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雄黄对NB4和HL-60细胞的形态,PML mRNA及蛋白的表达影响 被引量:24
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作者 钟璐 陈芳源 +2 位作者 韩洁英 邵念贤 欧阳仁荣 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2001年第3期223-227,共5页
本研究以NB4 ,HL 60细胞为研究对象 ,采用Wright′s染色法及荧光染色法、免疫荧光技术及RT PCR法 ,探讨雄黄对NB4 ,HL 60细胞的形态、PMLmRNA及蛋白的表达影响。结果发现 :①经雄黄处理后 ,各组均出现细胞凋亡的形态学上改变。②雄黄处... 本研究以NB4 ,HL 60细胞为研究对象 ,采用Wright′s染色法及荧光染色法、免疫荧光技术及RT PCR法 ,探讨雄黄对NB4 ,HL 60细胞的形态、PMLmRNA及蛋白的表达影响。结果发现 :①经雄黄处理后 ,各组均出现细胞凋亡的形态学上改变。②雄黄处理后NB4细胞内融合蛋白降解 ,PML蛋白聚积于POD结构 ,随后降解 ;在HL 60细胞中PML蛋白发生相似改变。③雄黄处理后各组细胞PMLmRNA表达均无显著影响。结论指出 ,在雄黄诱导下PML在蛋白水平参与诱导白血病细胞凋亡机制 ,雄黄能诱导NB4 ,HL 60细胞凋亡 。 展开更多
关键词 雄黄 NB4细胞 HL-60细胞 pml蛋白 早幼粒细胞白血病 急性粒细胞白血病
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早幼粒细胞白血病蛋白与TAK1结合蛋白相互作用的生物信息学分析与验证
2
作者 成佳聪 李智慧 +4 位作者 刘鳐 李成 黄鑫 田颖鑫 沈富兵 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期179-186,共8页
目的通过生物信息学方法预测早幼粒细胞白血病蛋白与TAK1结合蛋白的相互作用,并通过免疫共沉淀方法进行实验验证。方法使用Rosetta软件,采用比较建模的方法,构建TAB1蛋白的三维模型;在PDB数据库中检索PML蛋白二级结构,并解析其晶体结构... 目的通过生物信息学方法预测早幼粒细胞白血病蛋白与TAK1结合蛋白的相互作用,并通过免疫共沉淀方法进行实验验证。方法使用Rosetta软件,采用比较建模的方法,构建TAB1蛋白的三维模型;在PDB数据库中检索PML蛋白二级结构,并解析其晶体结构和三维结构。Zdock3.0.2软件进行PML与TAB1的蛋白-蛋白对接,并提取最佳构象进行对接模型的分子结构分析。α-MMC处理的M1炎性巨噬细胞,利用免疫共沉淀技术检测两种蛋白的相互作用。结果以PML的6IMQ为对接部位时,PML蛋白与TAB1蛋白能形成3个盐桥、6个氢键和6个疏水作用;以PML的5YUF为对接部位时,PML蛋白与TAB1蛋白能形成1个氢键、3个静电相互作用和9个疏水作用,两种对接模式皆能形成良好的分子对接和相互作用;在α-MMC处理4h后,其PML-IP组的细胞裂解沉淀液中分别能检测到显著的PML和TAB1阳性蛋白条带。结论PML蛋白与TAB1蛋白能发生较强的相互作用。 展开更多
关键词 TAB1蛋白 pml蛋白 生物信息学 蛋白-蛋白对接 免疫共沉淀
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四硫化四砷治疗急性早幼粒细胞白血病过程中PML/PML-RARα蛋白的变化 被引量:4
3
作者 王景枝 刘艳荣 +4 位作者 秦亚溱 江浩 王锋容 鲍立 陆道培 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2003年第5期464-468,共5页
为了研究四硫化四砷 (As4S4)对急性早幼粒细胞白血病 (APL)患者白血病细胞中PML/PML RARα蛋白的作用 ,在患者治疗前和治疗后不同时间多次留取骨髓或外周血标本 ,用抗PML蛋白单抗对APL细胞进行间接免疫荧光染色 ,并在荧光显微镜下观察... 为了研究四硫化四砷 (As4S4)对急性早幼粒细胞白血病 (APL)患者白血病细胞中PML/PML RARα蛋白的作用 ,在患者治疗前和治疗后不同时间多次留取骨髓或外周血标本 ,用抗PML蛋白单抗对APL细胞进行间接免疫荧光染色 ,并在荧光显微镜下观察荧光信号的演变规律。结果显示 :治疗前APL细胞表现为细胞核内弥漫分布的大量微颗粒荧光信号。As4S4 治疗后 ,最早于第 2天即可出现荧光分布的改变 ,表现为微荧光颗粒消失 ,出现数个大荧光颗粒 ,并出现核周荧光 ,最终大荧光颗粒也消失。当As4S4 合用全反式维甲酸 (ATRA)时 ,PML蛋白荧光信号变化规律与单用As4S4 基本相同。但单独应用ATRA治疗后 ,PML蛋白荧光信号的改变与前两组明显不同 ,主要差别为微荧光颗粒不会很快消失 ,而是在微荧光颗粒逐渐减少的基础上 ,出现越来越多的大荧光颗粒 ,最终微荧光颗粒消失 ,而大荧光颗粒始终存在。结论 :As4S4 使患者体内APL细胞的PML/PML RARα蛋白发生重新分布 。 展开更多
关键词 四硫化四砷 急性早幼粒细胞白血病 pml蛋白 免疫荧光
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抗PML抗体免疫荧光法快速诊断急性早幼粒细胞白血病
4
作者 秦亚溱 喻新建 +1 位作者 刘艳荣 陈珊珊 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 1998年第1期76-78,共3页
对35例白血病病人骨髓标本进行抗PML抗体免疫荧光测定。19例急性早幼粒细胞白血病(APL)标本中,11例未治、3例服ATRA4天以内,以及3例复发病人均为典型APL荧光表现,2例ATRA诱导完全缓解APL病人荧光表现为非APL型。16例未治的非APL病人均... 对35例白血病病人骨髓标本进行抗PML抗体免疫荧光测定。19例急性早幼粒细胞白血病(APL)标本中,11例未治、3例服ATRA4天以内,以及3例复发病人均为典型APL荧光表现,2例ATRA诱导完全缓解APL病人荧光表现为非APL型。16例未治的非APL病人均为典型非APL表现。研究结果表明,抗PML抗体免疫荧光法简便、快速、特异,适于诊断未治和复发的APL病人。 展开更多
关键词 pml抗体免疫荧光法 急性早幼粒细胞白血病 pml蛋白 pml/RARa融合蛋白
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PML翻译后修饰在肿瘤细胞中的研究进展 被引量:2
5
作者 黄倩 林雪平 +1 位作者 潘巍巍 刘胜兵 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第8期1532-1536,共5页
早幼粒细胞白血病(promyelocytic leukemia,PML)基因最初被发现于急性早幼粒细胞白血病(acute promyelocytic leukemia,APL)中,在大部分APL病例中发现染色体异位t(15;17),即17号染色体上的维甲酸受体α(retinoic acid recept... 早幼粒细胞白血病(promyelocytic leukemia,PML)基因最初被发现于急性早幼粒细胞白血病(acute promyelocytic leukemia,APL)中,在大部分APL病例中发现染色体异位t(15;17),即17号染色体上的维甲酸受体α(retinoic acid receptor α,RARα)基因与位于15号染色体上的PML基因相互异位,产生新的融合蛋白PML-RARα,这种融合蛋白在APL中发挥重要的作用[1]。PML蛋白又称TRIM19,属于三重基序蛋白(tripartite motif,TRIM)家族成员,有6个细胞核亚型和1个胞质亚型[2]。TRIM家族蛋白由1个锌指结构域、1个或2个B-box 基序、1个螺旋-卷曲-卷曲结构域构成,也叫RBCC(ring, B-box and coiled-coil)家族蛋白3],PML蛋白有3个富集半胱氨酸的锌指结构域和1个螺旋-卷曲-卷曲结构域,这些结构域共同形成RBCC模块。PML核小体 (PML nuclear bodies,PML-NBs) 是核基质相关结构域,PML-NBs在多数细胞核中以点状分布(直径为0.1~1 μm), 展开更多
关键词 pml蛋白 pml核小体 SUMO化 磷酸化
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重型再生障碍性贫血患者血清诱导淋巴细胞凋亡及PML蛋白表达 被引量:3
6
作者 刘红 田中公夫 镰田七男 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2002年第6期508-511,共4页
用免疫荧光染色及Westernblot检测重型再障患者血清对正常人淋巴细胞凋亡的促进作用及早幼粒细胞白血病 (PML)蛋白表达的诱导作用 ,并进一步观察Caspase3,8抑制剂作用前后这两者的变化 ,以探讨再生障碍性贫血(再障 )患者淋巴细胞凋亡增... 用免疫荧光染色及Westernblot检测重型再障患者血清对正常人淋巴细胞凋亡的促进作用及早幼粒细胞白血病 (PML)蛋白表达的诱导作用 ,并进一步观察Caspase3,8抑制剂作用前后这两者的变化 ,以探讨再生障碍性贫血(再障 )患者淋巴细胞凋亡增加的机制。结果显示 ,10例重型再障患者血清作用后 ,淋巴细胞的凋亡率较正常人血清作用后明显增加 (P <0 0 5 )。同时 ,PML蛋白也明显高表达 (P <0 0 0 1) ,两者呈正相关 (r =0 919,P <0 0 0 1)。caspase8抑制剂可部分阻断再障患者血清的这种作用 ,但caspase3抑制剂不能阻断这种作用。以上结果提示重型再障患者血清可诱导淋巴细胞PML蛋白的高表达 ,从而导致淋巴细胞凋亡 ,caspase8可能参与了这一过程。 展开更多
关键词 再生障碍性贫血 pml蛋白 细胞凋亡 CASPASE3 CASPASE8
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重型再生障碍性贫血患者血清诱导CD_(34)^+细胞凋亡及PML蛋白表达 被引量:3
7
作者 刘红 陆德炎 +1 位作者 杨锦媛 徐瑞容 《中华血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第11期596-597,共2页
关键词 再生障碍性贫血 血清 诱导 CD34^+ 细胞凋亡 pml蛋白 表达
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肝癌组织和细胞系PML蛋白表达及As_2O_3对其表达的调节作用 被引量:1
8
作者 金世龙 谭智明 +5 位作者 张鹏 匡远黎 杜波 唐华明 王郑 杜之明 《重庆医学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第22期2897-2899,共3页
目的:观察肝癌(HCC)组织及细胞系PML蛋白表达和三氧化二砷(As2 O3)对HCC PML蛋白表达的调节作用。方法免疫组织化学法检测不同分化程度HCC组织PML蛋白表达水平,Western blot分析12例 HCC患者的癌组织,和 HuH7、HepG2、Hep3B、SMM... 目的:观察肝癌(HCC)组织及细胞系PML蛋白表达和三氧化二砷(As2 O3)对HCC PML蛋白表达的调节作用。方法免疫组织化学法检测不同分化程度HCC组织PML蛋白表达水平,Western blot分析12例 HCC患者的癌组织,和 HuH7、HepG2、Hep3B、SMMC-7721、MHC97H等5种 HCC细胞系PML蛋白表达情况。观察低浓度As2O3处理72~96 h后,HuH7, HepG2,Hep3B、SMMC-7721、MHC97H细胞PML蛋白表达变化。结果免疫组织化学染色显示,HCC组织中细胞核、细胞质均有不同程度PM L蛋白表达,细胞内分布不均匀。高分化、中分化和低分化 HCC组织 PM L 蛋白表达差异不明显。Western blot分析发现12例HCC组织均有不同程度PML蛋白表达,而且各例 HCC的PML蛋白表达量不同。 HuH7、HepG2、Hep3B、SMMC-7721和MHC97H等5种细胞系均表达PML蛋白,而且PML蛋白灰度相差很小。 HuH7、HepG2、Hep3B、SMMC-7721、MHC97H经过0.25μg/mL的As2O3培养72~96 h后PML蛋白表达明显减少,As2O3可以下调肝癌细胞PML蛋白表达。结论 HCC组织和细胞系存在PML蛋白表达,而且As2O3可以调控肝癌细胞PML蛋白表达,PML蛋白可能是As2O3治疗肝癌的靶分子。 展开更多
关键词 肝细胞癌 pml蛋白 AS2O3
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再生障碍性贫血患者血清诱导淋巴细胞凋亡
9
作者 刘红 三原圭一朗 田中公夫 《交通医学》 2001年第6期617-619,共3页
目的 :探讨再生障碍性贫血 (再障 )患者淋巴细胞凋亡增加的机制。方法 :用免疫荧光染色检测重型再障患者血清对正常人淋巴细胞凋亡的促进作用及PML表达的诱导作用。结果 :10例重型再障患者血清作用后的淋巴细胞的凋亡率较正常人血清作... 目的 :探讨再生障碍性贫血 (再障 )患者淋巴细胞凋亡增加的机制。方法 :用免疫荧光染色检测重型再障患者血清对正常人淋巴细胞凋亡的促进作用及PML表达的诱导作用。结果 :10例重型再障患者血清作用后的淋巴细胞的凋亡率较正常人血清作用后明显增加 (P <0 .0 5 )。同时 ,PML蛋白也明显高表达 (P <0 .0 0 1) ,两者呈正相关 (r =0 919,P <0 .0 0 1)。结论 :重型再障患者血清可诱导淋巴细胞PML蛋白的高表达 ,从而导致淋巴细胞凋亡。 展开更多
关键词 再生障碍性贫血 pml蛋白 细胞凋亡 病理
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早幼粒细胞白血病核体研究进展
10
作者 吴秀梅 张梅 《国外医学(输血及血液学分册)》 CAS 2002年第1期1-5,共5页
早幼粒细胞白血病(PML)基因位于15号染色体上,其表达产物PML蛋白定位于一种被称为核体或POD的核内亚微结构中,具有抑制肿瘤、抑制生长及调节转录等作用。急性早幼粒细胞白血病(APL)患者形成PML-RARα融合基因,表达融合蛋白,使正常核体... 早幼粒细胞白血病(PML)基因位于15号染色体上,其表达产物PML蛋白定位于一种被称为核体或POD的核内亚微结构中,具有抑制肿瘤、抑制生长及调节转录等作用。急性早幼粒细胞白血病(APL)患者形成PML-RARα融合基因,表达融合蛋白,使正常核体结构发生改变。本文重点介绍PML蛋白与其它POD相关蛋白的功能,相互作用及APL发病的分子机制研究进展。 展开更多
关键词 早幼粒细胞白血病 核体 pml蛋白 肿瘤抑制 特异性转录启动抑制剂
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再生障碍性贫血患者造血细胞凋亡与PML蛋白的关系
11
作者 蔡奕峰 宋国齐 +2 位作者 丁润生 陆伟 姜胜华 《中国血液流变学杂志》 CAS 2007年第3期389-391,共3页
目的了解再生障碍性贫血患者血清对造血细胞凋亡的活性,及其对造血细胞PML蛋白表达和定位的影响。方法应用甲基纤维素半固体培养法,免疫荧光标记法及流式细胞技术分析12例再生障碍性贫血患者血清体外抑制正常人骨髓BFU-E、CFU-GM增殖及... 目的了解再生障碍性贫血患者血清对造血细胞凋亡的活性,及其对造血细胞PML蛋白表达和定位的影响。方法应用甲基纤维素半固体培养法,免疫荧光标记法及流式细胞技术分析12例再生障碍性贫血患者血清体外抑制正常人骨髓BFU-E、CFU-GM增殖及促进其集落细胞凋亡的作用,以共聚焦免疫荧光显微镜及流式细胞仪检测再生障碍性贫血患者血清与正常人骨髓造血细胞共同培养后,再生障碍性贫血患者血清对所形成集落细胞内的PML蛋白表达的影响。结果4例重型再生障碍性贫血(SAA)患者和8例非重型再生障碍性贫血(NSAA)患者血清在体外均可明显抑制正常人骨髓BFU-E、CFU-GM的增殖;SAA组、NSAA组和正常对照组血清作用后集落细胞内均表达一定量的PML蛋白,SAA组高于对照组。结论再生障碍性贫血患者血清具有诱导造血细胞凋亡的活性;再生障碍性贫血患者血清作用后PML蛋白在造血细胞内表达增加。 展开更多
关键词 贫血 再生障碍性 细胞凋亡 pml蛋白
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早幼粒细胞白血病蛋白及其核体研究进展
12
作者 钟璐 《国外医学(输血及血液学分册)》 2000年第1期8-11,共4页
早幼粒细胞白血病蛋白(PML蛋白)是核体(PML Oncogenic Domain,POD)的组成成份,它是细胞生长和转化的抑制蛋白。研究表明PML蛋白具有抗肿瘤特性,它在许多肿瘤的形成中起重要作用。PODs在整个细胞周期中,其数目及大小都在不断变化。PODs... 早幼粒细胞白血病蛋白(PML蛋白)是核体(PML Oncogenic Domain,POD)的组成成份,它是细胞生长和转化的抑制蛋白。研究表明PML蛋白具有抗肿瘤特性,它在许多肿瘤的形成中起重要作用。PODs在整个细胞周期中,其数目及大小都在不断变化。PODs的形态结构受多种因素影响。当PML与RARα形成融合基因,继而形成PML-RARα融合蛋白,破坏POD结构及功能,阻断骨髓干细胞的正常分化和凋亡,导致急性早幼粒细胞白血病(APL)发生。 展开更多
关键词 白血病 APL pml蛋白 研究进展
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从石蜡包埋肺癌组织提取RNA检测PML基因转录的研究 被引量:6
13
作者 赵志龙 宗志红 +2 位作者 李建新 刘宏旭 赵惠儒 《中国肺癌杂志》 CAS 2008年第4期563-566,共4页
背景与目的甲醛固定石蜡包埋组织(FPE)包含大量临床病理信息,同时还含有大量的基因和蛋白物质可用来研究临床意义。本研究的目的是探讨从FPE中提取RNA的可能性,检测急性早幼粒细胞白血病基因(PML)在肺癌FPE中的转录表达。方法选取前期... 背景与目的甲醛固定石蜡包埋组织(FPE)包含大量临床病理信息,同时还含有大量的基因和蛋白物质可用来研究临床意义。本研究的目的是探讨从FPE中提取RNA的可能性,检测急性早幼粒细胞白血病基因(PML)在肺癌FPE中的转录表达。方法选取前期经免疫组织化学染色证实无PML蛋白表达的40例肺癌FPE,存档时间在60-85个月,5例新鲜冰冻肺腺癌组织作为对照;利用Trizol一步法提取RNA,经OD值检测验证RNA质量;RT-PCR检测PML的基因转录表达。结果自肺癌FPE和新鲜冰冻组织提取的RNA的OD比值在1.7-2.1。RT-PCR显示,40例FPE以及5例新鲜冰冻组织中,PML(295bp)以及β-actin(318bp)mRNA均有表达。结论利用Trizol一步法自FPE提取RNA进行RT-PCR,可有效扩增出300bp左右的产物;肺癌组织中PML蛋白存在转录后缺失。 展开更多
关键词 RNA提取 石蜡包埋组织 pml蛋白 RT-PCR 病理学
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STUDY ON EFFECTS OF QUERCETIN ON PML GENE AND PROTEIN IN LEUKEMIA CELL LINES
14
作者 钟璐 陈芳源 +2 位作者 欧阳仁荣 韩洁英 邵念贤 《Journal of Shanghai Second Medical University(Foreign Language Edition)》 2003年第1期12-15,29,共5页
Objective To investigate the effect of quercetin on PML gene and protein expression andlocalization in leukemia cell lines. Methods Cell morphology was assayed by Wright's stain and fluorescence stain, and PML mRN... Objective To investigate the effect of quercetin on PML gene and protein expression andlocalization in leukemia cell lines. Methods Cell morphology was assayed by Wright's stain and fluorescence stain, and PML mRNA expression by RT-PCR , PML protein localization by immuno-fluorescence. Results NB4 and HL-60 cells differentiated morphologically after treatment with all-trans-retinoic acid (ATRA) while K562 cells did not differentiate. Typical apoptosis was found in each cell line after treatment with quercetin. Immuno-fluorescence analysis showed , after treatment with ATRA , the fusion protein disappeared in NB4 cells and PML protein relocated , while HL-60 and K562 cells had no difference from control cells. After treatment with quercetin, the fusion protein disappeared in NB4 cells, PML protein relocated, then degraded. In HL-60 cells and K562 cells, PML protein also located and then degraded . The expression of PML mRNA was not changed in all three cell lines after treatment with ATRA or quercetin. Conclusion PML plays the role of differentiation and apoptosis inducer in leukemia cells at the translational level. PML in POD plays the role of apoptosis inducer and the growth control of leukemia cells. 展开更多
关键词 quercetin ATRA pml NB4 cell HL-60 cell K562 cell
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生长抑制因子诱导膀胱肿瘤细胞凋亡的研究 被引量:1
15
作者 李磊 贺大林 +4 位作者 何辉 王新阳 张林琳 罗勇 南勋义 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第25期1766-1769,共4页
目的探讨生长抑制因子(PML)诱导膀胱肿瘤细胞凋亡的分子机制。方法应用脂质体Lipofectamine2000分别将重组可诱导表达的真核表达载体PMEP4/PML和对照PMEP4空载体转染到膀胱肿瘤细胞系UMUC2中,300μg/ml潮霉素B筛选稳定表达PML的抗性克... 目的探讨生长抑制因子(PML)诱导膀胱肿瘤细胞凋亡的分子机制。方法应用脂质体Lipofectamine2000分别将重组可诱导表达的真核表达载体PMEP4/PML和对照PMEP4空载体转染到膀胱肿瘤细胞系UMUC2中,300μg/ml潮霉素B筛选稳定表达PML的抗性克隆。激光共聚焦检测PML蛋白表达。DNAladder法检测肿瘤细胞凋亡。Western印迹法检测凋亡相关蛋白表达情况。结果经5μmol/L的CdSO4诱导表达后,激光共聚焦显微镜观察发现转染PMEP4/PML组的细胞核内有散在的斑点样的黄绿色荧光亮点,而转染空载体PMEP4组细胞未见特异性的荧光斑点表达。DNA梯度法显示转染PML细胞在诱导PML表达后24h出现梯状凋亡条带。Western印迹法检测凋亡相关蛋白半胱氨蛋白水解酶3、活化PARP上调,而survivin的表达水平下调。结论PML诱导膀胱肿瘤细胞凋亡可能与上调半胱氨蛋白水解酶3、活化PARP蛋白,抑制survivin的表达有关。 展开更多
关键词 肿瘤细胞凋亡 生长抑制因子 WESTERN印迹法 膀胱 半胱氨蛋白水解酶 survivin 凋亡相关蛋白 pml蛋白表达 激光共聚焦 真核表达载体 诱导表达 肿瘤细胞系 mol/L 分子机制 方法应用 抗性克隆 稳定表达 表达情况 细胞核内
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白血病细胞早幼粒细胞白血病(PML)蛋白存在形式的检测和临床意义 被引量:4
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作者 宋梅 吴秀梅 +1 位作者 张梅 贺鹏程 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第7期971-976,共6页
目的研究早幼粒细胞白血病(PML)蛋白在急性早幼粒细胞白血病(APL)不同阶段存在形式,探讨全反式维甲酸(ATRA)、砷剂、化疗药物对PML蛋白存在形式的影响。方法收集42例APL的骨髓细胞和白血病NB4、MR2细胞,采用1μmol/L三氧化二砷(As_2O_3)... 目的研究早幼粒细胞白血病(PML)蛋白在急性早幼粒细胞白血病(APL)不同阶段存在形式,探讨全反式维甲酸(ATRA)、砷剂、化疗药物对PML蛋白存在形式的影响。方法收集42例APL的骨髓细胞和白血病NB4、MR2细胞,采用1μmol/L三氧化二砷(As_2O_3)、1μmol/L四硫化四砷(As_4S_4)、1μmol/L ATRA、10 mg/L阿糖胞苷、1 mg/L高三尖杉酯碱处理,采用间接免疫荧光法,检测处理前后细胞PML荧光信号变化。结果 APL初发病例87.5%表现为小荧光信号(细胞核内密布满天星般荧光亮点,多于30个/细胞),完全缓解病例91.67%表现为大荧光信号(细胞核内有较大的荧光亮点,少于30个/细胞),复发病例中83.33%表现为小荧光信号;与未加药组相比,ARTA组、As_2O_3组、As_4S_4组能使初发患者APL细胞的PML蛋白表达由小荧光信号转变为大荧光信号,阿糖胞苷组、高三尖杉酯碱组则无明显影响;ARTA能使NB4细胞PML蛋白表达由小荧光信号转变为大荧光信号,而不能改变MR2细胞PML蛋白表达的小荧光信号,As2O3和As4S4能使NB4、MR2细胞PML蛋白表达由小荧光信号转变为大荧光信号。结论检测APL细胞PML蛋白存在形式对APL预后判断及合理药物选择具有实际应用价值。 展开更多
关键词 早幼粒细胞白血病(pml)蛋白 急性早幼粒细胞白血病(APL) 全反式维甲酸(ATRA)
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酵母双杂交诱饵载体pGBKT7-PML-V的构建、表达及鉴定
17
作者 钟梁 王翀 +5 位作者 刘北忠 王东生 郝坡 刘畅 金丹婷 王春光 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2008年第3期257-260,共4页
目的:构建早幼粒细胞白血病基因变异蛋白(Promyelocytic leukemia,PML-V)的诱饵表达载体,为应用酵母双杂交系统(Yeast two-hybrid system)筛选与PML-V相互作用的蛋白建立实验基础。方法:PCR扩增PML-V,克隆入诱饵载体pGBKT7中,经测序鉴定... 目的:构建早幼粒细胞白血病基因变异蛋白(Promyelocytic leukemia,PML-V)的诱饵表达载体,为应用酵母双杂交系统(Yeast two-hybrid system)筛选与PML-V相互作用的蛋白建立实验基础。方法:PCR扩增PML-V,克隆入诱饵载体pGBKT7中,经测序鉴定后,将构建好的诱饵载体pGBKT7-PML-V转化到酵母细胞AH109中,并利用蛋白印迹法(Western Blotting)分析诱饵蛋白的表达情况。同时检测诱饵蛋白有无毒性、渗漏和自激活作用。结果:成功扩增了PML-V基因片断,并克隆入pGBKT7中,测序结果正确。诱饵载体成功转化到酵母细胞AH109中,诱饵蛋白无毒性、渗漏和自激活作用,Western Blotting分析证实酵母细胞表达诱饵蛋白。结论:成功构建了PML-V结合域的酵母诱饵表达载体,为进一步运用酵母双杂交技术筛选与之相互作用的蛋白奠定了基础。 展开更多
关键词 pml变异蛋白 质粒构建 诱饵蛋白
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