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发根农杆菌诱导玉米毛状根发生及再生植株 被引量:18
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作者 徐洪伟 周晓馥 +2 位作者 陆静梅 王俊杰 王兴智 《中国科学(C辑)》 CSCD 北大核心 2005年第6期497-501,共5页
发根农杆菌(Agrobacterium rhizogenes)侵染玉米愈伤组织15天左右获得毛状根.转化根在不含激素的培养基上快速生长,并表现出典型的毛状根性状.在含ZT 1.6 mg/L和NAA 0.4 mg/L的MS培养基上,毛状根再生成完整转化植株.PCR-Southern... 发根农杆菌(Agrobacterium rhizogenes)侵染玉米愈伤组织15天左右获得毛状根.转化根在不含激素的培养基上快速生长,并表现出典型的毛状根性状.在含ZT 1.6 mg/L和NAA 0.4 mg/L的MS培养基上,毛状根再生成完整转化植株.PCR-Southern杂交证实T-DNA已整合入转化株的染色体组. 展开更多
关键词 发根农杆菌 玉米 毛状根 pcr-southern
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南瓜子房注射法遗传转化的研究 被引量:5
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作者 张言朝 葛宇 +4 位作者 于杨 徐文龙 白玉娇 崔崇士 屈淑平 《中国蔬菜》 北大核心 2012年第08X期27-31,共5页
以南瓜品种银辉1号为受体材料,用子房注射法对148个南瓜子房进行aiiA基因的遗传转化处理,共收获115个单瓜,结实率为77.7%。随机抽取56个单瓜,经0.2%Basta水溶液筛选和PCR鉴定,鉴定出7株阳性植株,均来自1个单瓜。再经PCR-Southern Blot鉴... 以南瓜品种银辉1号为受体材料,用子房注射法对148个南瓜子房进行aiiA基因的遗传转化处理,共收获115个单瓜,结实率为77.7%。随机抽取56个单瓜,经0.2%Basta水溶液筛选和PCR鉴定,鉴定出7株阳性植株,均来自1个单瓜。再经PCR-Southern Blot鉴定,结果显示均有杂交信号,表明aiiA基因已经整合到银辉1号南瓜基因组DNA中,转化率为0.25%,单瓜转化率为6.36%。 展开更多
关键词 南瓜 子房注射 pcr-southern Blot鉴定 转基因
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转基因烟草植株的检测 被引量:1
3
作者 张彦妮 曲敏 +2 位作者 卓丽环 徐香玲 杨利平 《东北林业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期36-40,共5页
对采用叶盘法以质粒PBLGC为介导转化烟草的 3个品种 ,经Kan抗性筛选获得的 119株转化的烟草再生植株分别以启动子CaMV3 5S、几丁质酶基因和β -1,3 -葡聚糖酶基因的引物进行PCR检测 ,分别获得 91、72、47株阳性植株。其中 ,同时具有几... 对采用叶盘法以质粒PBLGC为介导转化烟草的 3个品种 ,经Kan抗性筛选获得的 119株转化的烟草再生植株分别以启动子CaMV3 5S、几丁质酶基因和β -1,3 -葡聚糖酶基因的引物进行PCR检测 ,分别获得 91、72、47株阳性植株。其中 ,同时具有几丁质酶基因和 β -1,3 -葡聚糖酶基因的植株有 3 6株。对部分转化植株进行PCR -Southern杂交实验的结果表明 ,外源基因的转化频率与植物品种、外源基因片段的大小有关。又对 4株转基因植株后代 (T1)进行了PCR、PCR -Southern杂交 ,结果发现 ,几丁质酶基因和 β -1,3 -葡聚糖酶基因已经稳定地遗传给后代 ,但二者的遗传传递率不同 ,β -1,3 -葡聚糖酶基因似乎比几丁质酶基因更易于传递。另外 ,对转化植株T0 代几丁质酶活力检测结果表明 ,转基因植株中几丁质酶活力显著增强 ,含有几丁质酶基因和 β -1,3 展开更多
关键词 转基因烟草 植株检测 叶盘法 介导转化 抗性筛选 再生植株 几丁质酶基因
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无选择标记转基因大白菜的检测 被引量:1
4
作者 佟容 于占东 +4 位作者 吴春燕 乔宏宇 乔建磊 王彧彧 张新影 《吉林农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期364-369,共6页
通过对转基因大白菜进行TuMV-C4病毒摩擦接种鉴定、ELSIA检测、提取转基因大白菜DNA进行PCR检测,并通过PCR-Southern杂交、RT-PCR检测转基因大白菜,构建了针对无选择标记转基因大白菜的系统检测方法。试验结果表明:转基因大白菜通过摩... 通过对转基因大白菜进行TuMV-C4病毒摩擦接种鉴定、ELSIA检测、提取转基因大白菜DNA进行PCR检测,并通过PCR-Southern杂交、RT-PCR检测转基因大白菜,构建了针对无选择标记转基因大白菜的系统检测方法。试验结果表明:转基因大白菜通过摩擦接种TuMV-C4病毒抗病性鉴定,188株表现为抗性,初步筛选率为19.46%;进行ELISA检测抗病植株中TuMV含量,有63株明显低于非转化植株,筛选率达到26.25%;对抗TuMV植株直接进行目的基因PCR检测,有25株呈阳性,筛选率达到13.30%。经PCR-Southern杂交检测和RT-PCR检测,表明转基因大白菜中不仅整合了Nib基因,而且获得了表达。这种逐级递进的检测系统可以高效地获得无选择标记的转基因植株。 展开更多
关键词 无选择标记转基因 ELSIA pcr-southern RT-pcr 大白菜
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Hairy roots induced by Agrobacterium rhizogenes and production of regenerative plants in hairy root cultures in maize 被引量:2
5
作者 XU Hongwei ZHOU Xiaofu +2 位作者 LU Jingmei WANG Junjie WANG Xingzhi 《Science China(Life Sciences)》 SCIE CAS 2006年第4期305-310,共6页
Hairy roots of maize were induced by infecting 15-d calli with Agrobacterium rhizogenes. The hairy roots cultured in hormone-free media showed the vigorous growth; typical hairy root features. The regenerated plants w... Hairy roots of maize were induced by infecting 15-d calli with Agrobacterium rhizogenes. The hairy roots cultured in hormone-free media showed the vigorous growth; typical hairy root features. The regenerated plants were produced from hairy roots in MS media supplemented with 1.6 mg/L ZT; 0.4 mg/L NAA. The PCR-Southern hybridization demonstrated that T-DNA had been integrated into the chromosome of regenerated plants. 展开更多
关键词 Agrobacterium rhizogenes MAIZE hairy root pcr-southern
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抗除草剂转基因红麻的分子验证 被引量:6
6
作者 曹德菊 程备久 +1 位作者 林毅 万平 《中国麻业》 2001年第3期1-4,共4页
本文通过PCR分析及Southern杂交技术对抗除草剂转基因红麻进行分子水平上的验证 ,结果表明 :外源抗除草剂基因已整合入红麻基因组。
关键词 红麻 转基因 pcr分析 southern杂交 外源抗除草剂基因 验证
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抗旱、耐盐基因P5CS转化向日葵自交系 被引量:3
7
作者 程继东 安玉麟 孙瑞芬 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期65-69,共5页
以向日葵保持系75-33B和恢复系Ht80-97的子叶为转化受体材料,用携带P5CS基因的双元载体系统的根癌农杆菌进行叶盘转化,获得抗Kan的转化芽。提取转化芽总DNA进行PCR检测及PCR-Southern杂交检测,证实获得阳性抗性芽75-33B 2株,Ht80-97 4株... 以向日葵保持系75-33B和恢复系Ht80-97的子叶为转化受体材料,用携带P5CS基因的双元载体系统的根癌农杆菌进行叶盘转化,获得抗Kan的转化芽。提取转化芽总DNA进行PCR检测及PCR-Southern杂交检测,证实获得阳性抗性芽75-33B 2株,Ht80-97 4株,转化率分别为3.17%和4.65%。 展开更多
关键词 向日葵 P5CS基因 遗传转化 pcr扩增 pcrsouthern杂交
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PEX法提取植物组织DNA 被引量:5
8
作者 雷海英 孙毅 +2 位作者 仪治本 段永红 王志军 《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期178-180,共3页
介绍了一种简单而实用的DNA提取法,利用PEX试剂从高粱与转基因玉米的新鲜叶片中提取植物组织DNA。所得DNA经定量检测后,可满足AFLP分析及PCR-Southern杂交等要求。
关键词 DNA提取 PEX AFLP pcr-southern杂交
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甘蔗线虫病抗性基因的PCR检测研究 被引量:5
9
作者 吴杨 周会 潘大仁 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期939-942,共4页
以38份未经线虫病常规鉴定的甘蔗种质资源为供试材料,根据番茄抗根结线虫病基因和甜菜抗胞囊线虫病基因的保守序列区域,分别设计了2条上游引物2、条下游引物,对设计的引物进行组合后,应用PCR特异扩增从中分别筛选出各1对特异引物。用抗... 以38份未经线虫病常规鉴定的甘蔗种质资源为供试材料,根据番茄抗根结线虫病基因和甜菜抗胞囊线虫病基因的保守序列区域,分别设计了2条上游引物2、条下游引物,对设计的引物进行组合后,应用PCR特异扩增从中分别筛选出各1对特异引物。用抗根结线虫基因设计的特异引物进行扩增最终获得了1条大约460 bp大小的特异片段;用抗胞囊线虫基因设计的特异引物进行扩增最终获得了1条大约690 bp大小的特异片段,进一步进行了PCR-Southern杂交,确认了该2条特异引物的真实性。 展开更多
关键词 甘蔗 抗线虫基因 基因检测 pcr-southern杂交
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白藜芦醇合酶基因的克隆及丹参的转化 被引量:3
10
作者 陈海敏 徐妙云 +4 位作者 李刚强 郝雯静 魏昭荣 艾铁民 刘德虎 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期1235-1238,共4页
目的为探索利用分子生物学技术培育新型药用植物的新途径,将外源的白藜芦醇合酶(RS)基因导入到丹参中表达,以改善或增加丹参的效用。方法根据已公布的核苷酸序列,利用引物悬挂延伸法,经过3次扩增,最终从葡萄基因组DNA中获得完整的RScDN... 目的为探索利用分子生物学技术培育新型药用植物的新途径,将外源的白藜芦醇合酶(RS)基因导入到丹参中表达,以改善或增加丹参的效用。方法根据已公布的核苷酸序列,利用引物悬挂延伸法,经过3次扩增,最终从葡萄基因组DNA中获得完整的RScDNA基因序列;以质粒pBin438为基础,构建含有RS目的基因的组成型植物表达载体。在根癌农杆菌介导下,利用叶盘法转化丹参,进而通过PCR、PCR-Southern杂交对不同的转基因植株进行筛选与检测。结果总共得到了45棵卡那霉素抗性植株,经PCR和PCR-Southern杂交检测,确定葡萄RS基因已整合到部分转基因丹参苗的基因组中。结论成功建立了白藜芦醇合酶基因转化丹参的体系,并获得了转基因植株。 展开更多
关键词 白藜芦醇合酶(RS)基因 丹参 根癌农杆菌 白藜芦醇 pcr-Sounthern杂交
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欧美杨108号转蜘蛛杀虫肽与Bt毒蛋白嵌合基因的研究 被引量:3
11
作者 遇文婧 邹传山 +1 位作者 王志英 张国财 《植物研究》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期603-606,共4页
以欧美杨108号为外植体材料,利用农杆菌介导法成功地将抗虫基因(蜘蛛杀虫肽+B t毒蛋白的嵌合基因)导入受体中。通过PCR检测,凝胶电泳结果显示8个卡那霉素抗性芽中,6个存在目的基因;经PCR-Southern印迹杂交检测,阳性率为50%,进一步表明... 以欧美杨108号为外植体材料,利用农杆菌介导法成功地将抗虫基因(蜘蛛杀虫肽+B t毒蛋白的嵌合基因)导入受体中。通过PCR检测,凝胶电泳结果显示8个卡那霉素抗性芽中,6个存在目的基因;经PCR-Southern印迹杂交检测,阳性率为50%,进一步表明目的基因成功整合到欧美杨108号基因组内。 展开更多
关键词 欧美杨108号 蜘蛛杀虫肽+Bt毒蛋白基因 pcr-southern印迹杂交
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美洲拟鲽抗冻蛋白基因遗传转化草莓的研究 被引量:2
12
作者 孙瑞芬 李天然 +4 位作者 安玉麟 李堃 石慧芹 牛素清 赵京惠 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期423-428,共6页
以草莓品种星都2号和全明星的无菌苗叶盘和叶柄基部为外植体,采用携带美洲拟鲽编码pre、pro和mature3种抗冻蛋白(AFP)基因的双元载体系统的根癌农杆菌进行转化,获得7个Km抗性株系。经PCR扩增及PCR-Southern杂交检测,6个株系呈阳性,结果... 以草莓品种星都2号和全明星的无菌苗叶盘和叶柄基部为外植体,采用携带美洲拟鲽编码pre、pro和mature3种抗冻蛋白(AFP)基因的双元载体系统的根癌农杆菌进行转化,获得7个Km抗性株系。经PCR扩增及PCR-Southern杂交检测,6个株系呈阳性,结果表明,编码pre、pro和mature的AFP基因分别整合到了星都2号和全明星染色体DNA中,其中获得pre、pro和mature转星都2号株系各1个,转化率分别为1.56%、1.49%和1.67%;mature基因转全明星株系3个,转化率为4.05%。 展开更多
关键词 草莓 美洲拟鲽 抗冻蛋白(AFP)基因 遗传转化 pcr-southern杂交
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芬太尼对C6胶质瘤细胞黄嘌呤氧化还原酶基因表达的影响 被引量:1
13
作者 赵小冬 刘剑凯 洪敏 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期719-720,共2页
芬太尼同吗啡是较强的μ受体激动剂,许多实验已经表明μ受体介导了吗啡的依赖、耐受作用[1].芬太尼是常用于心脑血管外科手术的麻醉镇痛剂.芬太尼在细胞水平对核苷酸代谢相关酶的基因表达还不清楚.本文采用了高度灵敏的RT-PCR-Southern... 芬太尼同吗啡是较强的μ受体激动剂,许多实验已经表明μ受体介导了吗啡的依赖、耐受作用[1].芬太尼是常用于心脑血管外科手术的麻醉镇痛剂.芬太尼在细胞水平对核苷酸代谢相关酶的基因表达还不清楚.本文采用了高度灵敏的RT-PCR-Southern 杂交方法检测芬太尼对C6胶质瘤细胞黄嘌呤脱氢酶(Xanthine dehydrogenase,XD)/黄嘌呤氧化酶(Xanthine oxidase, XO)基因表达的影响. 展开更多
关键词 C6胶质瘤细胞 芬太尼 黄嘌呤脱氢酶/黄嘌呤氧化酶 RT—pcrsouthern杂交
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HPV16型DNA在大肠腺癌组织中表达的研究 被引量:3
14
作者 周宇 于皆平 +1 位作者 沈志祥 罗和生 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 1998年第7期505-507,共3页
应用多聚酶链反应(PCR)和Southernblot杂交技术,检测50例大肠腺癌、38例大肠腺瘤和20例正常大肠粘膜组织的HPV16型DNA序列。结果显示:三组病人HPV16型DNA阳性率依次为42%、31.6%和0... 应用多聚酶链反应(PCR)和Southernblot杂交技术,检测50例大肠腺癌、38例大肠腺瘤和20例正常大肠粘膜组织的HPV16型DNA序列。结果显示:三组病人HPV16型DNA阳性率依次为42%、31.6%和0。大肠腺癌和腺瘤分别与正常大肠粘膜组织比较,HPV16型DNA阳性率有显著差异(P<0.05);大肠腺癌和腺瘤之间比较HPV16型DNA阳性率无显著性差异(P>0.05)。但HPV16型DNA阳性的12例大肠腺癌组织均伴组织细胞异型增生。结果表明:HPV16型与国人的大肠腺癌有关。 展开更多
关键词 大肠肿瘤 HPV16型 DNA 人乳头瘤病毒 pcr
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ACC合酶反义基因转化洋桔梗Double Mariachi Pink的研究 被引量:2
15
作者 孙晶 王轶 +5 位作者 陈崇顺 邹爱兰 廖静 赵晓潘 乔宁宁 邓文汉 《江苏农业科学》 CSCD 北大核心 2012年第4期27-31,共5页
以洋桔梗(Eustoma grandiflorum)品种Double Mariachi Pink为试验材料,在已建立的洋桔梗高频再生体系和高效稳定遗传转化体系的基础上,将PBI121-ACC合酶反义基因片段(1 008 bp)通过农杆菌介导法转化洋桔梗,通过高频再生获得116株抗性苗... 以洋桔梗(Eustoma grandiflorum)品种Double Mariachi Pink为试验材料,在已建立的洋桔梗高频再生体系和高效稳定遗传转化体系的基础上,将PBI121-ACC合酶反义基因片段(1 008 bp)通过农杆菌介导法转化洋桔梗,通过高频再生获得116株抗性苗。再生抗性苗在生根培养基1/2MS+NAA 0.1 mg/L+Km 15 mg/L上生根筛选获得了55株正常生根的植株;对其中随机挑选的8个株系进行PCR鉴定和GUS表达检测,在增殖筛选培养基MS+6-BA0.1 mg/L+NAA 0.05 mg/L+Km 30 mg/L+Cb 100 mg/L上初步筛得到5个PCR阳性株系,其中4株GUS检测呈阳性:5个PCR阳性株系经PCR-Southern杂交鉴定得到1株阳性植株。将阳性株系出瓶移栽,其平均花期为24 d。 展开更多
关键词 洋桔梗 ACC合酶反义基因 遗传转化 pcr检测 pcr-southern杂交检测
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分子生物学方法在新生儿肺炎死亡病例大肠埃希菌的检测应用 被引量:2
16
作者 邓江红 杨永弘 +5 位作者 姚开虎 胡惠丽 俞桑洁 高薇 伏利兵 何乐健 《北京医学》 CAS 2012年第6期470-474,共5页
目的探讨新生儿重症肺炎死亡病例中大肠埃希菌(E.coli)感染的地位。方法收集北京儿童医院新生儿重症肺炎组200例和非感染性疾病(对照组)34例的尸检病理标本,应用PCR和Southern blot技术检测E.coli特异性uidA基因片断,并复习患儿临床资... 目的探讨新生儿重症肺炎死亡病例中大肠埃希菌(E.coli)感染的地位。方法收集北京儿童医院新生儿重症肺炎组200例和非感染性疾病(对照组)34例的尸检病理标本,应用PCR和Southern blot技术检测E.coli特异性uidA基因片断,并复习患儿临床资料。结果肺炎组中,PCR和Southern blot对E.coli检出率明显高于对照组(PCR:5.0% vs. 0,掊2=11.37,P<0.01;Southern blot:21.5% vs. 5.9%,掊2=4.56,P<0.05);晚发型肺炎E.coli检出率明显高于早发型(PCR:8.2%vs.1.9%,掊2=4.18,P<0.05;Southern blot:26.8% vs. 16.5%,掊2=4.48,P<0.05)。1980年前E.coli检出率高于1981年后(Southern blot法:28.0%vs.15.0%,掊2=5.00,P<0.05)。E.coli检测阳性组和阴性组比较,临床表现的差异无统计学意义(P﹥0.05)。结论 E.coli是新生儿重症肺炎死亡病例中的重要病原。分子生物学方法检测E.coli对早期诊断有重要价值。 展开更多
关键词 新生儿 肺炎 大肠埃希菌 聚合酶链反应 southern印迹杂交
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EBV感染与婴儿肝炎综合征相关分析 被引量:1
17
作者 况红星 《辽宁医学杂志》 2011年第1期15-16,共2页
目的为探讨婴儿肝炎综合征EB病毒(EBV)感染的相关性。方法采用实时荧光定量PCR技术检测80例婴肝患儿外周血EBV-DNA的拷贝数。采用PCR-Southern方法检测患儿咽分泌物EBV DNA;酶联免疫吸附法(ELISA)检测80例婴肝患儿血清EBV VCA-IgM。结果... 目的为探讨婴儿肝炎综合征EB病毒(EBV)感染的相关性。方法采用实时荧光定量PCR技术检测80例婴肝患儿外周血EBV-DNA的拷贝数。采用PCR-Southern方法检测患儿咽分泌物EBV DNA;酶联免疫吸附法(ELISA)检测80例婴肝患儿血清EBV VCA-IgM。结果 80例患儿血标本EBV DNA阳性率为20.0%(16/80),40例正常对照儿童有1例外周血EBV DNA阳性,阳性率为2.5%,婴肝患儿组外周血EBV DNA阳性率明显高于对照组,差异有显著性(P<0.05)。80例患儿咽分泌物标本EBV DNA阳性率为31.25%(25/80),40例正常对照儿童有1例咽分泌物EBV DNA阳性,阳性率为2.5%(1/40),患儿组咽分泌物EBV-DNA阳性率也明显高于对照组,差异有显著性(P<0.01)。80例患儿血EBV VCA-IgM阳性率为11.25%(9/80),40例正常对照儿童EBV VCA-IgM检测结果均为阴性,统计学分析表明,差异无显著性(P=0.066)。结论 EBV感染是婴儿肝炎综合征的致病因子之一,临床对年龄较小伴肝功能损害的患儿,在排除巨细胞病毒、乙肝病毒感染后,应考虑EBV感染的可能。 展开更多
关键词 婴儿肝炎综合征 EB病毒 pcr-southern杂交 实时荧光定量pcr
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胰腺癌K—ras基因的研究
18
作者 雷士泽 马建新 林万芳 《西南国防医药》 CAS 1997年第6期321-324,共4页
采用PCR技术,以福尔马林固定、石腊包埋切片中所含DNA为模板,成功地对19例胰腺导管癌中的18例进行了K-ras基因的扩增。应用特异核酸探针和Southern杂交,检测了扩增后K-ras基因并发现15例(83.3%)胰腺导管癌含有K-ras基因点突变。其中12... 采用PCR技术,以福尔马林固定、石腊包埋切片中所含DNA为模板,成功地对19例胰腺导管癌中的18例进行了K-ras基因的扩增。应用特异核酸探针和Southern杂交,检测了扩增后K-ras基因并发现15例(83.3%)胰腺导管癌含有K-ras基因点突变。其中12密码由GGT转换为GAT5例(33.3%),12密码由GGT转换为GTT6例(40.0%),13密码由GGC,转换为GAC4例(26.6%)。未证实K-ras基因突变与癌分化程度、转移和浸润率以及患者予后的关系。结果提示K-ras基因突变在胰腺导管癌中极为常见,可能在胰腺癌发生中起重要作用;检测此基因突变可作为胰腺导管癌早期诊断和发生监测的生物学指标。 展开更多
关键词 胰腺癌 K-RAS基因 pcr技术 southern杂交 早期诊断
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生殖器疱疹患者病毒DNA的定量测定研究
19
作者 程培华 《中华皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第3期171-172,共2页
目的 对生殖器疱疹病毒( HSV)患者病毒 DNA进行定量测定。方法 以标准的 HSV质粒作为标准,用聚合酶链反应( PCR)和酶联免疫吸附法( ELISA),定量测定 HSV DNA。结果 100例生殖器疱疹患者中 93例 HSV测定阳性, 7例阴性。在 93例... 目的 对生殖器疱疹病毒( HSV)患者病毒 DNA进行定量测定。方法 以标准的 HSV质粒作为标准,用聚合酶链反应( PCR)和酶联免疫吸附法( ELISA),定量测定 HSV DNA。结果 100例生殖器疱疹患者中 93例 HSV测定阳性, 7例阴性。在 93例阳性者中有 58例为 HSV- 2(占 62.4%), 35例为 HSV- 1(占 37.6%)。 93例阳性者定量测定结果, 250μ L标本混悬液中 DNA质粒数为 115~ 1.1× 105个,平均 7.1× 104个; 58例 HSV- 2阳性者, 250μ L标本悬液 DNA质粒数为 136~ 1.1× 105个,平均 7.6× 104个; 35例 HSV- 1阳性者 DNA质粒数为 115~ 9.4× 104个,平均 6.3× 104个。分别随机取 HSV- 2和 HSV- 1阳性患者各 8例已淬取和纯化的 DNA混悬液 10μ L,定量测定结果显示: HSV- 2患者最高为 2.7× 104个 DNA质粒数,最低 35个,平均 1.8× 104个。 HSV- 1最高 2.5× 104个,最低 29个,平均 1.6× 104个。结论 所用几种检测法中 ELISA定量总阳性率为 93%,与 DNA印迹法阳性率相同。诊断 PCR阳性率为 91% ,HSV分型 PCR阳性率为 88%。 展开更多
关键词 HSV-DNA 聚合酶链反应 ELISA 生殖器疱疹
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农杆菌介导法获得优良玉米自交系转Bt基因植株 被引量:11
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作者 张艳贞 王罡 +1 位作者 魏松红 季静 《上海交通大学学报(农业科学版)》 2004年第1期31-36,共6页
用根癌农杆菌介导法将携带有苏云金芽孢杆菌杀虫蛋白基因(Bt)和PPT乙酰转移酶基因(bar)的质粒pGBIL04导入优良玉米自交系340和4112经预培养的幼胚初始愈伤组织,抗性植株平均发生频率为11.21%,经PCR、PCR-Southern和Southernblotting检... 用根癌农杆菌介导法将携带有苏云金芽孢杆菌杀虫蛋白基因(Bt)和PPT乙酰转移酶基因(bar)的质粒pGBIL04导入优良玉米自交系340和4112经预培养的幼胚初始愈伤组织,抗性植株平均发生频率为11.21%,经PCR、PCR-Southern和Southernblotting检测证明外源基因Bt已稳定整合到13株玉米基因组中,平均转化率为2.35%。降低共培养温度到22℃的转化率最高达4.44%,Basta抗性检测bar基因也同时转移进再生植株中,部分转化植株已经结实。 展开更多
关键词 农杆菌介导法 玉米 自交系 转Bt基因植株 根癌农杆菌 平均转化率 抗性植株 共培养温度 pcr
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