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猪CD151基因的克隆及过表达细胞系的构建
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作者 樊爽爽 杜丽丽 +4 位作者 郭珍珍 鲁绍芳 曾磊 王江 杨国宇 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期33-38,50,共7页
猪繁殖与呼吸综合征病毒（Porcine reproductive and respiratory syndrome virus，PRRSV）主要感染猪肺泡巨噬细胞，但对猪源的其他细胞系不易感。本试验通过构建PK15-CD151和3D4／21-CD151过表达细胞系，为深入研究PRRSV感染宿主细胞... 猪繁殖与呼吸综合征病毒（Porcine reproductive and respiratory syndrome virus，PRRSV）主要感染猪肺泡巨噬细胞，但对猪源的其他细胞系不易感。本试验通过构建PK15-CD151和3D4／21-CD151过表达细胞系，为深入研究PRRSV感染宿主细胞的机制奠定基础。应用分子生物学方法、实时荧光定量PCR和荧光显微镜技术，对基因CD151在组织中的分布情况进行检测、基因克隆、真核表达载体的构建、对CD151在PK15和3D4／21细胞内的过表达情况，以及对细胞生长增殖的影响进行了研究。结果显示：CD151基因在不同组织内均有表达，但表达量有差异；PB真核表达载体构建成功，荧光显微镜下可见转染PB载体和CD151基因共转染的PK15和3D4／21细胞表达强烈的绿色荧光，实时荧光定量PCR分析结果进一步证实，CD151在转染后的细胞中获得超表达，并且对细胞的生长增殖无影响。本试验成功构建了PK15-CD151和3D4／21-CD151过表达细胞系，过表达细胞系的成功构建为进一步探索CD151在PRRSV感染细胞过程中的协同作用提供了细胞模型，特别是对深入研究PRRSV的入侵及宿主识别具有重要意义。 展开更多
关键词 PRRSV 猪CD151 基因克隆 载体构建 pk15和3D4/21细胞 真核表达
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