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嗜水气单胞菌毒力与毒力基因分布的相关性 被引量：64
1
作者 朱大玲 李爱华 +3 位作者 汪建国 李明 蔡桃珍 胡靖 《中山大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期82-85,共4页
采用PCR扩增的方法对9株鱼源嗜水气单胞菌AEROM ONAS HYDROPHILA中的气溶素基因(AERA)、溶血素基因(HLYA)和丝氨酸蛋白酶基因(AHPA)进行了扩增。结果表明,6/9的A.HYDROPHILA中存在AERA基因,8/9的A.HYDROPHILA中存在HLYA基因,而在7/9的A.... 采用PCR扩增的方法对9株鱼源嗜水气单胞菌AEROM ONAS HYDROPHILA中的气溶素基因(AERA)、溶血素基因(HLYA)和丝氨酸蛋白酶基因(AHPA)进行了扩增。结果表明,6/9的A.HYDROPHILA中存在AERA基因,8/9的A.HYDROPHILA中存在HLYA基因,而在7/9的A.HYDROPHILA中检测到AHPA基因。通过比较基因检测的结果与嗜水气单胞菌对鲫鱼的致病性,发现AHPA阴性菌株是无毒株,强毒株都呈AERA+HLYA+AHPA+基因型。AERA+HLYA+AHPA+基因型是致病性嗜水气单胞菌主要的基因型。本研究首次发现AHPA阳性的嗜水气单胞菌皆为毒力菌株,并且发现AERA和AHPA基因存在相关性,探讨了嗜水气单胞菌致病性与毒力基因分布的关系。 展开更多
关键词 嗜水气单胞菌 毒力基因 pcr检测 致病性
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SDS-CTAB结合法提取棉花总DNA 被引量：57
2
作者 孙鑫 崔洪志 +1 位作者 胡宝忠 郭三堆 《生物技术通报》 CAS CSCD 2004年第5期45-47,共3页
根据以往提取棉花总DNA的经验 ,并参考了几种相关的植物总DNA提取方法 ,得到一种更适合棉花 (GossypiumL .)总DNA提取的方法。该提取方法综合了SDS法与CTAB法的优点 ,使获得的棉花总DNA纯度高 ,得率大 ,完整性较好 ,可用于PCR检测 ,Sout... 根据以往提取棉花总DNA的经验 ,并参考了几种相关的植物总DNA提取方法 ,得到一种更适合棉花 (GossypiumL .)总DNA提取的方法。该提取方法综合了SDS法与CTAB法的优点 ,使获得的棉花总DNA纯度高 ,得率大 ,完整性较好 ,可用于PCR检测 ,Southern杂交 ,RAPD ,染色体步移等分子生物学操作。 展开更多
关键词 总DNA 棉花 CTAB法 pcr检测 RAPD SDS法 提取方法 分子生物学 SOUTHERN杂交 染色体
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香蕉炭疽菌rDNA ITS区的分子鉴定与检测 被引量：40
3
作者 杨腊英 黄华平 +3 位作者 唐复润 胡美娇 张世清 黄俊生 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期219-225,共7页
香蕉炭疽病菌(Colletotrichum musae)是一种引起香蕉采后病害的最重要病原,本研究用真菌18S^28S间的内转录间隔区(internal transcribed spacer,ITS)通用引物18SF和28SR扩增香蕉炭疽菌和其它外群真菌的基因组DNA,扩增出约510 bp的片段;... 香蕉炭疽病菌(Colletotrichum musae)是一种引起香蕉采后病害的最重要病原,本研究用真菌18S^28S间的内转录间隔区(internal transcribed spacer,ITS)通用引物18SF和28SR扩增香蕉炭疽菌和其它外群真菌的基因组DNA,扩增出约510 bp的片段;通过克隆测序香蕉炭疽菌的ITS全序列并与GenBank中炭疽菌属其它种的ITS序列比对,设计出香蕉炭疽菌的特异性引物ColM1和ColM2。用此特异引物可以从香蕉炭疽菌株中扩增出382 bp的特异性片段,而其余20个参试菌株和香蕉组织的PCR反应结果为阴性,灵敏度实验证明可以检测到目标DNA的浓度为0.1 pg。该方法可用于快速、准确和灵敏地检测香蕉炭疽菌,为快速监测组织中有无香蕉炭疽病菌潜伏侵染与及早采取防治措施提供积极的指导意义。 展开更多
关键词 香蕉炭疽菌 内转录间隔区(ITS) 特异性引物 pcr检测
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猪多杀性巴氏杆菌的分离鉴定及生物学特性研究 被引量：48
4
作者 唐先春 吴斌 +3 位作者 索绪峰 王大林 陈焕春 尹争艳 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期590-595,共6页
用PCR方法配合生化鉴定,从有肺炎症状猪的肺脏及进行性萎缩性鼻炎(Progressive atrophic rhinitis,PAR)症状猪的鼻拭子中分离出66 株多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida, Pm)。然后做了药敏试验,并用PCR方法对这66株Pm进行分型及毒... 用PCR方法配合生化鉴定,从有肺炎症状猪的肺脏及进行性萎缩性鼻炎(Progressive atrophic rhinitis,PAR)症状猪的鼻拭子中分离出66 株多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida, Pm)。然后做了药敏试验,并用PCR方法对这66株Pm进行分型及毒素基因的检测, 用豚鼠皮肤坏死试验及小鼠致死试验对产毒素多杀性巴氏杆菌(Toxigenic Pasteurella multocida, T+Pm)进一步鉴定。结果显示PCR鉴定与生化鉴定Pm结果完全一致;PCR分型表明有46株为D型Pm,18株为A型Pm,1株为B型Pm,1株无法定型;有8株用PCR检测为T+ Pm;豚鼠皮肤坏死试验及小鼠致死试验对这8株T+Pm的进一步鉴定也表明均为产毒素菌株。所鉴定的8 株T+ Pm都为D型,都分离于有严重PAR症状的猪。 展开更多
关键词 多杀性巴氏杆菌 特性研究 分离鉴定 生物学 pcr方法 猪 生化鉴定 致死试验 萎缩性鼻炎 pcr鉴定 pcr检测 药敏试验 毒素基因 Pm 进行性 症状 PAR 分型 小鼠 坏死 皮肤 豚鼠 D型 肺脏 肺炎
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转ScMV-CP基因甘蔗的分子生物学分析与鉴定 被引量：38
5
作者 姚伟 余爱丽 +3 位作者 徐景升 耿广良 张木清 陈如凯 《分子植物育种》 CAS CSCD 2004年第1期13-18,共6页
采用改良的CTAB方法提取转基因甘蔗幼苗的基因组DNA ,核酸蛋白测定仪分析及凝胶电泳结果表明 ,提取的DNA具有典型的DNA分子的标准紫外吸收光谱特点 ,DNA产量为 4 5～ 6 0 μg/ 10 0mg。同时根据质粒载体设计合成了 2对引物 ,分别扩增新... 采用改良的CTAB方法提取转基因甘蔗幼苗的基因组DNA ,核酸蛋白测定仪分析及凝胶电泳结果表明 ,提取的DNA具有典型的DNA分子的标准紫外吸收光谱特点 ,DNA产量为 4 5～ 6 0 μg/ 10 0mg。同时根据质粒载体设计合成了 2对引物 ,分别扩增新霉素磷酸转移酶 (nptII)基因和甘蔗花叶病毒外壳蛋白(ScMV CP)基因。PCR检测结果表明 ,在 5 3株待检测的样品中有 2 4株同时含有这 2种转基因成分 ,其中 13株在Southern杂交中有杂交信号出现 ,其拷贝数为 1～ 3个。 展开更多
关键词 甘蔗 ScMV-CP基因 转基因 分子生物学 改良CTAB法 DNA提取 pcr检测 鉴定 花叶病 抗病育种
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肺部真菌感染的诊断 被引量：49
6
作者 汤兵祥 《中国实用内科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期331-333,共3页
关键词 肺部真菌感染 X线诊断 实验室诊断 pcr检测
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嗜水气单胞菌毒力基因的研究进展 被引量：37
7
作者 朱大玲 李爱华 +1 位作者 钱冬 汪建国 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期80-84,共5页
关键词 嗜水气单胞菌 毒力基因 研究进展 pcr检测 致病菌
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尖锐湿疣皮损中人乳头瘤病毒基因分型研究 被引量：39
8
作者 蒋明军 王书崎 +6 位作者 龚向东 余艳华 陈强 高省 尹跃平 韩国柱 孙建方 《中华皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期262-264,共3页
目的采用反向杂交研究尖锐湿疣皮损中人乳头瘤病毒(HPV)的感染状况。方法提取尖锐湿疣新鲜标本的HPVDNA,采用PGMY09/11引物系统进行聚合酶链反应(PCR)。PCR产物在标记有37种HPV型特异性探针的尼龙膜条带上进行HPVDNA杂交分型。所有DNA... 目的采用反向杂交研究尖锐湿疣皮损中人乳头瘤病毒(HPV)的感染状况。方法提取尖锐湿疣新鲜标本的HPVDNA,采用PGMY09/11引物系统进行聚合酶链反应(PCR)。PCR产物在标记有37种HPV型特异性探针的尼龙膜条带上进行HPVDNA杂交分型。所有DNA模板采用HPV6和11型特异性引物进行PCR检测验证。数据经SPSS11.0统计软件分析。结果杂交结果显示201例标本HPVDNA均为阳性,共发现31种HPV基因型,其主要的HPV基因型名称及所占比例分别如下:HPV11(53.7%,108/201)、HPV6(43.8%,88/201)、HPV16(6.5%,13/201)、HPV52(6.0%,12/201)、HPV33和HPVcp6108(均为5.5%,11/201)、HPV42(5.0%,10/201)等。60.2%(121/201)的标本由单一型HPV感染,39.8%的标本由混合型HPV感染。HPV6和11型特异性引物PCR结果显示HPV6和11的阳性率分别为45.8%和56.2%,与杂交结果比较,一致性分别为98.5%和96.5%,资值分别为0.97和0.93,P值均<0.001。结论至少有31种HPV基因型与尖锐湿疣相关。HPV11阳性率最高,HPV68、40、54、67、73、82、35、64和83在尖锐湿疣中少见,HPVcp6108在尖锐湿疣中首次发现,且阳性率较高(与HPV33并列第5位)。HPV26、69、70、71、72和IS39可能与尖锐湿疣不相关。尖锐湿疣中单一型和混合型HPV阳性率分别为60.2%(121/201)和39.8%(80/201)。 展开更多
关键词 尖锐湿疣 人乳头瘤病毒基因 分型研究 聚合酶链反应(pcr) 皮损 HPV基因型 HPVDNA 型特异性引物 HPV感染 HPV6 DNA杂交 特异性探针 pcr产物 pcr检测 DNA模板 HPV11 阳性率 感染状况 反向杂交 软件分析 结果比较 首次发现
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暴发性流行病病原对中国对虾亲虾人工感染及对子代影响的PCR检测 被引量：25
9
作者 刘萍 ns.qd.sd.cn +4 位作者 孔杰 石拓 刘志鸿 李健 韩玲玲 《海洋与湖沼》 CAS CSCD 北大核心 1999年第2期139-144,共6页
1997年4月在山东海阳市近海捕获10尾中国对虾，采用患暴发性流行病的虾池中的病虾为毒种，进行人工感染试验。采用两次聚合酶链反应（PCR）检测方法，对感染亲虾的胃、腮、卵巢，以及卵和各期幼体进行跟踪检测。对经人工感染的10尾亲虾... 1997年4月在山东海阳市近海捕获10尾中国对虾，采用患暴发性流行病的虾池中的病虾为毒种，进行人工感染试验。采用两次聚合酶链反应（PCR）检测方法，对感染亲虾的胃、腮、卵巢，以及卵和各期幼体进行跟踪检测。对经人工感染的10尾亲虾组织的PCR检测结果表明，6尾虾的胃样呈阳性，其中4尾为第1次检测出阳性；1尾虾的腮样呈阳性；2尾虾的卵巢样呈阳性，且其所产的卵子也呈阳性；每尾亲虾产卵所孵化出来的各期幼体，经两次PCR检测均呈阴性。随着实验水温的上升，人工感染病毒的亲虾存活的时间缩短；卵子的孵化率随着对亲虾感染时间的增长而有大幅度降低的趋势。 展开更多
关键词 病毒 人工感染 亲虾 子代 pcr检测 中国对虾
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应用PCR检测山羊痘病毒 被引量：29
10
作者 郭巍 陈杰 +4 位作者 黄保续 李晓成 吴发兴 张燕霞 李一经 《中国兽医科技》 CSCD 北大核心 2003年第12期50-52,共3页
初步建立了用于诊断山羊皮肤组织中山羊痘病毒的PCR方法。试验设计了 2对引物 ,用以分别检测山羊痘病毒的特异性基因和α 微管蛋白基因。克隆到的DNA扩增产物的序列与GenBank中收录的序列同源性达到 98%。试验表明 ,用PCR方法可快速检... 初步建立了用于诊断山羊皮肤组织中山羊痘病毒的PCR方法。试验设计了 2对引物 ,用以分别检测山羊痘病毒的特异性基因和α 微管蛋白基因。克隆到的DNA扩增产物的序列与GenBank中收录的序列同源性达到 98%。试验表明 ,用PCR方法可快速检测样品中的山羊痘病毒。 展开更多
关键词 pcr检测 山羊痘 病毒 特异性基因 α-微管蛋白基因
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加工食品中若干动物成分的PCR检测技术应用研究 被引量：38
11
作者 陈文炳 邵碧英 +2 位作者 廖宪彪 江树勋 李寿崧 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第8期338-342,共5页
本研究应用PCR技术检测了12种加工食品中的牛、羊、鸡、猪等动物源性成分,在此基础上还开发了真核生物所共有的18S核糖体DNA(18SrDNA)与食品中牛、羊、鸡、猪等多种动物物种特异性基因片段之间的二重PCR检测方法,还分析了牛、羊源性成分... 本研究应用PCR技术检测了12种加工食品中的牛、羊、鸡、猪等动物源性成分,在此基础上还开发了真核生物所共有的18S核糖体DNA(18SrDNA)与食品中牛、羊、鸡、猪等多种动物物种特异性基因片段之间的二重PCR检测方法,还分析了牛、羊源性成分单PCR检测的灵敏度,以及18SrDNA与牛、羊之间的二重PCR检测方法的灵敏度。 展开更多
关键词 加工食品 动物成分 pcr检测
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食品及饲料中马属动物源性成分的PCR检测研究 被引量：35
12
作者 陈颖 吴亚君 +2 位作者 徐宝梁 马颖 董萌 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 2004年第5期78-83,共6页
采用马和驴mtDNA中特异性片段引物 ,利用聚合酶链反应技术 (polymerasechainreaction ,PCR) ,建立了饲料中马属动物源性动物成分的快速检测方法。通过内切酶HaeⅢ、Sau3A和AluⅠ可对扩增结果进行验证并能够区分马成分和驴成分。扩增产... 采用马和驴mtDNA中特异性片段引物 ,利用聚合酶链反应技术 (polymerasechainreaction ,PCR) ,建立了饲料中马属动物源性动物成分的快速检测方法。通过内切酶HaeⅢ、Sau3A和AluⅠ可对扩增结果进行验证并能够区分马成分和驴成分。扩增产物测序结果表明 :驴扩增产物序列与数据库序列完全一致 ,马样品扩增产物与数据库序列的同源性达 99%。该方法的检测低限分别为 0 5 %(w w)和 0 2 5 %(w w) 。 展开更多
关键词 食品 饲料 马属 动物源性成分 pcr检测 聚合酶链反应技术 mtDNA 肉骨粉
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扩增内标在沙门氏菌PCR检测方法中的应用 被引量：32
13
作者 刘斌 史贤明 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期156-161,共6页
在PCR反应体系中添加了一条人工构建的扩增内标片段,以指示沙门氏菌PCR快速检测中出现的假阴性。对9株沙门氏菌和15株非沙门氏菌进行PCR检测,结果显示所有沙门氏菌都能扩增到一条invA基因中的374bp特异性片段,而模板来源于非沙门氏菌时... 在PCR反应体系中添加了一条人工构建的扩增内标片段,以指示沙门氏菌PCR快速检测中出现的假阴性。对9株沙门氏菌和15株非沙门氏菌进行PCR检测,结果显示所有沙门氏菌都能扩增到一条invA基因中的374bp特异性片段,而模板来源于非沙门氏菌时则只能扩增到一条513bp扩增内标片段。灵敏度试验显示,该PCR检测体系对猪霍乱沙门氏菌纯DNA模板的检测灵敏度为12·8fg/μL,如果将增菌时间确定为8h,则该检测体系对人工染菌牛乳中沙门氏菌的检测灵敏度可以达到起始浓度为8cfu/25mL。采用上述方法检测了80份污染严重的样品,证实此方法可以有效地排除假阴性,提高检测准确率。 展开更多
关键词 扩增内标 pcr检测 沙门氏菌
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鸭疫里默氏菌的血清型及药物敏感性分析 被引量：36
14
作者 程龙飞 陈红梅 +5 位作者 施少华 傅光华 万春和 傅秋玲 黄瑜 林建生 《中国动物传染病学报》 CAS 2013年第4期23-28,共6页
为了解近期鸭疫里默氏菌的血清流行病学,明确鸭疫里默氏菌的敏感药物,本研究根据鸭疫里默氏菌的gyrB基因序列设计检测引物,建立PCR检测方法,并对收集的2006~2012年间福建省及邻近省份的疑似鸭疫里默氏菌病死亡鸭、鹅,进行细菌分离,PCR鉴... 为了解近期鸭疫里默氏菌的血清流行病学,明确鸭疫里默氏菌的敏感药物,本研究根据鸭疫里默氏菌的gyrB基因序列设计检测引物,建立PCR检测方法,并对收集的2006~2012年间福建省及邻近省份的疑似鸭疫里默氏菌病死亡鸭、鹅,进行细菌分离,PCR鉴定,凝集试验确定血清型,纸片法分析药物敏感性。该PCR法具有较好的特异性,检测敏感性可达102~103CFU/mL。分离鉴定鸭疫里默氏菌423株,分属于1、2、3、6、10、11、13、14、17型和未知型,2型、11型、1型和17型合计占所有菌株数量的86.4%。50%以上分离菌株敏感的药物有氟苯尼考、头孢拉定、头孢氨苄、阿莫西林、头孢唑啉和壮观霉素。 展开更多
关键词 鸭疫里默氏菌 pcr检测 血清型 药物敏感性
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白斑综合症病毒(WSSV)在对虾养殖过程中传播途径的调查 被引量：24
15
作者 刘萍 孔杰 +2 位作者 孟宪红 刘志鸿 李健 《海洋水产研究》 CSCD 2000年第3期9-12,共4页
为探讨人工养殖条件下池塘中对虾是如何感染暴发性流行病 ,作者通过对人工养殖对虾暴发白斑综合症的池塘进行生物调查和取样 ,经 PCR检测 ,获得了一些有意义的结果。发现 :在暴发白斑病的池塘中 ,中国对虾和日本对虾以及池中的脊尾白虾... 为探讨人工养殖条件下池塘中对虾是如何感染暴发性流行病 ,作者通过对人工养殖对虾暴发白斑综合症的池塘进行生物调查和取样 ,经 PCR检测 ,获得了一些有意义的结果。发现 :在暴发白斑病的池塘中 ,中国对虾和日本对虾以及池中的脊尾白虾均可检测到阳性 ,阳性率大小与发病的程度有关 ;蟹类未检测到阳性个体 ;鱼类和底栖的沙蚕亦未检测到阳性 ;浮游动物的糠虾类未检测到阳性 ;桡足类检测为阳性 ,说明桡足类是对虾白斑病毒中间宿主之一 。 展开更多
关键词 中国对虾 白斑综合症病毒 传播途径 pcr检测
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16SrRNA基因PCR加基因芯片杂交快速诊断新生儿败血症 被引量：26
16
作者 童美琴 尚世强 +1 位作者 吴亦栋 赵正言 《中华儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第9期663-667,i002,共6页
目的　探讨新生儿败血症的快速诊断方法。方法　 (1)以 16SrRNA基因为靶序列 ,设计引物及寡核苷酸探针 ;将探针固定在特制的玻片上制作成基因芯片 ;(2 )对临床疑为细菌感染的 2 85例新生儿抽取静脉血分别做血培养和细菌 16SrRNA基因检... 目的　探讨新生儿败血症的快速诊断方法。方法　 (1)以 16SrRNA基因为靶序列 ,设计引物及寡核苷酸探针 ;将探针固定在特制的玻片上制作成基因芯片 ;(2 )对临床疑为细菌感染的 2 85例新生儿抽取静脉血分别做血培养和细菌 16SrRNA基因检测 :于血标本及脑脊液中抽提DNA后采用聚合酶链反应 (PCR)扩增 ,将扩增产物加样在基因芯片上杂交后进行激光扫描及读片。结果(1)PCR检测阳性率 5 96 % (17/2 85 )明显高于血培养的 2 81% (8/2 85 ) ,差异有显著意义 (P <0 0 1)。若以确诊败血症作为对照 ,PCR的诊断敏感性为 10 0 % ,特异性为 96 75 % ,正确诊断指数为 0 96 8。(2 )对 17份PCR阳性标本进一步做基因芯片杂交 ,结果通用探针均阳性 ,其中G+ 探针阳性 12份、G-探针阳性 5份 ;8份PCR和血培养均阳性的标本 ,基因芯片杂交探针阳性菌株与血培养细菌阳性结果完全一致。结论　基因芯片杂交技术检测临床标本中 16SrRNA基因能快速诊断新生儿败血症 ,除较血培养等方法有更好的敏感性和特异性外 ,还能快速明确系何种病原菌感染 。 展开更多
关键词 基因芯片 血培养 新生儿败血症 阳性 16SRRNA基因 pcr检测 快速诊断方法 杂交技术 扩增产物 引物
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2011—2018年北京市通州区儿童急性呼吸道感染九种病毒性病原体监测研究 被引量：32
17
作者 李洪军 崔燕 +6 位作者 杨艳娜 黄芳 杜娟 王帅 卢庆彬 崔富强 刘芬 《中国感染控制杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期713-718,共6页
目的了解北京市通州区儿童急性呼吸道感染病毒性病原体感染情况及流行病学特征,为疾病监测和防控策略的制定提供依据。方法选取2011年1月-2018年6月首都医科大学附属北京潞河医院就诊的儿童急性呼吸道感染病例,使用多重实时荧光PCR检测... 目的了解北京市通州区儿童急性呼吸道感染病毒性病原体感染情况及流行病学特征,为疾病监测和防控策略的制定提供依据。方法选取2011年1月-2018年6月首都医科大学附属北京潞河医院就诊的儿童急性呼吸道感染病例,使用多重实时荧光PCR检测九种呼吸道病毒性病原体,分析各呼吸道病毒性病原体感染情况。结果 544例急性呼吸道感染儿童中,呼吸道病毒性病原体检测阳性者174例,阳性率为32.0%。其中鼻病毒和流感病毒的阳性率分别为9.4%和8.6%,高于其他病原体。各季节呼吸道病原体阳性率比较,差异无统计学意义;不同季节病原体构成比较,差异有统计学意义。病原体阳性患儿流涕发生率高于阴性患儿(P=0.015);急性上呼吸道感染患儿中呼吸道病原体阳性率高于肺炎患儿中的阳性率(43.9%vs 22.3%,P<0.001)。相比较肺炎,流感病毒、鼻病毒、偏肺病毒、冠状病毒和肠道病毒更易在急性上呼吸道感染中检出。结论通州区儿童急性呼吸道感染主要由鼻病毒和流感病毒两种呼吸道病原体所致,呼吸道病毒更易引起急性上呼吸道感染。 展开更多
关键词 急性呼吸道感染 儿童 病毒 病原体 pcr检测
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小麦花粉管通道及子房注射法转化Anti-TrxS基因 被引量：20
18
作者 尹钧 余桂荣 +2 位作者 任江萍 李磊 宋丽 《西北植物学报》 CAS CSCD 2004年第5期776-780,共5页
为了获得抗穗发芽转基因小麦材料,以13个小麦品种 品系 为受体材料,用花粉管通道及子房注射法进行了硫氧还蛋白反义基因 Anti-TrxS 的遗传转化.花粉管通道法共转化小花2036朵,收获T0代种子1616粒,结实率为79.4%,将T0代种子大田点播,获T... 为了获得抗穗发芽转基因小麦材料,以13个小麦品种 品系 为受体材料,用花粉管通道及子房注射法进行了硫氧还蛋白反义基因 Anti-TrxS 的遗传转化.花粉管通道法共转化小花2036朵,收获T0代种子1616粒,结实率为79.4%,将T0代种子大田点播,获T1代苗1424株,出苗率为88.1%.对T1代株系叶片基因组DNA进行PCR检测,31个株系中有16个株系呈阳性反应.子房注射法共转化小花1206朵,收获种子89粒,结实率为7.4%,T1代共出苗41株,出苗率为46.1%,对郑新991T1代株系进行PCR检测,电泳结果呈阳性反应. 展开更多
关键词 花粉管通道法 子房注射法 Anti-TrxS基因 小麦遗传转化 pcr检测
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利用花粉管通道技术培育番茄耐盐新种质 被引量：19
19
作者 陈火英 张建华 +1 位作者 庄天明 张晓宁 《西北植物学报》 CAS CSCD 2004年第1期12-16,共5页
利用自花授粉后形成的花粉管通道分别将番茄耐盐野生近缘种LycopersiconperuvianumLA111、Lycoper-siconcheesmaniiLA166、LycopersiconpennelliiLA716、LycopersiconpimpinellifoliumLA2184的总DNA及含来源于大麦LEA基因家族的HVA1基因... 利用自花授粉后形成的花粉管通道分别将番茄耐盐野生近缘种LycopersiconperuvianumLA111、Lycoper-siconcheesmaniiLA166、LycopersiconpennelliiLA716、LycopersiconpimpinellifoliumLA2184的总DNA及含来源于大麦LEA基因家族的HVA1基因的pBY520质粒DNA导入栽培番茄 鲜丰 及 矮黄 ,获得了较为广泛的变异,经过对后代的选择培育获得了一批农艺性状优良的耐盐新种质,并已培育耐盐新品系1个;传统的叶色遗传与现代的PCR检测表明番茄通过花粉管通道导入外源DNA是可行的. 展开更多
关键词 番茄 花粉管通道 野生耐盐近缘种总DNA 耐盐基因HVAl pcr检测
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用Glu-B3、Gli-B1和SEC-1b复合引物PCR检测普通小麦1BL/1RS易位系 被引量：23
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作者 张立平 何中虎 +4 位作者 陆美琴 庞斌双 张学勇 夏兰琴 Frank Ellison 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2003年第12期1566-1570,共5页
利用低分子量 (LMW )麦谷蛋白Glu B3的STS PCR标记、醇溶蛋白Gli B1的SSR标记和黑麦碱SEC 1b的STS PCR标记的复合PCR ,对 10个普通小麦品种、中优 950 7/CA963 2的 91个DH系和 2 8个F2 个体植株 ,进行了1BL/1RS易位系的检测。结果表明 ... 利用低分子量 (LMW )麦谷蛋白Glu B3的STS PCR标记、醇溶蛋白Gli B1的SSR标记和黑麦碱SEC 1b的STS PCR标记的复合PCR ,对 10个普通小麦品种、中优 950 7/CA963 2的 91个DH系和 2 8个F2 个体植株 ,进行了1BL/1RS易位系的检测。结果表明 ,中优 950 7/CA963 2的 3 9个DH系和CA963 2、晋麦 45、兰考 2 4、烟农 18、京冬 8等5个品种缺失 2个小麦贮藏蛋白位点的PCR产物 ,而拥有黑麦碱的PCR产物。利用PAGE和ELISA方法 ,对上述品种 (系 )进行了黑麦碱 (secalin)蛋白的检测 ,发现这些品种 (系 )均包含secalin ,与分子标记的检测结果吻合 ,是 1BL/1RS易位系。对 2 8个F2 单株的检测表明 ,该复合标记可以检测出早代 展开更多
关键词 Glu-B3 Gli-B1 SEC-1b复合引物 pcr检测 小麦 1BL/1RS易位系 低分子量
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