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高产几丁质酶巴伦葛兹类芽孢杆菌的筛选和发酵条件优化 被引量:9
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作者 付星 闫巧娟 +3 位作者 江正强 杨鑫斌 刘竹青 杨绍青 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期625-633,共9页
【目的】鉴定一株来源于中国南海海水样能够分泌多种胞外几丁质酶的类芽孢杆菌CAU904,并优化其产几丁质酶的发酵条件。【方法】采用形态学观察、16S r DNA序列比对及生理生化实验鉴定;通过碳源、氮源、温度、初始p H、表面活性剂种类以... 【目的】鉴定一株来源于中国南海海水样能够分泌多种胞外几丁质酶的类芽孢杆菌CAU904,并优化其产几丁质酶的发酵条件。【方法】采用形态学观察、16S r DNA序列比对及生理生化实验鉴定;通过碳源、氮源、温度、初始p H、表面活性剂种类以及发酵时间的单因素优化实验获得最佳发酵条件。【结果】菌株CAU904被鉴定为巴伦葛兹类芽孢杆菌(Paenibacillus barengoltzii),其最优发酵产酶条件为:0.5%胶体几丁质,0.2%酵母浸提物,0.1%吐温-80,培养基初始p H 7.0,45°C培养72 h。在最优发酵条件下,该菌株最大产酶水平达到8.2 U/m L,比优化前提高了5.4倍。几丁质酶的酶谱分析表明该菌株能够产生多达11种具有几丁质水解活性的同工酶,其中主要酶谱带对应分子量分别为54、47和38 k D。【结论】实验结果为巴伦葛兹类芽孢杆菌几丁质酶的分离纯化和酶的应用提供了基础。 展开更多
关键词 巴伦葛兹类芽孢杆菌 几丁质酶 鉴定 发酵 优化
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巴伦葛兹类芽孢杆菌β-葡萄糖苷酶的表达、酶学性质及结构解析 被引量:1
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作者 黄平 吴世旺 +1 位作者 江正强 杨绍青 《食品科学技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期20-27,共8页
从克隆巴伦葛兹类芽孢杆菌CAU904中克隆得到一个β-葡萄糖苷酶基因,并在大肠杆菌中进行了异源表达,研究了重组酶的酶学性质,进一步解析了该酶的晶体结构。研究结果表明,该酶的最适温度和pH值分别为50℃和7. 5。该酶底物特异性较广,能够... 从克隆巴伦葛兹类芽孢杆菌CAU904中克隆得到一个β-葡萄糖苷酶基因,并在大肠杆菌中进行了异源表达,研究了重组酶的酶学性质,进一步解析了该酶的晶体结构。研究结果表明,该酶的最适温度和pH值分别为50℃和7. 5。该酶底物特异性较广,能够水解β-1,2、β-1,3、β-1,4、β-1,6-糖苷键等在内的多种糖苷键,对昆布多糖、大麦β-葡聚糖和地衣多糖等聚糖均有水解作用。晶体结构信息表明,该酶呈现糖苷水解酶(GH) 3家族典型的多结构域结构,其催化口袋由类似(α/β)_5的三明治结构域和(β/α)_8折叠桶结构域中间的loop构成,其中芳香氨基酸残基Trp748侧链提供一1位结合位点,Trp749侧链提供+1位结合位点,Trp131侧链提供+2位结合位点,这些芳香氨基酸残基形成了一个小的口袋和疏水性环境,不利于转糖苷反应。 展开更多
关键词 巴伦葛兹类芽孢杆菌 Β-葡萄糖苷酶 异源表达 酶学性质 晶体结构
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