基因芯片对人乳头瘤病毒的快速检测和分型 被引量：50

1

作者 黄庆 府伟灵 +3 位作者 周玉 张雪 黄君富 陈斌 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期476-478,共3页

目的　针对HPV DNA亚型的异质性,建立HPV DNA亚型的基因芯片快速检测方法,为HPV感染病例提供诊断依据。方法　18 种HPV DNA亚型(HPV6、16、18、31、33、35、39、11、45、51、52、53、56、58、42、59、66、68)特异性探针,固定于硝酸纤维... 目的　针对HPV DNA亚型的异质性,建立HPV DNA亚型的基因芯片快速检测方法,为HPV感染病例提供诊断依据。方法　18 种HPV DNA亚型(HPV6、16、18、31、33、35、39、11、45、51、52、53、56、58、42、59、66、68)特异性探针,固定于硝酸纤维素膜制备成基因芯片,生物素标记引物经通用引物介导PCR(GD PCR)扩增HPV DNA, PCR产物与基因芯片经反向点杂交检测HPV亚型;同时采用荧光定量PCR检测HPV6、11、16 和18亚型。结果　31 例标本中,基因芯片的阳性检出率为74.2%,其中HPV6/18、HPV11/16、HPV33/58 和HPV6/11/33多重感染各1 例(3.2%);荧光定量PCR 阳性检出率为67.7%,与前种方法相比较,漏诊率为6.5%。结论　HPV分型基因芯片可1次检测HPV多种亚型,灵敏度高和特异性强,有利于对HPV多重感染的诊断。 展开更多

关键词 HPV 基因芯片 GD-pcr 反向点杂交

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贵州从江侗族和江口土家族人群β-地中海贫血基因突变型的研究 被引量：16

2

作者 单可人 谢渊 +7 位作者 马娇 赵艳 齐晓岚 何燕 吴昌学 李毅 官志忠 任锡麟 《中国地方病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期526-529,共4页

目的了解β-地中海贫血在贵州从江县侗族、江口县土家族中的基因类型特点、基因型频率及分布规律。方法采用抗碱血红蛋白(HbF)和血红蛋白A2(HbA2)定量测定对人群进行β-地中海贫血初筛,同时应用全自动血细胞分析仪进行RBC、Hb、HCT、MCV... 目的了解β-地中海贫血在贵州从江县侗族、江口县土家族中的基因类型特点、基因型频率及分布规律。方法采用抗碱血红蛋白(HbF)和血红蛋白A2(HbA2)定量测定对人群进行β-地中海贫血初筛,同时应用全自动血细胞分析仪进行RBC、Hb、HCT、MCV、MCH、MCHC、RDW等7项血液学指标分析,用常规酚-氯仿抽提法提取筛查阳性受检者DNA,经PCR-反向点杂交法对β珠蛋白基因进行突变分析。结果受检982人中,共检出52例β-地中海贫血携带者,总检出率为5.27%,其中侗族、土家族检出率分别为7.85%、2.68%;经β珠蛋白突变基因分析,在这两个民族中检出中国人常见3种突变类型:CD17(A→T)无义突变(39例,75.00%),CD41-42(TCTT)移码突变(12例,23.07%)和βE(Codon26)(1例,1.92%)。结论在贵州省少数民族中β-地中海贫血有很高的发病率,基因突变类型具有显著的民族特征,β珠蛋白基因变异情况很独特,可能与族内婚配、家族发病聚集性和通婚地域半径狭小有关。 展开更多

关键词 Β-地中海贫血 少数民族 pcr-反向点杂交

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海口地区4037例健康体检女性HPV亚型感染的研究 被引量：11

3

作者 何金龙 黄丽珍 +1 位作者 夏威夷 覃西 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期918-923,共6页

目的探讨海口地区女性宫颈上皮23种人乳头瘤病毒（human papillomavirus, HPV）的亚型感染情况，及其与年龄、细胞学结果的关系。方法以2013年7月至2016年8月我院体检中心的4 037例当地女性体检者为研究对象（其中1 967例有宫颈细胞学... 目的探讨海口地区女性宫颈上皮23种人乳头瘤病毒（human papillomavirus, HPV）的亚型感染情况，及其与年龄、细胞学结果的关系。方法以2013年7月至2016年8月我院体检中心的4 037例当地女性体检者为研究对象（其中1 967例有宫颈细胞学诊断结果），采用PCR-反向点杂交法对其宫颈脱落细胞进行HPV分型检测。结果（1）4 037例样本的HPV总阳性率为22.15%（894例），致癌型、可能致癌型及非致癌型HPV的检出率分别为16.13%、3.99%及5.55%（分别为651、161及224例），阳性率最高的6种基因型依次是HPV52、53、81、51、16及58。（2）致癌型、可能致癌型HPV及部分基因型（HPV18、52、53、66）的检出率均随年龄增长有增高趋势（均P〈0.05）。（3） HPV阳性者中多重感染占24.38%（218/894），其中单纯致癌型的多重感染率随年龄增长呈下降趋势，致癌型HPV的感染型别数与年龄负相关（均P〈0.05）。（4）细胞学阳性（≥ASC-US）者仅占2.49%（49/1967），8种致癌型与2种可能致癌型HPV在≥ASC-US组中的检出率明显高于阴性（NILM）组（均P〈0.05）。结论海口女性HPV感染率较高，感染高峰出现在高龄组；亚型感染有一定的地域特点，感染类型以单一感染为主；人群宫颈癌筛查应联合HPV与细胞学检查以提高有效性。 展开更多

关键词 人乳头瘤病毒 pcr.反向点杂交法 基因分型 多重感染 液基细胞学

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地中海贫血合并G6PD缺陷患者的血液学特点及G6PD活性的研究 被引量：10

4

作者 王霞 江帆 +6 位作者 何聚莲 唐盈 唐林国 陈跃琼 屈艳霞 卢航 林佩萱 《中国优生与遗传杂志》 2013年第2期24-26,共3页

目的分析广东地区地中海贫血(地贫)合并G6PD缺陷症的检出率,明确地贫合并G6PD缺陷症的G6PD活性及血液学改变特点。方法用GAP-PCR法检测α-THAL基因;反向斑点杂交(RDB)法检测β-THAL基因来验证用HPLC法发现的各种地贫;用G6PD活性定量检测... 目的分析广东地区地中海贫血(地贫)合并G6PD缺陷症的检出率,明确地贫合并G6PD缺陷症的G6PD活性及血液学改变特点。方法用GAP-PCR法检测α-THAL基因;反向斑点杂交(RDB)法检测β-THAL基因来验证用HPLC法发现的各种地贫;用G6PD活性定量检测(速率法)来检测G6PD缺陷症,用血常规进行血液学分析。结果(1)566例地贫患者中检测出G6PD缺陷症者46例(8.13%)(2)地贫合并G6PD缺陷症患者红细胞的平均红细胞体积(MCV)和平均红细胞血红蛋白含量(MCH)明显高于同型未合并G6PD缺陷地贫患者;(3)女性地贫合并G6PD缺陷症患者其G6PD活性明显高于单纯G6PD缺陷症患者,男性地贫合并G6PD缺陷症患者其G6PD活性与单纯G6PD缺陷症患者相比无统计学意义。结论在广东地区地贫合并G6PD缺陷症发病率高,各型地贫合并G6PD缺陷症的血液学结果与单纯地贫者有显著性差别,对于女性地贫者G6PD活性在临界范围应做基因检测或家系分析,以防漏检。 展开更多

关键词 地中海贫血 G6PD缺陷症 GAP-pcr 反向斑点杂交技术

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PCR-反向点杂交法在外阴阴道念珠菌病诊断及白念珠菌耐药基因突变检测中的应用 被引量：8

5

作者 刘秀卿 王革非 +1 位作者 李卓成 黄磊 《临床检验杂志》 CAS CSCD 2017年第7期495-498,共4页

目的评价PCR-反向点杂交法用于念珠菌菌种鉴定及白念珠菌耐药基因突变检测的应用价值。方法收集念珠菌性阴道炎患者及体检健康妇女分泌物各285份和50份。用生物梅里埃酵母菌鉴定卡进行菌种鉴定,用最低抑菌浓度(MIC)法(郑州安图真菌快速... 目的评价PCR-反向点杂交法用于念珠菌菌种鉴定及白念珠菌耐药基因突变检测的应用价值。方法收集念珠菌性阴道炎患者及体检健康妇女分泌物各285份和50份。用生物梅里埃酵母菌鉴定卡进行菌种鉴定,用最低抑菌浓度(MIC)法(郑州安图真菌快速培养鉴定药敏试剂)进行药敏试验;采用PCR-反向点杂交法(深圳亚能念珠菌菌种鉴定及白念珠菌耐药基因突变检测试剂)进行菌种鉴定和耐药基因突变检测;采用PCR及测序方法进行耐药基因的检测。分别以培养鉴定法、MIC法、核酸序列测定法为对比方法,评价PCR-反向点杂交法念珠菌菌种鉴定及白念珠菌耐药基因突变检测的敏感性、特异性及准确性。结果与培养鉴定法相比,PCR-反向点杂交法检测6种念珠菌菌种的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值和总符合率分别为95%、96%、96%、98%、97%以上,2种方法检测6种念珠菌(白念珠菌、光滑念珠菌、热带念珠菌、近平滑念珠菌、克柔念珠菌和季也蒙念珠菌)结果的差异无统计学意义(χ~2值分别为0.44、0、0、0、0和0,P均>0.05),一致性较好(Kappa均>0.9)。与MIC法相比,PCR-反向点杂交法检测白念珠菌耐药的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值和总符合率分别为98%、88%、98%、88%和96%,2种方法检测结果的差异无统计学意义(χ~2=0.17,P>0.05),一致性较好(Kappa>0.8)。PCR-反向点杂交法与核酸序列测定法相比,对6种白念珠菌耐药基因突变位点的检测结果完全一致。结论PCR-反向点杂交法在念珠菌菌种鉴定及白念珠菌耐药基因突变检测上与培养鉴定法以及核酸序列测定法的一致性高,比传统检测方法更早期更快速,可应用于外阴阴道念珠菌病(VVC)的辅助诊断。 展开更多

关键词 外阴阴道念珠菌病 白念珠菌 pcr-反向点杂交法 ERG11点突变

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膜-反向斑点杂交技术检测肺结核患者肺组织和肺泡灌洗液中的结核杆菌 被引量：7

6

作者 蒋莎莉 朱德茂 +3 位作者 周华山 罗海军 王志敢 李锋 《中国医药导报》 CAS 2013年第31期14-17,共4页

目的探讨膜-反向斑点杂交技术(RDB)在病理石蜡组织和肺泡灌洗液检测结核杆菌的临床应用价值。方法以97例病理石蜡组织、97例肺泡灌洗液为研究对象,分别以膜-反向斑点杂交、实时荧光PCR(RT-PCR)、抗酸染色三种方法检测结核杆菌,对三种方... 目的探讨膜-反向斑点杂交技术(RDB)在病理石蜡组织和肺泡灌洗液检测结核杆菌的临床应用价值。方法以97例病理石蜡组织、97例肺泡灌洗液为研究对象,分别以膜-反向斑点杂交、实时荧光PCR(RT-PCR)、抗酸染色三种方法检测结核杆菌,对三种方法进行方法学评价。结果结核组病理石蜡组织、肺泡灌洗液三种方法检测的总阳性率分别为:抗酸染色为32.8%,RT-PCR阳性率为82.8%,RDB阳性率为89.9%,两两比较差异均有统计学意义(均P<0.05),对照组三种方法检测结果均为阴性;三种结核杆菌的检测方法的方法学评价,RDB灵敏度(90.6%)、约登指数(0.91)、符合率(93.9%)、阴性预测值(85.0%)均较好。结论膜-反向斑点杂交技术在病理石蜡组织和肺泡灌洗液结核杆菌的检测上有很高的临床应用价值,值得临床推广应用。 展开更多

关键词 膜-反向斑点杂交 实时荧光pcr 抗酸染色 结核杆菌 病理石蜡组织 肺泡灌洗液

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陕西延安地区妇女人乳头瘤病毒基因分型检测及人群分布特征 被引量：7

7

作者 张晓艳 曹云 +3 位作者 薛乐 张燊璐 常正江 辛田田 《检验医学与临床》 CAS 2016年第5期641-643,共3页

目的探讨延安地区妇女感染人乳头瘤病毒的人群分布特征,为宫颈癌的早期预防和全国的流行病学调查提供理论参考。方法采用PCR-反向点杂交法对4 733例门诊、住院、体检妇女宫颈组织进行HPV基因检测及分型。结果 4 733例筛查样本中,HPV阳... 目的探讨延安地区妇女感染人乳头瘤病毒的人群分布特征,为宫颈癌的早期预防和全国的流行病学调查提供理论参考。方法采用PCR-反向点杂交法对4 733例门诊、住院、体检妇女宫颈组织进行HPV基因检测及分型。结果 4 733例筛查样本中,HPV阳性标本856例(18.09%)。排在前五位的HPV型别分别是HPV-16(3.8%)、HPV-58(2.3%)、HPV-52(2.0%)、HPV-53(1.5%)、HPV-51(1.2%)。各年龄组主要感染亚型是HPV-16,20岁及以下组以HPV-52为主。阳性标本中以单一亚型感染(82.47%)和40岁以上年龄组为主(42.86%)。结论延安地区总体以高危型HPV-16感染为主,HPV感染率和高危亚型感染率随年龄增加呈现增高趋势。40岁以上妇女为HPV高危型易感人群。 展开更多

关键词 人乳头瘤病毒 基因分型 宫颈癌 人群分布 反向斑点杂交

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HPV-DNA分型联合宫颈脱落细胞类型检测在宫颈癌早期诊断中的价值 被引量：7

8

作者 曹立萍 《贵阳医学院学报》 CAS 2015年第12期1406-1408,共3页

目的:探讨人乳头瘤病毒(HPV)-DNA分型联合宫颈脱落细胞类型检测在宫颈癌早期诊断中的价值。方法:350例宫颈病变患者,应用PCR反向点杂交法和液基薄层细胞检测(TCT)检测其宫颈分泌物HPVDNA类型及宫颈脱落细胞类型,以子宫颈组织的病理学检... 目的:探讨人乳头瘤病毒(HPV)-DNA分型联合宫颈脱落细胞类型检测在宫颈癌早期诊断中的价值。方法:350例宫颈病变患者,应用PCR反向点杂交法和液基薄层细胞检测(TCT)检测其宫颈分泌物HPVDNA类型及宫颈脱落细胞类型,以子宫颈组织的病理学检查结果为依据,比较单纯HPV-DNA分型检测、单纯TCT检测、HPV-DNA联合TCT检测在子宫颈癌早期诊断中的阳性率、灵敏度、特异度及准确性。结果:HPVDNA分型、TCT检测及阴道镜组织病理活检阳性率分别为32.3%、29.7%及20.6%,HPV-DNA分型和TCT检测均出现假阳性;以病理学检查结果为判断依据,HPV-DNA联合TCT检测对子宫颈癌诊断的阳性率及特异度,与单纯HPV-DNA或TCT检测比较,差异无统计学意义(P>0.05);但HPV-DNA联合TCT检测对子宫颈癌诊断的灵敏度高于单纯HPV-DNA或TCT检测(P<0.05),准确度虽升高,但仅与TCT检测差异有统计学意义(P<0.05)。结论:HPV-DNA联合TCT检测可显著提高宫颈癌早期诊断的灵敏度和准确性,对诊断特异度无影响。 展开更多

关键词 反向点杂交法 宫颈癌 人乳头瘤病毒 诊断 早期 DNA分型

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重庆43例临床非结核分枝杆菌鉴定及药敏试验 被引量：6

9

作者 张汇征 熊敏 +7 位作者 陈耀凯 严晓峰 李桓 李同心 李俊刚 王静 张珍 罗明 《中国预防医学杂志》 CAS CSCD 2019年第5期375-378,共4页

目的分析重庆市非结核分枝杆菌(NTM)菌种分布及耐药情况。方法选取2016年7月至2017年12月在重庆市公共卫生医疗救治中心经分枝杆菌菌种鉴定(PCR-反向点杂交法)鉴定为NTM的病例,分析其菌种鉴定及药敏试验结果。结果 43例NTM中,脓肿分枝杆... 目的分析重庆市非结核分枝杆菌(NTM)菌种分布及耐药情况。方法选取2016年7月至2017年12月在重庆市公共卫生医疗救治中心经分枝杆菌菌种鉴定(PCR-反向点杂交法)鉴定为NTM的病例,分析其菌种鉴定及药敏试验结果。结果 43例NTM中,脓肿分枝杆菌17例(39.53%),胞内分枝杆菌15例(34.88%),猪/偶然分枝杆菌7例(16.28%),鸟分枝杆菌3例(6.98%),堪萨斯分枝杆菌1例(2.33%)。脓肿分枝杆菌对利福平、异烟肼、链霉素和乙胺丁醇、卷曲霉素、力克肺疾、对氨基水杨酸、丙硫异烟胺和利福布丁耐药;胞内分枝杆菌对异烟肼和利福布丁耐药;堪萨斯分枝杆菌对链霉素、异烟肼、阿米卡星、力克肺疾和对氨基水杨酸耐药;鸟分枝杆菌对异烟肼、阿米卡星、卷曲霉素、力克肺疾、莫西沙星和对氨基水杨酸耐药;偶发/猪分枝杆菌对任一药物均未表现为全耐药。脓肿分枝杆菌的耐药情况最为严重,15种药物中,仅有克拉霉素(23.53%)和利奈唑胺(47.06%)的耐药率低于50.00%。一线药物中,INH是耐药率最高的药物,所有NTM菌株都对其耐药。二线药物中,PI和PAS的耐药株最多,脓肿分枝杆菌、堪萨斯分枝杆菌和鸟分枝杆菌对这两种药物全部耐药。克拉霉素是最为敏感的药物,仅偶发/猪分枝杆菌(57.14%)和鸟分枝杆菌(33.33%)的耐药率较高,其他NTM的耐药率均低于30.00%。结论重庆市NTM临床分离株以脓肿分枝杆菌和胞内分枝杆菌为主,且对大多数抗结核药物耐药。 展开更多

关键词 非结核分枝杆菌 菌种鉴定 pcr-反向点杂交法 药物敏感性

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唐山地区EBV及HPV感染与口咽鳞癌预后相关性分析 被引量：6

10

作者 吴蒙 孙玉满 +1 位作者 刘宏侠 杨俊泉 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 北大核心 2015年第18期1422-1427,共6页

目的检测唐山地区口咽鳞癌(oropharyngeal squamous cell carcinoma,OPC)组织中EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)和人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)感染情况及其对疾病预后判断的价值。方法选取2003-01-01-2010-12-31唐山市协和... 目的检测唐山地区口咽鳞癌(oropharyngeal squamous cell carcinoma,OPC)组织中EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)和人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)感染情况及其对疾病预后判断的价值。方法选取2003-01-01-2010-12-31唐山市协和医院明确诊断的OPC手术切除标本98例,分别采用原位杂交及PCR-反向点杂交方法检测蜡块组织中EB病毒编码的小RNA(EBV-encoded small RNA,EBER)及HPV感染情况,同时对所有患者进行电话随访。应用SPSS 18.0进行统计分析,Kaplan-Meier模型分析中位生存期,Log-rank检验比较生存曲线,Cox回归模型进行多因素分析。结果 98例OPC组织中29.6%(29/98)检测出HPV感染,4.1%(4/98)检测出EBER阳性;HPV感染与口咽癌患者的性别、年龄、饮酒状态、肿瘤部位、临床分期及分级均无明显相关性;HPV阳性病例以非吸烟者居多,明显高于吸烟者,P<0.001。Kaplan-Meier生存曲线显示,随访>30个月OPC患者中Ⅰ和Ⅱ期中位生存期为29个月,明显高于Ⅲ和Ⅳ期19个月,χ2=36.602,P<0.001;HPV阳性患者的中位生存期为35个月,高于HPV阴性患者23个月,χ2=34.413,P<0.001;病理分级为高、中分化患者的中位生存期分别为39和27个月,明显高于低分化的患者19个月,P<0.001。EBER表达与患者的各临床特征均无明显相关性;EBER阳性的OPC患者总体生存率与阴性患者比较差异无统计学意义,P=0.200。结论唐山地区OPC组织中存在一定程度的HPV及EBV感染情况,HPV阳性、临床分期早及分化程度高的OPC患者具有较好的预后。EBV感染对OPC患者的预后并无明显的判断价值。 展开更多

关键词 口咽肿瘤 鳞状细胞癌 人乳头瘤病毒 EB病毒 原位杂交 pcr-反向点杂交

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PCR-反向斑点杂交膜芯片技术在遗传性非综合征耳聋患儿基因检测中的应用 被引量：5

11

作者 叶敏南 李文瑞 +3 位作者 彭琪 黎四平 彭陆衡 陆小梅 《中华实用儿科临床杂志》 CSCD 北大核心 2018年第23期1811-1814,共4页

目的探讨PCR-反向斑点杂交(PCR—RDB)膜芯片技术在遗传性非综合征耳聋患儿基因诊断中的应用价值。方法收集东莞市康复学校38例排除耳聋高危因素的先天性耳聋患儿的外周血2mL,提取基因组DNA,采用自行研究设计的多重PCR扩增结合RDB膜芯片... 目的探讨PCR-反向斑点杂交(PCR—RDB)膜芯片技术在遗传性非综合征耳聋患儿基因诊断中的应用价值。方法收集东莞市康复学校38例排除耳聋高危因素的先天性耳聋患儿的外周血2mL,提取基因组DNA,采用自行研究设计的多重PCR扩增结合RDB膜芯片技术针对中国人群4个常见耳聋致病基因20个热点突变进行检测。以Sanger测序技术作为金标准对阳性样本进行验证。结果38例耳聋患儿中,共有16例患儿检出耳聋基因突变,检出率为42.11%,耳聋基因突变的患儿均行家系验证。16例耳聋患儿基因突变中GJB2基因突变6例,检出率为15.79%,其中纯合子3例、杂合子3例;SLC26A4基因突变4例,均为杂合子,检出率为10.53%;MTRNR基因m.1555A>G突变位点2例,检出率为5.26%;复合突变4例,检出率10.53%;未检出GJB3基因突变。16例耳聋基因突变患儿DNA样本经Sanger测序法验证,结果符合率为100%。结论应用针对4个常见耳聋致病基因20个热点突变设计的PCR-RDB膜芯片技术检测先天性耳聋患儿易感基因具有检出率高、快速、准确、经济等特点,是遗传性非综合征耳聋患儿基因筛查的理想方法,具有较好的临床应用前景。 展开更多

关键词 遗传性非综合征耳聋 pcr-反向斑点杂交 膜芯片 基因突变

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应用反向斑点杂交技术进行脐血HLA-DRB基因分型方法的建立 被引量：4

12

作者 黄以宁 廖灿 +3 位作者 汤雪薇 李焱 谢杏梅 曾瑞萍 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2002年第2期148-152,共5页

HLA分子的多态性对于移植有十分重要的意义。常用的HLA基因分型方法中SSOP基因分型方法有较高分辨率 ,但操作过程复杂 ,仅适于大样本的HLA分型。PCR SSP基因分型方法分辨率较低 ,但操作过程简单 ,适于临床要求。有必要建立一种简便、快... HLA分子的多态性对于移植有十分重要的意义。常用的HLA基因分型方法中SSOP基因分型方法有较高分辨率 ,但操作过程复杂 ,仅适于大样本的HLA分型。PCR SSP基因分型方法分辨率较低 ,但操作过程简单 ,适于临床要求。有必要建立一种简便、快速、价廉、高分辨率的基因分型方法。本研究取 6 3份已知HLA DRB型的脐血标本 ,经盐酸胍方法提取DNA用于反向斑点杂交 (RDB)基因分型 ,同时采用SSOP和PCR SSP方法进行比较。结果表明 ,所有样本用RDB方法基因分型均获得成功 ,可准确地分辨 6 0个HLA DRB等位基因 ,且结果与用SSOP和PCR SSP方法的结果完全一致。结论提示 ,RDB方法可准确地分辨HLA DRB等位基因 ,分辨率高 ,操作简单 。 展开更多

关键词 反向斑点杂交技术 HLA-DRB基因分型 脐血 特异性序列引物pcr 序列特异性寡核苷酸探针 白细胞抗原

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抗酸染色法、PCR-反向点杂交法和PCR-荧光探针法在结核分枝杆菌诊断中的研究

13

作者 李玉玉 陈文 +2 位作者 王凤华 代金龙 刘月姣 《现代生物医学进展》 CAS 2024年第23期4439-4443,4544,共6页

目的:比较抗酸染色法、PCR-反向点杂交法和PCR-荧光探针法在诊断结核分枝杆菌感染中的价值。方法:选取解放军总医院第八医学中心2024年1月-2024年4月80例疑似结核的样本,其中包括疑似肺结核及疑似肺外结核。80例样本在制成石蜡样本后同... 目的:比较抗酸染色法、PCR-反向点杂交法和PCR-荧光探针法在诊断结核分枝杆菌感染中的价值。方法:选取解放军总医院第八医学中心2024年1月-2024年4月80例疑似结核的样本,其中包括疑似肺结核及疑似肺外结核。80例样本在制成石蜡样本后同时采用抗酸染色法、PCR-反向点杂交法和PCR-荧光探针法进行结核分枝杆菌的检测。结果:PCR-反向点杂交法检出率63.6%,PCR-荧光探针法检出率59.1%,抗酸染色检出率25.0%,PCR-反向点杂交法和PCR-荧光探针法检出率均高于抗酸染色法,且P<0.05;PCR-反向点杂交法和PCR-荧光探针法的阳性检出率基本一致。抗酸染色法具备检测成本低,实验时间短的特点,但仅仅根据形态学无法明确判断是否为结核分枝杆菌感染;PCR-反向点杂交法检测成本高于抗酸染色法,实验时间长于抗酸染色法和PCR-荧光探针法;PCR-荧光探针法检测成本适中,但相较于PCR-反向点杂交法检测时间更短。结论:PCR-荧光探针法检出率高,操作快速,简单,费用适中,对于样本量较多的医院具有良好的临床应用价值。 展开更多

关键词 结核分枝杆菌 抗酸染色 pcr-反向点杂交 pcr-荧光探针 聚合酶链反应

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深圳地区女性生殖道HPV感染及基因型结果分析 被引量：5

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作者 麦光兴 严泽浩 +3 位作者 熊礼宽 肖克林 罗茗月 夏勇 《国际检验医学杂志》 CAS 2014年第14期1878-1879,共2页

目的：研究深圳市宝安区女性人乳头瘤病毒（HPV）感染情况，以及不同年龄段 HPV 阳性率和各亚型的分布情况。方法采用聚合酶链式反应-反向斑点杂交法（PCR-RDB）对2011年1月至2012年12月在深圳市宝安区妇幼保健院就诊的患者（2627例）进... 目的：研究深圳市宝安区女性人乳头瘤病毒（HPV）感染情况，以及不同年龄段 HPV 阳性率和各亚型的分布情况。方法采用聚合酶链式反应-反向斑点杂交法（PCR-RDB）对2011年1月至2012年12月在深圳市宝安区妇幼保健院就诊的患者（2627例）进行23种 HPV 基因分型检测。结果2627例样本中 HPV 阳性率为23．94％（629例）。其中单一低危型感染占15．10％，以 HPV43型为主；单一高危型感染占55．17％，以 HPV52、HPV16、HPV58型为主；混合感染占29．73％。15～＜21岁、21～＜31岁、31～＜41岁、41～50岁与＞50岁年龄组 HPV 感染率分别为50．0％、24．7％、20．8％、25．8％、42．1％，差异有统计学意义（P ＜0．05）。结论深圳市宝安地区 HPV 感染率为23．94％，基因型分布以 HPV 52、16、58、43型为主，15～20岁年龄段感染率高于其他年龄段。 展开更多

关键词 人乳头瘤病毒 基因分型 聚合酶链式反应 反向斑点杂交

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应用PCR-反向斑点杂交技术快速检测结核分枝杆菌耐链霉素基因型 被引量：4

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作者 梁建琴 吴雪琼 +2 位作者 曹立雪 张俊仙 李洪敏 《中国医师杂志》 CAS 2004年第9期1170-1172,共3页

目的　应用膜反向斑点杂交技术快速检测结核分枝杆菌对链霉素 (SM)的耐药性。方法　设计与合成用于检测结核分枝杆菌耐SM基因rpsL和rrs的寡核苷酸探针 ,点于硝酸纤维素膜上 ,与结核分枝杆菌分离株生物素标记的聚合酶链反应(PCR)产物进... 目的　应用膜反向斑点杂交技术快速检测结核分枝杆菌对链霉素 (SM)的耐药性。方法　设计与合成用于检测结核分枝杆菌耐SM基因rpsL和rrs的寡核苷酸探针 ,点于硝酸纤维素膜上 ,与结核分枝杆菌分离株生物素标记的聚合酶链反应(PCR)产物进行反向斑点杂交 ,并与PCR -单链构象多态性 (PCR -SSCP)和PCR -直接测序 (PCR -DS)结果比较。结果　 5 3株结核分枝杆菌临床分离株中 ,三种检测方法符合率为 10 0 %。 9株敏感株rpsL和rrs基因的SSCP图谱、膜杂交结果与标准株完全相同 ;44株耐SM菌株中 ,3 3株存在rpsL基因 43位密码子AAG→AGG突变 ,6株有rrs基因 5 13位A→C突变 ,1株有rrs基因 5 13位A→T突变 ,突变检出率为 90 .9%,40株耐SM菌株和 9株敏感株可用膜杂交方法检测出来 ,与传统药敏试验方法检测符合率为 49/5 3。结论　应用膜反向斑点杂交技术检测结核分枝杆菌耐SM基因型灵敏度高、特异性好、简便、快速 。 展开更多

关键词 pcr-反向斑点杂交 快速检测 结核分枝杆菌 链霉素 基因型 耐药性 基因变异

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人乳头瘤病毒感染基因亚型分析 被引量：5

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作者 朱岩 谢建生 +3 位作者 徐湘民 蔡筠 李晴 龙峰 《罕少疾病杂志》 2006年第5期4-7,共4页

目的分析HPV各基因亚型感染情况,探讨HPV亚型感染与宫颈病变的关系。方法应用美国Digene公司杂交捕获法(Hybrid Capture Ⅱ,HC Ⅱ)对我院宫颈疾病专科门诊病例进行高危型HPV筛查,从中随机抽取213例阳性标本应用PCR结合反向寡核苷酸探针... 目的分析HPV各基因亚型感染情况,探讨HPV亚型感染与宫颈病变的关系。方法应用美国Digene公司杂交捕获法(Hybrid Capture Ⅱ,HC Ⅱ)对我院宫颈疾病专科门诊病例进行高危型HPV筛查,从中随机抽取213例阳性标本应用PCR结合反向寡核苷酸探针斑点杂交技术(reverse dot blot,RDB)进行HPV基因亚型分析。结果213例HCⅡ法检测为高危型HPV阳性的标本中被PCR/RDB法检测出具体HPV高危型别的有195例。共检测出17种HPV型别(包括高危型13种和低危型4种)。具体HPV亚型检出率分别是16型(32.3%)、52型(23.1%)、58型(18.0%)、31型(11.8%)、68型(10.3%)、33型(9.7%)、53型(8.2%)、18型(8.2%)、66型(6.2%)、CP8304型(4.6%)、6型(3.6%)、59型(3.1%)、45型(2.1%)、39型(2.1%)、11型(2.1%)、56型(1.5%)、51型(1.0%)。单一HPV亚型感染及2种、3种和4种HPV亚型混合感染检出率分别为59.5%、30.8%、8.6%和1.1%。结论高危型HPV感染检出率最高的HPV亚型为HPV16型(32.3%),其次为HPV52型(23.1%),检出率最低的两种亚型分别是HPV56型(1.5%)和HPV51型(1.0%)。HPV58型这种世界范围内少见的一种高危型HPV在中国高危型HPV感染的患者中检出率(18.0%)却并不低。单一高危型HPV亚型感染是引起宫颈病变的主要原因,而多种HPV亚型混合感染在宫颈病变中的作用也不可忽视。 展开更多

关键词 乳头瘤病毒 基因分型 多聚酶链式反应 反向斑点杂交

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结核分枝杆菌和非结核分枝杆菌3种鉴定方法的比较 被引量：4

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作者 张汇征 付宗强 +7 位作者 曾婉婷 王晓英 廖传玉 李俊刚 王静 李同心 李桓 罗明 《医学动物防制》 2020年第1期100-102,共3页

目的评估MPB64免疫胶体金法、PNB试验和Xpert MTB/RIF在结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)和非结核分枝杆菌(non-tuberculous mycobacterium,NTM)鉴定中的应用价值。方法收集2017年5~11月在重庆市公共卫生医疗救治中心就诊... 目的评估MPB64免疫胶体金法、PNB试验和Xpert MTB/RIF在结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)和非结核分枝杆菌(non-tuberculous mycobacterium,NTM)鉴定中的应用价值。方法收集2017年5~11月在重庆市公共卫生医疗救治中心就诊经分枝杆菌菌种鉴定(PCR-反向点杂交法)诊断的肺结核或疑似肺结核病人BACTEC MGIT960培养阳性标本178份,分别用MPB64胶体金法、PNB试验和Xpert MTB/RIF鉴定MTB和NTM,以PCR-反向点杂交法的鉴定结果为金标准,比较3种方法的敏感度和特异度。结果 PCR-反向点杂交法鉴定结果为154株MTB,6株MTB与NTM混合感染,18株NTM。PNB试验、Xpert MTB/RIF试验、胶体金试验鉴定MTB的敏感度分别为96. 1%、100. 0%、96. 7%,3种方法的敏感度差异有统计学意义(P <0. 05);PNB试验、Xpert MTB/RIF试验、胶体金试验鉴定MTB的特异度分别为88. 8%、100. 0%、100. 0%,检测结果特异度之间差异无统计学意义(P> 0. 05)。结论 3种方法均可用于MTB和NTM的鉴定,Xpert MTB/RIF和胶体金MPB64更适用于MTB的快速初步鉴定。 展开更多

关键词 结核分枝杆菌 非结核分枝杆菌 免疫胶体金 Xpert MTB/RIF pcr-反向点杂交法

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牡丹江地区女性宫颈感染人乳头瘤病毒基因分型研究 被引量：4

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作者 丁陈静 王慧智 +3 位作者 黄丽晓 周方圆 杨宝丽 宋洁 《牡丹江医学院学报》 2017年第1期31-34,共4页

目的明确牡丹江地区女性宫颈感染人乳头瘤病毒(Human Papillomavirus,HPV)基因型的分布特征。方法应用PCR-反向点杂交法(PCR-RDH)对牡丹江地区642例女性宫颈上皮细胞标本进行23种HPV基因型的分型检测。结果642例中共检出21种HPV基因型(H... 目的明确牡丹江地区女性宫颈感染人乳头瘤病毒(Human Papillomavirus,HPV)基因型的分布特征。方法应用PCR-反向点杂交法(PCR-RDH)对牡丹江地区642例女性宫颈上皮细胞标本进行23种HPV基因型的分型检测。结果642例中共检出21种HPV基因型(HPV73、82型未检出),HPV感染阳性者226例,总感染率为35.20%;高危型HPV感染126例,阳性率为19.63%,排列前四位的高危基因型依次为HPV16、52、58、51型,低危型感染23例,阳性率为3.58%,以HPV6、43型为主,混合型感染77例,阳性率为11.99%;感染类型以单一HPV基因型感染为主,阳性率为23.20%,占65.93%,其中二重HPV感染阳性率为6.86%,占19.47%,三重及以上混合HPV感染阳性率为5.14%,占14.60%;≤20岁、21~30岁、31~40岁、41~50岁、51~60岁和>60岁6个年龄组中HPV感染阳性率分别为28.57%、40.91%、39.62%、32.14%、32.26%和23.81%。结论 HPV16、52、58、51型是牡丹江地区女性宫颈感染HPV的主要高危基因型,HPV感染率以21~30、31~40岁组中最高,分别为40.91%、39.62%。 展开更多

关键词 人乳头瘤病毒 pcr-反向点杂交 HPV基因分型 宫颈癌

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广州市5892例女性人乳头瘤病毒感染和基因分型特点分析

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作者 黄演婷 陈小明 +2 位作者 曾丽婷 杨小蓉 黄兰兰 《中国预防医学杂志》 CAS CSCD 2024年第6期746-750,共5页

目的了解广州市女性人乳头瘤病毒(human papilloma virus,HPV)的感染及基因分型情况,为宫颈癌防治提供流行病学依据。方法采集2021年1—12月广东药科大学附属第一医院门诊及体检的女性宫颈脱落细胞样本,利用聚合酶链式反应(polymerase c... 目的了解广州市女性人乳头瘤病毒(human papilloma virus,HPV)的感染及基因分型情况,为宫颈癌防治提供流行病学依据。方法采集2021年1—12月广东药科大学附属第一医院门诊及体检的女性宫颈脱落细胞样本,利用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)-反向点杂交法,分析HPV基因型。结果调查5892名女性,HPV感染820例,感染率13.92%,其中HPV单一基因型感染637例(77.68%),双重感染140例(17.07%),多重感染43例(5.25%)。高危型HPV感染率(9.35%)高于低危型(3.00%)和混合感染型(1.56%)。高危型HPV感染率最高的前5种基因型依次是HPV52(3.60%)、HPV58(1.49%)、HPV16(1.46%)、HPV53(1.17%)和HPV51(0.88%),而低危型HPV感染率最高的前3种基因型依次为HPV44(1.17%)、HPV54(0.70%)和HPV61(0.68%)。各年龄组中,≥60岁组HPV感染率最高(29.34%),不同年龄组之间HPV的感染率差异有统计学意义(χ^(2)=47.44,P<0.05)。结论广州市女性HPV感染率较高,应加强女性预防HPV感染的意识,提高HPV的筛查和疫苗接种率。 展开更多

关键词 人乳头瘤病毒 感染率 基因分型 pcr-反向点杂交法

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某区PCR法检测HPV感染的临床意义及分析 被引量：4

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作者 骆跃兴 邓秀美 《中国医药指南》 2015年第34期89-90,共2页

目的探讨闽北建阳区PCR-反向点杂交法在检查患者HPV感染病变中的临床意义及分析。方法回顾性分析我院检测的1624例HPV感染患者的临床资料,采用PCR-反向点杂交法对病变标本进行HPV分型检测。结果共进行1624次HPV分型检测,检出感染患者504... 目的探讨闽北建阳区PCR-反向点杂交法在检查患者HPV感染病变中的临床意义及分析。方法回顾性分析我院检测的1624例HPV感染患者的临床资料,采用PCR-反向点杂交法对病变标本进行HPV分型检测。结果共进行1624次HPV分型检测,检出感染患者504例,检出率为31.0%,感染较多的是16、52、58、81型,并以高危型感染为主。单种分型感染共346例,两种及以上感染158例。结论 PCR-反向点杂交法在HPV感染的诊断率较高,特异性较强,对闽北地区HPV感染病变的早期发现,判断预后及指导治疗有重要价值。 展开更多

关键词 反向点杂交法 人乳头瘤病毒(HPV) 临床价值

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