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沉默PTTG1基因对弥漫大B淋巴瘤细胞增殖和凋亡的影响
1
作者 刘海芸 方全钢 +1 位作者 刘娜 张水生 《江西医药》 CAS 2023年第4期391-394,共4页
目的探讨小干扰RNA(siRNA)靶向沉默PTTG1基因对弥漫大B淋巴瘤细胞株OCI-LY-19增殖和凋亡的影响。方法实验分3组:siRNA-PTTG1组细胞分别转染siPTTG1-415和siPTTG1-686,siNC组细胞转染阴性siRNA,空白组细胞不转染。采用qRT-PCR和Western b... 目的探讨小干扰RNA(siRNA)靶向沉默PTTG1基因对弥漫大B淋巴瘤细胞株OCI-LY-19增殖和凋亡的影响。方法实验分3组:siRNA-PTTG1组细胞分别转染siPTTG1-415和siPTTG1-686,siNC组细胞转染阴性siRNA,空白组细胞不转染。采用qRT-PCR和Western blotting法检测mRNA和蛋白质水平并评估PTTG1沉默效率,CCK-8法检测细胞增殖活力,Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡率。结果siPTTG1-415和siPTTG1-686组OCI-LY-19细胞中PTTG1 mRNA和蛋白表达水平与空白组和siNC组相比较明显降低(P<0.05),细胞增殖活力下降(P<0.05),细胞凋亡率增加(P<0.05)。结论siRNA能靶向沉默弥漫大B淋巴瘤细胞PTTG1基因的表达,并抑制细胞增殖,促进凋亡。 展开更多
关键词 pttg1基因 弥漫性大B淋巴瘤 细胞增殖 细胞凋亡
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HCV感染通过Erk信号的激活上调PTTG1的表达 被引量：2
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作者 冯丹丹 杨硕 +2 位作者 李红霞 顾娜 闾军 《科技导报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第13期25-30,共6页
为探讨丙型肝炎病毒(HCV)感染导致肝细胞癌发生的分子机制,利用前期研究建立的体外HCV细胞培养体系,将HCVJFH-1RNA转染CD81-Huh7细胞,确定能够获得感染性HCV后,收集HCV转染后10,50,100和150d的细胞,采用RealtimePCR及WesternBlot法检测... 为探讨丙型肝炎病毒(HCV)感染导致肝细胞癌发生的分子机制,利用前期研究建立的体外HCV细胞培养体系,将HCVJFH-1RNA转染CD81-Huh7细胞,确定能够获得感染性HCV后,收集HCV转染后10,50,100和150d的细胞,采用RealtimePCR及WesternBlot法检测不同时间点细胞内垂体瘤转化基因1(PTTG1)基因和蛋白水平的表达情况,同时检测总MAPK/Erk1/2,磷酸化Erk1/2(p-Erk1/2)蛋白的表达。随后,用干扰素抑制HCV的感染,再检测PTTG1及MAPK/Erk1/2的表达情况,以及用MAPK/Erk抑制剂(PD98059)阻断MAPK/Erk1/2的磷酸化后,检测PTTG1的表达情况。结果显示,HCV转染的细胞与未转染细胞比较,PTTG1的mRNA和蛋白表达均显著增加,p-Erk1/2蛋白显著升高(P<0.05);抑制HCV感染显著降低PTTG1的表达和MAPK/Erk1/2的磷酸化(P<0.05);MAPK/Erk1/2抑制剂显著降低了PTTG1基因和蛋白的表达(P<0.05)。体外HCV感染可以导致MAPK/Erk信号通路的磷酸化,进一步导致原癌基因PTTG1的表达增加,这可能是慢性HCV感染导致HCV相关性肝细胞癌发生的分子机制之一。 展开更多
关键词 HCV感染 CD81-Huh7细胞 MAPK/ERK信号通路 pttg1基因
原文传递
RNAi技术干扰人喉癌Hep-2细胞PTTG1基因的初步研究
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作者 王云龙 孙新城 +5 位作者 徐桂超 昌静峰 李玉林 王国强 刘旺根 董彩文 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2011年第16期2913-2917,共5页
目的:探索对人PTTG1基因mRNA序列有较高干扰效率的位点,构建对PTTG1基因的表达有较高抑制效率的重组质粒。方法:筛选、合成1对互补DNA单链,退火为双链后与双酶切后的质粒载体连接,构建了表达短发夹RNA的1种重组质粒plk0.1-puro/PTTG1。... 目的:探索对人PTTG1基因mRNA序列有较高干扰效率的位点,构建对PTTG1基因的表达有较高抑制效率的重组质粒。方法:筛选、合成1对互补DNA单链,退火为双链后与双酶切后的质粒载体连接,构建了表达短发夹RNA的1种重组质粒plk0.1-puro/PTTG1。重组质粒以不同浓度转染,并于转染后不同时间收集细胞,以β-actin为内参,采用RT-PCR和Western blot技术分别检测PTTG1基因的mRNA、蛋白质的相对表达水平。结果:与空白对照组相比,6孔板中每孔转染质粒plk0.1-puro/PTTG 11000ng以上、转染超过12d时,PTTG1基因mRNA、蛋白质的相对表达水平下降70%以上。结论:重组质粒plk0.1-puro/PTTG1,在6孔细胞培养板中以1000ng/孔转染12d以上时,有效抑制了人PTTG1基因的表达,在关于PTTG1基因的研究中具有较好的应用价值。 展开更多
关键词 RNAI pttg1基因 SHRNA
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陆川猪PTTG1基因克隆及序列分析
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作者 覃兆鲜 农素群 +5 位作者 关志惠 梁旦 覃倩 蓝晞 潘天彪 谢炳坤 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2016年第9期2223-2229,共7页
试验旨在克隆陆川猪PTTG1基因全长CDS序列并对其进行生物信息学分析。利用GenBank公布的猪PTTG1预测序列设计引物,用RT-PCR扩增得到目的基因片段,并用生物信息学软件分析和预测了陆川猪PTTG1基因的理化性质与二级结构。结果表明,陆川猪P... 试验旨在克隆陆川猪PTTG1基因全长CDS序列并对其进行生物信息学分析。利用GenBank公布的猪PTTG1预测序列设计引物,用RT-PCR扩增得到目的基因片段,并用生物信息学软件分析和预测了陆川猪PTTG1基因的理化性质与二级结构。结果表明,陆川猪PTTG1基因全长CDS序列为609bp,编码202个氨基酸;其核苷酸序列与牛、黑猩猩、人、猕猴、大鼠、小鼠、原鸡和斑马鱼相对应序列同源性分别为90.15%、87.85%、87.52%、87.03%、76.03%、74.38%、55.74%和44.48%;PTTG1基因编码的蛋白无信号肽,属于亲水性蛋白,主要存在于细胞质中,存在16个磷酸化位点。氨基酸系统进化树分析表明,不同物种PTTG1基因在进化过程中具有高度保守性。本研究成功克隆了陆川猪PTTG1基因,为今后研究PTTG1基因在猪早期胚胎发育过程中的作用奠定理论基础。 展开更多
关键词 陆川猪 pttg1基因 克隆 序列分析
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