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蛋白酪氨酸磷酸酶PTP1B催化活性区的原核表达及活性分析
被引量：
2
1
作者
王生育
颜江华
+2 位作者
潘阳霖
李学军
陈忠
《生物工程学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第4期553-557,共5页
从GenBank获得人PTP1B催化活性区(PTP1Bc)氨基酸序列(1～301aa),通过重叠PCR获得PTP1Bc基因。构建pET-22b(+)/PTP1Bc原核表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3),阳性重组子IPTG诱导表达,Ni柱纯化蛋白。目的蛋白以包涵体的形式表达,表达量占菌...
从GenBank获得人PTP1B催化活性区(PTP1Bc)氨基酸序列(1～301aa),通过重叠PCR获得PTP1Bc基因。构建pET-22b(+)/PTP1Bc原核表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3),阳性重组子IPTG诱导表达,Ni柱纯化蛋白。目的蛋白以包涵体的形式表达,表达量占菌体总蛋白30%以上。纯化后,蛋白纯度达95%以上。Western blotting结果表明所得的蛋白可与抗PTP1B抗体发生特异性结合;酶活实验证实复性的蛋白具有一定的磷酸酶活性。PTP1Bc基因的构建、表达纯化及活性分析,为进一步的功能研究奠定了基础。
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关键词
ptp
1
bc
基因表达
蛋白纯化
活性分析
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职称材料
题名
蛋白酪氨酸磷酸酶PTP1B催化活性区的原核表达及活性分析
被引量：
2
1
作者
王生育
颜江华
潘阳霖
李学军
陈忠
机构
厦门大学医学院抗癌研究中心
厦门大学生物医学工程研究中心
厦门第一医院
出处
《生物工程学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第4期553-557,共5页
基金
厦门市重大疾病攻关研究基金(No．3502220051027)
卫生部(福建省)卫生教育联合攻关项目(No．Wkj2005-2-019)资助~~
文摘
从GenBank获得人PTP1B催化活性区(PTP1Bc)氨基酸序列(1～301aa),通过重叠PCR获得PTP1Bc基因。构建pET-22b(+)/PTP1Bc原核表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3),阳性重组子IPTG诱导表达,Ni柱纯化蛋白。目的蛋白以包涵体的形式表达,表达量占菌体总蛋白30%以上。纯化后,蛋白纯度达95%以上。Western blotting结果表明所得的蛋白可与抗PTP1B抗体发生特异性结合;酶活实验证实复性的蛋白具有一定的磷酸酶活性。PTP1Bc基因的构建、表达纯化及活性分析,为进一步的功能研究奠定了基础。
关键词
ptp
1
bc
基因表达
蛋白纯化
活性分析
Keywords
ptp
1
bc
, expression, protein purification, activity analysis
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
蛋白酪氨酸磷酸酶PTP1B催化活性区的原核表达及活性分析
王生育
颜江华
潘阳霖
李学军
陈忠
《生物工程学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008
2
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职称材料
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参考文献
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