作用,使得常规DNA提取方法很难从福尔马林固定石蜡包埋组织(FFPET)中获取高质量的DNA。近年来,众多学者的研究表明,通过改良预处理方法,优化蛋白酶K消化作用,简化DNA提取步骤,纯化DNA提取物... 由于甲醛介导的DNA损伤和石蜡对DNA提取的阻碍作用,使得常规DNA提取方法很难从福尔马林固定石蜡包埋组织(FFPET)中获取高质量的DNA。近年来,众多学者的研究表明,通过改良预处理方法,优化蛋白酶K消化作用,简化DNA提取步骤,纯化DNA提取物等,可以有效提高FFPET中提取的DNA质量,为FFPET的DNA分析奠定了基础。 展开更多
关键词 福尔马林固定 石蜡包埋组织 DNA提取
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TUNEL技术原位观察肝细胞凋亡 被引量：16
10
作者 李江 王文亮 +2 位作者 王文勇 刘斌 王泊云 《华人消化杂志》 1998年第6期491-494,共4页
目的采用ＴＵＮＥＬ技术对福尔马林固定、石蜡包埋的肝组织和培养肝癌细胞进行染色，以探讨肝细胞凋亡的形态特征和分布．方法使用德国宝灵曼公司生产的原位末端标记试剂盒．石蜡包埋组织经微波处理后，行常规ＴＵＮＥＬ染色，观察凋亡... 目的采用ＴＵＮＥＬ技术对福尔马林固定、石蜡包埋的肝组织和培养肝癌细胞进行染色，以探讨肝细胞凋亡的形态特征和分布．方法使用德国宝灵曼公司生产的原位末端标记试剂盒．石蜡包埋组织经微波处理后，行常规ＴＵＮＥＬ染色，观察凋亡细胞的形态和分布．结果ＴＵＮＥＬ阳性信号为黄绿色或黄色荧光，位于胞核，呈小圆形或环行．ＴＵＮＥＬ阳性细胞大多在形态学上表现为凋亡的细胞．对肝组织ＴＵＮＥＬＬＩ的分析显示，肝癌组织中细胞凋亡指数（０３９５）比肝硬变（００７５）和癌旁肝组织（０１０５）要高，且癌组织恶性程度越高，这种凋亡就越显著．结论改进的ＴＵＮＥＬ技术对福尔马林固定、石蜡包埋的难处理组织进行染色是一个有效的方法． 展开更多
关键词 TUNEL技术 原位观察 肝细胞凋亡 肝肿瘤
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肺癌石蜡包埋组织及新鲜标本组织芯片制备方法学探讨 被引量：17
11
作者 韩瑞刚 张建中 +4 位作者 黄英武 郑燕华 赵尔增 周金莲 张卫国 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 2002年第4期404-407,共4页
目的 :探讨和建立石蜡包埋组织和新鲜冷冻标本制备组织芯片的方法 ,以及在基因表达分析中的应用。方法 :选取肺癌石蜡包埋组织 90例 ,新鲜液氮冻存肺癌及癌旁肺组织 2 0例 ,常规切片HE染色下确定穿刺部位 ,石蜡包埋组织芯片制作按Konone... 目的 :探讨和建立石蜡包埋组织和新鲜冷冻标本制备组织芯片的方法 ,以及在基因表达分析中的应用。方法 :选取肺癌石蜡包埋组织 90例 ,新鲜液氮冻存肺癌及癌旁肺组织 2 0例 ,常规切片HE染色下确定穿刺部位 ,石蜡包埋组织芯片制作按Kononem等方法 (1998) ,每例穿取 0 6mm组织柱 2条 ,制备 180点阵组织芯片 ;而新鲜组织芯片参考Fejzo等方法 (2 0 0 1) ,并略作改良 ,制备 5 0点阵组织芯片。所有组织芯片模块 ,经 4 μm切片、常规组织学染色和免疫组化染色 ,以评价其在形态学及基因表达分析中应用的可行性。结果 :180点阵石蜡包埋肺癌组织芯片 ,组织排列整齐 ,HE染色后组织形态可观察率在 98%以上 ;p5 3、c myc、bcl 2、bax和Ki 6 7等免疫组化染色后 ,肺癌组织可见不同程度的抗原表达 ,组织点阵的形态可观测率在 89%～ 95 %之间。新鲜组织芯片经HE染色后 ,形态可观测率和基因表达可分析率在 70 %左右。结论 :手工法组织芯片制备简便易行 ,使用组织少 ,不破坏原蜡块 ;实验均一性、可比性好 ,且节省试剂。与常规组织切片相比 ,2点 0 6mm组织可以获得原蜡块 95 %以上的信息 ,完全可以用于组织形态学和蛋白水平上的基因表达分析 ;新鲜组织芯片技术已经初步建立 ,但尚有待于进一步完善制备技术和mRNA分析方法。 展开更多
关键词 肺癌 石蜡包埋组织 新鲜标本组织芯片 制备 方法学
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石蜡包埋软组织肉瘤中融合基因表达的检测及其诊断学价值 被引量：15
12
作者 李锋 李新霞 +9 位作者 常彬 庞丽娟 杨江华 胡文浩 陆天才 李洪安 王坚 陆红芬 孙孟红 施达仁 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第18期1518-1522,共5页
目的　探讨检测软组织肉瘤组织中特异性染色体易位融合基因表达的诊断学意义。方法　运用一步法RT PCR技术检测 10 5例石蜡包埋软组织肉瘤 ,包括 30例滑膜肉瘤、15例横纹肌肉瘤(RMS)、2 5例尤因肉瘤 /外周原始神经外胚层瘤 (ES/pPNET)... 目的　探讨检测软组织肉瘤组织中特异性染色体易位融合基因表达的诊断学意义。方法　运用一步法RT PCR技术检测 10 5例石蜡包埋软组织肉瘤 ,包括 30例滑膜肉瘤、15例横纹肌肉瘤(RMS)、2 5例尤因肉瘤 /外周原始神经外胚层瘤 (ES/pPNET)、12例隆突性皮肤纤维肉瘤 (DFSP)、14例腺泡状软组织肉瘤 (ASPS)、3例平滑肌肉瘤 (LMS)、2例恶性纤维组织细胞瘤 (MFH)、2例纤维肉瘤和2 0例对照组肿瘤组织中特异性染色体易位融合基因SSX1/SSX2 SYT、PAX3/PAX7 FKHR、EWS FLI1、COL1A1 PDGFB、ASPL TFE3的表达。结果　 30例滑膜肉瘤中 ,2 8例 ( 93 3% )检出SYT SSX融合基因的表达 ,其中 14例表达SYT SSX1,9例表达SYT SSX2 ;6例腺泡型RMS 4例表达PAX3/PAX7 FKHR ,其余9例胚胎型和多形性RMS均无PAX FKHR表达 ;80 % ( 2 0 / 2 5 )的ES/pPNET中表达EWS FLI1或EWS ERG ;12例DFSP中 8例 ( 6 7% )检出COL1A1 PDGFB融合基因的表达 ,14例ASPS中 10例 ( 71% )检出融合基因ASPL TFE3的表达。 3例LMS、2例MFH、2例纤维肉瘤和对照组 2 0例肿瘤组织中均未检出上述易位融合基因的表达。结论　软组织肉瘤特异性染色体易位融合基因的表达是其分子诊断的可靠指标 ,一步法RT PCR技术检测染色体易位融合基因为临床软组织肉瘤疑难病例的诊断? 展开更多
关键词 表达 融合基因 软组织肉瘤 检出 易位 诊断学 石蜡包埋 一步法RT-PCR 性染色体 特异性
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在石蜡切片中进行微切割-PCR-银染的方法 被引量：11
13
作者 黄智达 黄琼 来茂德 《中华医学遗传学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第6期429-431,共3页
目的　探索在石蜡切片中应用微切割 - PCR-银染技术 ,检测大肠癌的微卫星不稳定性和杂合性缺失。方法　用微切割技术在 2 8例石蜡切片中提取淋巴细胞和间质细胞、癌旁粘膜腺管、不典型增生腺管、腺瘤腺管和腺癌细胞 ,每例至少包含 3种... 目的　探索在石蜡切片中应用微切割 - PCR-银染技术 ,检测大肠癌的微卫星不稳定性和杂合性缺失。方法　用微切割技术在 2 8例石蜡切片中提取淋巴细胞和间质细胞、癌旁粘膜腺管、不典型增生腺管、腺瘤腺管和腺癌细胞 ,每例至少包含 3种类型细胞 ,经蛋白酶 K消化后 ,直接用于 PCR扩增 ,产物进行8%变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 -银染。共进行了 TGF-βR (A) 1 0 、h MSH2 (A) 2 6 - Bat2 6 ,h MSH3(A) 8,h MSH6(C) 84个微卫星位点的检测。结果　 h MSH3(A) 8和 h MSH6 (C) 8位点在 2 8例标本全部扩增出目的片段 ,而TGF-βR (A) 1 0 和 h MSH2 (A) 2 6 位点则分别有 2 3例、2 2例扩增出目的片段 ,且 h MSH2 (A) 2 6 位点有 5例癌细胞呈阳性 ,其中 1例同时有腺瘤细胞阳性。结论　微切割 - PCR-银染技术应用于石蜡切片 ,可获得较满意的结果 。 展开更多
关键词 微切割 石蜡切片 大肠癌 微卫星不稳定性 PCR
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胸腹水恶性肿瘤病理细胞学检查分析 被引量：12
14
作者 张玉文 《中国医学创新》 CAS 2012年第9期11-12,共2页
目的:比较恶性胸腹水几种细胞学检查的优缺点,探讨恶性胸腹水病理细胞学诊断的最佳途径。方法:对每例胸腹水行普通离心沉淀涂片、TCT制片,部分疑难病例结合沉渣包埋及免疫组化检查。结果:127例恶性胸腹水中,普通离心沉淀涂片诊断127例,... 目的:比较恶性胸腹水几种细胞学检查的优缺点,探讨恶性胸腹水病理细胞学诊断的最佳途径。方法:对每例胸腹水行普通离心沉淀涂片、TCT制片,部分疑难病例结合沉渣包埋及免疫组化检查。结果:127例恶性胸腹水中,普通离心沉淀涂片诊断127例,TCT诊断127例,沉渣包埋诊断38例,免疫组化诊断24例。结论:普通离心沉淀涂片、TCT、沉渣包埋和免疫组化是恶性胸腹水细胞学的重要检查方法,普通离心沉淀涂片适于一般良恶性胸腹水,沉渣包埋和免疫组化适于复查和疑难病例,而TCT制片技术尚待改进。 展开更多
关键词 胸腹水 细胞学 涂片 TCT 沉渣包埋
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石蜡包埋组织中4种DNA提取方法的比较研究 被引量：8
15
作者 张旭垠 易晓芳 +1 位作者 丁景新 丰有吉 《中国妇幼健康研究》 2007年第4期291-293,共3页
目的探讨石蜡包埋组织中提取DNA的简易有效方法。方法取我院2003年肿瘤细胞减灭术切除的10%甲醛固定石蜡包埋的上皮性卵巢癌标本20例,分别以一步法、氯化钠盐析法、酚氯仿抽提法、试剂盒法提取其DNA,然后进行电泳和聚合酶链反应扩增分... 目的探讨石蜡包埋组织中提取DNA的简易有效方法。方法取我院2003年肿瘤细胞减灭术切除的10%甲醛固定石蜡包埋的上皮性卵巢癌标本20例,分别以一步法、氯化钠盐析法、酚氯仿抽提法、试剂盒法提取其DNA,然后进行电泳和聚合酶链反应扩增分析。结果酚氯仿抽提法所得样本DNA的产量为55.12±8.81μg,氯化钠盐析法为58.39±5.76μg,两者比较无显著差异(P>0.05),但分别和另外两组相比有显著差异(P<0.001);酚氯仿抽提法所得样本DNA的OD260/OD280比值为1.81±0.16,氯化钠盐析法为1.84±0.18,两者比较无显著差异(P>0.05),但分别和另外两组相比有显著差异(P<0.01);酚氯仿抽提法,氯化钠盐析法所得DNA产量和质量均高于一步法和试剂盒法。结论蛋白酶K消化氯化钠盐析法简便快捷,不用接触有毒的化学药品,是理想的石蜡包埋组织DNA提纯方法。 展开更多
关键词 DNA提取 聚合酶链反应 石蜡包埋组织 氯化钠盐析法
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两种石蜡包埋组织DNA提取方法的比较 被引量：9
16
作者 张晓萍 刘辉 +2 位作者 袁健 冯振兴 李勇 《兰州大学学报（医学版）》 CAS 2009年第1期35-37,共3页
目的比较两种不同的DNA提取方法对DNA质量的影响。方法选取石蜡包埋的病理组织24例,采用二甲苯脱蜡法和改良TES水浴法提取DNA。通过对所提DNA的浓度、纯度及完整性的检测,比较两种DNA提取方法的优劣。结果二甲苯脱蜡法提取样品D_(260)/D... 目的比较两种不同的DNA提取方法对DNA质量的影响。方法选取石蜡包埋的病理组织24例,采用二甲苯脱蜡法和改良TES水浴法提取DNA。通过对所提DNA的浓度、纯度及完整性的检测,比较两种DNA提取方法的优劣。结果二甲苯脱蜡法提取样品D_(260)/D_(280)比值在1.6～1.8之间的为62.5%,电泳条带清晰可见;改良TES水浴法提取样品D_(260)/D_(280)比值在1.6～1.8之间的为41.2%,电泳条带模糊不清。结论二甲苯脱蜡法提取DNA简单快速,需要的组织样品少,是一个值得推荐的石蜡包埋组织DNA的提取方法。 展开更多
关键词 石蜡包埋组织 DNA 比较
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不同染色组织切片及不同组织固定方法对检测STR基因座的影响 被引量：7
17
作者 王坚 刘开会 +4 位作者 徐俊波 郭燕霞 邱宁 季安全 常彩琴 《刑事技术》 2003年第2期24-26,共3页
目的探讨不同染色组织切片及不同组织固定方法对DNA检验的影响。方法采用Chelex100法及浓缩纯化方法提取DNA,PCR扩增后310型遗传分析仪检测。结果福尔马林固定4天以内或70%乙醇、无水乙醇分别固定1年及15年的HE染色切片可以检见Amel及9... 目的探讨不同染色组织切片及不同组织固定方法对DNA检验的影响。方法采用Chelex100法及浓缩纯化方法提取DNA,PCR扩增后310型遗传分析仪检测。结果福尔马林固定4天以内或70%乙醇、无水乙醇分别固定1年及15年的HE染色切片可以检见Amel及9个STR基因座。PTAH等5种特殊染色未能检出相应基因座DNA谱带。结论70%乙醇或无水乙醇固定组织,石腊包埋组织及HE染色切片可以作为DNA?STR检验鉴定的样本材料。 展开更多
关键词 组织固定方法 染色组织切片 DNA—STR检验 福尔马林 法医学
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石蜡包埋淋巴组织三种微量DNA提取方法的比较 被引量：6
18
作者 齐宗利 韩西群 +2 位作者 黄宏宇 朱梅刚 赵彤 《中国实验诊断学》 2006年第4期351-355,共5页
目的为寻找一种高效、简便、实用的石蜡组织中DNA提取方法，本研究比较了三种不同的DNA提取方法对DNA质量的影响。方法选取淋巴相关组织的蜡块21例。三种DNA提取方法分别是简单消化煮沸法，酚／氯仿提纯法和试剂盒法。通过提取DNA的浓... 目的为寻找一种高效、简便、实用的石蜡组织中DNA提取方法，本研究比较了三种不同的DNA提取方法对DNA质量的影响。方法选取淋巴相关组织的蜡块21例。三种DNA提取方法分别是简单消化煮沸法，酚／氯仿提纯法和试剂盒法。通过提取DNA的浓度和纯度、PCR扩增保守序列pglobin等方法，比较三种DNA提取方法的优劣。结果试剂盒法提取样品OD260／OD280平均比值位于1．6～1．8之间；提纯法位于1．3—1．5之间；简单消化煮沸法位于1，2—1．3之间。三种方法中，试剂盒法提取的DNA最为稳定。以3种DNA提取方法所获取DNA为模板，PCR扩增阳性率无统计学差异。结论从实用、快速、经济的角度综合分析，简单消化煮沸法简单快速，需要的组织样品少，是一个值得推荐的石蜡组织DNA提取方法。 展开更多
关键词 石蜡包埋组织 PCR DNA提取
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石蜡包埋组织中DNA提取方法的对比研究 被引量：8
19
作者 宋丽新 高兴华 +1 位作者 张士发 宋芳吉 《中国麻风皮肤病杂志》 2006年第4期268-269,共2页
目的：探讨石蜡包埋组织中提取DNA的简易有效方法。方法：将58份10％福尔马林固定、石蜡包埋组织标本按保存时间分为1-5年组和6～10年组，采用微卫星引物PCR扩增技术对“一步法”和酚氯仿法进行DNA检出率的比较研究。结果：58份标本中... 目的：探讨石蜡包埋组织中提取DNA的简易有效方法。方法：将58份10％福尔马林固定、石蜡包埋组织标本按保存时间分为1-5年组和6～10年组，采用微卫星引物PCR扩增技术对“一步法”和酚氯仿法进行DNA检出率的比较研究。结果：58份标本中“一步法”和酚氯仿法总阳性数分别为45份和32份（P〈0．05）；其中35份保存1～5年标本中，“一步法”和酚氯仿法阳性数分别为29份和24份（P〉0．05）；23份保存6～10年标本中，“一步法”和酚氯仿法阳性数分别为16份和8份（P〈0．05）。结论：“一步法”标本用量少、DNA检出率高且简便易行，尤其对保存较长时问的石蜡标本是一种值得推荐的方法。 展开更多
关键词 石蜡包埋组织 聚合酶链反应 DNA
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石蜡包埋人体组织DNA分型的研究 被引量：5
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作者 周毅 严红 +2 位作者 李万水 张大安 李俊涛 《刑事技术》 2003年第4期17-18,共2页
目的研究石蜡包埋人体组织的DNA提取方法对其STR分型的影响,并建立石蜡包埋组织的DNA提取方法。方法经不同预处理条件后采用Chelex-100法提取石蜡包埋人体组织中的DNA,用不同的反应体系进行STR复合扩增检验。结果经福尔马林固定、石蜡... 目的研究石蜡包埋人体组织的DNA提取方法对其STR分型的影响,并建立石蜡包埋组织的DNA提取方法。方法经不同预处理条件后采用Chelex-100法提取石蜡包埋人体组织中的DNA,用不同的反应体系进行STR复合扩增检验。结果经福尔马林固定、石蜡包埋的人体组织直接采用Celex-100法提取DNA与65℃水浴除蜡后采用Celex-100法提取DNA均可获得满意的DNA分型。结论该方法简便易行,实验效果好,适合检案。 展开更多
关键词 DNA提取 石蜡包埋组织 STR分型 影响因素 复合扩增检验 预处理条件
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