丹参二萜醌通过PERK-EIF2α通路诱导肺癌PC9细胞凋亡的机制研究 被引量：12

1

作者 李晓娟 夏榕蔓 +1 位作者 楼招欢 张光霁 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期1897-1902,共6页

目的:探讨PERK-EIF2α通路在丹参二萜醌诱导肺癌PC9细胞凋亡中的作用。方法:采用0、2.5、5.0、7.5μg/mL丹参二萜醌处理PC9细胞24h后,CCK8法、Annexin V-FITC/PI双染色法分析细胞增殖活性及凋亡情况;Western blot检测凋亡相关蛋白Bax、B... 目的:探讨PERK-EIF2α通路在丹参二萜醌诱导肺癌PC9细胞凋亡中的作用。方法:采用0、2.5、5.0、7.5μg/mL丹参二萜醌处理PC9细胞24h后,CCK8法、Annexin V-FITC/PI双染色法分析细胞增殖活性及凋亡情况;Western blot检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2,PERK-EIF2α通路相关关键蛋白,以及下游CHOP、ATF4蛋白表达水平;PERKsi RNA转染PC9细胞,Western blot检测PERK蛋白的转染结果,筛选出干扰效果最佳的片段。Annexin V-FITC/PI双染色法检测沉默PERK基因后丹参二萜醌对PC9细胞的凋亡情况,Western blot分析PERK-EIF2α通路相关关键蛋白的表达情况。结果:随着丹参二萜醌浓度的增加,PC9细胞增殖抑制作用增加,凋亡率显著增高(P<0.05);随着时间延长PERK、EIF2α蛋白磷酸化水平明显增加,且以8h增加最为明显(P<0.05);其下游蛋白ATF4表达量逐渐减低,CHOP逐渐增高,呈剂量依赖性。PERK蛋白干扰后研究得到与干扰前相反的结果:与空载体组比较,丹参二萜醌诱导PC9细胞凋亡被明显抑制(P<0.05);PERK、EIF2α蛋白磷酸化水平明显降低(P<0.05),ATF4表达量有所增加,CHOP有所降低。结论:丹参二萜醌可触发PC9细胞内质网应激,其诱导细胞凋亡的机制与激活PERK/EIF2α通路密切相关。 展开更多

关键词 丹参二萜醌 肺癌PC9细胞 细胞凋亡 perk-eif2α通路

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基于PERK-eIF2α信号通路探讨眼针对脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织Atg12表达的影响 被引量：2

2

作者 赵甲秀 潘茜 +7 位作者 于丹 王莹 邰东梅 马贤德 徐畅 何树诺 张威 王哲 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2023年第10期60-63,I0013,共5页

目的 通过检测各组脑组织中磷酸化蛋白激酶R样内质网激酶(phosphorylation protein kinase-like ER kinase, p-PERK)、磷酸化真核起始因子2α(phosphorylated α subunit of eukaryotic initiation factor 2,p-eIF2α)、自噬相关基因12(... 目的 通过检测各组脑组织中磷酸化蛋白激酶R样内质网激酶(phosphorylation protein kinase-like ER kinase, p-PERK)、磷酸化真核起始因子2α(phosphorylated α subunit of eukaryotic initiation factor 2,p-eIF2α)、自噬相关基因12(antigen, Atg12)蛋白表达水平的变化,探讨眼针是否能够通过调控内质网应激信号通路PERK-eIF2α影响脑缺血再灌注损伤(cerebral ischemia reperfusion injury, CIRI)大鼠脑组织Atg12的表达。方法 建立大鼠脑缺血再灌注损伤模型,实验分为4组,即:对照组、假手术组、模型组、眼针组。末次针刺后,对各组大鼠进行神经功能缺损评分,透射电镜观察各组大鼠自噬小体的表达情况,然后采用Western blot法检测脑组织中p-PERK、p-eIF2α、Atg12蛋白表达。结果 与对照组和假手术组相比,模型组大鼠神经功能缺损评分、脑组织中p-PERK、p-eIF2α、Atg12蛋白表达均升高,差异具有统计学意义(P<0.01),自噬小体数量增多;与模型组相比,眼针组大鼠神经功能缺损评分、脑缺血组织中p-PERK、p-eIF2α、Atg12的蛋白表达明显降低,差异具有统计学意义(P<0.01),自噬小体数量减少。结论 眼针能够降低脑缺血再灌注损伤模型大鼠脑组织自噬蛋白Atg12的表达,其机制可能与调控内质网应激通路PERK-eIF2α有关。 展开更多

关键词 脑缺血再灌注损伤 眼针疗法 perk-eif2α通路 Atg12

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芪蛭三七汤对心肌梗死大鼠心室重构及内质网应激凋亡的影响 被引量：6

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作者 苏学旭 仲秀艳 《中国现代医学杂志》 CAS 2019年第19期8-16,共9页

目的探讨芪蛭三七汤对心肌梗死(MI)大鼠心室重构及心肌细胞内质网应激凋亡的影响。方法采用冠状动脉结扎法复制大鼠心肌梗死模型,分为空白对照组(n=15)、假手术组(n=14)、MI组(n=11)及芪蛭三七汤干预模型组(QZ组)(n=13)。空白对照组、... 目的探讨芪蛭三七汤对心肌梗死(MI)大鼠心室重构及心肌细胞内质网应激凋亡的影响。方法采用冠状动脉结扎法复制大鼠心肌梗死模型,分为空白对照组(n=15)、假手术组(n=14)、MI组(n=11)及芪蛭三七汤干预模型组(QZ组)(n=13)。空白对照组、假手术组和MI组大鼠均灌胃给予无菌生理盐水,QZ组大鼠灌胃给予22.68 g/kg芪蛭三七汤溶液,连续给药4周。采用超声心动图评价大鼠心功能,Western blotting检测大鼠心肌细胞凋亡相关蛋白以及蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)-真核细胞翻译起始因子2α(e IF2α)通路相关蛋白的表达。结果①心功能比较:与空白对照组和假手术组大鼠比较,MI组大鼠左室射血分数(LVEF)和短轴缩短率(FS)降低,而左室舒张末径(LVEDd)、左室收缩末径(LVESd)增加(P <0.05)。QZ组大鼠LVEF和FS高于MI组大鼠,LVEDd和LVESd低于MI组大鼠(P <0.05)。与空白对照组和假手术组大鼠比较,MI组大鼠左室压上升最大速率(+dp/dtmax)和左室压下降最大速率(-dp/dtmax)绝对值降低(P <0.05)。QZ组大鼠+dp/dtmax和-dp/dtmax绝对值高于MI组大鼠(P <0.05)。空白对照组和假手术组大鼠无梗死区域。QZ组大鼠梗死范围低于MI组大鼠(P <0.05)。②心肌细胞凋亡指标:MI组大鼠非梗死区心肌凋亡指数(AI)高于空白对照组和假手术组大鼠(P <0.05)。QZ组大鼠非梗死区心肌AI低于MI组大鼠(P <0.05)。与空白对照组和假手术组比较,MI组大鼠心肌组织促凋亡蛋白Caspase-3、Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达量升高,而抗凋亡蛋白B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)表达量降低(P <0.05)。与MI组大鼠比较,QZ组大鼠心肌组织Caspase-3、Bax蛋白表达量降低,Bcl-2蛋白表达量升高(P <0.05)。③PERK-eIF2α信号通路:与空白对照组和假手术组比较,MI组大鼠心肌组织葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、p-PERK、p-eIF2α及活化转录因子4(ATF4)蛋白表达量升高(P <0.05)。而与MI组大鼠比较,QZ组大鼠心肌组� 展开更多

关键词 心肌梗死/心肌梗塞 芪蛭三七汤 心室重构 内质网应激 perk-eif2α信号通路

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基于PERK/eIF2α通路探讨清热止血方联合雷公藤多苷治疗紫癜性肾炎大鼠的疗效机制

4

作者 王龙 丁樱 +2 位作者 徐闪闪 张霞 韩姗姗 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期3424-3429,共6页

目的:探讨清热止血方联合雷公藤多苷(GTW)改善紫癜性肾炎(HSPN)内皮损伤的机制。方法:72只大鼠随机分为空白对照组及造模组,造模组构建HSPN大鼠模型,将造模成功后的大鼠随机分为模型组、清热止血方组、GTW组、联合组、泼尼松组。其中空... 目的:探讨清热止血方联合雷公藤多苷(GTW)改善紫癜性肾炎(HSPN)内皮损伤的机制。方法:72只大鼠随机分为空白对照组及造模组,造模组构建HSPN大鼠模型,将造模成功后的大鼠随机分为模型组、清热止血方组、GTW组、联合组、泼尼松组。其中空白对照组及模型组予0.9%氯化钠溶液灌胃,余治疗组予相应药物灌胃,2次/d,干预4周后,检测大鼠24 h尿总蛋白定量;光镜下观察大鼠肾组织PAS染色情况;荧光镜下观察大鼠肾组织肾小球IgA沉积情况;ELISA检测血清白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、血管细胞黏附因子-1(VCAM-1)、血管内皮生长因子(VEGF)表达;Western Blot检测大鼠肾组织磷酸化RNA蛋白激酶样内质网激酶(p-PERK)、磷酸化真核翻译起始因子2α(p-eIF2α)、葡萄糖调节蛋白78(GRP78)蛋白表达。结果:与空白对照组比较,模型组大鼠24 h尿总蛋白定量显著升高(P<0.05),模型组可见肾小球系膜增生,肾小球毛细血管管腔受压变狭窄,且伴有少量炎症细胞浸润,肾小球系膜区可见有团块状绿色荧光,且强度较高,血清IL-1β、TNF-α、VCAM-1、VEGF表达显著升高(P<0.05),p-PERK、p-eIF2α、GRP78蛋白表达显著升高(P<0.05)。与模型组比较,联合组治疗可显著降低24 h尿总蛋白定量水平(P<0.05),改善肾组织系膜增生及IgA荧光沉积,降低血清中IL-1β、TNF-α、VCAM-1、VEGF表达(P<0.05),降低p-PERK、p-eIF2α、GRP78蛋白表达(P<0.05)。结论:清热止血方联合GTW可有效降低HSPN模型大鼠尿总蛋白水平,减轻肾脏病理及内皮损伤,其机制可能与调控肾组织内质网应激PERK/eIF2α通路有关。 展开更多

关键词 紫癜性肾炎 清热止血方 雷公藤多苷 RNA蛋白激酶样内质网激酶/真核翻译起始因子2α通路 动物模型 机制 内质网应激 炎症因子

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地黄饮子调控PERK/eIF2α通路改善阿尔茨海默病小鼠脑内炎症微环境 被引量：3

5

作者 郭昕鑫 《中医学报》 CAS 2022年第9期1941-1946,共6页

目的:基于蛋白激酶R样内质网激酶(protein kinase R-like endoplasmic reticulum kinase,PERK)/真核细胞起始因子2α(eukaryotic initiation factor 2α,eIF2α)通路探讨地黄饮子对阿尔茨海默病(Alzheimer′s disease,AD)小鼠脑内炎症... 目的:基于蛋白激酶R样内质网激酶(protein kinase R-like endoplasmic reticulum kinase,PERK)/真核细胞起始因子2α(eukaryotic initiation factor 2α,eIF2α)通路探讨地黄饮子对阿尔茨海默病(Alzheimer′s disease,AD)小鼠脑内炎症微环境的改善作用及其机制。方法:40只SPF级雄性APP/PS1双转基因小鼠随机分为空白对照组、模型组、多奈哌齐组(1 mg·kg^(-1))和地黄饮子组(0.25 g·kg^(-1)),每组各10只。除空白对照组外,其余组腹腔注射100 mg·kg^(-1)3-硝基丙酸建立AD模型。造模完成后,各组小鼠分别灌胃给予相应药物进行干预,空白对照组和模型组灌胃给予等体积生理盐水,每日1次,持续7 d。Morris水迷宫实验评价小鼠的学习记忆能力;ELISA法检测小鼠脑脊液中巨噬细胞炎性蛋白-2(macrophage inflammatory protein-2,MIP-2)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的水平;Western Blot法检测PERK/eIF2α通路相关蛋白表达水平。结果:与空白对照组比较,模型组穿越平台次数显著减少(P<0.05),目标象限停留时间显著缩短(P<0.05),相对象限停留时间及第2~5天逃避潜伏期显著延长(P<0.05),MIP-2、IL-1β、TNF-α、PERK/p-PERK、eIF2α/p-eIF2α及β-分泌酶1(β-secretase,BACE1)水平明显升高(P<0.05);与模型组比较,多奈哌齐组和地黄饮子组穿越平台次数显著增多(P<0.05),目标象限停留时间显著延长(P<0.05),相对象限停留时间及第2~5天逃避潜伏期显著缩短(P<0.05),MIP-2、IL-1β、TNF-α、PERK/p-PERK、eIF2α/p-eIF2α及BACE1水平明显降低(P<0.05)。结论:地黄饮子能显著改善AD小鼠学习记忆能力及脑内炎症微环境,其作用可能与抑制PERK/eIF2α信号通路的激活有关。 展开更多

关键词 地黄饮子 阿尔茨海默病 perk/eif2α通路 脑内炎症微环境 小鼠

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氧化应激对磷酸三钙磨损颗粒诱导的假体周围骨溶解的影响及其机制 被引量：2

6

作者 刘坚荣 毛红娇 +5 位作者 郭高力 傅晶蕾 童夏 钱沁清 骆华刚 张云 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期355-359,共5页

目的:探讨氧化应激对磷酸三钙(TCP)磨损颗粒诱导的假体周围骨溶解的影响及其作用机制。方法:36只雄性ICR小鼠随机分为3组(n=12):假手术(Sham)组、TCP磨损颗粒(TCP)组和N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)组。将TCP磨损颗粒30 mg包埋于小鼠颅骨顶部... 目的:探讨氧化应激对磷酸三钙(TCP)磨损颗粒诱导的假体周围骨溶解的影响及其作用机制。方法:36只雄性ICR小鼠随机分为3组(n=12):假手术(Sham)组、TCP磨损颗粒(TCP)组和N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)组。将TCP磨损颗粒30 mg包埋于小鼠颅骨顶部构建假体周围骨溶解模型,于术后第2天颅顶骨膜局部注射NAC(1.0 mg/kg),隔日1次,持续2周后处死动物采血、取颅骨。抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色观察小鼠颅骨假体周围骨溶解情况; ELISA和化学比色法检测血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)和总抗氧化能力(T-AOC)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性; Western blot检测假体周围骨组织中内质网应激标志蛋白葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)、磷酸化PERK(p-PERK)、真核细胞翻译起始因子2α(eIF2α)和磷酸化eIF2α(p-eIF2α)的表达。结果:与Sham组比较,TCP组小鼠血清TNF-α、IL-1β和IL-6水平及假体周围骨溶解面积显著增加(P<0.05),T-AOC含量和SOD活性明显降低(P<0.05),GRP78蛋白质表达、pPERK/PERK和p-eIF2α/eIF2α值显著升高。与TCP组比较,NAC组小鼠血清TNF-α、IL-1β和IL-6水平及骨溶解面积明显减少(P<0.05),血清T-AOC含量和SOD活性明显增加(P<0.05),GRP78蛋白质表达、p-PERK/PERK和p-eIF2α/eIF2α值明显降低。结论:抑制氧化应激可阻止TCP磨损颗粒诱导的假体周围骨溶解,其机制可能与PERK/eIF2α通路的失活有关。 展开更多

关键词 TCP磨损颗粒 骨溶解 氧化应激 perk/eif2α通路 小鼠

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黄芪多糖对Tg诱导PERK/eIF2α通路介导HT29细胞凋亡的保护机制研究 被引量：1

7

作者 郑烈 闻新丽 段盛蕾 《中国中医急症》 2022年第2期222-224,246,共4页

目的探讨黄芪多糖对毒胡萝卜素内酯(Tg)诱导PERK/eIF2α通路介导HT29细胞凋亡的保护作用。方法将细胞分为空白组、模型组、黄芪多糖低剂量组、黄芪多糖高剂量组。除空白组外,其余组给予1μmol/L Tg诱导24 h后进行PERK及p-eIF2α蛋白表... 目的探讨黄芪多糖对毒胡萝卜素内酯(Tg)诱导PERK/eIF2α通路介导HT29细胞凋亡的保护作用。方法将细胞分为空白组、模型组、黄芪多糖低剂量组、黄芪多糖高剂量组。除空白组外,其余组给予1μmol/L Tg诱导24 h后进行PERK及p-eIF2α蛋白表达的检测。结果用Tg诱导HT29细胞,PERK及p-eIF2α水平随时间延长呈依赖性增加(P<0.05)。与空白组比较,模型组CHOP表达明显增加(P<0.05);与模型组比较,黄芪多糖低、高剂量组CHOP表达均减少(P<0.05)。与空白组比较,模型组PERK、p-eIF2α蛋白质表达明显增加(P<0.01),通过不同剂量黄芪多糖干预后,PERK、p-eIF2α蛋白质表达呈下降趋势(P<0.05)。Tg诱导HT29细胞后明显增加Caspase-3的凋亡(P<0.01),给予不同剂量黄芪多糖干预后HT29细胞Caspase-3的凋亡率较模型组下降(P<0.05或P<0.01),且高剂量黄芪多糖明显优于低剂量组(P<0.05)。结论毒胡萝卜素内酯诱导HT29细胞凋亡可能与激活内质网应激PERK/p-eIF2α信号通路密切相关,黄芪多糖具有干预该信号通路作用,能抑制HT29细胞凋亡。 展开更多

关键词 HT29细胞 细胞凋亡 黄芪多糖 毒胡萝卜素内酯 perk/eif2α通路 内质网应激

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小檗碱对糖尿病大鼠主动脉病变及其PERK/eIF2a表达的作用 被引量：1

8

作者 李阳 高明松 +2 位作者 肖方喜 阳义 周密 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期826-831,共6页

目的:探究小檗碱对糖尿病(diabetes mellitus,DM)大鼠主动脉病变及其PERK/eIF2a表达的作用。方法:大鼠被分为3组:对照组、糖尿病组和小檗碱组,每组12只,通过腹腔注射链脲佐菌素建立大鼠DM模型,小檗碱组大鼠使用小檗碱灌胃(100 mg·k... 目的:探究小檗碱对糖尿病(diabetes mellitus,DM)大鼠主动脉病变及其PERK/eIF2a表达的作用。方法:大鼠被分为3组:对照组、糖尿病组和小檗碱组,每组12只,通过腹腔注射链脲佐菌素建立大鼠DM模型,小檗碱组大鼠使用小檗碱灌胃(100 mg·kg^(-1)·d^(-1))。比较各组大鼠的血糖水平,主动脉损伤情况和血管内皮功能指标—一氧化氮(nitric oxide,NO)和内皮素(endothelin,ET),并通过Western blot检测中动脉中内质网(endoplasmic reticulum,ER)应激和PERK/eIF2α通路水平。结果:建模后大鼠血糖均在16.7mmol·L^(-1)之上,建模成功,并且干预后小檗碱组的血糖水平显著低于糖尿病组(P<0.05)。对照组主动脉结构正常;糖尿病组的主动脉血管壁明显增厚,血管内膜出现褶皱,细胞膨大、排列紊乱;小檗碱组血管结构基本清晰,细胞排列基本正常。与对照组比较,糖尿病组的NO和ET分别显著降低和升高(P<0.05)。小檗碱组的NO水平为(61.08±9.57)μmol·L^(-1),显著高于糖尿病组;小檗碱组的ET水平为(103.59±12.84)pg·mL^(-1),显著低于糖尿病组(P<0.05)。与对照组比较,糖尿病组的IL-1、IL-6和TNF-α的水平显著升高(P<0.05);小檗碱组的IL-1、IL-6和TNF-α水平显著低于糖尿病组(P<0.05)。与对照组比较,糖尿病组大鼠主动脉组织中ER应激相关蛋白GRP78和CHOP以及PERK/eIF2α通路的表达水平显著升高(P<0.05),小檗碱组的GRP78、CHOP和PERK/eIF2α通路的表达水平显著低于糖尿病组(P<0.05)。结论:小檗碱可抑制DM大鼠的PERK/eIF2α通路,缓解ER应激,从而保护主动脉和血管内皮功能。 展开更多

关键词 糖尿病 主动脉 小檗碱 内质网应激 perk/eif2α通路 内皮损伤

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吸烟COPD模型大鼠肺组织内质网相关凋亡蛋白CHOP的表达 被引量：12

9

作者 甘桂香 胡瑞成 谭双香 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期314-320,共7页

目的:研究吸烟所致慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型大鼠肺组织CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)表达的情况。方法:40只成年雄性Wistar大鼠随机分为对照组、吸烟2个月组、吸烟4个月组及戒烟组。采用单纯被动吸烟法复制大鼠COPD模型,测各... 目的:研究吸烟所致慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型大鼠肺组织CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)表达的情况。方法:40只成年雄性Wistar大鼠随机分为对照组、吸烟2个月组、吸烟4个月组及戒烟组。采用单纯被动吸烟法复制大鼠COPD模型,测各组大鼠0.3秒用力呼气容积与用力肺活量比(FEV0.3/FVC)和最高峰值流速(PEF);采用TUNEL法检测肺结构细胞凋亡情况;采用原位杂交和RT-PCR检测肺组织CHOP的mRNA表达水平;免疫组化和Western blot检测其蛋白质水平;同时采用Western blot检测蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)、p-PERK、真核生物起始因子(e IF)2α和p-e IF2α的蛋白水平。结果:大鼠吸烟2个月后,肺功能较对照组明显下降(P<0.05),肺结构细胞凋亡明显增加,凋亡细胞主要是肺泡上皮细胞、血管内皮细胞和支气管上皮细胞,肺结构出现破坏;吸烟4个月后,FEV0.3/FVC显著下降(P<0.05),肺结构凋亡细胞进一步增加,肺结构破坏明显;戒烟组肺功能较4个月组稍好转,肺结构破坏仍明显。与对照组相比,p-PERK、p-e IF2α和CHOP表达在吸烟2个月大鼠中升高(P<0.05),在吸烟4个月大鼠中进一步升高(P<0.05);戒烟组大鼠CHOP较吸烟4个月大鼠稍下降但差异无统计学意义;PERK和e IF2α在各组大鼠中表达的差异无统计学显著性。肺结构细胞凋亡与CHOP表达呈正相关;结论:吸烟可通过PERK/e IF2α/CHOP信号通路促进CHOP表达,从而促进COPD的发生与发展。 展开更多

关键词 CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白 慢性阻塞性肺疾病 内质网应激 细胞凋亡 perk/eif2α信号通路

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梓醇基于内质网应激介导的PERK-eIF2α信号通路改善非酒精性脂肪肝和降脂机制的研究 被引量：4

10

作者 刘璐 刘冲霄 +3 位作者 冷清阳 朱祎 张宏利 李晓华 《中华内分泌代谢杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第3期231-238,共8页

目的探讨梓醇对非酒精性脂肪肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)治疗及降脂机制。方法高脂饮食喂养ICR小鼠8周以建立NAFLD体内模型,给予低剂量(50 mg/kg)、中剂量(150 mg/kg)、高剂量(300 mg/kg)剂量梓醇干预,分析小鼠体重... 目的探讨梓醇对非酒精性脂肪肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)治疗及降脂机制。方法高脂饮食喂养ICR小鼠8周以建立NAFLD体内模型,给予低剂量(50 mg/kg)、中剂量(150 mg/kg)、高剂量(300 mg/kg)剂量梓醇干预,分析小鼠体重、肝湿重、肝指数及生化指标。游离脂肪酸诱导人肝细胞LO2建立NAFLD细胞模型。实时荧光定量PCR检测脂肪酸合成相关基因水平。Western印迹法检测内质网应激(ERS)介导的蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)-真核翻译起始因子2α(eIF2α)信号通路蛋白水平。结果与模型小鼠相比,低剂量、中剂量、高剂量梓醇组小鼠体重[(39.43±1.84)g,(34.01±1.83)g,(32.28±1.11)g对(42.17±1.37)g,均P<0.001]、肝湿重[(1.03±0.06)g,(0.79±0.05)g,(0.64±0.04)g对(1.30±0.13)g,P<0.01或P<0.001]、肝指数[(2.60±0.09)%,(2.32±0.09)%,(1.99±0.11)%对(3.07±0.30)%,P<0.05或P<0.001]降低。中、高剂量梓醇组模型小鼠总胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白胆固醇、天冬氨酸转氨酶和丙氨酸转氨酶降低(P<0.01或P<0.001),高密度脂蛋白胆固醇升高(P<0.01或P<0.001)。细胞模型中,脂肪酸合成基因及PERK-eIF2α通路蛋白水平的升高均被梓醇显著削弱(P<0.05),且这种削弱作用被信号通路激动剂逆转(P<0.05)。结论中药梓醇可能通过调控ERS介导的PERK-eIF2α信号通路发挥改善NAFLD的作用。 展开更多

关键词 内质网应激 非酒精性脂肪肝病 perk-eif2α信号通路 梓醇

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基于PERK-eIF2α通路探讨冠心康对LDLR-/-高脂血症小鼠血脂的调控机制 被引量：4

11

作者 马贵萍 陈冉 +2 位作者 王建茹 韦婧 章怡祎 《世界科学技术-中医药现代化》 CSCD 北大核心 2020年第2期370-376,共7页

目的观察中药复方冠心康对LDLR-/-高脂血症小鼠肝脏PERK-eIF2α信号通路以及ATP结合盒转运子亚家族成员1(ABCA1)和固醇调节元件结合蛋白-2(SREBP-2)的影响,探讨冠心康对高脂血症的调控机制。方法通过高脂饮食诱导30只LDLR-/-小鼠12周,... 目的观察中药复方冠心康对LDLR-/-高脂血症小鼠肝脏PERK-eIF2α信号通路以及ATP结合盒转运子亚家族成员1(ABCA1)和固醇调节元件结合蛋白-2(SREBP-2)的影响,探讨冠心康对高脂血症的调控机制。方法通过高脂饮食诱导30只LDLR-/-小鼠12周,构建高脂血症模型小鼠后随机分为模型组、冠心康组和辛伐他汀组,以10只同遗传背景的C57BL/6J小鼠为正常组。冠心康组以冠心康煎剂灌胃,辛伐他汀组以辛伐他汀水溶液进行灌胃。各组干预12周取材进行指标检测。生化仪检测血清血脂;HE染色观察肝脏病理形态变化;real-time PCR检测肝脏PERK、eIF2α、SREBP-2、ABCA1基因表达;Western blot法检测肝脏PERK、eIF2α磷酸化水平和SREBP-2、ABCA1蛋白表达。结果与模型组比较,冠心康组和辛伐他汀组的血清TG、TC下降(P<0.05),HDL-C升高(P<0.05),冠心康组和辛伐他汀组对蛋白PERK磷酸化以及SREBP-2水平有下调作用,对ABCA1有上调作用,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论冠心康通过影响SREBP-2和ABCA1的表达,可显著调节LDLR-/-高脂血症小鼠的血脂水平,从而维持肝脏胆固醇稳态的平衡,其作用机制可能与PERK-eIF2α信号通路有关。 展开更多

关键词 高脂血症 冠心康 perk-eif2α信号通路 ABCA1 SREBP-2

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4-苯基丁酸抑制PERK/eIF2α信号通路缓解大鼠脊髓损伤内质网氧化应激反应 被引量：2

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作者 刘威 张绍昆 +3 位作者 牛丰 赵松 陈克研 闫明 《解剖科学进展》 CAS 2021年第1期1-4,共4页

目的探讨4-苯基丁酸对脊髓损伤大鼠的作用和可能机制。方法采用Allen’s法操作方法建立脊髓损伤模型,将SD大鼠分为假手术组(Sham组)、模型组(SCI组)和4-苯基丁酸钠治疗组(4-PBA组);对三组大鼠进行脊髓运动功能(BBB)的评分;应用HE染色检... 目的探讨4-苯基丁酸对脊髓损伤大鼠的作用和可能机制。方法采用Allen’s法操作方法建立脊髓损伤模型,将SD大鼠分为假手术组(Sham组)、模型组(SCI组)和4-苯基丁酸钠治疗组(4-PBA组);对三组大鼠进行脊髓运动功能(BBB)的评分;应用HE染色检测各组大鼠脊髓的损伤情况;采用ELISA检测各组大鼠血清中MDA、CAT、SOD、GSH-Px等蛋白的表达情况;应用免疫组织化学检测内质网应激蛋白GRP78、ATF4和CHOP的表达水平;Western blot法检测PERK、eIF2α、ATF4蛋白的表达水平。结果 4-苯基丁酸明显降低中性粒细胞的浸润程度,减少脊髓内GRP78、ATF4和CHOP表达水平,BBB评分在各个时间点明显升高,上调血清SOD、CAT,GSH-Pxe和IF2α的表达水平,下调MDA和ATF4的表达水平(P<0.05),p-PERK/PERK的表达无明显变化。结论 4-苯基丁酸缓解线粒体氧化应激从而减轻大鼠脊髓损伤与抑制PERK/eIF2α信号通路相关。 展开更多

关键词 perk/eif2α通路 脊髓损伤 内质网应激 4-苯基丁酸 SD大鼠

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呋塞米对脑出血模型大鼠PERK/eIF2α/CHOP通路及继发性脑损伤的影响 被引量：1

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作者 张瑜 高建洲 韩韶 《基础医学与临床》 2022年第1期100-105,共6页

目的探讨呋塞米(FUR)对脑出血(ICH)大鼠RNA依赖的蛋白激酶样内质网激酶(PERK)/真核起始因子2α(eIF2α)/转录因子CCAAT增强子结合蛋白的同源蛋白(CHOP)通路及继发性脑损伤的影响。方法将大鼠分为假手术组、模型组(脑定位注射Ⅳ型胶原酶... 目的探讨呋塞米(FUR)对脑出血(ICH)大鼠RNA依赖的蛋白激酶样内质网激酶(PERK)/真核起始因子2α(eIF2α)/转录因子CCAAT增强子结合蛋白的同源蛋白(CHOP)通路及继发性脑损伤的影响。方法将大鼠分为假手术组、模型组(脑定位注射Ⅳ型胶原酶,建立ICH模型)、FUR低剂量组(FUR-L)、FUR中剂量组(FUR-M)、FUR高剂量组(FUR-H)、神经节苷脂组,每组18只。药物处理后,检测神经功能,对其进行Longa评分;测量大脑含水量;用Evans蓝外渗实验检测血脑屏障损伤;用HE染色检测海马神经元损伤;用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-6(IL-6)水平;用免疫印迹法检测大鼠脑组织PERK/eIF2α/CHOP通路相关蛋白p-PERK/PERK、p-eIF2α/eIF2α、CHOP表达。结果相比假手术组,模型组大鼠海马神经元变性坏死,皱缩变小,数目明显减少,呈现严重病理损伤,Longa评分、Evans蓝渗出量、大脑含水量、血清IFN-γ及IL-6水平、p-PERK/PERK、p-eIF2α/eIF2α、CHOP表达水平明显升高(P<0.05)。相比模型组,FUR-L、FUR-M、FUR-H组及神经节苷脂组大鼠海马神经元形态有不同程度恢复,病理损伤减轻,Longa评分、大脑含水量、Evans蓝渗出量、血清IFN-γ及IL-6水平、p-PERK/PERK、p-eIF2α/eIF2α、CHOP表达水平均降低(P<0.05)。结论FUR可下调PERK/eIF2α/CHOP通路蛋白表达,缓解脑水肿及海马神经元损伤,修复ICH模型大鼠神经功能。 展开更多

关键词 呋塞米 脑出血 perk/eif2α/CHOP通路 脑损伤

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尖吻蝮蛇毒抑瘤组分I通过PERK/eIF2α通路诱导Tca8113细胞凋亡的机制研究 被引量：1

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作者 王振杰 柴琳 +1 位作者 徐冉 张根葆 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期991-997,共7页

目的:探讨内质网应激(ERS)相关的蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)/真核翻译起始因子2α(eIF2α)通路在尖吻蝮蛇毒抑瘤组分I(AAVC-I)诱导人舌鳞癌Tca8113细胞凋亡中的作用及机制。方法:不同实验浓度(4. 0、8. 0和16. 0 mg/L)的AAVC-I处理Tca... 目的:探讨内质网应激(ERS)相关的蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)/真核翻译起始因子2α(eIF2α)通路在尖吻蝮蛇毒抑瘤组分I(AAVC-I)诱导人舌鳞癌Tca8113细胞凋亡中的作用及机制。方法:不同实验浓度(4. 0、8. 0和16. 0 mg/L)的AAVC-I处理Tca8113细胞24 h后采用苏木素-伊红(HE)染色观察细胞形态;流式细胞术(annexin V-FITC/PI双荧光染色法)检测细胞凋亡;Western blot检测ERS相关蛋白葡萄糖调节蛋白78(GRP78),PERK/eIF2α通路中的磷酸化PERK(p-PERK)、磷酸化eIF2α(p-eIF2α)及下游的活化转录因子4(ATF4)和CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP),以及细胞凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的蛋白表达水平。结果:AAVCI各浓度组分别与正常对照组相比以及各浓度组之间相互比较的结果显示,随着AAVC-I浓度的增加,Tca8113细胞活力逐渐降低,细胞逐渐皱缩变小,间隙增大,胞核浓缩、碎裂,出现凋亡小体,细胞凋亡率增高(P<0. 05);GRP78、p-PERK、p-eIF2α、ATF4、CHOP及Bax蛋白水平上调,Bcl-2表达下调(P<0. 05)。结论:AAVC-I抑制Tca8113细胞活力的同时引发细胞发生ERS并诱导细胞凋亡,其诱导细胞凋亡的机制与PERK/eIF2α通路密切相关。 展开更多

关键词 尖吻蝮蛇毒 内质网应激 舌鳞癌 细胞凋亡 perk/eif2α信号通路

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基于PERK-eIF2α-CHOP通路调控巨噬细胞胆固醇稳态及冠心康含药血清干预机制研究

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作者 靳琪鹏 侯文艳 章怡祎 《世界科学技术-中医药现代化》 CSCD 北大核心 2022年第10期3813-3819,共7页

目的观察具有益气化痰活血作用的冠心康对人单核/巨噬细胞株THP-1细胞PERK-eIF2α信号通路及相关活化转录因子(ATF)和C/EBP同源转录因子(CHOP)的影响,探究冠心康对胆固醇在巨噬细胞内质网中的代谢稳态调节及作为“脂毒”流出后异常沉积... 目的观察具有益气化痰活血作用的冠心康对人单核/巨噬细胞株THP-1细胞PERK-eIF2α信号通路及相关活化转录因子(ATF)和C/EBP同源转录因子(CHOP)的影响,探究冠心康对胆固醇在巨噬细胞内质网中的代谢稳态调节及作为“脂毒”流出后异常沉积的相关作用。方法采用100 ng·mL^(-1)PMA及80μg·mL^(-1)氧化低密度脂蛋白诱导THP-1细胞株,构建巨噬细胞模型,并随机分为模型组、冠心康组、辛伐他汀组、正常组。分别采用10%小牛血清及含药血清干预模型细胞72 h后收集细胞。HE染色观察巨噬细胞病理形态变化,同时进行胆固醇及脂滴含量测定。分别采用Real-time PCR及Western blot法检测各组细胞PERK、eIF2α、ATF、CHOP mRNA及蛋白的表达。结果HE染色观察到模型组细胞内呈现较多红色脂滴,经胆固醇含量测定,明显高于正常组,脂滴含量测定与前者一致(P<0.01)。模型组细胞ATF、CHOP基因表达水平均显著升高(P<0.01)。与模型组比较,冠心康组和辛伐他汀组细胞ATF、CHOP基因表达水平均显著降低(P<0.01)。PERK磷酸化以及CHOP蛋白表达水平在冠心康和辛伐他汀干预组表现为显著下调,与模型组比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论冠心康可能通过调控PERK-eIF2α-CHOP通路相关基因及蛋白,减少泡沫细胞形成,从而减轻内质网应激,维持细胞内胆固醇稳态,减少细胞内胆固醇沉积。 展开更多

关键词 perk-eif2α-CHOP通路 巨噬细胞 胆固醇稳态 冠心康 内质网应激

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垂盆草苷对胆道梗阻大鼠肝脏组织形态及PERK/eIF2α信号通路的影响

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作者 樊斌 张家耀 李伟 《中国药师》 CAS 2022年第9期1493-1498,共6页

目的:研究垂盆草苷对胆道梗阻大鼠肝脏组织形态及蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)/真核翻译起始因子2α(eIF2α)信号通路的影响。方法:60只SD大鼠随机分为5组:正常对照组、模型组、阳性对照组(异甘草酸镁,15 ml·kg^(-1))、垂盆草苷低(... 目的:研究垂盆草苷对胆道梗阻大鼠肝脏组织形态及蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)/真核翻译起始因子2α(eIF2α)信号通路的影响。方法:60只SD大鼠随机分为5组:正常对照组、模型组、阳性对照组(异甘草酸镁,15 ml·kg^(-1))、垂盆草苷低(15 ml·kg^(-1))、高(60 ml·kg^(-1))剂量组,每组12只。除正常对照组外,其余各组建立胆道梗阻模型。各给药组灌胃给药,正常对照组和模型组给与等量蒸馏水,1次/d,连续1周。采用HE染色法观察肝脏组织病理形态;PCR检测PERK、eIF2α基因表达水平;黄嘌呤氧化酶法检测超氧化物歧化酶(SOD);TBA法检测丙二醛(MDA);四唑盐比色法检测黄嘌呤氧化酶(XOD);比色法检测谷胱甘肽(GSH);TUNEL检测肝细胞凋亡;Western Blot检测肝组织中B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl2关联X蛋白(Bax)、PERK、p-PERK、eIF2α、p-eIF2α蛋白表达水平。结果:正常对照组肝脏细胞结构完整;模型组肝细胞结构模糊,有局灶性坏死及炎性细胞浸润;阳性对照组和垂盆草苷低、高剂量组以上情况均有所改善,以垂盆草苷高剂量组效果更佳。与正常对照组相比,模型组PERK和eIF2α基因水平、XOD、MDA、肝细胞凋亡率、Bax、PERK、p-PERK、eIF2α、p-eIF2α蛋白水平显著升高(P<0.05),SOD、GSH、Bcl-2水平显著降低(P<0.05)。与模型组相比,阳性对照组和垂盆草苷低、高剂量组PERK和eIF2α基因水平、XOD、MDA、肝细胞凋亡率、Bax、PERK、p-PERK、eIF2α、p-eIF2α蛋白水平显著降低(P<0.05),SOD、GSH、Bcl-2水平显著升高(P<0.05)。垂盆草苷低、高剂量组与阳性对照组相比,各指标差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:垂盆草苷可改善肝组织病理形态及氧化应激水平,降低肝细胞凋亡,其作用机制可能与抑制PERK/eIF2α通路的激活有关。 展开更多

关键词 垂盆草苷 胆道梗阻 肝脏组织形态 蛋白激酶R样内质网激酶/真核翻译起始因子2α信号通路

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PERK／p-eIF2a通路在氟致机体损伤中的作用

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作者 王诗泽 魏玮 孙殿军 《中华地方病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期698-702,共5页

氟中毒可造成机体的骨相和非骨相组织损害，其发生机制不清。大量研究证明，氟能引起机体各系统或脏器的蛋白合成下降、细胞凋亡增加，从而造成机体组织的广泛损伤，并且损伤机制可能与内质网应激有关。蛋白激酶受体样内质网激酶／磷酸... 氟中毒可造成机体的骨相和非骨相组织损害，其发生机制不清。大量研究证明，氟能引起机体各系统或脏器的蛋白合成下降、细胞凋亡增加，从而造成机体组织的广泛损伤，并且损伤机制可能与内质网应激有关。蛋白激酶受体样内质网激酶／磷酸化真核翻译起始因子2α（PERK／p-eIF2a）通路为内质网应激最先活化的通路，可能在氟中毒的发生机制中有重要作用。因此，作者将对PERK／p-eIF2a路在氟致机体损伤中的作用进行综述，以期为氟中毒发病机制的阐明和防治提供新思路。 展开更多

关键词 氟中毒 perk/p-eif2a通路 发病机制

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