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31株苏云金芽孢杆菌杀虫晶体蛋白基因型鉴定及表达产物研究 被引量：14
1
作者 张杰 宋福平 +2 位作者 左雅慧 戴莲韵 黄大昉 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第4期372-378,共7页
利用已建立的苏云金芽孢杆菌cry基因的PCR RFLP鉴定体系 ,鉴定了 31株Bt菌株的cry基因类型 ,并进行了SDS PAGE分析和杀虫生物活性测定。研究表明 :2 5株含cry1基因 ,表达蛋白 1 30～ 1 50kD ;其中 1 6株含有对鞘翅目和鳞翅目害虫皆有活... 利用已建立的苏云金芽孢杆菌cry基因的PCR RFLP鉴定体系 ,鉴定了 31株Bt菌株的cry基因类型 ,并进行了SDS PAGE分析和杀虫生物活性测定。研究表明 :2 5株含cry1基因 ,表达蛋白 1 30～ 1 50kD ;其中 1 6株含有对鞘翅目和鳞翅目害虫皆有活性的cry1I基因 ,其表达蛋白为 81kD ;1 5株同时含有cry1和cry2基因 ( 1 3株表达蛋白约为 60kD) ;1 0株含有未知待定基因 ;6株不含所鉴定的cry基因 (其中 2株有表达产物 )。室内生物测定表明 :cry1、cry2基因表达的菌株对鳞翅目害虫具有高杀虫活性 ,7株对舞毒蛾和膜翅目———杨叶蜂幼虫具有较高杀虫活性 ;含有cry1Aa、cry1Ac、cry2或cry1Ab、cry1Ac、cry2基因组合的菌株对棉铃虫幼虫均显示杀虫活性 ,其中 6、1 2、30号菌株毒力最强。不含上述cry基因的菌株均无杀虫活性。以上结果证明 ,通过cry基因类型鉴定和表达产物的SDS PAGE分析可以预测菌株的杀虫活性。 展开更多
关键词 苏云金孢杆菌 CRY基因 基因型鉴定 SDS-PAGE
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糖单孢菌16SrDNA的PCR-RFLP分析 被引量：7
2
作者 吕志堂 刘志恒 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第6期567-572,共6页
PCR RFLP分析适用于种和种间水平的多相分类研究。文章对PCR RFLP方法应用于糖单孢菌属分类的具体方法进行了探讨 ;报道了一组适于糖单孢菌属PCR RFLP分析的限制性内切酶 ,并用这组酶对 6株糖单孢菌属分离株进行了研究 ,进一步探讨了实... PCR RFLP分析适用于种和种间水平的多相分类研究。文章对PCR RFLP方法应用于糖单孢菌属分类的具体方法进行了探讨 ;报道了一组适于糖单孢菌属PCR RFLP分析的限制性内切酶 ,并用这组酶对 6株糖单孢菌属分离株进行了研究 ,进一步探讨了实验菌株在该属的分类地位。同时指出了PCR RFLP方法应用中应注意的问题。 展开更多
关键词 糖单孢菌属 16SrDNA pcr-PFLP分析
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PCR-RFLP技术在环境地球化学研究中的应用及展望 被引量：5
3
作者 梁小兵 万国江 黄荣贵 《地质地球化学》 CSCD 2001年第1期94-98,共5页
PCR—RFLP技术为环境地球化学提供了一种新的研究方法和实验设计的新的思维方式。该方法具有所需样品量低、快速简便及特征性强等优点 ,可广泛应用于物质的生物地球化学循环、环境过程的生物作用、生物多样性及有机物源判断等方面的研... PCR—RFLP技术为环境地球化学提供了一种新的研究方法和实验设计的新的思维方式。该方法具有所需样品量低、快速简便及特征性强等优点 ,可广泛应用于物质的生物地球化学循环、环境过程的生物作用、生物多样性及有机物源判断等方面的研究。利用PCR—RFLP技术 ,以环境中存在的 16SrRNA为对象 ,对环境生物的研究已广泛开展并取得了许多成果。展望未来研究成果 ,将会在海洋及湖泊沉积物等自然环境中发现更多的、新的微生物种类 ;将进一步阐明生物作用和物质循环的机理和过程 ; 展开更多
关键词 pcr-RELP技术 环境地球化学 生物 沉积物 有机物源
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牛亚科5个群体β-Lg基因PCR-RFLP分析 被引量：5
4
作者 武秀香 杨章平 +6 位作者 毛永江 王小龙 瞿冬艳 陈仁金 周里根 王建勇 尹召华 《扬州大学学报（农业与生命科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期6-9,共4页
应用PCR-PFLP技术,分析荷斯坦奶牛、鲁西黄牛、闽南黄牛、渤海黑牛和青海牦牛5个群体741头个体β-乳球蛋白(β-Lg)基因第4外显子和β-Lg 5′侧翼区2个基因座的多态性。结果表明:前4个群体β-Lg A、B基因频率分别为0.4125/0.5875、0.1419... 应用PCR-PFLP技术,分析荷斯坦奶牛、鲁西黄牛、闽南黄牛、渤海黑牛和青海牦牛5个群体741头个体β-乳球蛋白(β-Lg)基因第4外显子和β-Lg 5′侧翼区2个基因座的多态性。结果表明:前4个群体β-Lg A、B基因频率分别为0.4125/0.5875、0.1419/0.8581、0.0333/0.9667和0.1857/0.8143,β-Lg 5′侧翼区A、B基因频率分别为0.412 5/0.5875、0.7286/0.2714、0.7328/0.2672和0.8637/0.1364;牦牛β-Lg B和E基因频率为0.0732/0.9269,未发现其他等位基因。适合性检验表明:β-Lg第4外显子在荷斯坦奶牛、鲁西黄牛和渤海黑牛3个群体中已达Hardy-Weinberg平衡状态,而闽南黄牛未达到平衡状态;β-Lg 5′侧翼区位点荷斯坦奶牛群体接近平衡,其余群体均已达平衡。群体遗传学分析表明:除闽南黄牛β-Lg 5′侧翼区为低度多态外,2个位点在其余群体内均为中度多态,荷斯坦奶牛这2个位点的杂合度和期望杂合度最高,闽南黄牛最低。提示这一研究成果为开展地方遗传资源保护奠定了基础。 展开更多
关键词 牛 β-Lg基因 pcr-PFLP 遗传多态性
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用AFLP技术和16SrDNA PCR-RFLP分析毛苜蓿根瘤菌的遗传多样性 被引量：12
5
作者 冯瑞华 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第4期339-345,共7页
采用选择性扩增片断长度多态性 (简称AFLP)DNA指纹技术对采自我国云南省与西藏交界的高山地区的野生型豆科植物毛苜蓿根际土样分离的 2 91株毛苜蓿 (Medicagoedge worthii)根瘤菌进行遗传多样性的研究。从AFLP图谱中 ,揭示出毛苜蓿根瘤... 采用选择性扩增片断长度多态性 (简称AFLP)DNA指纹技术对采自我国云南省与西藏交界的高山地区的野生型豆科植物毛苜蓿根际土样分离的 2 91株毛苜蓿 (Medicagoedge worthii)根瘤菌进行遗传多样性的研究。从AFLP图谱中 ,揭示出毛苜蓿根瘤菌有较显著的遗传多样性 ,从 2 91株中选择出 90个代表株用计算机进行树状图的分析。结果表明 ,所分析的菌株在 79%的相似性水平上聚类成 3个群。对这 90个代表株进行多聚酶链反应 (PCR)扩增的 1 6SrDNA的 4种限制性内切酶长度多态 (简称 1 6SrDNAPCR RFLP)分析 ,得出 2个不同的 1 6SrDNAPCR RFLP类型的菌株。分别选出这 2个类型的代表菌株与各种根瘤菌的参比菌株进行 1 6SrDNAPCR RFLP分析 ,再进行树状图的分析 ,初步得出了它们在根瘤菌系统分类中的地位。分析结果表明 :毛苜蓿根瘤菌与根瘤菌属中的Rhizobiummongolense的相似性很高。 展开更多
关键词 AFLP 16SrDNA 毛苜蓿根瘤菌 遗传多样性 牧草
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异基因骨髓移植中PCR-SSP和RFLP对HLA-DRB、DPB1分型的应用
6
作者 林祥华 陈志哲 +1 位作者 林敏辉 吕联煌 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第8期558-561,共4页
目的:探讨序列特异性引物聚合酶链反应（PCR-SSP）和聚合酶链反应限制性片段长度多态性分析（PCR-RFLP）对HLA-DRB、DPB1分型在异基因骨髓移植中应用的可行性。方法:应用19对不同的DRB抗原所对应等位基因序列特异性的引物,PCR扩增供受者... 目的:探讨序列特异性引物聚合酶链反应（PCR-SSP）和聚合酶链反应限制性片段长度多态性分析（PCR-RFLP）对HLA-DRB、DPB1分型在异基因骨髓移植中应用的可行性。方法:应用19对不同的DRB抗原所对应等位基因序列特异性的引物,PCR扩增供受者各20个样本DRB,产物直接琼脂糖凝胶电泳分析;同时用另一对引物PCR扩增DPB1第二外显子,产物10种限制性内切酶酶切分析。结果:各DRB带清晰可辨,直接确定为该型;DPB1的多态性片段编码转换后确定其基因型;4例找到供者。结论:它们是异基因骨髓植前快速、精确和可靠的基因分型手段。 展开更多
关键词 异基因骨髓移植 pcr-SSP rflp HLA-DRB DPB1 分型
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入侵中国大陆的红火蚁的鉴定及发生为害调查 被引量：292
7
作者 曾玲 陆永跃 +2 位作者 何晓芳 张维球 梁广文 《昆虫知识》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期144-148,F003-F004,共7页
根据形态特征鉴定结果首次证实红火蚁SolenopsisinvictaBuren入侵中国大陆 ,并调查了广东省吴川市红火蚁发生为害情况。调查结果表明 ,发生区内部分地点红火蚁发生密度较高 ,主要发生于较稳定的生态环境中 ,如荒坡、草地、长满杂草的田... 根据形态特征鉴定结果首次证实红火蚁SolenopsisinvictaBuren入侵中国大陆 ,并调查了广东省吴川市红火蚁发生为害情况。调查结果表明 ,发生区内部分地点红火蚁发生密度较高 ,主要发生于较稳定的生态环境中 ,如荒坡、草地、长满杂草的田埂等。红火蚁已对当地农业生产、人们的身体健康、日常生活等造成了不利影响。此外 ,Cytb基因序列分析结果表明 ,采自美国佛罗里达和广东吴川的红火蚁与采自广东 4个地方的热带火蚁S .geminata (Fabr.)两物种间有 61个变异位点 ,种内变异为 0。限制性酶切多态实验 (RFLP)的结果显示 ,BamHI酶在红火蚁的特异扩增片段中有一个识别位点 ,而在热带火蚁中无酶切位点 ;MspI酶在热带火蚁的扩增片段中也有一个识别位点 ,而在红火蚁中无识别位点。有酶切位点的扩增产物在酶切后分别获得近 2 0 0bp与 2 5 0bp的片段各一带。因此 ,用PCR RFLP的方法可以简单快速地鉴别红火蚁和热带火蚁。 展开更多
关键词 红火蚁 中国大陆 发生为害调查 入侵 pcr-rflp 识别位点 扩增片段 酶切位点 B基因序列 限制性酶切 鉴定结果 形态特征 为害情况 调查结果 发生密度 生态环境 农业生产 身体健康 不利影响 分析结果 佛罗里达 种内变异 扩增产物
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微生物生态学研究方法进展 被引量：87
8
作者 张洪勋 王晓谊 齐鸿雁 《生态学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期988-995,共8页
微生物培养及显微技术作为鉴定微生物种群的手段有很大的局限性 ,因为环境中大多数微生物处于“存活但不能培养”的状态。因此 ,不依赖于微生物培养的生物化学以及分子生物学方法正被广泛地用于微生物生态学研究。主要介绍了荧光技术 ,... 微生物培养及显微技术作为鉴定微生物种群的手段有很大的局限性 ,因为环境中大多数微生物处于“存活但不能培养”的状态。因此 ,不依赖于微生物培养的生物化学以及分子生物学方法正被广泛地用于微生物生态学研究。主要介绍了荧光技术 ,基于 PCR的分析技术和 展开更多
关键词 微生物生态学 研究方法 显微技术 微生物培养 生物化学 分子生物学方法 pcr PLFA
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小尾寒羊高繁殖力候选基因BMP15和GDF9的研究 被引量：95
9
作者 储明星 桑林华 +2 位作者 王金玉 方丽 叶素成 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第1期38-45,共8页
以控制Belclare和Cambridge绵羊高繁殖力的骨形态发生蛋白 15 (bonemorphogeneticprotein 15 ,BMP15 )基因和生长分化因子 9(growthdifferentiationfactor 9,GDF9)基因为候选基因 ,采用PCR RFLP技术检测BMP15基因和GDF9基因在高繁殖力... 以控制Belclare和Cambridge绵羊高繁殖力的骨形态发生蛋白 15 (bonemorphogeneticprotein 15 ,BMP15 )基因和生长分化因子 9(growthdifferentiationfactor 9,GDF9)基因为候选基因 ,采用PCR RFLP技术检测BMP15基因和GDF9基因在高繁殖力绵羊品种 (小尾寒羊、湖羊 )以及低繁殖力绵羊品种 (多赛特羊、特克塞尔羊、德国肉用美利奴羊 )中的单核苷酸多态性 ,同时研究这两个基因对小尾寒羊高繁殖力的影响。结果表明 :在 5个绵羊品种中都没有检测到GDF9基因的G8突变 (C→T) ,也没有检测到BMP15基因的B4突变 (G→T)。高繁殖力的小尾寒羊在BMP15基因编码序列第 718位碱基处发生了与Belclare绵羊和Cambridge绵羊相同的B2突变 (C→T) ,而其余 4个绵羊品种则没有发生这种突变。对于BMP15基因的B2突变 ,在小尾寒羊中检测到AA、AB两种基因型 ,A等位基因频率为 0 734,B等位基因频率为 0 2 6 6。小尾寒羊与其余 4个绵羊品种间B2突变基因型分布差异极显著 (P <0 0 0 1)。突变杂合基因型 (AB)小尾寒羊平均产羔数比野生纯合基因型 (AA)多 0 6 2只 (P <0 0 1)。研究结果表明 ,BMP15B2突变对小尾寒羊高繁殖力影响作用十分明显 。 展开更多
关键词 绵羊 高繁殖力 候选基因法 骨形态发生蛋白15基因 生长分化因子9基因 pcr—rflp
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乙型肝炎病毒基因型S基因PCR-RFLP分型方法的建立 被引量：77
10
作者 阎丽 侯金林 +3 位作者 郭亚兵 王战会 林裕龙 骆抗先 《中华传染病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期224-228,共5页
目的　建立乙型肝炎病毒 (HBV)S基因聚合酶链反应 限制性片段长度多态性 (PCR RFLP)的基因型分型方法并验证其准确性。方法　比较GenBank中HBV 2 2 3株各基因型全序列的S基因氨基酸及核苷酸序列 ,设计限制性内切酶BsrI、StyI、DpnI和Hp... 目的　建立乙型肝炎病毒 (HBV)S基因聚合酶链反应 限制性片段长度多态性 (PCR RFLP)的基因型分型方法并验证其准确性。方法　比较GenBank中HBV 2 2 3株各基因型全序列的S基因氨基酸及核苷酸序列 ,设计限制性内切酶BsrI、StyI、DpnI和HpaII鉴别HBVA F基因型的方法。选择经前SPCR PFLP的方法已鉴定出的HBVB、C和D基因型标本各 3 0例 ,用此方法鉴定验证 ,并随机对HBVB、C和D基因型各 3株标本进行S基因测序证实。结果　两种PCR RFLP及S基因测序鉴定HBV基因型结果一致。结论　S基因PCR RFLP的方法能够准确鉴定HBV基因型。此方法灵敏性高 ,特异性强 ,且酶切图谱简明单一 ,易于识别 ,适宜于HBV基因型的流行病学调查。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 HBV S基因 基因型 聚合酶链反应 限制性片段长度多态性 pcr-rflp 基因分型
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长江中游水系鲢和草鱼群体mtDNA遗传变异的研究 被引量：59
11
作者 张四明 汪登强 +1 位作者 邓怀 余来宁 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期142-147,共6页
采用 PCR技术进行了长江中游鲢和草鱼四个地理群体的线粒体 DNA(mt DNA)限制性片段长度多态性 (RFL P)的研究。四个地理群体包括长江中游的湖北嘉鱼和江西瑞昌两个地理群体 ,长江中游的两大支流汉江和湘江群体。 PCR技术扩增出 mt DNA N... 采用 PCR技术进行了长江中游鲢和草鱼四个地理群体的线粒体 DNA(mt DNA)限制性片段长度多态性 (RFL P)的研究。四个地理群体包括长江中游的湖北嘉鱼和江西瑞昌两个地理群体 ,长江中游的两大支流汉江和湘江群体。 PCR技术扩增出 mt DNA ND5 - ND6基因 ,选用 1 0种限制性内切酶对 PCR产物进行酶切。从鲢中共检出 1 8种单倍型 ,在草鱼中没有发现多态现象 ,只有一种单倍型存在。进一步地证实了长江鲢的遗传多样性比草鱼的要丰富得多 ,与这两种鱼类在长江现有生物量成反比的反常现象。 展开更多
关键词 鲢鱼 草鱼 线粒体DNA 变异 pcr-rflp 遗传多样性 长江中游水系
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9个猪种H-FABP基因5’-上游区和第二内含子的遗传变异 被引量：51
12
作者 张桂香 曹红鹤 +2 位作者 王立贤 李宏滨 郑友民 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期340-343,共4页
以 8个中国地方猪种和引进品种大白猪共 40 9头猪为实验动物 ,利用PCR RFLP技术研究了H FABP基因的 5’ 上游区和第二内含子内的遗传变异。结果在 9个品种的 5’ 上游区中都验证了一个HinfⅠ RFLP ,变异的酶切位点在 132 2位 ,等位基因... 以 8个中国地方猪种和引进品种大白猪共 40 9头猪为实验动物 ,利用PCR RFLP技术研究了H FABP基因的 5’ 上游区和第二内含子内的遗传变异。结果在 9个品种的 5’ 上游区中都验证了一个HinfⅠ RFLP ,变异的酶切位点在 132 2位 ,等位基因H ,在皖南花猪 ,二花脸猪 ,金华猪 ,小梅山猪 ,滇南小耳猪 ,香猪 ,荣昌猪 ,北京黑猪和大白猪中的频率分别为 0 36 ,0 34 ,0 6 0 ,0 6 6 ,0 80 ,0 73,0 76 ,0 70和 0 90。大白猪和滇南小耳猪的HinfⅠ RFLP的基因型分布相似 ,二者分别与其它 7个猪种之间存在着极显著的差异 ;皖南花猪和二花脸猪相近 ,二者与另外 7个品种之间的差异也达到极显著水平。在第二内含子中 ,验证了一个HaeⅢ RFLP ,该多态性只出现在皖南花猪和大白猪中 ,等位基因D的频率分别为 0 99和 0 6 1。另外 ,发现一个新的多态HinfⅠ 酶切位点 ,测序结果表明 ,该多态位点的产生是由于 1970位碱基C突变为T造成的。该多态位点只在皖南花猪和大白猪中出现 ,等位基因B的频率在两品种中分别为 0 86和 0 5 8。在所有测定的猪种中 ,都没有发现MspⅠ RFLP。 展开更多
关键词 5′-上游区 遗传变异 H-FABP基因 猪 pcr-rflp 第二内含子
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绵羊BMPR-IB基因多态性与其产羔数的相关研究 被引量：56
13
作者 王启贵 钟发刚 +3 位作者 李辉 王新华 刘守仁 陈晓军 《草食家畜》 2003年第2期20-23,共4页
本研究以绵羊BMPR -IB基因为候选基因 ,以湖羊、中国美利奴单胎品系、中国美利奴肉用和毛用多胎品系为研究对象 ,通过PCR -RFLP检测该基因的单核苷酸多态性 (SNP)位点 ,同时研究该基因对绵羊产羔数的影响。研究发现 ,在BMPR -IB基因序列... 本研究以绵羊BMPR -IB基因为候选基因 ,以湖羊、中国美利奴单胎品系、中国美利奴肉用和毛用多胎品系为研究对象 ,通过PCR -RFLP检测该基因的单核苷酸多态性 (SNP)位点 ,同时研究该基因对绵羊产羔数的影响。研究发现 ,在BMPR -IB基因序列第 74 6碱基处有一个A /GSNP位点 ,结果在不同品系羊中产生 3种基因型 (BB、B +和 ++)。基因型频率在各品种 (系 )间差异极显著 (P <0 .0 0 1) ,在湖羊中以BB基因型为主 ,在中国美利奴单胎品系中以 ++基因型为主 ,而在中国美利奴肉用和毛用多胎品系中以B +基因型为主。BB和B +基因型的母羊产羔数明显较 ++基因型的母羊多。BMPR -IB基因型在绵羊各品系间的分布和各种基因型绵羊的实际产羔情况两方面的研究结果强烈表明BMPR -IB为影响绵羊的产羔数的主效基因 ,可以用于对绵羊产羔数的选择。 展开更多
关键词 绵羊 BMPR--IB基因 多态性 产羔数 pcr-rflp
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小梅山、中梅山及大约克猪的SLA-DQB基因外显子2 PCR-RFLP多态性分析 被引量：46
14
作者 方美英 胡晓湘 +1 位作者 李宁 吴常信 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第8期685-687,共3页
采用限制性内切核酸酶RsaⅠ对中国地方猪种小梅山、中梅山及国外猪种大约克SLA DQB基因外显子 2的2 73bp扩增产物进行多态性分析。小梅山猪酶切后出现两种基因型 :2 4 6bp 2 7bp(AA)、132bp 84bp 30bp 2 7bp(BB) ;中梅山猪中出现 4种基... 采用限制性内切核酸酶RsaⅠ对中国地方猪种小梅山、中梅山及国外猪种大约克SLA DQB基因外显子 2的2 73bp扩增产物进行多态性分析。小梅山猪酶切后出现两种基因型 :2 4 6bp 2 7bp(AA)、132bp 84bp 30bp 2 7bp(BB) ;中梅山猪中出现 4种基因型 :2 4 6bp 2 7bp(AA)、132bp 84bp 30bp 2 7bp(BB)、132bp 114bp 2 7bp(CC)、2 4 6bp 132bp 84bp 30bp 2 7bp(AB) ;大约克猪中出现 5种基因型 :2 4 6bp 2 7bp(AA)、132bp 84bp 30bp 2 7bp(BB)、132bp 114bp 2 7bp(CC)、2 4 6bp 132bp 84bp 30bp 2 7bp(AB)、2 73bp 2 4 6bp 2 7bp(AD)。分析发现 ,SLA DQB基因外显子 2的 11、94和 12 4位碱基表现出多态性并在 3个猪种中检测到A、B、C和D 4个等位基因 ;χ2 适合性检验结果表明 ,小梅山、中梅山及大约克SLA DQB基因外显子 2在RsaⅠ酶切位点已经达到了Hardy 展开更多
关键词 小梅山 中梅山 大约克猪 SLA-DQB基因 外显子2 pcr-rflp多态性分析 中国地方猪种
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IGF2基因PCR-RFLP多态性与脂肪沉积相关性状的关联分析 被引量：52
15
作者 刘桂兰 蒋思文 +2 位作者 熊远著 郑嵘 屈彦纯 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第12期1107-1112,共6页
胰岛素样生长因子 2在胎儿生长发育、肿瘤细胞增殖、肌肉生长等方面具有重要的调控作用 ,是影响猪瘦肉量的主要候选基因。采用PCR RFLP技术 ,分析了IGF2基因第 8内含子部分片段在猪资源家系群体中的NciⅠ酶切片段多态性分布。IGF2基因... 胰岛素样生长因子 2在胎儿生长发育、肿瘤细胞增殖、肌肉生长等方面具有重要的调控作用 ,是影响猪瘦肉量的主要候选基因。采用PCR RFLP技术 ,分析了IGF2基因第 8内含子部分片段在猪资源家系群体中的NciⅠ酶切片段多态性分布。IGF2基因该片段具有两个NciⅠ酶切位点 (切点位于第 8内含子 ,分别记录为位点A和位点B) ,两位点在资源家系中均具有多态性。IGF2基因B位点酶切未突变个体均比酶切突变的个体背膘薄 18 2 8% (P<0 0 1) ,肥肉率低 2 2 4 3% (P <0 0 1) ,瘦肉率高 8 71% (P <0 0 1) ,位点A具有相同的影响趋势。在该研究群体中 ,IGF2基因发挥作用的方式主要为加性效应 。 展开更多
关键词 IGF2基因 pcr-rflp 背膘厚 猪
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3个杂交牛种H-FABP基因第二内含子的遗传变异与肉品质性状的相关分析 被引量：45
16
作者 李武峰 许尚忠 +1 位作者 曹红鹤 李宏滨 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期252-255,共4页
利用PCR-RFLP方法在牛H-FABP基因内发现了1个变异酶切位点,为intron2上的HaeIII-RFLP。对此多态性片段进行克隆测序分析,结果表明此酶切位点是由于1006位的碱基C→G的突变引起。利用最小二乘法拟合线性模型对不同分子标记基因型效应值... 利用PCR-RFLP方法在牛H-FABP基因内发现了1个变异酶切位点,为intron2上的HaeIII-RFLP。对此多态性片段进行克隆测序分析,结果表明此酶切位点是由于1006位的碱基C→G的突变引起。利用最小二乘法拟合线性模型对不同分子标记基因型效应值间肉品质大理石花纹和嫩度性状差异显著性检验,结果表明:牛H-FABP基因中的h等位基因,尤其是hh纯合基因型对牛肉嫩度剪切力值有较大的影响。 展开更多
关键词 肉牛 H-FABP基因 第二内含子 遗传变异 肉质性状 相关分析 牛肉嫩度 牛肉大理石花纹
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真菌核糖体基因间隔区研究概况 被引量：29
17
作者 余仲东 张星耀 曹支敏 《西北林学院学报》 CSCD 北大核心 2000年第2期107-112,共6页
真菌基因组核糖体基因间隔区是分子生物技术研究的重要片段。本文综述了PCR:RFLP技术。
关键词 真菌 核糖体基因间隔区 pcr-rflp 测序技术
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猪资源家系MC4R基因扫描及其与脂肪性状的相关分析 被引量：41
18
作者 刘桂兰 蒋思文 +2 位作者 熊远著 郑嵘 屈彦纯 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第6期497-501,共5页
黑素皮质激素受体 4 (Melanocortin 4Receptor,MC4R)是在人类肥胖研究中发现的重要调节因子 ,它可以与瘦蛋白 (Leptin)、神经肽Y(NeuropeptideY ,NPY)、α 黑素细胞刺激激素 (Alpha melanocyte stimulatinghormone ,α MSH)等一起调节... 黑素皮质激素受体 4 (Melanocortin 4Receptor,MC4R)是在人类肥胖研究中发现的重要调节因子 ,它可以与瘦蛋白 (Leptin)、神经肽Y(NeuropeptideY ,NPY)、α 黑素细胞刺激激素 (Alpha melanocyte stimulatinghormone ,α MSH)等一起调节动物体重和采食量。采用PCR RFLP技术 ,分析了MC4R基因部分片段在猪资源家系群体中的TaqⅠ酶切片段多态性分布。MC4R基因多态性与生长肥育性状、肉质性状、胴体性状的相关性分析的结果表明 ,MC4R基因型频率在不同品种群体中的分布不同 ;MC4R基因与猪胸腰椎间膘厚、臀部膘厚、平均背膘、眼肌宽度、眼肌面积、皮率呈显著性相关。MC4R基因主要以显性作用方式发挥作用 。 展开更多
关键词 猪资源家系MC4R 基因扫描 脂肪性状 相关分析 背膘厚
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药用植物束花石斛、流苏石斛及其形态相似种的PCR-RFLP鉴别研究 被引量：44
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作者 张婷 徐珞珊 +3 位作者 王峥涛 周开亚 张宁 史永峰 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第8期728-733,共6页
目的建立简易的采用rDNAITS区作为分子标记对中药石斛的基源植物进行分子鉴定的技术。方法用聚合酶链反应—限制性片段长度多态性(PCRRFLP)方法获得ITS片段的限制性图谱。束花石斛及其形态相似种的PCR扩增产物用ClaI和ApaLI酶切,流苏石... 目的建立简易的采用rDNAITS区作为分子标记对中药石斛的基源植物进行分子鉴定的技术。方法用聚合酶链反应—限制性片段长度多态性(PCRRFLP)方法获得ITS片段的限制性图谱。束花石斛及其形态相似种的PCR扩增产物用ClaI和ApaLI酶切,流苏石斛及其形态相似种的PCR扩增产物用SphI酶切。结果根据预测的PCRRFLP图谱,可以鉴别药用植物束花石斛、流苏石斛及它们的形态相似种。用这种方法鉴定了市场上收集的25件商品束花石斛、流苏石斛新鲜药材的原植物。结论rDNAITS的PCRRFLP可用于鉴定石斛药材的原植物,具有简便、费用低的优点。 展开更多
关键词 石斛 束花石斛 流苏石斛 ITS区 pcr-rflp
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几种分子生物学方法在菌种鉴定中的应用 被引量：37
20
作者 周贤轩 杨波 陈新华 《生物技术》 CAS CSCD 2004年第6期35-38,共4页
REP -PCR指纹法、PCR -RFLP分析法、16SrDNA序列分析法在生物多样性研究、菌种鉴定、及微生物资源的开发应用中得到了广泛的应用 ,但最高分辨能力及适用性各不相同。该文采用上述方法对从厦门温泉分离到的嗜热菌进行了鉴定分析 ,并对Gen... REP -PCR指纹法、PCR -RFLP分析法、16SrDNA序列分析法在生物多样性研究、菌种鉴定、及微生物资源的开发应用中得到了广泛的应用 ,但最高分辨能力及适用性各不相同。该文采用上述方法对从厦门温泉分离到的嗜热菌进行了鉴定分析 ,并对GeneBank数据库中的同源性较近的细菌 16SrDNA序列进行比较 ,结果发现 :在这三种鉴定方法中 ,REP -PCR法最简单 ,分辨能力最强 ,可鉴别 16SrDNA序列同源性大于 99.5 %甚至完全相同的不同菌株 ;16SrDNA分析能快速准确地对微生物进行分类鉴定 ,它在分类学中的核心地位不可替代 ,但当 16SrDNA序列同源性大于 99.5 %时难以获得准确的鉴定结果 ;PCR -RFLP法分辨力弱 ,可用于种到属水平的研究 ,16SrDNA序列相似性在 96 %以上 ,酶切图谱就难以区分了 。 展开更多
关键词 REP-pcr pcr-rflp 16SrDNA序列分析 嗜热菌
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