期刊文献+
共找到2,886篇文章
< 1 2 145 >
每页显示 20 50 100
微生物原生质体制备及再生的影响因素 被引量:42
1
作者 谭文辉 李燕萍 许杨 《现代食品科技》 EI CAS 2006年第3期263-265,258,共4页
原生质体的制备及再生,是原生质体技术的前提和基础。本文较全面地介绍了影响微生物原生质体制备及再生的因素,以期在原生质体形成和再生的最佳条件下制备原生质体,为进一步实验打下良好的基础。
关键词 原生质体 制备 再生
下载PDF
平菇与香菇属间原生质体融合的研究 被引量:36
2
作者 刘振岳 董毓琨 +3 位作者 泰立芳 庞国新 赵世民 徐金相 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 1991年第4期352-357,共6页
通过分离和出菇试验,获得了纯化的平菇(Pleurotus sapidus)和香菇(Lentinus edodes)单孢系。用溶壁酶去细胞壁制备成原生质体。以PEG为融合诱导剂,诱导两者原生质体融合。1988年获得了可以出菇的融合子。这些融合子形成的子实体,从形态... 通过分离和出菇试验,获得了纯化的平菇(Pleurotus sapidus)和香菇(Lentinus edodes)单孢系。用溶壁酶去细胞壁制备成原生质体。以PEG为融合诱导剂,诱导两者原生质体融合。1988年获得了可以出菇的融合子。这些融合子形成的子实体,从形态、生长习性和菌伞的颜色特征上都与双亲有明显的差异。大部分氨基酸含量介于双亲之间。同功酶分析也显示出融合子呈现与双亲不同的酶带。融合子出现的上述新性状,可能是平菇与香菇的原生质体基因重组的结果。 展开更多
关键词 平菇 香菇 原生质体 融合
下载PDF
复合诱变原生质体选育耐热碱性蛋白酶高产菌 被引量:26
3
作者 冯清平 薛林贵 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 1996年第6期453-459,共7页
以地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)53号为原始菌株,在原生质体形成和再生的最佳条件下制备原生质体,对原生质体进行复合诱变,对大量再生突变株进行筛选,最终获得了高产、稳定、耐热的碱性蛋白酶产生菌53-G38-6,产酶活力由1104U/m... 以地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)53号为原始菌株,在原生质体形成和再生的最佳条件下制备原生质体,对原生质体进行复合诱变,对大量再生突变株进行筛选,最终获得了高产、稳定、耐热的碱性蛋白酶产生菌53-G38-6,产酶活力由1104U/ml提高到22080U/ml。适宜的发酵条件:培养基(%)胰蛋白胨1,酵母膏0.5,玉米粉5,Na_2HP0_4·12H_20 0.4,KH_2P0_4 0.03,Na_2CO_3 0.1,自然pH。42℃旋转培养44~48h,得到的蛋白酶热稳定性强,60℃处理1h剩余酶活55%。酶反应最适条件:62℃,pH10.0,在pH9~10.5范围内稳定。 展开更多
关键词 地衣状芽孢杆菌 原生质体 碱性 蛋白酶 发酵
下载PDF
黄瓜原生质体培养再生胚状体和植株研究 被引量:21
4
作者 张兴国 刘佩瑛 《西南农业大学学报(自然科学版)》 CSCD 1998年第4期288-292,共5页
】对黄瓜原生质体分离和再生条件的研究表明,7日龄初展黄瓜子叶和15~17日的真叶,在1%纤维素酶、0.5%离析酶和0.25~0.30mol/L甘露醇混合酶液中,均分离出大量原生质体,转入附加1mg/LBA和0.5mg... 】对黄瓜原生质体分离和再生条件的研究表明,7日龄初展黄瓜子叶和15~17日的真叶,在1%纤维素酶、0.5%离析酶和0.25~0.30mol/L甘露醇混合酶液中,均分离出大量原生质体,转入附加1mg/LBA和0.5mg/L2,4-D的改良KM培养基(去除NH4NO3)中浅层液体培养,形成微愈伤组织。由成都二早子黄瓜真叶原生质体愈伤组织培养的胚状体和子叶原生质体愈伤组织诱导的不定芽,皆培育成小植株。 展开更多
关键词 黄瓜 原生质体 愈伤组织 胚状体 植株
下载PDF
铁皮石斛种质资源的玻璃化法超低温保存 被引量:15
5
作者 陈勇 王君晖 黄纯农 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期436-438,共3页
对铁皮石斛的原生质体、原球茎进行了玻璃化法超低温保存研究 ,存活率分别达 4 8%和 88% .实验结果表明 :材料、预处理、化冻方法。
关键词 铁皮石斛 原生质体 原球茎 玻璃化法 超低温保存 种质资源
下载PDF
原生质体紫外诱变技术筛选红霉素高产菌株的研究 被引量:13
6
作者 王筱虹 倪文琴 刘寒 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第4期301-303,共3页
将红霉素产生菌——红色链霉菌的菌丝体经溶菌酶去壁后获得的原生质体 ,用紫外线照射一定时间后 ,在再生培养基上得到再生菌株 ,通过活性测定 ,挑选抑菌圈大而清晰的再生菌株进行摇瓶筛选 ,最后得到比对照菌株效价提高 2 2 5.8%的高产菌株
关键词 红霉素 原生质体 紫外诱变 高产菌株
下载PDF
黄瓜胚性细胞悬浮培养及其原生质体的植株再生 被引量:20
7
作者 贾士荣 罗美中 林云 《Acta Botanica Sinica》 1988年第5期463-467,共5页
黄瓜子叶原生质体来源的胚性愈伤组织,在液体培养中形成胚性悬浮细胞系,已继代两年,仍保持胚胎发生能力。不同的 ABA 和蔗糖浓度对胚状体的生长发育和同步化有明显影响。1mg/l 的 ABA 和7—9%的蔗糖能显著地减少培养物的愈伤化,并同步... 黄瓜子叶原生质体来源的胚性愈伤组织,在液体培养中形成胚性悬浮细胞系,已继代两年,仍保持胚胎发生能力。不同的 ABA 和蔗糖浓度对胚状体的生长发育和同步化有明显影响。1mg/l 的 ABA 和7—9%的蔗糖能显著地减少培养物的愈伤化,并同步地控制胚状体处于球形或球形后期。低浓度的蔗糖(1%)有利于胚状体的早熟萌发。继代3—5天的胚性悬浮细胞团酶解后,获得大量有活力的原生质体。原生质体在 DPDK 液滴或浅层培养、或褐藻酸钠包埋培养中活跃分裂,形成细胞团和球形胚,转至固体培养基上或将包埋培养物直接转入液体振荡培养,胚状体可不断增殖。胚状体在大量元素减半,不加外源激素的 MS 培养基上发育成小植株。 展开更多
关键词 黄瓜 胚胎发生 细胞悬浮培养 原生质体 植株再生 细胞融合
全文增补中
酿酒葡萄原生质体再生植株 被引量:15
8
作者 于向荣 李佩芬 +3 位作者 卢炳芝 王敏 郑旭琴 刘延松 《果树科学》 CSCD 北大核心 1999年第2期115-118,共4页
将酿酒葡萄品种白诗南、梅郁的花丝接种在含6BA2.0mg·1-1、2,4-D0.5mg·1-1的B5诱导培养基上,诱导产生胚性愈伤组织。胚性愈伤组织经液体悬浮培养形成含大量胚性细胞团的悬浮培养物。用Cellu... 将酿酒葡萄品种白诗南、梅郁的花丝接种在含6BA2.0mg·1-1、2,4-D0.5mg·1-1的B5诱导培养基上,诱导产生胚性愈伤组织。胚性愈伤组织经液体悬浮培养形成含大量胚性细胞团的悬浮培养物。用Cellulase  Rs2%、Pectolyase Y230.3%,5mmol·1-1CaCl2·2H2O、0.6mol·1-1甘露醇、0.3%葡聚糖硫酸钾、pH5.6~5.8的酶混合液从胚性细胞团分离得到原生质体。原生质体培养到第5天出现第一次分裂,40d形成上百个细胞的大细胞团,50d形成0.5~1.0mm大小的小愈伤组织。这些小愈伤组织在含6BA0.5mg·1-1的B5分化培养基上分化出胚状体进而形成幼苗,在生根培养基上生根形成再生植株。 展开更多
关键词 酿酒葡萄 原生质体 再生植株 葡萄
下载PDF
‘翠秀’黄瓜子叶原生质体的高效培养及植株再生 被引量:15
9
作者 郭德章 鄢铮 +2 位作者 赖钟雄 林庆良 王家福 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期227-228,共2页
分离纯化的黄瓜子叶原生质体 ,以 5 5× 10~ 5 5× 10 5个 /mL的不同密度培养于mKM8p液体培养基中 ,均获得不同程度的细胞分裂。当培养密度超过 1 0× 10 3 个 /mL时 ,原生质体可持续分裂至愈伤组织形成 ,最高植板率为 5... 分离纯化的黄瓜子叶原生质体 ,以 5 5× 10~ 5 5× 10 5个 /mL的不同密度培养于mKM8p液体培养基中 ,均获得不同程度的细胞分裂。当培养密度超过 1 0× 10 3 个 /mL时 ,原生质体可持续分裂至愈伤组织形成 ,最高植板率为 5 4%。原生质体来源的愈伤组织经诱导培养产生大量体胚并再生成植株。Ca2 + 浓度对黄瓜原生质体的稳定和细胞分裂有重要影响。 展开更多
关键词 黄瓜 子叶 原生质体 植株再生
下载PDF
新月弯孢霉原生质体制备及再生条件的研究 被引量:19
10
作者 王赓 杜连祥 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第1期21-23,共3页
以从自然界中筛选的新月弯孢菌D-1为出发菌株,进行原生质体制备及再生条件的研究。将培养至16h的D-1菌丝体经DTT溶液处理30min后,用溶壁酶和纤维酶的混合酶液于30℃下酶解4h,原生质体释放量达到6.0×1... 以从自然界中筛选的新月弯孢菌D-1为出发菌株,进行原生质体制备及再生条件的研究。将培养至16h的D-1菌丝体经DTT溶液处理30min后,用溶壁酶和纤维酶的混合酶液于30℃下酶解4h,原生质体释放量达到6.0×10^6个/mL,原生质体再生率为8.3%。 展开更多
关键词 新月弯孢霉 原生质体 制备 再生
下载PDF
通过PEG法转化甘蓝获得转基因植株 被引量:12
11
作者 薛红卫 卫志明 许智宏 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 1997年第1期28-33,共6页
通过PEG法将外源基因导入甘蓝(Brassica oleracea L.)下胚轴原生质体。以潮霉素和卡那霉素进行筛选,均成功地得到了抗性愈伤组织。对于潮霉素抗性愈伤组织,其绝对和相对转化频率分别为4.1×10^(-4)和1%~3%,在分化培养基上,抗性... 通过PEG法将外源基因导入甘蓝(Brassica oleracea L.)下胚轴原生质体。以潮霉素和卡那霉素进行筛选,均成功地得到了抗性愈伤组织。对于潮霉素抗性愈伤组织,其绝对和相对转化频率分别为4.1×10^(-4)和1%~3%,在分化培养基上,抗性愈伤组织能够分化出芽。诱导生根后进行移栽,生长状况良好。Southem blotting分析表明外源基因已插入到植物细胞基因组中。对影响转化的一些因素进行了探讨。 展开更多
关键词 甘蓝 原生质体 PEG转化 转基因植株 基因工程
下载PDF
中华猕猴桃原生质体再生植株 被引量:19
12
作者 肖尊安 沈德绪 林伯年 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 1992年第10期736-742,共7页
从中华猕猴桃(Actinidia chinensis Planch.)子叶愈伤组织系A14N7分离的原生质体,培养在改良NN-69培养基中,7—10天发生第一次细胞分裂,20天的分裂率为10%左右。原生质体最适植板密度是5×104/ml;培养方法以液体浅层培养最好。4... 从中华猕猴桃(Actinidia chinensis Planch.)子叶愈伤组织系A14N7分离的原生质体,培养在改良NN-69培养基中,7—10天发生第一次细胞分裂,20天的分裂率为10%左右。原生质体最适植板密度是5×104/ml;培养方法以液体浅层培养最好。4个月左右,按分步诱导法,把原生质体来源的小愈伤组织逐步转移到不同的再生培养基上诱导器官分化,最后得到原生质体再生植株。 展开更多
关键词 中华猕猴桃 原生质体 再生植株
下载PDF
重金属诱导拟南芥原生质体DNA损伤的单细胞凝胶电泳检测 被引量:21
13
作者 聂志刚 王艳 李韶山 《植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期117-123,共7页
以拟南芥原生质体为实验体系,研究不同浓度的3种重金属离子对拟南芥原生质体的毒性和DNA损伤的差异。结果表明,用1-5mmol.L-1的Zn2+、Cd2+和Cu2+分别处理的拟南芥原生质体,2小时内活力逐渐下降,并表现出明显的浓度依赖性;与相同浓度的C... 以拟南芥原生质体为实验体系,研究不同浓度的3种重金属离子对拟南芥原生质体的毒性和DNA损伤的差异。结果表明,用1-5mmol.L-1的Zn2+、Cd2+和Cu2+分别处理的拟南芥原生质体,2小时内活力逐渐下降,并表现出明显的浓度依赖性;与相同浓度的Cd2+和Cu2+相比,Zn2+对拟南芥原生质体活力的影响程度较小,表现出较低的毒性。单细胞凝胶电泳检测发现,用0.1-0.8mmol.L-1的Zn2+、Cd2+和Cu2+分别处理拟南芥原生质体30分钟,以OTM值表示的原生质体DNA损伤量随重金属离子浓度的增加而递增;相同浓度(0.5mmol.L-1)的3种重金属离子相比,Zn2+对原生质体的遗传毒性明显低于Cu2+和Cd2+。综合原生质体活力和DNA损伤的单细胞凝胶电泳检测结果,发现Zn2+对拟南芥原生质体的遗传毒性较低,而Cd2+和Cu2+的遗传毒性较高。本研究建立的拟南芥原生质体实验体系,结合运用单细胞凝胶电泳技术,能够快速、灵敏地检测重金属对植物细胞的遗传毒性。 展开更多
关键词 拟南芥 彗星试验 DNA损伤 重金属 原生质体 单细胞凝胶电泳
下载PDF
浓醪酒精发酵酵母菌的选育 被引量:12
14
作者 王滨 张国政 +1 位作者 路福平 杜连祥 《天津轻工业学院学报》 2001年第3期33-36,共4页
以本研究室保藏酵母菌 Y316作为出发菌株 ,经紫外线诱变处理原生质体 ,再生菌通过初筛 ,复筛 ,选育出酒精高产菌株 Y316 - 2 3,在料水比 1∶ 1.8,发酵 6 0 h的条件下 ,成熟醪酒精的体积分数可达 13.5
关键词 酿酒酵母 原生质体 诱变 乙醇 酒精 选育 发酵
下载PDF
大豆原生质体的植株再生 被引量:15
15
作者 罗希明 赵桂兰 简玉瑜 《Acta Botanica Sinica》 SCIE CAS CSCD 1990年第8期616-621,共6页
酶法分离大豆(Glycine max L.)植株的幼荚子叶和无菌苗子叶的原生质体。用 K8P原生质体培养基悬滴培养,K8培养基加液。1个半月形成愈伤组织,转入固体 K8培养基中增殖,用 MSB(MS 无机成分+B5有机成分+0.5—1mg/l 2,4-D+0.2—0.5mg/l BA)... 酶法分离大豆(Glycine max L.)植株的幼荚子叶和无菌苗子叶的原生质体。用 K8P原生质体培养基悬滴培养,K8培养基加液。1个半月形成愈伤组织,转入固体 K8培养基中增殖,用 MSB(MS 无机成分+B5有机成分+0.5—1mg/l 2,4-D+0.2—0.5mg/l BA)培养基诱导瘤状愈伤组织的形成,再转入分化培养基 M_1(MS 无机成分+B5有机成分+0.5mg/l TZ+0.5mg/l BA+0.5mg/lKT+0.15mg/l NAA+500mg/l CH)中分化出苗。在 M_2培养基(1/2MS+0.2mg/l IBA)中生根,分化频率为13.6—24.2%,移栽盆中开花结荚。有两个大豆品种的幼荚子叶原生质体培养再生植株。 展开更多
关键词 大豆 原生质体 植株再生
下载PDF
灵芝原生质体诱变筛选富硒高生物量菌株 被引量:15
16
作者 刘士旺 郭泽建 +2 位作者 阚云超 李南羿 李靖 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期44-48,共5页
研究了灵芝(Ganodermalucidum)CJXN-9802的原生质体形成和影响原生质再生的各因素,其中包括酶,温度,渗透压调节剂和菌龄等。并对灵芝原生质体进行了紫外照射诱变,筛选获得了快速生长的诱变菌株。诱变株之一的灵芝CJXN-980222菌株硒含量... 研究了灵芝(Ganodermalucidum)CJXN-9802的原生质体形成和影响原生质再生的各因素,其中包括酶,温度,渗透压调节剂和菌龄等。并对灵芝原生质体进行了紫外照射诱变,筛选获得了快速生长的诱变菌株。诱变株之一的灵芝CJXN-980222菌株硒含量有很大的提高,比出发株提高9.4%,生物量比出发株高14.3%。 展开更多
关键词 诱变筛选 生物量 灵芝 原生质体 富硒菌株
下载PDF
保加利亚乳杆菌原生质体的制备与回复研究 被引量:17
17
作者 张莉滟 陈林 张德纯 《中国微生态学杂志》 CAS CSCD 2004年第2期73-74,共2页
目的 :通过对保加利亚乳杆菌的原生质体的制备和回复的方法学探讨 ,为乳杆菌的基因操作和其相关研究提供技术思路和实验条件。方法 :用酶浓度分别为 1μg/ml、4 μg/ml、10 μg/mlMutanolysin(变溶菌素 )对保加利亚乳杆菌进行处理 ,脱... 目的 :通过对保加利亚乳杆菌的原生质体的制备和回复的方法学探讨 ,为乳杆菌的基因操作和其相关研究提供技术思路和实验条件。方法 :用酶浓度分别为 1μg/ml、4 μg/ml、10 μg/mlMutanolysin(变溶菌素 )对保加利亚乳杆菌进行处理 ,脱去细胞壁以探讨其原生质体形成与时间和酶浓度的关系 ;并选用较为适宜的酶浓度制备其原生质体 ,在自制的双层再生培养基上观察其原生质体在普通培养、CO2 培养、厌氧培养时的回复生长情况。结果 :保加利亚乳杆菌对Mutanolysin较敏感 ,酶浓度为 1μg/ml时只需 4 0min大部分菌体形成原生质体。经 1μg/mlMutanolysin处理后制得的保加利亚乳杆菌原生质体倾入自制的双层再生培养基中 ,置于CO2 和厌氧环境条件下培养能很好的回复生长。结论 :本文的研究为乳杆菌的基因工程方面的研究提供了相关的技术条件和实验基础。 展开更多
关键词 保加利亚乳杆菌 原生质体 制备 再生 基因工程
下载PDF
原生质体融合构建高效降解工程菌的研究 被引量:10
18
作者 周德明 《中南林学院学报》 CSCD 2001年第2期42-46,共5页
研究了球形红假单胞菌与酿酒酵母菌的原生质体融合条件 ,并对融合子性能进行了测定 .结果表明 :两种菌株分别在溶菌酶—— EDTA和蜗牛酶——巯基乙醇处理后形成原生质体 ,两种原生质体在聚乙二醇 ( PEG)和 Ca2 + 的诱导下发生融合 .最... 研究了球形红假单胞菌与酿酒酵母菌的原生质体融合条件 ,并对融合子性能进行了测定 .结果表明 :两种菌株分别在溶菌酶—— EDTA和蜗牛酶——巯基乙醇处理后形成原生质体 ,两种原生质体在聚乙二醇 ( PEG)和 Ca2 + 的诱导下发生融合 .最佳融合条件是 ,Ca2 + 浓度为 5 0 mmo L· L- 1 ,PEG质量分数为 3 0 % ,融合温度为 3 0℃ ,融合时间为 3 0 min,该条件下融合率为 6.8× 10 - 6 ;该融合子具有两亲株的特性 ,适应能力增强 ,比降解率是酵母的 1.88倍 . 展开更多
关键词 球形红假单胞菌 酿酒酵母 原生质体融合 比降解率 废水处理 工程菌
下载PDF
利用原生质体诱变技术筛选脱落酸高产菌株 被引量:14
19
作者 谭红 龚革 +4 位作者 李志东 彭树林 雷宝良 刘大江 丁立生 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 1998年第3期281-285,共5页
以葡萄孢属TB-3菌株为出发菌株制备其原生质体.在纤维素酶浓度为20g/L,蜗牛酶浓度为3g/L的酶解系统中,25℃酶解3h,其原生质体制备数可达67×105mL-1,在KYM上的再生率为46.1%,在KPDA上的再生率为33.6%,经过3轮原生质体... 以葡萄孢属TB-3菌株为出发菌株制备其原生质体.在纤维素酶浓度为20g/L,蜗牛酶浓度为3g/L的酶解系统中,25℃酶解3h,其原生质体制备数可达67×105mL-1,在KYM上的再生率为46.1%,在KPDA上的再生率为33.6%,经过3轮原生质体紫外线诱变后回复再生,及对大量再生突变株进行发酵筛选,获得高产稳定株TB-3H8,其发酵液中ABA的质量浓度可达1. 展开更多
关键词 脱落酸 原生质体 紫外线诱变 再生 菌株筛选
下载PDF
小麦原生质体分离过程中生理状态的变化 被引量:11
20
作者 王丽莉 贾敬芬 《植物生理学报(0257-4829)》 CSCD 1994年第4期393-398,共6页
酶解处理使小麦对肉原生质体膜流动性降低,膜脂过氧化产物丙二醛(MDA)积累,说明脱璧过程对细胞有伤害作用,损伤位点可能发生在膜上。胚性愈伤组织的具有分裂能力的原生质体,不表现上述变化。酶解脱壁还使超氧化物歧化酶(SO... 酶解处理使小麦对肉原生质体膜流动性降低,膜脂过氧化产物丙二醛(MDA)积累,说明脱璧过程对细胞有伤害作用,损伤位点可能发生在膜上。胚性愈伤组织的具有分裂能力的原生质体,不表现上述变化。酶解脱壁还使超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性上升;过氧化物酶(POX)在叶肉原生质体中活性下降,在胚性愈伤组织来源的原生质体中活性上升。以上结果表明:在原生质体分离过程中,细胞的生理特性发生了变化;膜损伤的发生可能与原生质体能否进入正常分裂状态有关。 展开更多
关键词 小麦 原生质体 分离 生理学
下载PDF
上一页 1 2 145 下一页 到第
使用帮助 返回顶部