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甘蔗△~1-吡咯啉-5-羧酸合成酶基因转化烟草的抗旱性分析 被引量：12
1
作者 李健 杜成忠 +3 位作者 王露蓉 邢永秀 李杨瑞 杨丽涛 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期34-42,共9页
为了分析甘蔗P5CS(sugrcane△~1-pyrroline-5-carboxylate synthetase gene,SoP5CS)基因的抗旱性能,利用农杆菌介导的叶盘转化法对烟草进行遗传转化,对拷贝数较低的4个转基因株系(T_1、T_4、T_6和T_9)进行抗旱性分析。结果显示:在干旱... 为了分析甘蔗P5CS(sugrcane△~1-pyrroline-5-carboxylate synthetase gene,SoP5CS)基因的抗旱性能,利用农杆菌介导的叶盘转化法对烟草进行遗传转化,对拷贝数较低的4个转基因株系(T_1、T_4、T_6和T_9)进行抗旱性分析。结果显示:在干旱胁迫下,T_9株系中SoP5CS及其编码的蛋白的相对表达量都是最低的,T_1、T_4、T_6中SoP5CS的相对表达量分别是T_9的9.02、3.93和8.51倍,SoP5CS蛋白则分别是T_9的2.22、3.91和1.36倍;进一步分析发现T_1和T_6叶片脯氨酸和ABA含量相对较高,且4个株系均显著高于对照;MDA含量则是对照显著高于转基因植株,其中T_1的MDA累积量最低;P5CR和P5CS活性在对照和转基因植株间表现不一,在T_1和T_4中,2种酶活性均与对照相当,T_6和T_9则是显著高于对照;对于CAT活性,表现为T_6最高,T_1、T_4、T_9也显著高于对照;对于SOD活性,转基因株系均显著比对照高,其中T_4和T_6的相对较高;转基因株系的叶片相对含水量明显高于对照,叶绿素减少量则低于对照。综合分析发现,T_6株系的抗旱性表现最好,T_1株系较好,表明SoP5CS基因确实具有较强的抗旱功能。 展开更多
关键词 甘蔗 P5CS基因 抗旱性 转基因烟草
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植物△1-吡咯啉-5-羧酸合成酶（P5CS）基因的研究进展 被引量：7
2
作者 李健 彭东海 +2 位作者 张风娟 杨丽涛 李杨瑞 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期1545-1550,共6页
△1-吡咯啉-5-羧酸合成酶(P5CS)是植物脯氨酸生物合成的关键酶。近年来,许多学者对P5CS酶基因克隆、其在植物中的表达特性与在抗逆基因工程上的应用进行了大量研究,证实P5CS基因已成功在许多植物中进行过量表达并能有效提高植物的抗旱... △1-吡咯啉-5-羧酸合成酶(P5CS)是植物脯氨酸生物合成的关键酶。近年来,许多学者对P5CS酶基因克隆、其在植物中的表达特性与在抗逆基因工程上的应用进行了大量研究,证实P5CS基因已成功在许多植物中进行过量表达并能有效提高植物的抗旱、耐盐性。随着分子生物学和现代生物技术的快速发展,今后可进一步挖掘利用植物P5CS基因,有效验证其功能和了解其作用机制,探讨P5CS基因与其他基因的互作及调控植物抗逆的生理生化机理,研究其在植物生长发育及器官发生等过程中的作用;培育出高效、实用、抗逆性强的转基因植物品种,均有待今后进行深入研究。 展开更多
关键词 P5CS基因 脯氨酸 渗透胁迫 基因工程
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过量表达脯氨酸的转基因烟草细胞对毒性重金属的抗性增强 被引量：13
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作者 支立峰 余涛 +1 位作者 朱英国 李阳生 《湖北师范学院学报（自然科学版）》 2006年第2期14-19,共6页
脯氨酸(Proline)在植物对环境胁迫的耐受性中发挥了非常重要的作用。本文中,我们将来自飞蛾豆(V igna acon itifolia L.)的△1-吡咯啉-5-羧酸合成酶(△1-pyrroline-5-carboxylate synthetase,P5CS)基因转化烟草(N icotiana tabacum cv S... 脯氨酸(Proline)在植物对环境胁迫的耐受性中发挥了非常重要的作用。本文中,我们将来自飞蛾豆(V igna acon itifolia L.)的△1-吡咯啉-5-羧酸合成酶(△1-pyrroline-5-carboxylate synthetase,P5CS)基因转化烟草(N icotiana tabacum cv SR I.),经PCR扩增及Southern杂交分析证实飞蛾豆p5 cs基因已整合到烟草细胞基因组中,并在转基因烟草中得以表达。与野生型细胞相比,转基因烟草细胞中脯氨酸含量提高了80%;在毒性重金属镉(Cd,浓度50-100μM)的胁迫下,转基因细胞的生长速度更快,与镉结合的能力也提高近4倍。还原型/氧化型GSH之比和丙二醛水平分析表明,转基因细胞脯氨酸的增加与GSH的氧化还原状态和丙二醛水平是有关的。 展开更多
关键词 pscs 毒性镉胁迫 转基因烟草细胞 Pro功能 抗氧化剂
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利用P5CS基因转化白三叶的研究 被引量：9
4
作者 李志亮 杨清 +3 位作者 叶嘉 邢浩春 黄丛林 吴忠义 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期61-65,共5页
为了培育抗旱白三叶,构建了植物表达载体pBPC-P5CS,利用基因枪法转化白三叶的愈伤组织,PCR检测和Southern blot鉴定证实白三叶中已导入P5CS基因。对转P5CS基因白三叶植株的不同抗旱指标进行了分析。结果表明,与对照相比,转P5CS基因株系... 为了培育抗旱白三叶,构建了植物表达载体pBPC-P5CS,利用基因枪法转化白三叶的愈伤组织,PCR检测和Southern blot鉴定证实白三叶中已导入P5CS基因。对转P5CS基因白三叶植株的不同抗旱指标进行了分析。结果表明,与对照相比,转P5CS基因株系的抗旱能力得到了较大的提高。干旱胁迫下,与对照相比,转P5CS基因植株的脯氨酸含量和相对含水量分别比对照高20.0%-21.2%和5.6%-8.5%。 展开更多
关键词 P5CS基因 白三叶 基因枪转化法 抗旱性
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甘蔗Δ~1-吡咯啉-5-羧酸合成酶(ScP5CS)基因分离及其分析(英文) 被引量：7
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作者 黄诚梅 杨丽涛 +3 位作者 李杨瑞 邓智年 魏源文 潘有强 《广西农业科学》 CSCD 2009年第2期113-119,共7页
以甘蔗品种ROC22为材料,待甘蔗生长至4～5叶期直接以25%PEG6000淋灌根部模拟水分胁迫。采用同源克隆与RT-PCR法从甘蔗叶片中得到甘蔗Δ1-吡咯啉-5-羧酸合成酶(Saccharum officinarum L.Δ1-pyrroline-5-carboxy-late synthetase,ScP5CS... 以甘蔗品种ROC22为材料,待甘蔗生长至4～5叶期直接以25%PEG6000淋灌根部模拟水分胁迫。采用同源克隆与RT-PCR法从甘蔗叶片中得到甘蔗Δ1-吡咯啉-5-羧酸合成酶(Saccharum officinarum L.Δ1-pyrroline-5-carboxy-late synthetase,ScP5CS)基因的编码区cDNA序列,其长度为2151 bp,为一个完整的ORF,编码716个氨基酸,GenBank注册号为EU005373。核苷酸序列与前人已注册的甘蔗P5CS(EF155655)相比,同源率达到98%,但推断编码的氨基酸同源率仅为92%。该基因具有P5CS共有的结构域与结合位点:Putative ATP-binding site;Putative leucine domains;Glu-5-kinase domain;Putative NADPH-binding domain;Conserved GSA-DH domain保守区,脯氨酸反馈抑制作用位点。与前人已注册的甘蔗P5CS基因氨基酸序列(ABM30223)比较,在γ-GK保守域(Glu-5-kinase domain)内氨基酸变化较大,而与水稻、小麦的相比,其变化较小。因此,推断为甘蔗P5CS基因家族中的一个新成员。 展开更多
关键词 甘蔗 P5CS基因 分离与分析 脯氨酸
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抗旱、耐盐基因P5CS转化向日葵自交系 被引量：3
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作者 程继东 安玉麟 孙瑞芬 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期65-69,共5页
以向日葵保持系75-33B和恢复系Ht80-97的子叶为转化受体材料,用携带P5CS基因的双元载体系统的根癌农杆菌进行叶盘转化,获得抗Kan的转化芽。提取转化芽总DNA进行PCR检测及PCR-Southern杂交检测,证实获得阳性抗性芽75-33B 2株,Ht80-97 4株... 以向日葵保持系75-33B和恢复系Ht80-97的子叶为转化受体材料,用携带P5CS基因的双元载体系统的根癌农杆菌进行叶盘转化,获得抗Kan的转化芽。提取转化芽总DNA进行PCR检测及PCR-Southern杂交检测,证实获得阳性抗性芽75-33B 2株,Ht80-97 4株,转化率分别为3.17%和4.65%。 展开更多
关键词 向日葵 P5CS基因 遗传转化 PCR扩增 PCR—Southern杂交
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