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铜绿假单胞菌外毒素A诱导MLE-12细胞氧化应激损伤并激活自噬 被引量：2
1
作者 王婷婷 康思静 胡天玉 《中国微生态学杂志》 CAS CSCD 2015年第10期1148-1151,共4页
目的观察铜绿假单胞菌外毒素A(PEA)对MLE-12细胞的氧化应激损伤及其自噬活动的影响。方法体外培养MLE-12细胞至对数生长期,分别采用PEA 0、200、400、800和1 000ng/mL处理细胞1h和2h,之后进一步采用PEA 1 000ng/mL处理细胞15min、30min... 目的观察铜绿假单胞菌外毒素A(PEA)对MLE-12细胞的氧化应激损伤及其自噬活动的影响。方法体外培养MLE-12细胞至对数生长期,分别采用PEA 0、200、400、800和1 000ng/mL处理细胞1h和2h,之后进一步采用PEA 1 000ng/mL处理细胞15min、30min、1h、2h和3h,应用过氧化氢试剂盒检测H2O2的生成量,Western-blot法检测微管相关蛋白1轻链3(LC3)的表达,分析LC3II与β-actin之间的比值变化。结果与对照组细胞相比较,随着PEA浓度的增高,细胞的H2O2检出量逐渐增加,PEA处理2h后,各组细胞H2O2检出量分别是对照组的1.73、2.09、3.82和5.06倍(P<0.01)。与此同时,细胞中自噬标记物LC3II的表达量显著增加。此外,高浓度PEA(1 000ng/mL)处理细胞后,随着时间的延长,H2O2检出量明显升高,同时伴随着细胞自噬活动的增强。结论 PEA可以诱导MLE-12细胞产生氧化应激损伤,并激活细胞的自噬活动。 展开更多
关键词 铜绿假单胞菌外毒素A 氧化应激 自噬
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血液PEA检测在鉴别PA感染与定植中的作用 被引量：1
2
作者 傅玉琼 周伟 +2 位作者 熊彬 湛晓勤 冉茂娟 《泸州医学院学报》 2014年第1期70-74,共5页
目的：探讨大鼠血液铜绿假单胞菌（pseudomonas aeruginosa，PA）外毒素（paeruginosa exotoxin A，PEA）检测在PA感染与定植鉴别中的价值。方法：8周龄雄性SD大鼠180只，经地塞米松抑制免疫预处理后，随机分为感染组（气管内注入0.4 m... 目的：探讨大鼠血液铜绿假单胞菌（pseudomonas aeruginosa，PA）外毒素（paeruginosa exotoxin A，PEA）检测在PA感染与定植鉴别中的价值。方法：8周龄雄性SD大鼠180只，经地塞米松抑制免疫预处理后，随机分为感染组（气管内注入0.4 ml铜绿假单胞菌混悬液）、定植组（经咽部滴入铜绿假单胞菌混悬液0.2 ml）、对照组（气管内注入0.4 ml生理盐水）。各组按处死时间不同，再分为3 D组、7 D组、11 D组，分别于接种后第3、7、11 d随机抽取各组20只大鼠，心脏采血法处死，无菌取出肺组织并抽取血样。左肺组织匀浆行铜绿假单胞菌培养并计数菌落；右肺组织HE染色，镜下观察肺组织结构；收集血液分别以实时荧光定量PCR法检测PEA DNA及ELISA法检测IL-6、IL-8、IFN-γ、TNF-α。结果：定植组、对照组大鼠各时间点肺组织均未见PA菌生长及明显炎症反应，定植组各时间点咽拭子培养见PA菌生长（其菌落计数均＞105 cfu/ml），感染组大鼠肺组织匀浆各时间点均可见PA菌生长（其菌落计数均＞104 cfu/ml）及明显炎症反应，其中以第3 d最为明显，至第7、11天有所下降。各时间点感染组大鼠血液PEA DNA及IL-6、IL-8、IFN-γ、TNF-α表达均有升高，与定植组及对照组表达差异均有统计学意义（P＜0.05），各时间点定植组及对照组大鼠血液PEA DNA及IL-6、IL-8、IFN-γ、TNF-α表达差异无统计学意义（P〉0.05），其中感染组大鼠血液PEA DNA及IL-6、IL-8、IFN-γ、TNF-α表达检测以第3 d最为显著。结论：血液PEA DNA检测对鉴别铜绿假单胞菌感染与定植有一定价值，其表达水平高低与大鼠肺组织PA菌菌落计数及肺组织炎症反应程度正相关，推测PEA DNA可能反映肺部感染程度及其预后。 展开更多
关键词 铜绿假单胞菌外毒素 感染 定植
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