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人参皂苷前体工程酵母的构建 被引量:2
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作者 梁彦龙 赵寿经 +3 位作者 徐立新 刘丽 何沐阳 孙尧 《吉林大学学报(工学版)》 EI CAS CSCD 北大核心 2011年第5期1513-1516,共4页
从人参发根中通过RT-PCR扩增了人参达玛烯二醇合成酶基因。并利用这一基因和酵母表达载体pAUR123构建了产达玛烯二醇的转基因酿酒酵母。阳性克隆经短梗霉素A抗性粗筛,并经PCR、SDS-PAGE和TLC验证。研究结果表明,这一酵母能够表达人参达... 从人参发根中通过RT-PCR扩增了人参达玛烯二醇合成酶基因。并利用这一基因和酵母表达载体pAUR123构建了产达玛烯二醇的转基因酿酒酵母。阳性克隆经短梗霉素A抗性粗筛,并经PCR、SDS-PAGE和TLC验证。研究结果表明,这一酵母能够表达人参达玛烯二醇合成酶,并产生达玛烯二醇。达玛烯二醇合成酶在整个酵母生长期内均有表达。达玛烯二醇合成酶活和达玛烯二醇水平在YDP液体培养基中培养36 h和42 h时达到最高,分别为132U/g干细胞和251μg/L。 展开更多
关键词 生物工程 达玛烯二醇合成酶 人参发根 酿酒酵母
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人参发根长期冷冻保存方法的研究 被引量:1
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作者 钱延春 王迪 +2 位作者 梁彦龙 曹豪杰 赵寿经 《特产研究》 2013年第2期29-34,56,共7页
本试验对人参发根长期冷冻保存方法进行了研究。首先对人参发根预培养的培养基成分进行了选择;然后通过对人参发根预培养时间、玻璃化前处理时间和玻璃化脱水时间的正交试验,确定主次因素:玻璃化脱水时间>预培养时间>玻璃化前处... 本试验对人参发根长期冷冻保存方法进行了研究。首先对人参发根预培养的培养基成分进行了选择;然后通过对人参发根预培养时间、玻璃化前处理时间和玻璃化脱水时间的正交试验,确定主次因素:玻璃化脱水时间>预培养时间>玻璃化前处理时间;最后对人参发根长期冷冻保存3种具体方式进行了研究,确定了先将人参发根在预培养基上培养7d,然后经玻璃化处理90min(前处理30min+脱水90min)后,在液氮中超低温(-196℃)速冻1d,最后转移到-80℃冰箱中长期冷冻保存的有效方法,为深入开展相关研究奠定了基础。本试验还对冷冻保存前后人参发根的生长活力、总皂苷、总蛋白和总糖的含量,以及过氧化氢酶等主要生理生化指标进行了测定。利用PCR技术对冷冻保存前后人参发根T-DNA上的主要基因进行了分析,确定该冷冻保存方法对人参发根遗传稳定性无影响。 展开更多
关键词 人参发根 长期冷冻保存 玻璃化脱水 遗传稳定性
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Triton X-100对人参发根皂苷分泌和合成的影响
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作者 梁彦龙 赵寿经 +3 位作者 王倩 李梦婷 林曦 窦博 《吉林大学学报(工学版)》 EI CAS CSCD 北大核心 2016年第3期1013-1016,共4页
研究了促渗透剂Triton X-100对人参发根皂苷分泌的影响,结果表明:质量分数为2%的Triton X-100可以有效促进人参皂苷的分泌,同时也能增强发根人参皂苷的生物合成量。此外,在Triton X-100作用下,人参皂苷生物合成关键酶基因达玛烯二醇合... 研究了促渗透剂Triton X-100对人参发根皂苷分泌的影响,结果表明:质量分数为2%的Triton X-100可以有效促进人参皂苷的分泌,同时也能增强发根人参皂苷的生物合成量。此外,在Triton X-100作用下,人参皂苷生物合成关键酶基因达玛烯二醇合成酶基因的表达得到了增强。 展开更多
关键词 生物化学工程 人参发根 人参皂苷 TRITON X-100 分泌
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