猪附红细胞体PPA-ELISA检测方法的建立 被引量：29

1

作者 韩惠瑛 孟日增 +1 位作者 贾鸿莲 马海利 《中国兽医科技》 CSCD 北大核心 2005年第1期49-51,共3页

用物理方法纯化猪附红细胞体抗原,用纯化抗原免疫兔制备超免疫血清,以辣根过氧化物酶标记葡萄球菌A蛋白作为二抗,建立了辣根过氧化物酶标记葡萄球菌A蛋白的酶联免疫吸附试验(PPA ELISA)检测方法。结果显示,用PPA ELISA方法检测猪血液中... 用物理方法纯化猪附红细胞体抗原,用纯化抗原免疫兔制备超免疫血清,以辣根过氧化物酶标记葡萄球菌A蛋白作为二抗,建立了辣根过氧化物酶标记葡萄球菌A蛋白的酶联免疫吸附试验(PPA ELISA)检测方法。结果显示,用PPA ELISA方法检测猪血液中的附红细胞体,具有很高的敏感性和特异性,重复性良好,完全适用于猪附红细胞体病的实验室诊断。 展开更多

关键词 猪附红细胞体 ppa-elisa 检测方法

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猪瘟病毒重组E2蛋白PPA-ELISA抗体检测试剂盒的研制及应用 被引量：16

2

作者 李娇 王金良 +2 位作者 祖立闯 谢金文 沈志强 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期1390-1394,1399,共6页

以纯化的猪瘟病毒(CSFV)重组E2蛋白为包被抗原,辣根过氧化物酶标记葡萄球菌A蛋白为二抗,组装了检测CSFV抗体的PPA-ELISA诊断试剂盒。该试剂盒与其他7种常见猪病毒(PRRSV、PPV、JEV、PCV-2、PEDV、PRV、TGEV)及牛病毒性腹泻病毒(BVDV)的... 以纯化的猪瘟病毒(CSFV)重组E2蛋白为包被抗原,辣根过氧化物酶标记葡萄球菌A蛋白为二抗,组装了检测CSFV抗体的PPA-ELISA诊断试剂盒。该试剂盒与其他7种常见猪病毒(PRRSV、PPV、JEV、PCV-2、PEDV、PRV、TGEV)及牛病毒性腹泻病毒(BVDV)的阳性血清不发生交叉反应;批内重复性试验的变异系数小于5%,批间重复性试验的变异系数小于10%;与间接血凝试验相比较,符合率、敏感性和特异性分别为86.2%,85.4%,87.2%;与IDEXX ELISA试剂盒相比较,符合率、敏感性和特异性分别为91.3%,93.2%,88.7%。表明本试验研制的E2-PPA-ELISA抗体检测试剂盒具有良好的重复性、敏感性和特异性,将为CSFV的快速诊断、免疫猪群抗体水平监测和CSFV流行病学调查提供一种快速、简便的血清学诊断方法。 展开更多

关键词 猪瘟病毒 重组E2蛋白 ppa-elisa

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猪瘟PPA-ELISA和Dot-ELISA检测猪瘟抗体的比较及其应用 被引量：6

3

作者 杨晓梅 林毅 +3 位作者 邓小东 张道永 李力 曾惠 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2000年第C00期128-130,共3页

关键词 猪瘟 ppa-elisa DOT-elisa 抗体检测

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用PPA-ELISA检测鸡痘病毒抗体的研究 被引量：7

4

作者 徐春厚 孙力 +3 位作者 于春生 房秀云 吴凌 邵红 《中国畜禽传染病》 CSCD 1997年第4期33-35,共3页

建立了检测鸡痘病毒抗体的ＰＰＡ－ＥＬＩＳＡ。用该法检测７５份鸡血清样品，鸡痘病毒抗体检出率（２１．３３％）高于琼脂扩散试验（１０．６７％）。经血清抗体吸收和重复性试验，证明ＰＰＡ－ＥＬＩＳＡ法具有特异性强和重复性好特... 建立了检测鸡痘病毒抗体的ＰＰＡ－ＥＬＩＳＡ。用该法检测７５份鸡血清样品，鸡痘病毒抗体检出率（２１．３３％）高于琼脂扩散试验（１０．６７％）。经血清抗体吸收和重复性试验，证明ＰＰＡ－ＥＬＩＳＡ法具有特异性强和重复性好特点。此外，对４种封闭液的封板结果表明：１０％犊牛血清ＰＢＳ／Ｔ效果最好，次之为０．２５％白明胶ＰＢＳ／Ｔ、０．５％牛血清白蛋白ＰＢＳ／Ｔ、０．１％牛血清白蛋白ＰＢＳ／Ｔ。 展开更多

关键词 鸡痘病毒 抗体 ppa-elisa

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PPA-ELISA检测猪传染性胸膜肺炎抗体方法的建立 被引量：5

5

作者 王淑敏 冼琼珍 温广杰 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2003年第1期37-38,共2页

关键词 ppa-elisa 检测 猪传染性胸膜肺炎 抗体

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应用FA及PPA-ELISA技术对猪瘟的检测 被引量：6

6

作者 潘树德 何利昆 +1 位作者 李学俭 马兴元 《动物医学进展》 CSCD 2003年第5期114-116,共3页

用免疫荧光抗体诊断技术及单克隆抗体纯化酶联免疫吸附试验诊断技术对疑为猪瘟病毒感染猪进行了检测 ,重点阐述了 2种方法的技术原理和操作过程。通过用免疫荧光抗体诊断技术检测了 5份病料 ,其中有 2份为阳性 ,阳性率为 40 % ;用单克... 用免疫荧光抗体诊断技术及单克隆抗体纯化酶联免疫吸附试验诊断技术对疑为猪瘟病毒感染猪进行了检测 ,重点阐述了 2种方法的技术原理和操作过程。通过用免疫荧光抗体诊断技术检测了 5份病料 ,其中有 2份为阳性 ,阳性率为 40 % ;用单克隆抗体纯化酶联免疫吸附试验诊断技术检测了猪瘟血清抗体 ,在 40头母猪血清样品中 ,猪瘟弱毒抗体效价 OD值较高 ,有 1 0 0 %的保护率 ,但是发现母猪群中有 1 0 %隐性猪瘟感染 ,其强毒抗体效价 OD值大于 0 .5,体内带有猪瘟病毒。结果及过程表明此两种诊断方法检测快速、鉴别准确。 展开更多

关键词 FA ppa—elisa 猪瘟 免疫荧光抗体诊断 单克隆抗体纯化酶联免疫吸附

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PPA制剂对人PBMC分泌细胞因子水平的影响 被引量：8

7

作者 廖伟娇 刘利东 朱彤 《广东医学》 CAS CSCD 2003年第9期963-964,共2页

目的　探讨绿脓杆菌菌毛制剂 (PPA)对正常人外周血单核细胞 (PBMC)分泌细胞因子水平的影响 ,了解该制剂的免疫作用。方法　采用ELISA法 ,测定PPA刺激下 ,体外培养的正常人PBMC分泌IL -2 ,IFN -γ和IL -10的水平变化。结果　培养上清液... 目的　探讨绿脓杆菌菌毛制剂 (PPA)对正常人外周血单核细胞 (PBMC)分泌细胞因子水平的影响 ,了解该制剂的免疫作用。方法　采用ELISA法 ,测定PPA刺激下 ,体外培养的正常人PBMC分泌IL -2 ,IFN -γ和IL -10的水平变化。结果　培养上清液中刺激组IL -2 ,IFN -γ和IL -10含量分别为 ( 163 74± 2 3 5 1)pg/ml ,( 92 4 12± 2 14 3 2 )pg/ml和 ( 3 3 76± 9 83 )pg/ml,而对照组则分别为 ( 3 0 80± 14 42 )pg/ml ,( 4 6 80± 15 2 9)pg/ml和 ( 4 1 61± 10 75 )pg/ml。刺激组IL -2和IFN -γ含量明显增高 ,而IL -10的含量则下降 ,其差异均有显著性 (P <0 0 1)。结论　PPA能促进Th1细胞因子的产生 ,抑制Th2细胞因子的分泌 ,能有效增强机体的细胞免疫功能。 展开更多

关键词 ppa制剂 人PBMC 分泌细胞因子 影响 elisa法

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牛病毒性腹泻病毒重组E2蛋白PPA-ELISA方法的建立及临床应用 被引量：6

8

作者 柴顺秀 马花 +1 位作者 韩英 赵隆寿 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2013年第6期106-110,共5页

用牛病毒性腹泻病毒(BVDV)重组E2蛋白为包被抗原,辣根过氧化物酶标记葡萄球菌A蛋白(PPA)为二抗,建立了检测BVDV血清抗体的E2-PPA-ELISA方法。研究选取特异性良好的E2抗原,确定了最佳工作条件为:E2蛋白抗原的最适包被质量浓度为16.0μg/... 用牛病毒性腹泻病毒(BVDV)重组E2蛋白为包被抗原,辣根过氧化物酶标记葡萄球菌A蛋白(PPA)为二抗,建立了检测BVDV血清抗体的E2-PPA-ELISA方法。研究选取特异性良好的E2抗原,确定了最佳工作条件为:E2蛋白抗原的最适包被质量浓度为16.0μg/mL,酶标二抗的工作浓度为1∶2 000,血清稀释度为1∶40时效果最佳。通过重复性试验、特异性试验和敏感性试验证明,与用BVDV全病毒为抗原的IDEXX ELISA试剂盒相比,建立的E2-PPA-ELISA抗体检测方法具有较好的重复性、敏感性和特异性。对285份不同地区采集的血清样本进行检测,阳性检出率为33.4%,与IDEXX ELISA试剂盒的检出率无明显差异。表明该方法为BVDV的快速诊断和流行病学调查提供一种快速、简便的血清学诊断方法,适合规模化养牛场BVDV的抗体监测以及流行病学调查。 展开更多

关键词 牛病毒性腹泻病毒 重组E2蛋白 ppa-酶联免疫吸附试验

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检测猪瘟抗体的PPA-ELISA诊断试剂盒的制备、标化和应用的研究 被引量：2

9

作者 周光胜 汤赛冬 +5 位作者 周雪芳 张曹民 张敏 王伟禄 王海根 陈斌 《中国动物检疫》 CAS 2000年第9期26-28,共3页

以猪瘟兔化毒接种猪肾细胞（ＰＫ－１５细胞系），提取细胞培养物进行纯化，以纯化病毒抗原和酶标葡萄球菌 Ａ蛋白探索建立了检测猪瘟病毒抗体的 ＰＰＡ－ＥＬＩＳＡ方法，其最佳工作条件为：抗原包被浓度为 ２ μｇ／ｍｌ，酶标Ａ蛋白... 以猪瘟兔化毒接种猪肾细胞（ＰＫ－１５细胞系），提取细胞培养物进行纯化，以纯化病毒抗原和酶标葡萄球菌 Ａ蛋白探索建立了检测猪瘟病毒抗体的 ＰＰＡ－ＥＬＩＳＡ方法，其最佳工作条件为：抗原包被浓度为 ２ μｇ／ｍｌ，酶标Ａ蛋白浓度１：３０，底物作用时间３０ ｍｉｎ。经对不同血清的检验，本法有较高的特异性和敏感性，同时本试验也证明ＥＬＩＳＡ与ＩＨＡ检测结果具较高相关性。 展开更多

关键词 猪瘟病毒 ppa-elisa 抗体检测

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猪瘟PPA-ELISA的免疫监测 被引量：5

10

作者 钱永清 孙智锋 +1 位作者 范建敏 金柏新 《上海农业学报》 CSCD 1993年第3期6-10,共5页

应用纯化猪瘟病毒抗原(SFV)和酶标葡萄球菌A蛋白(PPA)建立PPA-ELISA,并通过对12份设定阴性血清和38头仔猪注苗前后不同时期164份系列血清的检测结果表明,免疫母猪所产未注苗仔猪在30日龄时母源抗体水平个体差异很大。光密度值(OD)为0.28... 应用纯化猪瘟病毒抗原(SFV)和酶标葡萄球菌A蛋白(PPA)建立PPA-ELISA,并通过对12份设定阴性血清和38头仔猪注苗前后不同时期164份系列血清的检测结果表明,免疫母猪所产未注苗仔猪在30日龄时母源抗体水平个体差异很大。光密度值(OD)为0.28～1.77((?)=0.98),有1/6的仔猪血清抗体水平在保护临界点以下;免疫母猪与其所生未注苗仔猪血清中抗体水平并不呈正相关;仔猪于30日龄时注苗,60日龄时ELISA抗体水平急剧上升,90日龄时达峰值,维持至120日龄,之后逐渐下降,到150日龄时降至注苗前水平。另外,对1头份、2头份、4头份等不同免疫剂量进行了比较,三者的免疫效果无显著差异。 展开更多

关键词 猪瘟 免疫 检测 猪病 ppa-elisa

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猪链球菌抗体GDH重组蛋白PPA-ELISA检测方法的建立 被引量：6

11

作者 夏小静 李书光 +4 位作者 王金良 陈金龙 谢金文 姜世金 沈志强 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期932-937,共6页

以纯化的猪链球菌重组谷氨酸脱氢酶(GDH)蛋白作为包被抗原,酶标葡萄球菌A(PPA)蛋白为二抗,建立了检测猪链球菌抗体的间接PPA-ELISA诊断方法。经方阵滴定确定了抗原的最适包被浓度为12.5mg/L,血清样品的最佳稀释倍数为1∶80,PPA-ELISA阳... 以纯化的猪链球菌重组谷氨酸脱氢酶(GDH)蛋白作为包被抗原,酶标葡萄球菌A(PPA)蛋白为二抗,建立了检测猪链球菌抗体的间接PPA-ELISA诊断方法。经方阵滴定确定了抗原的最适包被浓度为12.5mg/L,血清样品的最佳稀释倍数为1∶80,PPA-ELISA阳性反应的临界值为D450nm≥0.378,交叉反应试验结果表明,该重组抗原与其他常见的6种猪病的阳性血清不发生交叉反应,批内和批间重复试验的变异系数均小于10%。经与武汉科前动物生物制品有限责任公司的商品化猪链球菌抗体检测试剂盒比较,二者的符合率为96.7%;对320份血清进行猪链球菌抗体检测,阳性检出率为73.1%。试验证明,所建立的PPA-ELISA检测法重复性好、特异性强、灵敏度高,为大规模地进行猪链球菌病的流行病学调查和血清学诊断提供了有效的技术手段。 展开更多

关键词 猪链球菌 酶标葡萄球菌A蛋白-酶联免疫吸附试验 谷氨酸脱氢酶

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猪流行腹泻病毒N蛋白表达与PPA-ELISA抗体检测方法的建立 被引量：4

12

作者 王金良 祖立闯 +5 位作者 唐娜 李娇 董炳梅 魏凤 韩文瑜 沈志强 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期801-807,共7页

为建立一种快速的猪流行性腹泻病毒抗体检测方法,本研究参照已发表的猪流行性腹泻病毒(PEDV)N基因序列,RT-PCR扩增了长约1 300bp的N基因片段,连接pET30a表达载体后获得了以可溶性形式表达的重组N蛋白。重组蛋白纯化后,经免疫印迹检测证... 为建立一种快速的猪流行性腹泻病毒抗体检测方法,本研究参照已发表的猪流行性腹泻病毒(PEDV)N基因序列,RT-PCR扩增了长约1 300bp的N基因片段,连接pET30a表达载体后获得了以可溶性形式表达的重组N蛋白。重组蛋白纯化后,经免疫印迹检测证明具有良好的抗原性和特异性。以该蛋白作为诊断抗原,建立检测PEDV抗体的PPA-ELISA诊断方法。该诊断方法具有良好的敏感性、特异性和重复性,为PEDV的快速诊断、免疫猪群抗体监测和PEDV流行病学调查提供了一种快速、简便的血清学诊断方法。 展开更多

关键词 猪流行性腹泻病毒 N蛋白 ppa-elisa 检测

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应用PPA—ELISA检测鸡毒支原体血清抗体 被引量：3

13

作者 郭建华 陈明勇 陈德威 《畜牧兽医杂志》 1998年第1期5-6,共2页

应用PPA—ELISA检测鸡毒支原体血清抗体，其结果与血凝抑制试验和ELISA符合率为100％，是一种特异、敏感、简单、快速的检测方法。

关键词 鸡毒支原体 ppa-elisa 血清抗体

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PPA-ELISA检测猪瘟抗体方法在江苏省的应用 被引量：4

14

作者 李亚敏 王伟峰 郝玉玲 《畜牧与兽医》 北大核心 1990年第5期216-218,共3页

猪瘟是由猪瘟病毒引起的一种高度传染性疾病,死亡率很高,迄今尚无有效的治疗方法。自1980年以来全省改革了防疫制度,全面推行了常年防疫,使猪瘟逐步得到了控制。为了进一步控制和消灭猪瘟,我省25个市、县1985年与农业部签定了《猪瘟、... 猪瘟是由猪瘟病毒引起的一种高度传染性疾病,死亡率很高,迄今尚无有效的治疗方法。自1980年以来全省改革了防疫制度,全面推行了常年防疫,使猪瘟逐步得到了控制。为了进一步控制和消灭猪瘟,我省25个市、县1985年与农业部签定了《猪瘟、鸡新城疫免疫程序新技术推广》项目,按项目要求,在三年内要控制和消灭猪瘟和鸡新城疫。经过三年努力。 展开更多

关键词 猪瘟 抗体 ppa-elisa 检测

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猪流行性腹泻抗体PPA-ELISA检测方法的建立及其应用 被引量：5

15

作者 孙智锋 钱永清 +1 位作者 唐永兰 许大新 《上海畜牧兽医通讯》 北大核心 1995年第5期28-29,共2页

应用纯化猪流行性腹泻病毒抗原(PEDV)和酶标葡萄球菌A蛋白(PPA)建立的A-ELISA,通过对免疫猪血清PEDV抗体的动态测定及临床自然感染猪血清抗体水平的检测表明,该法敏感、特异、简便、快速,尤适于基层猪场大批血清样品抗体水平的普查与检测.

关键词 猪病 腹泻 病毒 抗体 ppa-elisa

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仔猪猪瘟母源抗体及免疫抗体监测实验研究 被引量：3

16

作者 陈耀 刘用玲 《西昌学院学报（自然科学版）》 2012年第1期19-22,共4页

由于猪瘟流行性差异,研究制订符合本地实际的猪瘟免疫程序是有效防控猪瘟的关键措施之一,而确定仔猪最佳首免日龄和免疫剂量是研究猪瘟免疫程序的两个重要内容。本文提出应用PPA(酶标葡萄球菌蛋白A)-ELISA法对达县某猪场进行了仔猪猪瘟... 由于猪瘟流行性差异,研究制订符合本地实际的猪瘟免疫程序是有效防控猪瘟的关键措施之一,而确定仔猪最佳首免日龄和免疫剂量是研究猪瘟免疫程序的两个重要内容。本文提出应用PPA(酶标葡萄球菌蛋白A)-ELISA法对达县某猪场进行了仔猪猪瘟母源抗体及免疫抗体监测实验研究,实验结果表明25日龄为最佳免疫日龄,1倍剂量为最佳免疫剂量。 展开更多

关键词 猪瘟 母源抗体 免疫抗体 最佳免疫日龄 最佳免疫剂量 ppa—elisa

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PPA－ELISA猪瘟免疫检测技术的应用 被引量：4

17

作者 陈春旺 梁砚如 +2 位作者 鲁还美 翁少霞 黄权时 《畜牧与兽医》 北大核心 1995年第5期224-225,共2页

ＰＰＡ－ＥＬＩＳＡ猪瘟免疫检测技术的应用陈春旺，梁砚如，鲁还美，翁少霞，黄权时（武汉市畜科所，４３００００）迄今为止，猪瘟仍是国内养猪业重要疫病之一，以武汉地区为例，从１９８０～１９８９年间，平均每年有４０００余头猪... ＰＰＡ－ＥＬＩＳＡ猪瘟免疫检测技术的应用陈春旺，梁砚如，鲁还美，翁少霞，黄权时（武汉市畜科所，４３００００）迄今为止，猪瘟仍是国内养猪业重要疫病之一，以武汉地区为例，从１９８０～１９８９年间，平均每年有４０００余头猪死于猪瘟，尽管猪瘟疫苗对预防猪瘟有... 展开更多

关键词 猪病 猪瘟 免疫 检测 ppa-elisa

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用PPA-ELISA等5种方法检测布病抗体敏感性 被引量：2

18

作者 刘宝全 李海滨 +3 位作者 魏国生 王君伟 徐玉绪 李英霞 《东北农学院学报》 CSCD 1990年第1期42-50,共9页

以布病S_2苗免疫猪,7,21和35天采血,血清457份。以4种常规方法检测,RBPT和SAT两法的检出率高于其他方法。血清置-80℃冰箱冻存2个月后,取84份,用PPA-ELISA及4种常规方法检测,SAT的阳性率为90.5％,高于其他方法,差异显著(P<0.05)。PPA... 以布病S_2苗免疫猪,7,21和35天采血,血清457份。以4种常规方法检测,RBPT和SAT两法的检出率高于其他方法。血清置-80℃冰箱冻存2个月后,取84份,用PPA-ELISA及4种常规方法检测,SAT的阳性率为90.5％,高于其他方法,差异显著(P<0.05)。PPA-ELISA和RBPT分别居第2位(87.2％)和第3位(85.7％)。PAT和CFT阳性率最低。检出抗体滴度比较,SAT高于PPA-ELISA,而后者又高于PAT。SAT、PPA-ELISA和RBPT三者之间符合率均较高(88％)。PPA,ELISA检测猪布病免疫抗体的敏感性低于SAT而高于其他方法。本文还探讨了5种方法的优缺点。 展开更多

关键词 布氏杆菌病 ppa-elisa 抗体滴度

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福建省1996年猪瘟抗体PPA—ELISA检测 被引量：2

19

作者 余群 黄旭明 +5 位作者 郑旭升 连增德 郭瑞生 缪昌盛 陈锦鸿 王瑞金 《福建畜牧兽医》 1997年第1期4-5,12,共2页

本文应用ＰＰＡ—ＥＬＩＳＡ对福建省十个县２５９９份送检血清作猪瘟抗体检测。结果表明本省猪瘟疫苗群体保护率达８２．５％，仔猪经二次免疫，１５９日龄猪瘟抗体ＯＤ值仍保持０．３，群体保护率仍保持７７％。

关键词 福建省 猪瘟 ppa-elisa 检测

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检测猪轮状病毒的一种新方法——夹心PPA-ELISA 被引量：2

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作者 侯继波 何家惠 +1 位作者 丁再棣 林继煌 《江苏农业学报》 CSCD 1993年第3期47-50,共4页

本研究将酶标记葡萄球菌A蛋白(PPA)这一通用试剂引入间接夹心酶联免疫吸附试验(ELISA),建立于夹心PPA—ELISA,用于检测猪轮状病毒时显示出优越性,比夹心ELISA敏感,背景染色极低,健猪粪便的背景光密度与PBS相同。

关键词 猪病 轮状病毒 ppa-elisa 检测

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