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灵芝多糖对大鼠胰岛细胞分泌胰岛素功能的影响 被引量：32
1
作者 张慧娜 林志彬 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2003年第3期265-268,共4页
目的 :探讨灵芝多糖 (Gl PS)对胰岛细胞分泌胰岛素的影响。方法 :分离大鼠胰岛细胞 ,分别观察在葡萄糖为 5 .6和 1 6.7mmol·L- 1 时 ,Gl PS对胰岛细胞分泌胰岛素的影响。进一步加入不同的抑制剂观察Gl PS对胰岛细胞分泌胰岛素的影... 目的 :探讨灵芝多糖 (Gl PS)对胰岛细胞分泌胰岛素的影响。方法 :分离大鼠胰岛细胞 ,分别观察在葡萄糖为 5 .6和 1 6.7mmol·L- 1 时 ,Gl PS对胰岛细胞分泌胰岛素的影响。进一步加入不同的抑制剂观察Gl PS对胰岛细胞分泌胰岛素的影响。采用Westernblotting观察Gl PS对胰岛细胞葡萄糖转运蛋白 2 (GLUT2 )表达的影响。结果 :在 5 .6mmol·L- 1葡萄糖时 ,1 0 0mg·L- 1 的Gl PS可明显促进胰岛细胞胰岛素的分泌 ;当葡萄糖浓度为 1 6.7mmol·L- 1 时 ,5 0和 1 0 0mg·L- 1 的Gl PS均可明显促进胰岛细胞胰岛素的分泌。维拉帕米或维拉帕米 +EGTA均可显著抑制 5 .6和 1 6.7mmol·L- 1 葡萄糖时胰岛素的分泌 ,维拉帕米只能部分抑制Gl PS的促胰岛素分泌作用 ,而维拉帕米 +EGTA则可完全抑制Gl PS的这种作用。在葡萄糖浓度为 5 .6和 1 6.7mmol·L- 1 时 ,Gl PS 5 0和 1 0 0mg·L- 1 均能明显促进胰岛细胞GLUT2的蛋白表达。结论 :Gl PS可能通过促进胰岛细胞GLUT2蛋白的表达从而有助于葡萄糖转运入B细胞 ,促进葡萄糖的代谢 ,引起胰岛细胞外Ca2 + 展开更多
关键词 灵芝多糖 胰岛细胞 胰岛素功能 葡萄糖转运蛋白2 抑制剂
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高压静电场制备微胶囊的研究 被引量：29
2
作者 李保国 华泽钊 刘占杰 《上海理工大学学报》 EI CAS 2000年第3期189-193,共5页
在自行研制的高压静电成囊装置上进行了制备微胶囊的试验研究. 以海藻酸钠在氯化钙中固化成囊方法,进行了平针头与斜针头的成囊电压、跳火电压对比试验研究,得出平针头优于斜针头的结果;分析了电压、推进速度、液面距等参数变化对制成... 在自行研制的高压静电成囊装置上进行了制备微胶囊的试验研究. 以海藻酸钠在氯化钙中固化成囊方法,进行了平针头与斜针头的成囊电压、跳火电压对比试验研究,得出平针头优于斜针头的结果;分析了电压、推进速度、液面距等参数变化对制成的微胶囊直径和均匀度的影响;对于1.5%的海藻酸钠溶液和7# 平针头,得到满足胰岛细胞团微胶囊化要求的较佳参数组合为电压5kV,推进速度50mm/h,液面距20mm. 展开更多
关键词 微胶囊 胰岛细胞 制备 高压静电场 海澡酸钠
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胰岛微循环与胰岛功能 被引量：8
3
作者 李新 袁莉 《国际内科学杂志》 CAS 2008年第12期709-712,共4页
胰岛微循环是维持胰岛结构和功能的基础，每个胰岛由1—5个动脉供应血液，动脉分支为毛细血管后在胰岛内形成血管球框架，胰岛细胞位于血管球内，从血管中摄取营养物质及氧气。胰岛微循环受局部合成的生物活性分子、神经系统及胰岛分泌... 胰岛微循环是维持胰岛结构和功能的基础，每个胰岛由1—5个动脉供应血液，动脉分支为毛细血管后在胰岛内形成血管球框架，胰岛细胞位于血管球内，从血管中摄取营养物质及氧气。胰岛微循环受局部合成的生物活性分子、神经系统及胰岛分泌激素等调节，与胰岛功能关系密切，参与糖尿病胰岛功能障碍发生发展过程，是糖尿病防治研究的新视角。 展开更多
关键词 胰岛 微循环 胰岛功能 糖尿病
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长期酒精摄入对大鼠胰岛的影响及与氧化应激关系的探讨 被引量：7
4
作者 付元华 孙秀发 +5 位作者 曲巍 郭军旗 刘烈刚 应晨江 郝丽萍 杨雪锋 《卫生研究》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期440-443,共4页
目的　探讨了活性氧和一氧化氮 (NO)在其中的可能作用 ,以研究长期酒精摄入对胰岛影响的机制。方法　对照组灌以 6ml kgBW的蒸馏水 ,低、中、高各剂量组的无水乙醇剂量分别为 0 4 8、1 4 4及 2 4 0g kgBW ,时间为 1 3周。实验结束时... 目的　探讨了活性氧和一氧化氮 (NO)在其中的可能作用 ,以研究长期酒精摄入对胰岛影响的机制。方法　对照组灌以 6ml kgBW的蒸馏水 ,低、中、高各剂量组的无水乙醇剂量分别为 0 4 8、1 4 4及 2 4 0g kgBW ,时间为 1 3周。实验结束时检测了血糖和血胰岛素 ,用免疫组化及图象分析法分析了大鼠的胰岛结构参数 (从各组随机选 1 0只 ) ,并检测了其余大鼠血清和胰腺组织中的自由基反应水平。结果　 (1 )与对照组相比 ,高剂量组雌雄大鼠的血糖升高 ,血胰岛素下降 ,胰岛素免疫反应阳性物面积与胰腺组织面积百分比(Ins+ panc)及胰岛素免疫反应阳性物面积与胰岛组织面积百分比 (Ins+ Isl)均降低 (P <0 0 5 )。 (2 )与对照组相比 ,高剂量组雌雄大鼠血清和胰腺组织中的总超氧化物歧化酶 (T SOD)降低 ,NO、活性氧及丙二醛 (MDA)含量升高 ;而低剂量组雌雄大鼠血清中的T SOD和谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH Px)升高 ,NO、活性氧及MDA含量下降 (P <0 0 5 )。结论　长期过量饮酒可通过引起胰腺氧化损伤而使胰岛功能受损 ,这可能是酒精引起患糖尿病危险性增高的原因之一。而长期适量饮酒可使抗氧化能力增强 。 展开更多
关键词 酒精 血糖 胰岛 氧化应激
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固定化猪胰腺细胞移植治疗糖尿病小鼠的实验观察 被引量：9
5
作者 唐天华 姜枫勤 +2 位作者 王美岭 张胜兰 刘金生 《中华器官移植杂志》 CAS CSCD 1994年第4期171-172,共2页
用链脲霉素制备合格的糖尿病模型小鼠２４只，随机分为３组：对照１组为生理盐水组，对照２组为植入猪胰腺细胞组，治疗组为植入用免疫隔离膜包裹的猪胰腺细胞组。植入量均为１００ｍｇ。结果表明：治疗组小鼠在完全停用胰岛素的情况下... 用链脲霉素制备合格的糖尿病模型小鼠２４只，随机分为３组：对照１组为生理盐水组，对照２组为植入猪胰腺细胞组，治疗组为植入用免疫隔离膜包裹的猪胰腺细胞组。植入量均为１００ｍｇ。结果表明：治疗组小鼠在完全停用胰岛素的情况下，于第７天左右血糖水平可降至８．１１±３．０６ｍｍｏｌ／Ｌ并能维持２～４．５个月，与对照１、２组１９．６７±２．４５ｍｍｏｌ／Ｌ和１３。４４±２，５７ｍｍｏｌ／Ｌ相比均有显著差异（Ｐ＜０．０１；Ｐ＜０．０５）。可见免疫隔离膜具有良好的生物膜性，可以有效地避免宿主抗移植物的排斥反应，使猪胰腺细胞在小鼠体内仍具有生物功能。 展开更多
关键词 免疫隔离膜 胰腺细胞 糖尿病 血糖
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过量酒精摄入对大鼠细胞因子及胰岛的影响 被引量：6
6
作者 曲巍 孙秀发 +5 位作者 付元华 郭军旗 刘烈刚 郝丽萍 毛丽梅 杨年红 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2004年第10期1174-1175,共2页
目的　研究长期酒精摄入对大鼠胰岛功能的影响 ,以及白细胞介素Iβ(IL - 1β)、肿瘤坏死因子α(TNF -α)、白细胞介素 6 (IL - 6 )在其中的作用。方法　清洁级Wistar大鼠 80只 (雌雄各半 )给予不同浓度的酒精溶液(10 % ,30 % ,5 0 % )... 目的　研究长期酒精摄入对大鼠胰岛功能的影响 ,以及白细胞介素Iβ(IL - 1β)、肿瘤坏死因子α(TNF -α)、白细胞介素 6 (IL - 6 )在其中的作用。方法　清洁级Wistar大鼠 80只 (雌雄各半 )给予不同浓度的酒精溶液(10 % ,30 % ,5 0 % )灌胃。于实验第 13周末 ,断头处死大鼠 ,分离血清和胰腺分别检测血清中血糖、胰岛素、IL - 1β、TNF -α和IL - 6以及胰腺组织中IL - 1β、TNF -α和IL - 6水平。 结果　 5 0 %酒精雌雄大鼠组血清胰岛素水平降低 ,空腹血糖升高 ,血清IL - 1β、TNF -α、IL - 6水平升高 ,与正常对照组相比均有显著性差异 (P <0 0 5 ) ;胰腺组织中 ,5 0 %酒精雌性大鼠组IL - 1β、TNF -α、IL - 6和雄性大鼠IL - 1β、TNF -α水平升高。雄性大鼠IL - 6在各组间无显著性差异。结论　IL - 1β、TNF -α、IL - 6可能参与了长期过量酒精摄入而引起的胰岛 β细胞功能障碍。 展开更多
关键词 酒精 胰岛 血糖 胰岛素 IL-1Β TNF-Α IL-6
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游离脂肪酸对大鼠胰岛细胞体外分泌功能的影响 被引量：7
7
作者 惠晓丽 王惠芳 +2 位作者 刘惊涛 刘靖芳 徐利 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期173-175,188,共4页
目的探讨饱和脂肪酸软脂酸和单不饱和脂肪酸油酸对大鼠胰岛细胞体外分泌胰岛素功能的影响。方法体外分离大鼠胰岛细胞,分为:①浓度梯度组,将0.125、0.250、.5 mmol/L软脂酸(PA)和油酸(OA)分别与胰岛细胞共培养48 h;②时间梯度组,将0.25 ... 目的探讨饱和脂肪酸软脂酸和单不饱和脂肪酸油酸对大鼠胰岛细胞体外分泌胰岛素功能的影响。方法体外分离大鼠胰岛细胞,分为:①浓度梯度组,将0.125、0.250、.5 mmol/L软脂酸(PA)和油酸(OA)分别与胰岛细胞共培养48 h;②时间梯度组,将0.25 mmol/L软脂酸、油酸及二者的混合物与胰岛细胞共培养24、487、2 h,进行葡萄糖刺激胰岛素释放试验,放射免疫法检测培养液中胰岛素浓度。结果①浓度梯度组,不同浓度PA和OA组葡萄糖刺激后胰岛素分泌水平均明显减少,浓度越高胰岛素分泌越少,高浓度时(0.5 mmol/L),高糖刺激下OA组胰岛素分泌高于PA组;②时间梯度组,PA、OA及混合组,葡萄糖刺激后胰岛素分泌水平均明显减少,随时间延长,胰岛素分泌逐渐减低;相同时间段,各组胰岛素分泌无差异(P>0.05)。结论PA和OA对大鼠胰岛细胞分泌功能均有一定的抑制作用,呈剂量依赖性,PA抑制程度呈时间依赖性;高浓度时PA抑制程度大于OA;OA对PA诱导的胰岛细胞分泌功能损伤无保护及协同效应。 展开更多
关键词 游离脂肪酸 软脂酸 油酸 胰岛细胞 葡萄糖刺激的胰岛素分泌
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地骨皮对实验性糖尿病小鼠胰岛免疫组织化学的影响 被引量：7
8
作者 沈桂月 文永植 +1 位作者 金政 李相伍 《延边医学院学报》 CAS 1990年第3期179-181,共3页
以四氧嘧啶实验性糖尿病小鼠为对照组,以口服地骨皮水煎剂的实验性糖尿病小鼠为实验组,分别在病期第1周与第2周,用免疫组织化学方法,对胰岛和胰鸟B细胞的形态结构进行了观察.结果表明,地骨皮对实验性糖尿病小鼠胰岛B细胞的形态结构损害... 以四氧嘧啶实验性糖尿病小鼠为对照组,以口服地骨皮水煎剂的实验性糖尿病小鼠为实验组,分别在病期第1周与第2周,用免疫组织化学方法,对胰岛和胰鸟B细胞的形态结构进行了观察.结果表明,地骨皮对实验性糖尿病小鼠胰岛B细胞的形态结构损害有一定的减轻作用. 展开更多
关键词 地骨皮 糖尿病 胰岛 免疫组织化学
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联合阻断CD28和可诱导共刺激分子对小鼠同种异体胰岛移植物急性排斥反应的影响 被引量：6
9
作者 赵国华 张佳林 +4 位作者 许国岩 钟鑫平 李铁民 赵宁 刘永锋 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期417-419,共3页
目的在小鼠同种异体胰岛移植模型上,通过联合阻断CD28和可诱导共刺激分子(ICOS),观察CTLA-4Ig及ICOS单克隆抗体(ICOSmAb)对胰岛移植物功能的影响。方法将小鼠随机分成4组,每组10只。联合阻断组:分别于移植后0、2、4 d和1、3、5 d腹腔内... 目的在小鼠同种异体胰岛移植模型上,通过联合阻断CD28和可诱导共刺激分子(ICOS),观察CTLA-4Ig及ICOS单克隆抗体(ICOSmAb)对胰岛移植物功能的影响。方法将小鼠随机分成4组,每组10只。联合阻断组:分别于移植后0、2、4 d和1、3、5 d腹腔内注射CTLA-4Ig 50μg/ kg和ICOSmAb 100μg/kg体重组。ICOS组:移植后1、3、5 d腹腔内注射ICOSmAb 100μg/kg体重组。CTLA4组:移植后0、2,4d腹腔内注射CTLA-4Ig 50μg/kg体重组。对照组:单纯胰岛移植,不做CT- LA-4Ig和ICOSmAb处理组。观察术后移植物存活时间和病理改变,RT-PCR检测移植组织中IL-2、IL-10mRNA表达,流式细胞仪检测CD4^+、CD8^+T淋巴细胞表达。结果联合阻断组小鼠移植物存活时间平均为(31.00±6.57)d,较其他3组延长,差异有统计学意义(P<0.05);IL-2和IL-10 mRNA表达水平分别为(44.23±6.24)和(65.23±11.02),与其他3组比较,IL-2 mRNA表达差异有统计学意义(P<0.05),而IL-10mRNA表达差异无统计学意义(P>0.05);CD4^+、CD8^+T淋巴细胞荧光阳性百分率分别为(13.73±0.49)%和(14.56±0.31)%,表达上调均不明显;移植胰岛光镜检查接近正常。结论应用CTLA-4Ig和ICOSmAb联合阻断CD28和ICOS,可以明显抑制胰岛移植物排斥反应。 展开更多
关键词 胰岛 移植 排斥反应
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饱和脂肪酸对胰岛β细胞凋亡和细胞周期进程的影响 被引量：5
10
作者 崔巍 黄葶 +1 位作者 刘均利 施秉银 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期301-306,共6页
目的探讨饱和脂肪酸棕榈酸(pal mitate acids,PA)对MIN6胰岛β细胞生长、增殖及凋亡的影响,研究诱导MIN6细胞凋亡,抑制细胞周期进程的可能细胞分子机制。方法采用MTT法检测细胞活力,流式细胞仪测定细胞周期,Annexin-Ⅴ/FITC/PI双标记流... 目的探讨饱和脂肪酸棕榈酸(pal mitate acids,PA)对MIN6胰岛β细胞生长、增殖及凋亡的影响,研究诱导MIN6细胞凋亡,抑制细胞周期进程的可能细胞分子机制。方法采用MTT法检测细胞活力,流式细胞仪测定细胞周期,Annexin-Ⅴ/FITC/PI双标记流式细胞术检测细胞凋亡。应用Western blot检测细胞周期相关蛋白cyclin D1和CDK4的表达水平,以及抗凋亡蛋白家族(IAP)XIAP和cIAP-2的表达水平。结果和对照组相比:①不同浓度PA显著抑制MIN6细胞增殖(P<0.01);②不同浓度PA作用均呈时间与剂量依赖性诱导MIN6细胞凋亡(P<0.01);③PA亦能显著抑制细胞周期进程,使MIN6细胞周期更多滞留在G0/G1期(P<0.01),G2/M期与S期细胞比例降低(P<0.01);④用Western blot检测发现:和对照组相比,PA降低磷酸化AKT、XIAP和cIAP-2的表达水平(P<0.01),以及降低细胞周期蛋白CDK4、cyclin D1(P<0.01)的表达水平。结论PA能抑制胰岛β细胞的生长、增殖和诱导凋亡,可能是通过降低cyclin D1和CDK4活性,使细胞滞留在G0/G1期,抑制细胞周期进程,影响其复制;同时降低抗凋亡蛋白XIAP和cIAP-2的活性,促使细胞的凋亡。 展开更多
关键词 胰岛细胞 饱和脂肪酸 增殖 凋亡
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胰岛素作用对胰岛β细胞磷脂酶Cγ1表达的影响 被引量：4
11
作者 李广文 焦凯 《第四军医大学学报》 北大核心 2009年第19期1944-1946,共3页
目的:观察胰岛素对大鼠胰岛β细胞内磷脂酶Cγ1(PLCγ1)表达的影响.方法:大鼠胰岛分离纯化.通过HE染色观察纯化胰岛的形态特征,采用免疫组织化学方法并结合激光扫描共聚焦显微镜和图像分析技术对胰岛β细胞表达不同时间(0,30,60,120,240... 目的:观察胰岛素对大鼠胰岛β细胞内磷脂酶Cγ1(PLCγ1)表达的影响.方法:大鼠胰岛分离纯化.通过HE染色观察纯化胰岛的形态特征,采用免疫组织化学方法并结合激光扫描共聚焦显微镜和图像分析技术对胰岛β细胞表达不同时间(0,30,60,120,240min)内的PLCγ1进行半定量分析.结果:PLCγ1在胰腺的内外分泌部均有表达.与0min比较,胰岛素作用30,60min时胰岛β细胞表达的PLCγ1荧光强度有明显降低(P<0.05);而在240min时PLCγ1荧光强度与0min比较无明显差别.结论:胰岛素作用60min内可使PLCγ1表达下调;胰岛素-PLCγ1途径参与了胰岛素的信息传递. 展开更多
关键词 磷脂酶Cγ1 胰岛素 胰岛 Β细胞
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急性高血糖影响小鼠第一时相胰岛素分泌的机制 被引量：5
12
作者 赵一楠 周迎生 +1 位作者 颜迪恩 高秀莹 《中国实验动物学报》 CSCD 北大核心 2017年第5期479-485,共7页
目的观察急性高血糖影响小鼠第一时相胰岛素分泌的功能及形态学变化特点。方法给C57/BL 6J小鼠完成颈静脉插管后输注20%高糖溶液4 h,建立急性糖毒性小鼠模型,行腹腔葡萄糖耐量实验(intraperitoneal glucose tolerance test,IPGTT)及口... 目的观察急性高血糖影响小鼠第一时相胰岛素分泌的功能及形态学变化特点。方法给C57/BL 6J小鼠完成颈静脉插管后输注20%高糖溶液4 h,建立急性糖毒性小鼠模型,行腹腔葡萄糖耐量实验(intraperitoneal glucose tolerance test,IPGTT)及口服葡萄糖耐量实验(oral glucose tolerance test,OGTT)评价葡萄糖耐量及胰岛素分泌功能。HE染色及电镜观察胰岛形态变化及细胞内胰岛素分泌颗粒亚细胞结构变化。结果 IPGTT实验中急性糖毒性组15 min血糖值较对照组显著增加[(10.3±0.33)mmol/L vs(19.3±1.66)mmol/L],上升87%(P<0.05),OGTT实验中30 min血糖值较对照组显著增加[(9.8±0.31)mmol/L vs(18.16±1.01)mmol/L],升高85%(P<0.05),且早期胰岛素分泌高峰受损且分泌延迟。GSIS实验中急性糖毒性组在基础状态时(葡萄糖浓度2.8 mmol/L)和高糖(16.7 mmol/L)刺激后,胰岛素分泌较对照组显著降低[(0.481±0.003)ng/m L vs(0.702±0.121)ng/m L,(2.43±0.03)ng/m L vs(4.07±0.34)ng/m L],分别下降46%和67%(P<0.05);胰岛素含量测定结果显示,急性糖毒性组比对照组降低[(97.01±2.05)ng/m L vs(65.12±0.42)ng/m L,(121.40±0.58)ng/m L vs(62.7±0.48)ng/m L],下降49%和94%(P<0.05)。HE染色显示急性糖毒性胰岛边界不规则、内部细胞排列不整;透射电镜可见细胞内胰岛素分泌颗粒空泡,线粒体嵴断裂。结论急性葡萄糖毒性使胰岛β细胞内胰岛素储备减少,导致第一时相分泌胰岛素峰值降低及延迟。 展开更多
关键词 胰岛 急性高血糖试验 糖耐量试验 胰岛素分泌 组织学 超微结构 小鼠
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新生期小鼠胰岛分离纯化方法的研究 被引量：4
13
作者 朱嘉瑜 王晓兢 +2 位作者 张勤凤 徐一力 武晓泓 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期766-770,共5页
目的:探讨新生期小鼠胰岛分离纯化方案。方法:采用胰腺局部充盈、胶原酶Ⅴ消化,对比不同消化时间及单纯显微镜下手挑胰岛或Histopaque-1077纯化对胰岛得率的影响,并通过胰岛素/胰高血糖素双染后流式细胞术检测胰岛β和α细胞构成比例。... 目的:探讨新生期小鼠胰岛分离纯化方案。方法:采用胰腺局部充盈、胶原酶Ⅴ消化,对比不同消化时间及单纯显微镜下手挑胰岛或Histopaque-1077纯化对胰岛得率的影响,并通过胰岛素/胰高血糖素双染后流式细胞术检测胰岛β和α细胞构成比例。结果:在1 mg/ml酶浓度下,1周和3周小鼠胰岛的最适消化时间分别为23 min(胰岛/胰腺38.11±2.78)和25 min(胰岛/胰腺66.06±2.61)。1周以直径<50μm胰岛居多(P<0.01),而3周以50～99μm者居多(P<0.01)。单纯手挑组胰岛得率显著高于Histopaque-1077纯化组(P<0.05)。所得胰岛存活率和纯度均>90%,且存在β和α细胞构成比例的动态变化(P<0.05)。结论:胰腺局部充盈、胶原酶Ⅴ消化后镜下手挑胰岛是一种较好的新生期小鼠胰岛分离纯化方法,消化时间和纯化方法是其重要影响因素。 展开更多
关键词 新生期 小鼠 胰岛 分离纯化
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胶原酶浓度对大鼠胰岛分离纯化产量的影响 被引量：4
14
作者 蒋小峰 高玲 +5 位作者 钱滔来 陈松伟 王业增 向广阳 钱世鹍 陈德 《临床医学工程》 2011年第4期492-494,共3页
目的观察胶原酶浓度对大鼠胰岛分离纯化产量的影响,筛选出获取高产量胰岛的最佳消化液的胶原酶浓度。方法 75只雄性SD大鼠按胶原酶浓度分为5组：Ⅰ组（0.5 mg/ml）、Ⅱ组（0.75 mg/ml）、Ⅲ组（1.0 mg/ml）Ⅳ组（1.2 mg/ml）和Ⅴ组（1.5... 目的观察胶原酶浓度对大鼠胰岛分离纯化产量的影响,筛选出获取高产量胰岛的最佳消化液的胶原酶浓度。方法 75只雄性SD大鼠按胶原酶浓度分为5组：Ⅰ组（0.5 mg/ml）、Ⅱ组（0.75 mg/ml）、Ⅲ组（1.0 mg/ml）Ⅳ组（1.2 mg/ml）和Ⅴ组（1.5 mg/ml）,每组15只。通过胆灌注胶原酶V来消化大鼠胰腺,分离胰岛,采用不连续密度梯度Ficoll离心法纯化胰岛,根据胰岛直径计数所获胰岛的数量及胰岛当量,并利用葡萄糖刺激胰岛素释放试验评估胰岛功能。结果分离的大鼠胰岛具有较好的质量,胰岛纯度为95%左右,活性率为90%左右,体外培养生长良好。随着胶原酶的浓度增加,胰岛数量和胰岛当量明显增加（P〈0.05）,并且最大直径的胰岛数量也在增加（P〈0.05）,在胶原酶浓度1.0 mg/ml时获得的胰岛产量最高,其次为1.2 mg/ml,在其他浓度时,胰岛产量都较低（P〈0.05）。在低糖和高糖刺激下胰岛素的释放分别为（1.346±0.128）ng/ml和（2.565±0.208）ng/ml,差异具有显著性意义（P〈0.05）,刺激指数为（1.908±0.152）,提示胰岛细胞功能良好,电镜照片显示胰岛生长状况良好。结论进行大鼠胰岛分离纯化时最适宜的胶原酶浓度为1.0~1.2 mg/ml,可获得稳定高产量的胰岛,过低和过高的浓度都是不适宜的。 展开更多
关键词 胶原酶浓度 大鼠 胰岛 产量
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海参磷脂型二十碳五烯酸对糖尿病大鼠血葡萄糖耐量的影响 被引量：4
15
作者 徐雷雷 王静凤 +2 位作者 柳东 龙腾腾 薛长湖 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第10期1398-1402,共5页
目的研究海参磷脂型二十碳五烯酸(eicosapentaeno-ic acid phosphatidylcholine,EPA-PC)对链脲佐菌素(streptozo-cin,STZ)诱导的糖尿病大鼠血葡萄糖耐量的影响。方法两次腹腔注射STZ建立糖尿病大鼠模型,经不同剂量的海参EPA-PC(25和75 m... 目的研究海参磷脂型二十碳五烯酸(eicosapentaeno-ic acid phosphatidylcholine,EPA-PC)对链脲佐菌素(streptozo-cin,STZ)诱导的糖尿病大鼠血葡萄糖耐量的影响。方法两次腹腔注射STZ建立糖尿病大鼠模型,经不同剂量的海参EPA-PC(25和75 mg.kg-1,以EPA含量计)灌胃60 d。实验结束后,分别检测大鼠空腹血糖(fasting blood-glucose,FBG)、口服葡萄糖耐量(oral glucose tolerance test,OGTT)、糖化血红蛋白(glycated hemoglobin,HbAlc)、糖化血清蛋白(glycated serum protein,GSP)、空腹血清胰岛素(fasting insu-lin,FIN)含量,并分别采用光镜和电镜观察胰腺组织的显微结构和胰岛β细胞的亚显微结构。结果海参EPA-PC可明显改善糖尿病大鼠OGTT(P<0.05),降低HbAlc和GSP的含量(P<0.01),促进FIN的分泌(P<0.01);明显改善胰腺组织的显微结构,修复受损胰岛β细胞的亚显微结构。结论海参EPA-PC对糖尿病大鼠具有明显改善血葡萄糖耐量的作用,其与恢复糖尿病大鼠受损的胰岛外周组织以及胰岛β细胞有关。 展开更多
关键词 海参 多不饱和脂肪酸 二十碳五烯酸 糖尿病 空腹血糖 糖化血红蛋白 糖化血清蛋白 胰岛
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大鼠胰岛分离条件的优化 被引量：3
16
作者 陈晓波 秦杰 +4 位作者 焦洋 董维平 李永翔 钟翠平 谭建明 《现代生物医学进展》 CAS 2007年第2期166-168,共3页
目的:优化大鼠胰岛分离纯化的条件,为胰岛移植实验奠定基础。方法:通过胆总管灌注胶原酶P来消化大鼠胰腺,分离胰岛,采用不连续密度梯度Ficoll离心法纯化胰岛,观察胶原酶浓度、消化时间以及大鼠体重对胰岛分离结果的影响。双硫腙染色鉴... 目的:优化大鼠胰岛分离纯化的条件,为胰岛移植实验奠定基础。方法:通过胆总管灌注胶原酶P来消化大鼠胰腺,分离胰岛,采用不连续密度梯度Ficoll离心法纯化胰岛,观察胶原酶浓度、消化时间以及大鼠体重对胰岛分离结果的影响。双硫腙染色鉴定胰岛,丫啶橙/碘丙啶染色鉴定胰岛细胞活率,糖刺激胰岛素释放试验评价胰岛功能。结果:胶原酶浓度、消化时间以及大鼠体重对胰岛分离结果有重要影响。1mg/ml胶原酶P在37℃静止消化45分钟条件下,胰岛分离效果最佳,效果较其他酶浓度和消化时间条件下好(P＜0．05)。体重350g的大鼠的胰岛收获量778．33±80．21IEQ/胰腺,而体重250g的大鼠的胰岛收获量655．00±56．56 IEQ/胰腺(P＜0．05)。优化条件下分离的胰岛其纯度＞90%,胰岛细胞活率＞90%,低糖(2．8mmol/L)、高糖(16．7mmol/L)刺激胰岛素释放分别为(5．40±1．75)mIU/L/30IEQ,(12．27±2．55)mIU/L/30IEQ(P＜0．05),刺激指数为2．33±0．29。结论:胶原酶浓度、消化时间以及大鼠体重影响胰岛分离结果,优化分离条件可改善大鼠胰岛分离结果。 展开更多
关键词 大鼠 胰岛 分离 纯化
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新生小鼠胰岛增殖及口袋蛋白家族、E2F转录因子表达变化 被引量：4
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作者 朱嘉瑜 王晓兢 +5 位作者 张勤凤 徐一力 吕颖钺 张洁 吴雨洁 武晓泓 《中华糖尿病杂志》 CAS CSCD 2013年第11期678-682,共5页
目的 观察新生小鼠胰岛细胞、细胞周期和视网膜母细胞瘤蛋白（Rb）、视网膜母细胞瘤样蛋白1（p107）、视网膜母细胞瘤样蛋白2（p130）及E2F转录因子的变化特点,探讨其与胰岛细胞增殖的关系.方法 采用免疫组化法检测出生第1、3和8周小鼠... 目的 观察新生小鼠胰岛细胞、细胞周期和视网膜母细胞瘤蛋白（Rb）、视网膜母细胞瘤样蛋白1（p107）、视网膜母细胞瘤样蛋白2（p130）及E2F转录因子的变化特点,探讨其与胰岛细胞增殖的关系.方法 采用免疫组化法检测出生第1、3和8周小鼠胰岛β/α细胞量、单个细胞面积和细胞数量的变化.采用胶原酶消化法分离纯化小鼠胰岛,以流式细胞术检测细胞周期,实时定量PCR及蛋白印迹技术检测Rb、p107、p130和E2F转录因子mRNA和蛋白表达.结果 （1）小鼠3周和8周胰岛β/α细胞量显著高于1周（P＜0.05）;单个β/α细胞面积在3周时无明显差异,8周时扩大1.7倍（P＜0.01）;而β/α细胞数量在3周增加约3.5/3.7倍（P＜0.01）,8周与3周无明显差异.（2）1周和3周时G0/G1期细胞比8周明显减少（81.3±1.2、82.8±3.3比92.6±1.3,F=6.5,P＜0.05）,而G2/M期显著增多（13.4±1.4、12.2±1.8比5.5±0.5,F=6.3,P＜0.05）,细胞增殖指数明显增加（P＜0.05）.（3）8周时Rb mRNA表达明显低于1周和3周（P＜0.01）;3周和8周时p107 mRNA显著低于1周（P＜0.05）,而p130 mRNA显著高于1周（P＜0.05）,E2F-1、E2F-2 mRNA均显著低于1周（均P＜0.01）;8周时E2F-3 mRNA显著低于1周（P＜0.05）;而E2F-4、E2F-5 mRNA在3周和8周时表达增加.（4）8周时Rb和p107蛋白表达均比1周明显降低,p130表达显著增高,3周和8周时E2F1表达显著降低（均P＜0.05）.结论 新生小鼠胰岛细胞量扩增明显,以细胞数量增加为主,细胞增殖显著.Rb、p107、p130及其相关E2F转录因子的表达存在动态变化,可能参与细胞增殖的调控. 展开更多
关键词 胰岛 增殖 新生期 口袋蛋白家族 E2F转录因子
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db/db小鼠胰岛的分离与特征分析
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作者 叶泽岚 吴莹 +5 位作者 宋益康 林悦 李蓝齐 蔡娟娟 杨超 傅红兴 《肝胆胰外科杂志》 CAS 2023年第4期230-232,251,共4页
目的分离db/db小鼠胰岛,并对其特征进行检测和分析。方法采用胶原酶V对10只db/db小鼠胰岛分离进行逆行胰管灌注和消化,用Ficoll-1077和Ficoll-1119进行胰岛的不连续密度梯度纯化,对分离的胰岛进一步进行手工挑选,并用DTZ进行胰岛和纯度... 目的分离db/db小鼠胰岛,并对其特征进行检测和分析。方法采用胶原酶V对10只db/db小鼠胰岛分离进行逆行胰管灌注和消化,用Ficoll-1077和Ficoll-1119进行胰岛的不连续密度梯度纯化,对分离的胰岛进一步进行手工挑选,并用DTZ进行胰岛和纯度鉴定,用透射电镜观察胰岛内部分泌颗粒等情况。结果经本方法分离可得到db/db小鼠胰岛数量为(122.4±6.6)个/只,当量为(483.6±82.3)IEQ/只,与ICR小鼠胰岛分离结果差异有统计学意义(P<0.05);db/db小鼠胰岛DTZ染色后显淡红色;胰岛大小指数为(3.96±0.64),显著大于ICR小鼠胰岛(P<0.05);透射电镜下显示β细胞中的胰岛素分泌颗粒减少,分泌颗粒颜色较浅。结论采用本方法可分离得到db/db小鼠胰岛,为后续开展基于胰岛功能和特征变化的2型糖尿病患者治疗研究提供一种参考。 展开更多
关键词 DB/DB小鼠 胰岛 分离 鉴定
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老年人群空腹血糖水平与胰岛B细胞功能关系的研究 被引量：3
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作者 范爱红 叶山东 +1 位作者 陈燕 谈敏 《中华老年医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期590-592,共3页
目的探讨老年人群空腹血糖水平与胰岛B细胞功能的关系。方法276例入选者根据空腹血糖（FBG）水平分为：健康对照组（A组）：FBG＜5.6 mmol/L；B组：5.6～6.9 mmol/L；C组：FBG 7.0～7.9 mmol/L；D组：FBG 8.0～9.9 mmol／L；E组：FBG 1... 目的探讨老年人群空腹血糖水平与胰岛B细胞功能的关系。方法276例入选者根据空腹血糖（FBG）水平分为：健康对照组（A组）：FBG＜5.6 mmol/L；B组：5.6～6.9 mmol/L；C组：FBG 7.0～7.9 mmol/L；D组：FBG 8.0～9.9 mmol／L；E组：FBG 10.0～11.9 mmol/L；F组：FBG 12.0～14.9；G组：FBG≥15.0 mmol/L。均行口服葡萄糖耐量试验（OGTT）或馒头餐-胰岛素释放试验,并测定空腹胰岛素原。结果（1）胰岛素曲线下面积（INSAUC）和空腹胰岛素,与A组比较,B组和C组明显增高（P〈0.05）,C组至G组逐渐减低；（2）Homa-B细胞功能指数（HBCI）和糖负荷后30 min净增胰岛素/净增葡萄糖比值（△I30/△G30）,B组至G组呈逐渐降低趋势（P〈0.05或P〈 0.01）；（3）空腹胰岛素原和胰岛素原/胰岛素比值,B组至G组呈逐渐增高趋势（P〈0.05或P0.01）。结论空腹血糖是简单而实用反映老年人群胰岛B细胞功能的指标,空腹血糖越高,胰岛B细胞功能越差。 展开更多
关键词 血糖 胰岛 糖尿病 2型
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五指山小型猪胰岛分离和纯化的初步研究 被引量：3
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作者 蒋小峰 钱滔来 +5 位作者 向广阳 王业增 陈松伟 杨学伟 章乐虹 陈德 《临床医学工程》 2011年第9期1343-1344,1347,共3页
目的探讨封闭群五指山小型猪胰岛的分离和纯化,并在体外检测分离纯化后的胰岛对高低糖刺激反应来判定胰岛功能。方法 7只雄性五指山小型猪和6只普通成年猪的胰腺分别被用于胰岛分离纯化实验研究。胰腺获取后,胰管插管并注入消化液(胶原... 目的探讨封闭群五指山小型猪胰岛的分离和纯化,并在体外检测分离纯化后的胰岛对高低糖刺激反应来判定胰岛功能。方法 7只雄性五指山小型猪和6只普通成年猪的胰腺分别被用于胰岛分离纯化实验研究。胰腺获取后,胰管插管并注入消化液(胶原酶V,1.8g/L),胰腺充分灌注后,切成碎块并转入消化罐内消化,消化液过滤后并经梯度离心后,收集纯化的胰岛,经双硫宗(DTZ)染色后计数,并在不同浓度葡萄糖培养液里检测释放的胰岛素浓度来判定胰岛的活性。结果小型猪胰腺解剖上更接近人类,胰腺消化时间平均为(30±8)min,消化程度为(70±8)%,胰岛产量纯化前为(5500±1025)IEQ/g,纯化后为(4120±625)IEQ/g,纯度为85%,活力为80%;取自屠宰场猪胰岛产量纯化前为(2500±625)IEQ/g,纯化后为(1720±435)IEQ/g,活力为60%。镜下观察,小型猪胰岛镜下可被DTZ染色呈红色,纯化后的胰岛大小一致,形态完整,体外培养小型猪胰岛在低糖和高糖刺激下胰岛素释放分别为(1.346±0.128)ng/mL和(2.565±0.208)ng/mL,差异有显著性意义(P<0.05),刺激指数为(1.908±0.152),而取自屠宰场猪胰岛素释放分别为(1.246±0.18)ng/mL和(1.4±0.208)ng/mL,差异无显著性。结论封闭群五指山小型猪胰腺解剖结构和人类相似,分离纯化后的胰岛产量高,功能良好,适合异种胰岛移植。 展开更多
关键词 小型猪 胰岛 异种 移植
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