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天然药物化学史话:岩沙海葵毒素的全合成 被引量：12
1
作者 李骘 刘诣 +2 位作者 李力更 王磊 史清文 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2013年第18期2630-2633,共4页
岩沙海葵毒素(palytoxin,PTX)是从海洋生物软体珊瑚Palytoa toxicus中发现的具有非常复杂且结构新颖、特殊的天然有机化合物,其化学全合成的成功令化学家叹为观止。主要对岩沙海葵毒素全合成战略做简要介绍。
关键词 岩沙海葵毒素 化学全合成 海洋药物 天然产物 海洋生物
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岩沙海葵毒素人工抗原的合成及鉴定 被引量：4
2
作者 刘必勇 焦红 王家骥 《中国生化药物杂志》 CAS CSCD 2005年第4期196-199,共4页
目的制备岩沙海葵毒素(PTX)的人工抗原和抗血清,为建立PTX的酶联免疫检测方法提供技术基础.方法用小分子succinimidyl 3-(2-pyridyldithio) propionate(SPDP)将PTX巯基化成半抗原PTX-PDP,用2-iminothiolane将大分子载体蛋白质匙眼血蓝蛋... 目的制备岩沙海葵毒素(PTX)的人工抗原和抗血清,为建立PTX的酶联免疫检测方法提供技术基础.方法用小分子succinimidyl 3-(2-pyridyldithio) propionate(SPDP)将PTX巯基化成半抗原PTX-PDP,用2-iminothiolane将大分子载体蛋白质匙眼血蓝蛋白(KLH)巯基化成KLH-SH,再将PTX-PDP和KLH-SH反应合成人工抗原PTX-PDP-KLH免疫雌性6～8周龄Balb/c小鼠,进行多抗的制备.用同样的方法制备酶联免疫反应之包被抗原PTX-PDP-BSA,用于检测血清抗体效价.结果根据紫外检测图谱,PTX的最大吸收波长在264 nm处,KLH及BSA的最大吸收波长在278及279 nm处,而合成的人工抗原PTX-PDP-KLH和PTX-PDP-BSA的最大吸收波长分别在267和273 nm处.抗血清经间接酶联免疫吸附法检测,效价达到1∶3 200,且与正常Balb/c小鼠、昆明种小鼠及兔血清间无交叉反应.结论合成的人工抗原纯度高,具有较好的免疫原性. 展开更多
关键词 岩沙海葵毒素 人工抗原 酶联免疫吸附分析
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海洋生物岩沙海葵毒素血清免疫抗体的制备 被引量：1
3
作者 焦红 刘必勇 +3 位作者 郭素珍 席静 林峰 王家骥 《检验检疫科学》 2005年第2期3-6,共4页
〔目的〕　为建立岩沙海葵毒素(PTX)的酶联免疫快速测试方法提供特异性免疫抗体。〔方法〕　巯基化标准PTX成半抗原PTX -PDP ;巯基化匙眼血蓝蛋白(KLH)成KLH -SH ,两者合成反应人工抗原PTX -PDP -KLH。用PTX -PDP -KLH免疫雌性6～8周龄B... 〔目的〕　为建立岩沙海葵毒素(PTX)的酶联免疫快速测试方法提供特异性免疫抗体。〔方法〕　巯基化标准PTX成半抗原PTX -PDP ;巯基化匙眼血蓝蛋白(KLH)成KLH -SH ,两者合成反应人工抗原PTX -PDP -KLH。用PTX -PDP -KLH免疫雌性6～8周龄Balb/c小鼠,制备PTX多克隆抗体。用同样方法制备包被抗原PTX-PDP -BSA ,用以检测血清抗体效价。〔结果〕　紫外检测标准品PTX的最大吸收波长在2 6 4nm处,纯品KLH及BSA的最大吸收波长在2 78nm及2 79nm处,小鼠血清多克隆抗体PTX -PDP -KLH和PTX -PDP -BSA的最大吸收波长分别在2 6 7nm和2 73nm处。抗血清效价达到1:32 0 0 ,与正常Balb/c小鼠、昆明小鼠及兔血清间无交叉反应。〔结论〕　合成的PTX人工抗原纯度高,成功制备PTX多克隆抗体血清。 展开更多
关键词 免疫抗体 制备 毒素 海葵 Balb/c小鼠 生物岩 最大吸收波长 多克隆抗体 海洋 血清抗体效价 FIX 人工抗原 PDP BSA 测试方法 酶联免疫 血蓝蛋白 合成反应 包被抗原 紫外检测 交叉反应 昆明小鼠 抗体血清 巯基化 特异性
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核酸适配体对岩沙海葵毒素细胞毒性的拮抗作用
4
作者 童启聆 程鼎原 +6 位作者 高思懿 邹彬 亓茉言 邓博文 李振钢 孙铭娟 王梁华 《海军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第12期1391-1396,共6页
目的 探究核酸适配体对岩沙海葵毒素(PLTX)细胞毒性的拮抗作用。方法 采用细胞毒性实验分别检测并比较PLTX对小鼠胚胎成纤维细胞株NIH-3T3、仓鼠卵巢细胞亚株CHO-K1及人永生化角质形成细胞株HaCaT的毒性作用,以及核酸适配体13-S3对PLTX... 目的 探究核酸适配体对岩沙海葵毒素(PLTX)细胞毒性的拮抗作用。方法 采用细胞毒性实验分别检测并比较PLTX对小鼠胚胎成纤维细胞株NIH-3T3、仓鼠卵巢细胞亚株CHO-K1及人永生化角质形成细胞株HaCaT的毒性作用,以及核酸适配体13-S3对PLTX细胞毒性的拮抗作用(PLTX与适配体的浓度比例均为1∶1)。采用红细胞溶血实验检测PLTX对绵羊红细胞的溶血作用,以及适配体对PLTX溶血活性的抑制作用。结果 细胞毒性实验结果显示,HaCaT细胞的IC50为(1.24±0.93)nmol/L,CHO-K1细胞的IC50为(3.95±0.78)×10^(-3)nmol/L,NIH-3T3细胞的IC50为(5.18±1.92)×10^(-3)nmol/L。与PLTX对照组比较,各浓度(9.3×10^(-4)、9.3×10^(-3)、9.3×10^(-2)、9.3×10^(-1)、9.3、93.3 nmol/L)PLTX+适配体13-S3组的HaCaT细胞存活率均升高(P均<0.05)。在12.5 nmol/L PLTX浓度下,与PLTX+适配体N7-T(节球藻毒素R的特异性适配体)组相比,PLTX+适配体13-S3组的溶血率下降更明显(P<0.05),表明适配体13-S3能够特异性地抑制PLTX对绵羊红细胞的溶血活性。结论 HaCaT细胞存活率对PLTX浓度变化(9.3×10^(-4)~93.3 nmol/L)具有较好的梯度响应,相应浓度的核酸适配体能够拮抗PLTX对HaCaT细胞的毒性作用。在12.5 nmol/L PLTX浓度下,相应浓度适配体能够有效抑制PLTX对绵羊红细胞的溶血活性,具有细胞保护作用。 展开更多
关键词 岩沙海葵毒素 适配体 细胞毒性 细胞保护作用
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岩沙海葵毒素的检测方法
5
作者 程鼎原 童启聆 +3 位作者 亓茉言 梁珍珍 王梁华 孙铭娟 《生命的化学》 CAS 2021年第4期851-856,共6页
贝类产品中海洋毒素的检测对保障人类健康具有重要意义,其中岩沙海葵毒素(PLTX)是一种毒性很强的天然海洋毒素,是目前已知的最具毒性的非蛋白质物质之一。岩沙海葵毒素在可食用海洋生物中积累并进入食物链,对人类健康造成威胁,亟需开发... 贝类产品中海洋毒素的检测对保障人类健康具有重要意义,其中岩沙海葵毒素(PLTX)是一种毒性很强的天然海洋毒素,是目前已知的最具毒性的非蛋白质物质之一。岩沙海葵毒素在可食用海洋生物中积累并进入食物链,对人类健康造成威胁,亟需开发快速、特异、灵敏的检测和定量方法。本文对岩沙海葵毒素的检测方法及目前进展进行综述,详细叙述了岩沙海葵毒素的小鼠生物检测法、细胞毒性实验、溶血法、酶联免疫法、液相色谱法、核酸适配体法的应用情况,并对各种研究方法的优点和缺点与局限进行了比较分析。此外,还对新型核酸适配体法的开发进行了展望。 展开更多
关键词 岩沙海葵毒素 检测方法 应用前景
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岩沙海葵毒素单克隆抗体的制备及其鉴定
6
作者 戴悦婵 焦红 王家骥 《中国热带医学》 CAS 2009年第6期1002-1003,共2页
目的建立岩沙海葵毒素(Palytoxin,PTX)高特异性单克隆抗体杂交瘤细胞株。方法将PTX偶联成具有免疫功能的PTX-PDP-KLH完全抗原,免疫雌性6～8周龄Balb/c小鼠,利用传统杂交瘤技术制备PTX单克隆抗体,并通过间接酶联免疫吸附测定(ELISA)方法... 目的建立岩沙海葵毒素(Palytoxin,PTX)高特异性单克隆抗体杂交瘤细胞株。方法将PTX偶联成具有免疫功能的PTX-PDP-KLH完全抗原,免疫雌性6～8周龄Balb/c小鼠,利用传统杂交瘤技术制备PTX单克隆抗体,并通过间接酶联免疫吸附测定(ELISA)方法筛选克隆阳性杂交瘤细胞株。结果获得能稳定分泌抗PTX单克隆抗体的杂交瘤细胞株B8,与载体蛋白没有发生交叉反应。SDS-PAGE分析表明,McAbB8在50KD和25KD处各出现一条条带,与IgG的重链和轻链的大小相符。结论研究制备了特异性单克隆抗体PTX,为进一步建立快速检测、鉴定海产品中岩沙海葵毒素的方法,奠定有效的实验基础。 展开更多
关键词 岩沙海葵毒素 单克隆抗体 酶联免疫吸附试验 SDS—PAGE
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