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PCR-焦磷酸测序法快速鉴定食品中肠炎沙门菌 被引量:3
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作者 曹冬梅 倪长鹏 +3 位作者 刘宇 卢熠川 许龙岩 曹际娟 《大连工业大学学报》 CAS 北大核心 2015年第1期29-33,共5页
通过对肠炎沙门菌特异性基因片段的焦磷酸测序,达到快速鉴定肠炎沙门菌的目的。设计PCR扩增引物和焦磷酸测序引物,对PCR扩增产物进行焦磷酸测序,测得序列进行BLAST比对分析。通过对肠炎沙门菌特异性基因上的30个碱基片段进行测定,可准... 通过对肠炎沙门菌特异性基因片段的焦磷酸测序,达到快速鉴定肠炎沙门菌的目的。设计PCR扩增引物和焦磷酸测序引物,对PCR扩增产物进行焦磷酸测序,测得序列进行BLAST比对分析。通过对肠炎沙门菌特异性基因上的30个碱基片段进行测定,可准确鉴定16株肠炎沙门菌。所建立的方法可以从基因序列水平上准确鉴定肠炎沙门菌,具有快速、准确的优势。 展开更多
关键词 肠炎沙门菌 pcr-焦磷酸测序 鉴定
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PCR-焦磷酸测序检测单核细胞增生李斯特氏菌研究 被引量:3
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作者 许龙岩 袁慕云 +2 位作者 唐勤 阳静 相大鹏 《中国食品卫生杂志》 北大核心 2013年第3期201-205,共5页
目的建立结合PCR-焦磷酸测序检测单核细胞增生李斯特氏菌的方法。方法根据单核细胞增生李斯特氏菌的hly基因设计扩增引物和测序引物,特异地扩增目的片段,再制备单链模板,在测序引物引导下进行焦磷酸测序,通过测序结果与GenBank中的hly... 目的建立结合PCR-焦磷酸测序检测单核细胞增生李斯特氏菌的方法。方法根据单核细胞增生李斯特氏菌的hly基因设计扩增引物和测序引物,特异地扩增目的片段,再制备单链模板,在测序引物引导下进行焦磷酸测序,通过测序结果与GenBank中的hly基因序列的比对进行鉴定。结果扩增引物和测序引物表现出良好的特异性,16株单核细胞增生李斯特氏菌菌株均扩增出大小249 bp的DNA片段,焦磷酸测序结果与hly基因序列100%匹配,而阴性对照菌株均未扩增出DNA条带,焦磷酸测序结果为阴性。结论建立的方法特异性高,是快速从DNA序列水平上检测单核细胞增生李斯特氏菌的有效手段。 展开更多
关键词 pcr-焦磷酸测序 单核细胞增生李斯特氏菌 DNA碱基序列 hly基因
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PCR-焦磷酸测序技术检测奶牛乳房炎4种主要致病菌方法的建立 被引量:2
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作者 剧慧栋 李月颖 +3 位作者 张乐祎 李秀娟 赵宝华 徐保红 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2012年第6期58-64,共7页
应用PCR-焦磷酸测序技术(pyrosequencing)一种新型快速检测奶牛乳房炎(bovine mastitis)4种主要致病菌无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)、停乳链球菌(S.dysgalactiae)、沙门氏菌(Salmonella sp.)和金黄色葡萄球菌(Staphylococcus a... 应用PCR-焦磷酸测序技术(pyrosequencing)一种新型快速检测奶牛乳房炎(bovine mastitis)4种主要致病菌无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)、停乳链球菌(S.dysgalactiae)、沙门氏菌(Salmonella sp.)和金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)的方法。根据GenBank中无乳链球菌的sip基因、停乳链球菌的isp基因、沙门氏菌的stn基因和金黄色葡萄球菌的clfa基因的序列信息,分别设计各基因保守区段的PCR扩增引物及焦磷酸测序引物。分别以108株无乳链球菌、100株停乳链球菌、136株沙门氏菌、203株金黄色葡萄球菌,以及多株其他参照菌为模板,轮流使用上述各扩增引物进行PCR扩增目的基因片段。随后采用焦磷酸测序技术针对阳性PCR扩增片段进行核苷酸保守区段的测序分析。最终得到预期的PCR扩增和焦磷酸测序结果,且实验结果具有可靠的重复性。PCR-焦磷酸测序技术适用于上述奶牛乳房炎4种主要致病菌的检测鉴定,具有准确、快速等优点。 展开更多
关键词 pcr-焦磷酸测序 奶牛乳房炎 无乳链球菌 停乳链球菌 沙门氏菌 金黄色葡萄球菌
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沙门菌PCR-焦磷酸测序法检测 被引量:4
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作者 李秀娟 徐保红 +2 位作者 宋红梅 李丽婕 田会芳 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期997-998,共2页
关键词 沙门菌 pcr-焦磷酸测序 免疫学检测技术
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