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远志抗抑郁有效部位中寡糖酯单体的分离及活性研究 被引量：29
1
作者 涂海华 刘屏 +4 位作者 马亮 廖红波 谢婷婷 穆丽华 刘耀明 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第11期1278-1280,共3页
目的:研究远志的抗抑郁活性成分。方法:用色谱法分离远志的化学成分,根据波谱学分析鉴定了化合物的结构,用MTT法评价其细胞毒活性。结果从远志分离得到8个化合物,分别鉴定为:西伯利亚远志糖A1(sibiricose A1,1),西伯利亚远志糖A5(sibiri... 目的:研究远志的抗抑郁活性成分。方法:用色谱法分离远志的化学成分,根据波谱学分析鉴定了化合物的结构,用MTT法评价其细胞毒活性。结果从远志分离得到8个化合物,分别鉴定为:西伯利亚远志糖A1(sibiricose A1,1),西伯利亚远志糖A5(sibiricose A5,2),tenuifoliside A(3),西伯利亚远志糖A6(sibiricose A6,4),3,4,5-三甲氧基肉桂酸甲酯(3,4,5-trimethoxycinnamate,5),远志酮Ⅲ(polygalaxanthoneⅢ,6),tenuifolioses A(7),tenuifolioses H(8)。结论:化合物1为首次从远志中分离得到,远志中的寡糖酯类成分对谷氨酸造成的PC12细胞损伤均有一定的保护作用。 展开更多
关键词 远志 寡糖酯 pci2细胞 抗抑郁
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肉苁蓉毛蕊花糖苷对D-半乳糖诱导PC12神经细胞损伤的保护作用 被引量：24
2
作者 苗鑫 张弘 +3 位作者 武燕 刘丹丹 张晓菲 李刚 《中国药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第23期2071-2078,共8页
目的从调节环腺苷酸/环腺苷酸依赖蛋白激酶/环磷腺苷效应元件结合蛋白(c AMP/PKA/CREB)信号通路水平的角度探讨肉苁蓉毛蕊花糖苷对D-半乳糖诱导PC12神经细胞损伤的保护作用。方法四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞存活率以及提供毛蕊花糖... 目的从调节环腺苷酸/环腺苷酸依赖蛋白激酶/环磷腺苷效应元件结合蛋白(c AMP/PKA/CREB)信号通路水平的角度探讨肉苁蓉毛蕊花糖苷对D-半乳糖诱导PC12神经细胞损伤的保护作用。方法四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞存活率以及提供毛蕊花糖苷剂量选择依据,确定D-半乳糖诱导PC12神经细胞损伤模型的剂量和作用时间,毛蕊花糖苷干预以后,Western Blotting从蛋白水平检测CREB、p-CREB蛋白的表达水平。ELISA法检测c AMP、PKA和脑源性神经营养因子(BDNF)的含量。试剂盒检测超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和乳酸脱氢酶(LDH)的含量。结果 (1)16 g·L^(-1)D-半乳糖暴露PC12细胞40 h后,MTT检测细胞存活率达(46.67±6.59)%,与对照组比较差异具有显著性意义(P<0.05),表明成功建立了细胞衰老模型。(2)与模型组比较,毛蕊花糖苷作用24 h后,p-CREB表达增加(P<0.05),并且有剂量依赖性(r=0.989,P<0.01),PKA、c AMP、BDNF和SOD水平提高(P<0.05),MDA和LDH水平下降(P<0.05)(rMDA=-0.875,P<0.05);(rLDH=-0.834,P<0.05)。阻断剂H-89干预后1 h后,p-CREB表达减少,PKA、c AMP、BDNF和SOD水平显著降低(P<0.05),MDA和LDH水平升高(P<0.05)。结论肉苁蓉中毛蕊花糖苷对D-半乳糖诱导的PC12神经细胞损伤有明显的保护作用,其机制与上调c AMP/PKA/CREB信号通路有关。 展开更多
关键词 肉苁蓉 毛蕊花糖苷 pci2细胞 环腺苷酸 环腺苷酸依赖蛋白激酶 环磷腺苷效应元件结合蛋白信号通路
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β-细辛醚对PC12细胞和乳鼠皮层神经细胞形态学及细胞活力的影响 被引量：14
3
作者 陈奕芝 方永奇 +2 位作者 王绮雯 谢宇辉 匡忠生 《中药材》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期317-321,共5页
目的:观察β-细辛醚对PC12细胞和乳鼠皮层神经细胞形态学及细胞活力的影响。方法:用免疫细胞化学方法检测皮层神经细胞特异性标志物NSE、GFAP的表达;在体外将不同浓度β-细辛醚与PC12细胞和皮层神经细胞各作用24 h,用相差显微镜观察细... 目的:观察β-细辛醚对PC12细胞和乳鼠皮层神经细胞形态学及细胞活力的影响。方法:用免疫细胞化学方法检测皮层神经细胞特异性标志物NSE、GFAP的表达;在体外将不同浓度β-细辛醚与PC12细胞和皮层神经细胞各作用24 h,用相差显微镜观察细胞形态的改变,并用MTT比色法检测细胞活力的变化。结果:原代培养的乳鼠皮层神经细胞大多数NSE呈阳性表达,少量GFAP呈阳性表达;β-细辛醚与PC12细胞作用24 h,低浓度β-细辛醚(7.5、15、30、60μg/ml)有促增殖作用,高浓度β-细辛醚(120、140、2480μg/ml)则可抑制其增殖,且随药物浓度的增加而增强;β-细辛醚与皮层神经细胞作用24 h,7.5、15、30、60、120μg/mlβ-细辛醚对其细胞形态和活力无明显影响,240μg/mlβ-细辛醚对其有促增殖作用,而480μg/mlβ-细辛醚对其则有损伤作用。结论:β-细辛醚可能有抗肿瘤和保护神经细胞的作用。 展开更多
关键词 pci2细胞 皮层神经细胞 MTT法 Β-细辛醚 石菖蒲
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阿魏酸钠对H_2O_2诱导的PC12细胞凋亡的保护作用的探讨 被引量：10
4
作者 曲喜英 祝其锋 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期553-556,共4页
目的　探讨阿魏酸钠 (sodiumferulate ,SF)对H2 O2 引起的PC12细胞凋亡保护作用的可能机制。方法　在H2 O2诱导PC12细胞凋亡模型的基础上 ,采用MTT比色分析测细胞存活率 ,RT PCR检测 par 4和caspase 3基因mRNA表达 ,Westernblot检测Par ... 目的　探讨阿魏酸钠 (sodiumferulate ,SF)对H2 O2 引起的PC12细胞凋亡保护作用的可能机制。方法　在H2 O2诱导PC12细胞凋亡模型的基础上 ,采用MTT比色分析测细胞存活率 ,RT PCR检测 par 4和caspase 3基因mRNA表达 ,Westernblot检测Par 4蛋白表达和Caspase 3P2 0活性片段 ,用比色法检测Caspase 3相对活性。 结果　不同剂量SF预处理 1h可提高PC12细胞的存活率 ,降低 par 4和cas pase 3的mRNA表达以及Par 4的蛋白表达 ,Caspase 3P2 0活性片段和Caspase 3相对活性减少 ,但变化不明显。结论　SF可剂量依赖性地对抗H2 O2 的神经毒性作用 ,其机制可能与凋亡基因 par 4表达有关 ,与Caspase 展开更多
关键词 阿魏酸钠 H2O2 pci2细胞 凋亡 PAR-4 CASPASE-3
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尿酸减轻6-羟基多巴胺对PC12细胞的毒性作用 被引量：14
5
作者 叶艳 罗蔚锋 +4 位作者 朱婷鸽 杨亚萍 周旭平 刘春风 包仕尧 《中国临床神经科学》 2010年第2期135-139,共5页
目的:评价尿酸减轻6-羟基多巴胺(6-OHDA)对PC12细胞的毒性作用。方法:应用PC12细胞制作帕金森细胞模型,分为对照组、尿酸组、6-OHDA组、尿酸+6-OHDA组。采用MTT测定各组PC12细胞活性,免疫荧光法观察各组PC12细胞caspase-3激活情况,流式... 目的:评价尿酸减轻6-羟基多巴胺(6-OHDA)对PC12细胞的毒性作用。方法:应用PC12细胞制作帕金森细胞模型,分为对照组、尿酸组、6-OHDA组、尿酸+6-OHDA组。采用MTT测定各组PC12细胞活性,免疫荧光法观察各组PC12细胞caspase-3激活情况,流式细胞术检测各组PC12细胞凋亡率。尿酸100～400μmol·L^(-1)不影响PC12细胞生存率,尿酸100～400μmol·L^(-1)可显著提高6-OHDA 50μmol·L^(-1)作用6、12和24 h造成的PC12细胞生存率的下降(P<0.01);尿酸能减少6-OHDA导致的PC12细胞caspase-3激活,降低6-OHDA导致的凋亡率(P<0.05)。结论:尿酸具有减轻6-OHDA对PC12细胞的毒性作用。 展开更多
关键词 尿酸 帕金森病 pci2细胞 6-羟基多巴胺
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神经再生素激活PC12细胞ERK1/2的实验研究 被引量：7
6
作者 强亮 顾星星 丁斐 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期369-372,共4页
本实验初步探讨了神经再生素 ( NRF)作用于 PC12细胞的信号传导途径。采用 MTT法检测 NRF对无血清培养的PC12细胞存活率的影响 ;用磷酸化的 Elk单克隆抗体 ,通过 Western blot法观察 NRF的不同浓度 ( 10、10 0、10 0 0 ng/ m l)及不同... 本实验初步探讨了神经再生素 ( NRF)作用于 PC12细胞的信号传导途径。采用 MTT法检测 NRF对无血清培养的PC12细胞存活率的影响 ;用磷酸化的 Elk单克隆抗体 ,通过 Western blot法观察 NRF的不同浓度 ( 10、10 0、10 0 0 ng/ m l)及不同作用时间 ( 0 min、15 min、3 0 min、1h、2 h)对无血清培养的 PC12细胞 ERK1/ 2活性的影响 ;还运用 MEK1/ 2阻断剂 U0 12 6,观察NRF激活 ERK1/ 2是否需要其上游信号蛋白 MEK1/ 2的激活。结果表明 ,NRF作用于无血清培养的 PC12细胞 ,可以激活ERK1/ 2 ,存在明显的剂量效应关系和时间依赖作用 ,在 10 0 0 ng/ ml浓度下最大 ,作用 2 h时达峰值 ;U0 12 6作用后 ,可抑制 NRF作用于 PC12细胞引起的 ERK1/ 2的激活。由此可见 ,NRF对无血清培养的 PC12细胞具有保护作用 ,可能通过激活 ERK1/ 2磷酸化级联途径来介导这些作用。 展开更多
关键词 神经再生素 ERKl/2 U0126 pci2细胞 信号传导途径 细胞培养
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电磁辐射诱导PC12细胞凋亡中丝裂原活化蛋白激酶的差别激活 被引量：9
7
作者 杨学森 龚茜芬 +2 位作者 张广斌 余争平 余晓东 《中华劳动卫生职业病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期167-171,共5页
目的探讨丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号转导系统的差别激活与电磁辐射诱导PC12细胞凋亡的关系。方法以65mWcm2电磁波辐照离体培养PC12细胞20min,分为辐照后即刻及3、12、24h共4个观察时相点,采用流式细胞仪检测PC12细胞凋亡率,采用蛋白... 目的探讨丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号转导系统的差别激活与电磁辐射诱导PC12细胞凋亡的关系。方法以65mWcm2电磁波辐照离体培养PC12细胞20min,分为辐照后即刻及3、12、24h共4个观察时相点,采用流式细胞仪检测PC12细胞凋亡率,采用蛋白质免疫印迹法检测ERK12、JNK、P38MAPK蛋白质磷酸化水平。结果电磁波辐照后即刻PC12细胞凋亡开始增加;3h后凋亡细胞进一步明显增多,凋亡率约为23.5%;12h后细胞凋亡率与3h相比,差异无统计学意义(P>0.05);24h后细胞凋亡再次明显增加,并达到高峰。电磁辐射后PC12细胞ERK12和JNK蛋白质磷酸化都明显增加,但ERK12的增加持续到3h,JNK蛋白磷酸化水平增高一直持续到12h,24h后两者都较对照组明显降低。P38MAPK蛋白质磷酸化水平在辐照后一直处于较高水平,其变化趋势呈双峰状,即在3h和24h出现2次磷酸化高峰。结论电磁辐射可以激活MAPK信号转导系统,但ERK12、JNK、P38MAPK表现为差别激活。MAPK信号转导系统可能参与了电磁辐射诱导的PC12细胞凋亡,正是MAPK这种差别激活才导致PC12细胞出现特有的凋亡变化形式。 展开更多
关键词 PC12细胞凋亡 丝裂原活化蛋白激酶 辐射诱导 激活 MAPK信号转导系统 差别 P38MAPK ERK1/2 蛋白质免疫印迹法 磷酸化水平 流式细胞仪检测 细胞凋亡率 pci2细胞 蛋白质磷酸化 电磁辐射 24h JNK 离体培养 凋亡细胞 电磁波
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圣草酚对Aβ_(25-35)诱导的PC12细胞损伤的保护作用及其机制 被引量：10
8
作者 顾婷 徐占玲 +5 位作者 曹玲 雷霞 刘海洋 耿放 刘国良 张宁 《现代生物医学进展》 CAS 2018年第7期1230-1233,共4页
目的:探讨圣草酚对Aβ_(25-35)诱导的PC12细胞损伤的保护作用及其机制。方法:采用MTT法筛选圣草酚对Aβ_(25-35)诱导的PC12细胞损伤的有效保护浓度,进一步采用流式细胞术检测圣草酚对Aβ_(25-35)诱导的PC12细胞的凋亡率的影响,并通过试... 目的:探讨圣草酚对Aβ_(25-35)诱导的PC12细胞损伤的保护作用及其机制。方法:采用MTT法筛选圣草酚对Aβ_(25-35)诱导的PC12细胞损伤的有效保护浓度,进一步采用流式细胞术检测圣草酚对Aβ_(25-35)诱导的PC12细胞的凋亡率的影响,并通过试剂盒检测圣草酚对Aβ_(25-35)诱导的PC12细胞胆碱能系统受体活性的影响。结果:MTT结果显示2×10^(-3)μmol/L圣草酚可显著促进Aβ2_(25-35)诱导的PC12细胞增殖(P<0.05)。流式细胞术结果显示2×10^(-3)μmol/L圣草酚和雌二醇均可以显著抑制Aβ_(25-35)诱导的PC12细胞凋亡(P<0.05),提高其乙酰胆碱及乙酰胆碱转移酶活性并且降低乙酰胆碱酯酶的活性(P<0.05),且二者的作用相当,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:圣草酚可能通过提高Ach及ChAT的含量,降低AchE的含量,调节胆碱能系统相关酶的活性,发挥对Aβ_(25-35)诱导的PC12细胞的保护作用。 展开更多
关键词 圣草酚 AΒ25-35 pci2细胞 胆碱能系统
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神经再生素对PC12细胞分化的影响 被引量：7
9
作者 强亮 丁斐 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2003年第3期235-240,共6页
目的　探索神经再生素 (nerveregenerationfactor,NRF)诱导PC12细胞神经元性分化的潜在能力。方法　以NGF为阳性对照 ,采用细胞培养方法 ,观察NRF在低血清的情况下 ,诱导PC12细胞发生的形态学改变 ;同时 ,使用荧光免疫细胞化学方法 ,观... 目的　探索神经再生素 (nerveregenerationfactor,NRF)诱导PC12细胞神经元性分化的潜在能力。方法　以NGF为阳性对照 ,采用细胞培养方法 ,观察NRF在低血清的情况下 ,诱导PC12细胞发生的形态学改变 ;同时 ,使用荧光免疫细胞化学方法 ,观察神经元标志性物质—低分子量神经丝蛋白 (NF L)在NRF诱导分化的PC12细胞中的表达。采用RT PCR方法观察NRF对无血清培养的PC12细胞即早基因c-fos的表达变化。结果　加药后第 14天 ,NRF组以及NGF组的PC12细胞呈现明显的形态学改变 :细胞胞体皱缩 ,且有明显的突起生长。空白对照组、NRF组 (0 0 1μg/ml、0 1μg/ml、 1μg /ml)、NGF组 (0 0 5 μg/ml)具有明显突起的分化细胞占总细胞的比例分别为 5 16 9%、 2 5 718%、4 3 32 5 %、 73 0 38%、 85 2 86 %。免疫荧光细胞化学结果显示NRF、NGF组的分化细胞基本都为NF L标记阳性的细胞 ;NRF能使c fos的表达上调 ,作用 2h后达峰值。结论　神经再生素具有诱导PC12细胞的神经元性分化作用 ,且能使c-fos表达上调。 展开更多
关键词 神经再生素 神经丝蛋白-L pci2细胞 细胞分化 神经元性分化 中药
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阻断泛素-蛋白酶体通路诱导PC12细胞死亡和泛素阳性包涵体生成 被引量：5
10
作者 杨卉 陈生弟 +3 位作者 李彪 陆国强 梁梁 徐洁懿 《中华神经科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第7期430-433,共4页
目的探讨泛素蛋白酶体通路的功能障碍对于多巴胺能细胞的活力以及胞质内包涵体生成的影响。方法应用蛋白酶体抑制剂lactacystin(5μmol/L、10μmol/L、15μmol/L和20μmol/L)处理PC12细胞24h,MTT方法检测细胞活力,WesternBlot方法测定... 目的探讨泛素蛋白酶体通路的功能障碍对于多巴胺能细胞的活力以及胞质内包涵体生成的影响。方法应用蛋白酶体抑制剂lactacystin(5μmol/L、10μmol/L、15μmol/L和20μmol/L)处理PC12细胞24h,MTT方法检测细胞活力,WesternBlot方法测定细胞内泛素化蛋白质水平,免疫荧光细胞化学染色观察泛素免疫阳性包涵体的生成。结果经5μmol/L、10μmol/L、15μmol/L和20μmol/Llactacystin处理24h后,PC12细胞的活力显著降低(细胞存活率分别为81.5%±3.6%、75.4%±2.4%、70.2%±2.7%和60.4%±3.9%),呈现剂量依赖性。WesternBlot证实对照组细胞内未检测到相对高分子质量的泛素化蛋白质;随着lactacystin作用浓度的增加,细胞内相对高分子质量泛素化蛋白质的含量逐渐增高。免疫荧光染色显示对照组中仅有极少数细胞内含有泛素阳性包涵体;20μmol/Llactacystin处理组中含有泛素阳性包涵体的细胞数目显著增多(P<0.01)。结论泛素蛋白酶体通路的功能缺失能诱导多巴胺能细胞死亡,造成细胞内泛素化蛋白质积聚,促进胞质内泛素阳性包涵体的生成,可能在帕金森病黑质多巴胺能神经元变性死亡和Lewy小体形成中发挥重要作用。 展开更多
关键词 泛素 蛋白酶抑制药 pci2细胞 帕金森病
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黑果枸杞果实化学成分研究 被引量：8
11
作者 张佳 赫军 +5 位作者 张蕾 叶贤胜 刘淑娜 潘雪格 张维库 续洁琨 《中国药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第24期2150-2154,共5页
目的研究黑果枸杞（LyciumruthenicumMurr．）果实的化学成分及其对缺氧缺糖（oxygen—glueosedeprivation，OGD）损伤PCI2细胞的保护作用。方法采用D101型大孔吸附树脂、硅胶、ODS、SephadexLH-20柱色谱和制备高效液相色谱等多种色谱... 目的研究黑果枸杞（LyciumruthenicumMurr．）果实的化学成分及其对缺氧缺糖（oxygen—glueosedeprivation，OGD）损伤PCI2细胞的保护作用。方法采用D101型大孔吸附树脂、硅胶、ODS、SephadexLH-20柱色谱和制备高效液相色谱等多种色谱方法分离纯化．根据理化常数以及NMR等波谱学方法鉴定其结构，并采用MTF法测定其对OGD损伤的PCI2细胞的保护作用。结果从黑果枸杞果实的体积分数65％乙醇提取物中共分离得到了11个化合物，分别是：p．hydroxyphenethyltrans—ferulate（1），山柰酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（kaempferol3-D-β-D—glucopyranoside）（2），槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（quercetin3-O-β-D—glueopyranoside）（3），紫丁香苷（syringin）（4），槲皮素（5），咖啡酸乙酯（6），p-香豆酸（7），阿魏酸（8），2，6-bis（1-phe—nylethyl）phenol（9），正三十二烷（10）和胡萝卜串（11）。结论其中化合物1～4，6，9和10为首次从该种植物中分离得到；化合物1—8对0GD损伤的PCI2细胞有一定的保护作用。 展开更多
关键词 黑果枸杞 化学成分 酚酸 黄酮 pci2细胞
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蒺藜总皂苷对H_2O_2诱导PC12细胞凋亡的保护作用 被引量：7
12
作者 姜恩平 李红 +1 位作者 纪影实 杨世杰 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期183-186,共4页
目的:探讨蒺藜总皂苷(GSTT)对过氧化氢(H2O2)诱导大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(PC12)凋亡的保护作用及其机制。方法:PC12细胞分为对照组、模型组及蒺藜总皂苷高(GSTT1)、低(GSTT2)剂量组。用H2O2刺激PC12细胞使其发生凋亡,MTT法检测PC12细... 目的:探讨蒺藜总皂苷(GSTT)对过氧化氢(H2O2)诱导大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(PC12)凋亡的保护作用及其机制。方法:PC12细胞分为对照组、模型组及蒺藜总皂苷高(GSTT1)、低(GSTT2)剂量组。用H2O2刺激PC12细胞使其发生凋亡,MTT法检测PC12细胞活性,流式细胞仪检测PC12细胞亚二倍体峰比率及线粒体膜电位的变化,免疫组织化学方法检测与凋亡相关蛋白Bcl-2及Bax。结果:与模型组比较,蒺藜总皂苷组随着剂量的增加PC12细胞存活率提高(P<0.001),凋亡比率下降(P<0.01),线粒体膜电位回升(P<0.01),Bcl-2表达增加(P<0.05),而Bax的表达降低(P<0.05)。结论:蒺藜总皂苷可抑制H2O2诱导的PC12细胞凋亡,其机制可能与抑制线粒体途径的细胞凋亡有关。 展开更多
关键词 蒺藜总皂苷 pci2细胞 细胞凋亡
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抗霉素A抑制PC12细胞线粒体COⅡ基因表达 被引量：6
13
作者 邱小忠 欧阳钧 +5 位作者 余磊 张黎声 陆云涛 陈瑗 周玫 钟世镇 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期167-170,共4页
采用不同浓度的抗霉素 A(一种能提高线粒体内活性氧水平的线粒体抑制剂 )处理 PC12细胞 ,利用血细胞计数、台盼蓝排除法以及 MTT法进行细胞活性检测。实验证明 ,当抗霉素 A的浓度达到 15 0 μmol/L时 ,PC12细胞开始出现损伤 ;进一步采用... 采用不同浓度的抗霉素 A(一种能提高线粒体内活性氧水平的线粒体抑制剂 )处理 PC12细胞 ,利用血细胞计数、台盼蓝排除法以及 MTT法进行细胞活性检测。实验证明 ,当抗霉素 A的浓度达到 15 0 μmol/L时 ,PC12细胞开始出现损伤 ;进一步采用 RNA斑点杂交和 RT-PCR技术分析发现抗霉素 A所致的细胞损伤和线粒体内细胞色素 C氧化酶亚基 (CO )基因表达下降有关。本研究证实线粒体介导的活性氧的产生能早期诱导线粒体细胞色素氧化酶的活性的改变 ,逐步引起 展开更多
关键词 抗霉素A pci2细胞 线粒体 COⅡ 基因表达 细胞色素C氧化酶亚基Ⅱ 活性氧 损伤
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氯化钴诱导PC12细胞凋亡的分子机制 被引量：6
14
作者 曾季平 王立祥 +5 位作者 胡晓燕 杨玲玲 孔峰 吴伟芳 陈蔚文 崔行 《毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期193-195,共3页
目的确定氯化钴(CoCl2)诱导PC12细胞凋亡的分子机制。方法500μmolLCoCl2诱导PC12细胞24h后,检测活性氧(ROS)生成量的变化以及抗氧化剂N乙酰半胱氨酸(NAC)、二硫代苏糖醇(DTT)对细胞存活率和ROS生成量的影响;琼脂糖凝胶电泳检测NAC、DTT... 目的确定氯化钴(CoCl2)诱导PC12细胞凋亡的分子机制。方法500μmolLCoCl2诱导PC12细胞24h后,检测活性氧(ROS)生成量的变化以及抗氧化剂N乙酰半胱氨酸(NAC)、二硫代苏糖醇(DTT)对细胞存活率和ROS生成量的影响;琼脂糖凝胶电泳检测NAC、DTT对CoCl2诱导PC12细胞DNA片段化的影响;利用RTPCR法检测凋亡相关基因bclxl和bax在PC12细胞调亡过程中的表达及NAC、DTT对基因表达的影响;化学发光法检测NAC、DTT对Caspase3表达的作用。结果在CoCl2诱导PC12细胞凋亡中,ROS生成量明显上升,为正常时的2.92倍;NAC、DTT可提高细胞存活率,由53.1%上升为94.8%和92.3%(P<0.01),并有效抑制ROS的生成,为正常时的24.2%和82.1%(P<0.01);同时抑制DNA片段化的发生。bclxl在细胞凋亡过程中表达明显下降,bax表达无明显变化;NAC和DTT可使bclxl的表达明显上升。Caspase3在细胞凋亡中被激活,NAC、DTT可抑制Caspase3的表达(P<0.01)。结论ROS介导了CoCl2诱导的PC12细胞凋亡,这一过程与抑制bclxl表达,激活Caspase3有关。 展开更多
关键词 氯化钴 pci2细胞 细胞凋亡 活性氧 基因bcl-xl
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神经妥乐平对H2O2致PC12细胞损伤的保护作用 被引量：7
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作者 方文丽 范胜诺 +3 位作者 廖旺 郑雨秋 廖劭伟 刘军 《国际医药卫生导报》 2017年第6期771-785,共15页
目的 探索神经妥乐平对H2O2诱导的PC12细胞氧化应激损伤的影响及其潜在机制。方法 用CCK-8法检测细胞存活率，以流式细胞术检测细胞氧化损伤的发生、细胞内活性氧的生成及线粒体膜电位的变化，荧光显微镜观察细胞内活性氧的产生，qRT-P... 目的 探索神经妥乐平对H2O2诱导的PC12细胞氧化应激损伤的影响及其潜在机制。方法 用CCK-8法检测细胞存活率，以流式细胞术检测细胞氧化损伤的发生、细胞内活性氧的生成及线粒体膜电位的变化，荧光显微镜观察细胞内活性氧的产生，qRT-PCR 测定 Caspase-3、Bax 和 Bcl-2 mRNA 的表达。结果 PC12 细胞存活率随 H2O2 浓度的增加而逐渐下降。其中，450μM H2O2 处理细胞 24 h 后细 胞存活率、凋亡率、坏死率明显降低；细胞内活性氧水平表达明显升高；线粒体膜电位JC-1红/绿荧光比值下降；Bax 和 Caspase-3 的 mRNA 表达升高，而 Bcl-2 的 mRNA 表达下降，以上指标与对照组相比， 差异有统计学意义 （P ＜ 0.05）。而预先给予 0.01 UN/ml 的 NTP 处理细胞 12 h 可明显提高细胞存活率，降 低细胞凋亡率和坏死率，减少细胞内活性氧生成并提高线粒体膜电位，抑制Bax和Caspase-3的mRNA表 达，促进 Bcl-2 mRNA 的表达，以上指标与 H2O2 组相比，差异有统计学意义 （P ＜ 0.05）。结论 NTP 能抑 制H2O2诱导的PC12细胞损伤，其神经细胞保护作用可能与其降低细胞内活性氧水平、维持线粒体膜电位的高能状态和抑制促凋亡基因表达、促进抗凋亡基因表达有关。 展开更多
关键词 神经妥乐平 pci2细胞 氧化应激损伤 线粒体膜电位 凋亡
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传代培养PC12细胞的分泌特性及PENK基因表达的研究 被引量：5
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作者 马超 伍少玲 燕铁斌 《解剖学研究》 CAS 2008年第3期200-202,共3页
目的观察PC12细胞传代培养中的生长情况,检测培养液中去甲肾上腺素(NE)和甲硫氨酸脑啡肽(M-EK)的分泌水平及细胞前脑啡肽(PENK)基因的表达情况,为细胞移植镇痛的研究提供实验依据。方法PC12细胞在DMEM+15%胎牛血清中培养,酶法消化传代;... 目的观察PC12细胞传代培养中的生长情况,检测培养液中去甲肾上腺素(NE)和甲硫氨酸脑啡肽(M-EK)的分泌水平及细胞前脑啡肽(PENK)基因的表达情况,为细胞移植镇痛的研究提供实验依据。方法PC12细胞在DMEM+15%胎牛血清中培养,酶法消化传代;采用高效液相色谱-电化学检测法检测培养液中NE的浓度;采用放射免疫法检测培养液中M-EK的浓度;采用反转录PCR检测细胞PENK mRNA的表达。结果传代培养PC12细胞的基础分泌:NE为(465.8±78.5)pg/mL,M-EK为(4.3±0.66)pg/mL;PENK低水平表达。结论PC12细胞在传代培养过程中,可合成和分泌NE和M-EK,并可检测到PENK基因的表达,为细胞移植镇痛提供新的细胞来源。 展开更多
关键词 pci2细胞 脑啡肽 前脑啡肽基因 细胞移植
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蛋白酶体抑制剂lactacystin诱导PC12细胞凋亡以及半胱氨酸蛋白水解酶3活化的实验研究 被引量：3
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作者 杨卉 陈生弟 +3 位作者 陆国强 李彪 梁梁 徐洁懿 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第29期2058-2061,共4页
目的探讨蛋白酶体功能缺陷是否能诱导多巴胺能细胞发生凋亡及其可能的作用机理。方法应用高选择性的蛋白酶体抑制剂lactacystin(0、1μmol/L、5μmol/l或10μmol/L)处理大鼠嗜铬细胞瘤PC12细胞株24h,四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测细胞... 目的探讨蛋白酶体功能缺陷是否能诱导多巴胺能细胞发生凋亡及其可能的作用机理。方法应用高选择性的蛋白酶体抑制剂lactacystin(0、1μmol/L、5μmol/l或10μmol/L)处理大鼠嗜铬细胞瘤PC12细胞株24h,四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测细胞活力的改变。10μmol/Llactacystin作用24h后,Hoechst荧光染色观察凋亡细胞的核形态学改变,流式细胞仪测定细胞凋亡百分率。用Western印迹法检测10μmol/Llactacystin作用0、24或48h时PC12细胞内半胱氨酸蛋白水解酶3活化片段的动态变化。结果5μmol/L或10μmol/Llactacystin作用24h后,PC12细胞的活力(87%±6%和26%±6%)显著低于对照组(P<0.05)。Hoechst荧光染色显示10μmol/Llactacystin作用24h后部分细胞呈现凋亡细胞核形态学改变;流式细胞仪证实31.4%±4.0%的PC12细胞发生了凋亡,与对照组(7.5%±0.8%)比较差异有统计学意义(P<0.01)。Western印迹法显示对照组细胞内仅有极少量的半胱氨酸蛋白水解酶3活化片段表达;10μmol/Llactacystin作用48h的PC12细胞内半胱氨酸蛋白水解酶3活化片段的表达明显较多。结论蛋白酶体抑制剂lactacystin能诱导多巴胺能细胞PC12发生凋亡,半胱氨酸蛋白水解酶3蛋白酶的激活可能参与lactacystin诱导的PC12细胞凋亡过程;蛋白酶体的功能缺陷在帕金森病发病机制中可能发挥重要作用。 展开更多
关键词 蛋白酶抑制药 pci2细胞 脱噬作用 帕金森病
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醒脑启智胶囊药物血清对PC12细胞缺氧损伤的保护作用 被引量：4
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作者 杨牧祥 田元祥 +3 位作者 徐华洲 赵建新 于文涛 王少贤 《中西医结合心脑血管病杂志》 2004年第11期651-652,共2页
目的　探讨醒脑启智胶囊药物血清对PC12细胞缺氧损伤的影响。方法　采用血清药理学方法 ,体外培养PC12细胞 ,用Na2 S2 O4产生缺氧损伤 ,观察PC12细胞形态学、MTT法细胞活力、乳酸脱氢酶LDH活性的变化。结果　醒脑启智胶囊药物血清对PC1... 目的　探讨醒脑启智胶囊药物血清对PC12细胞缺氧损伤的影响。方法　采用血清药理学方法 ,体外培养PC12细胞 ,用Na2 S2 O4产生缺氧损伤 ,观察PC12细胞形态学、MTT法细胞活力、乳酸脱氢酶LDH活性的变化。结果　醒脑启智胶囊药物血清对PC12细胞的形态改变具有明显的保护作用 ,可增强细胞活力 ,降低LDH活性。结论　醒脑启智胶囊药物血清能明显减轻PC12细胞的缺氧损伤 ,并呈现一定的剂量依赖关系。 展开更多
关键词 缺氧损伤 醒脑启智胶囊 药物血清 PC12细胞 保护作用 细胞活力 LDH pci2细胞 血清药理学方法 MTT法
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芥子碱对PC12细胞内游离钙升高的影响 被引量：4
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作者 何玲 刘丽芳 +4 位作者 李海涛 郭胜伟 邱嘉斌 李富 蔡宝昌 《中国新药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第19期1679-1683,共5页
目的:考察芥子碱对高钾除极和谷氨酸引起细胞外钙内流以及咖啡因和环匹阿尼酸(cyclopia-zonic acid,CPA)引起细胞内钙释放所导致的PC12细胞内游离钙升高的影响。方法:PC12细胞用终浓度为5μmo.lL-1的钙离子荧光指示剂Fluo-3/AM于37℃避... 目的:考察芥子碱对高钾除极和谷氨酸引起细胞外钙内流以及咖啡因和环匹阿尼酸(cyclopia-zonic acid,CPA)引起细胞内钙释放所导致的PC12细胞内游离钙升高的影响。方法:PC12细胞用终浓度为5μmo.lL-1的钙离子荧光指示剂Fluo-3/AM于37℃避光负载孵育。细胞内游离钙([Ca2+]i)用VictorⅡ1420多功能标记分析仪检测,以荧光强度(FI)表示。结果:当有外钙存在时,PC12细胞静息[Ca2+]i的FI值为(1 188±163),75 mmol.L-1KCl和10 mmol.L-1谷氨酸引起细胞外钙内流,使[Ca2+]i增高,FI峰值分别增至(4 270±982)和(3 096±402)。芥子碱(0.01,0.1,1.0,10,100μmol.L-1)对静息[Ca2+]i没有明显的影响,但浓度相关性地抑制高钾和谷氨酸诱发的[Ca2+]i增高,抑制率分别为10.2%,39.5%,53.7%,71.8%,88.4%和30.3%,55.7%,68.5%,79.2%,94.1%。当无外钙存在时,PC12细胞静息[Ca2+]i的FI值为(813±112)。咖啡因(40 mmol.L-1)和CPA(30μmol.L-1)分别引起Caffeine-ryanodine和三磷酸肌醇(InsP3)敏感型-钙池释放而使[Ca2+]i升高,FI值分别增至(2 944±371)和(1 844±332)。芥子碱(0.1,1.0,10,100μmol.L-1)浓度相关性地抑制咖啡因和CPA诱发的[Ca2+]i增高,抑制率分别为23.7%,61.9%,77.5%,88.2%和10.9%,23.8%,44.6%,68.3%。结论:芥子碱能显著抑制电压依赖性和受体依赖性钙通道开放所引起的外钙内流,且对受体依赖性钙通道的抑制作用更强。此外,芥子碱对Caffeine-ryan-odine受体和InsP3敏感型钙池的内钙释放也有明显抑制作用,且对Caffeine-ryanodine受体敏感型钙池的抑制作用更强。这提示芥子碱有望成为很有研发前景的新型钙阻滞剂。 展开更多
关键词 芥子碱 细胞内游离钙 pci2细胞 Fluo-3/AM 钙阻滞剂
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β-淀粉样蛋白25-35片段诱导PC12细胞凋亡 被引量：4
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作者 罗蔓 谢瑞满 《复旦学报（医学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2004年第6期618-621,共4页
目的　探讨 β -淀粉样蛋白 2 5 - 35片段 (Aβ2 5-3 5)对体外培养的PC12细胞的毒性作用机制。方法　用四甲基偶氮唑蓝 (MTT)代谢率检测 ,光镜吖啶橙荧光染色术 ,透射电镜以及流式细胞仪技术研究Aβ2 5-3 5损伤PC12细胞的途径。结果　用... 目的　探讨 β -淀粉样蛋白 2 5 - 35片段 (Aβ2 5-3 5)对体外培养的PC12细胞的毒性作用机制。方法　用四甲基偶氮唑蓝 (MTT)代谢率检测 ,光镜吖啶橙荧光染色术 ,透射电镜以及流式细胞仪技术研究Aβ2 5-3 5损伤PC12细胞的途径。结果　用Aβ2 5-3 5处理PC12细胞 2 4h ,Aβ2 5-3 5剂量依赖性地引起PC12细胞的MTT代谢率减少 ,荧光染色及电镜观察发现经Aβ2 5-3 5处理的PC12细胞表现出凋亡细胞的特征 ,流式细胞仪检测发现 ,对照组 2 0 μmol/L及 5 0 μmol/L的Aβ2 5-3 5组PC12细胞的凋亡率分别为 0 .0 8%± 0 .0 1% ,14 .8%± 1.13% ,2 5 .9%± 2 .34%。 展开更多
关键词 pci2细胞 AΒ25-35 Β-淀粉样蛋白 PC12细胞 凋亡 MTT 诱导 代谢率 片段 发现
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