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题名竹节参粗多糖的初步纯化工艺研究
被引量：5
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作者
许彬
陈平
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机构
武汉工业学院生物与制药工程系
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出处
《武汉工业学院学报》
CAS
2008年第4期5-8,共4页
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文摘
先用乙醇对竹节参粗多糖进行分步醇沉以脱除色素,利用Sevag法、TCA法和木瓜蛋白酶法对其进行脱蛋白,以多糖回收率和蛋白损失率为考察指标,比较三种方法对竹节参粗多糖脱蛋白的效果。实验结果表明,进行5次醇沉,最终乙醇浓度为50%时沉淀出乳白色的粗多糖。Sevag法脱蛋白率80.5%,多糖回收率24%;TCA法脱蛋白率59.8%,多糖回收率47.3%;木瓜蛋白酶法脱蛋白率86.7%,多糖回收率为87.9%。可见,木瓜蛋白酶法能有效去除竹节参粗多糖中的蛋白质。
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关键词
竹节参多糖
乙醇
Sevag法
TcA法
木瓜蛋白酶法
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Keywords
panax japonicus. c. A. mey polysaccharide
ethyl alcohol
sevag method
TcA method
caroid method
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分类号
S567.3
[农业科学—中草药栽培]
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题名竹节参根状茎总RNA提取方法的研究与优化
被引量：3
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作者
吴亚运
张绍鹏
赵小龙
宋佳
陈平
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机构
武汉轻工大学生物与制药工程学院
湖北道地药材分子生物学实验室
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出处
《武汉轻工大学学报》
CAS
2015年第3期11-15,共5页
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基金
湖北省教育厅科学研究青年项目(Q20141704)
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文摘
针对竹节参根状茎质地坚硬、植物纤维多,富含多糖、酚类、蛋白质及其他多种次生代谢产物的特点,研究竹节参根状茎总RNA提取方法。分别运用Trizol法、Total RNA Kit植物提取试剂法、CTAB法进行总RNA的提取。借鉴人参根组织RNA的提取经验,根据竹节参的自身特点,有针对性的对CTAB法和Trizol法进行了优化,样品裂解后中加入PVPP(聚乙烯聚吡咯烷酮)和B-巯基乙醇去除酚类,并加入乙酸钠营造出高浓度钠离子环境去除多糖,之后再加入70%高氯酸钠溶液去除蛋白质,并对提取的总RNA进行电泳和OD值检测与分析。优化后的3种方法进行对比发现,对于竹节参总RNA的提取效果有较大差异,其中优化的Trizol法提取的RNA电泳28S、18S条带清晰,比值约为2:1,经紫外光谱分析OD260/OD280比值为1.93,OD260/OD230比值为2.07,获得了纯度高、完整性好的总RNA。进一步以优化的Trizol法提取所得RNA为模版进行反转录,并做RT-PCR,结果表明,RT-PCR的带型特异稳定,优化方法提取的总RNA质量稳定可靠,适用于基因表达等后续分子生物学研究。优化的Trizol法是一种适合于竹节参根状茎总RNA抽提的简单快速有效的方法。
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关键词
竹节参
RNA提取
RT-PcR
根状茎
多糖
多酚
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Keywords
panax japonicus c.A.mey
RNA extraction
RT-PcR
rhizomes
polysaccharide
polyphenol
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分类号
Q949
[生物学—植物学]
TQ460.6
[化学工程—制药化工]
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