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青藤碱对脂多糖诱导的神经细胞环氧化酶-2表达的影响 被引量：23
1
作者 陈炜 沈悦娣 +1 位作者 赵光树 姚杭平 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第9期900-903,共4页
目的 :了解青藤碱 (sinomenine ,Sin)对PC 12细胞增殖和表达环氧化酶 2 (COX 2 )及合成前列腺素E2(PGE2 )的影响 ,探讨Sin对神经细胞的作用机制。方法 :采用NGF诱导培养PC 12细胞 ,用不同浓度的Sin(0 ,3× 10 -6,30× 10 -6,15... 目的 :了解青藤碱 (sinomenine ,Sin)对PC 12细胞增殖和表达环氧化酶 2 (COX 2 )及合成前列腺素E2(PGE2 )的影响 ,探讨Sin对神经细胞的作用机制。方法 :采用NGF诱导培养PC 12细胞 ,用不同浓度的Sin(0 ,3× 10 -6,30× 10 -6,15 0× 10 -6mol·L-1)预处理后 ,加或不加脂多糖 (LPS) ,分别用3 H TdR法、竞争ELISA、半定量逆转录 聚合酶联反应 (RT PCR)法、细胞酶联免疫法及Western blot法 ,检测PC 12细胞的增殖活性、细胞培养上清液中PGE2 的水平、细胞COX 2mRNA及蛋白表达水平。同时提取各组细胞蛋白 ,测定其核转录因子NF κB活性。结果 :Sin对LPS诱导的PC 12细胞的COX 2mRNA、蛋白表达具有不同程度的抑制作用 ,与Sin浓度呈明显正相关性 ,且对LPS激活的PC 12细胞的核转录因子NF κB活性有明显的抑制作用。实验未观察到Sin对PC 12细胞增殖的影响。结论 :Sin可显著抑制LPS诱导的PC 12细胞COX 2的表达及其产物PGE2 的合成 ,其作用机制可能是通过Sin抑制PC 12细胞核转录因子NF 展开更多
关键词 pc-12细胞 COX-2 青藤碱 PGE2 表达 环氧化酶-2 脂多糖 浓度 诱导培养 活性
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Aβ诱导PC-12细胞凋亡建立阿尔茨海默病细胞模型 被引量：20
2
作者 王亚利 宋天保 +1 位作者 路明 许琨 《西安医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期128-132,共5页
目的　用β 淀粉样蛋白 (Aβ2 5- 35)诱导PC 1 2细胞凋亡以建立阿尔茨海默病细胞模型。方法　体外培养大鼠嗜铬细胞瘤PC 1 2细胞 ,以不同浓度Aβ2 5 - 35诱导并于不同时间收获细胞 ,应用MTT法观察细胞活力 ,Fura 2 /AM荧光分析法检测细... 目的　用β 淀粉样蛋白 (Aβ2 5- 35)诱导PC 1 2细胞凋亡以建立阿尔茨海默病细胞模型。方法　体外培养大鼠嗜铬细胞瘤PC 1 2细胞 ,以不同浓度Aβ2 5 - 35诱导并于不同时间收获细胞 ,应用MTT法观察细胞活力 ,Fura 2 /AM荧光分析法检测细胞内游离Ca2 +浓度 ,Hoechst332 5 8及碘化丙啶复染分析细胞凋亡。结果　Aβ2 5- 35作用于PC 1 2细胞后 ,细胞活力逐渐下降 ,并呈时间和剂量依赖性 ;同时细胞内Ca2 +浓度显著上升 ;不同浓度Aβ2 5 - 35作用后 ,PC 1 2细胞于不同时间出现凋亡的典型形态学特征 ,该时间比Ca2 +浓度上升约晚 6～ 1 2h。结论　Aβ2 5- 35诱导后PC 1 2细胞活力下降、细胞内Ca2 +浓度上升及细胞凋亡 。 展开更多
关键词 细胞凋亡 Β-淀粉样蛋白 pc-12细胞 阿尔茨海默病 细胞培养 动物模型
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毛子草化学成分及其促PC-12细胞的分化作用研究Ⅰ 被引量：19
3
作者 余正文 朱海燕 +2 位作者 杨小生 孙黔云 郝小江 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第17期1335-1338,共4页
目的:研究毛子草的化学成分及其促PC-12细胞的分化作用.方法:利用反复硅胶柱色谱进行分离和纯化,通过理化方法及光谱分析鉴定其结构.采用PC-12细胞株模型对毛子草不同提取部位及各单体化合物进行了促分化作用研究.结果:从毛子草的正丁... 目的:研究毛子草的化学成分及其促PC-12细胞的分化作用.方法:利用反复硅胶柱色谱进行分离和纯化,通过理化方法及光谱分析鉴定其结构.采用PC-12细胞株模型对毛子草不同提取部位及各单体化合物进行了促分化作用研究.结果:从毛子草的正丁醇溶解部分分离得到5个化合物,鉴定为:车前醚苷(Ⅰ),5-羟基-4',6,7-三甲氧基黄酮(Ⅱ),4',5-二羟基-6,7-二甲氧基黄酮(Ⅲ),4',5-二羟基-7-甲氧基黄酮(Ⅳ),5-羟基-4',7-二甲氧基黄酮(Ⅴ).结论:化合物Ⅰ为首次从该植物中分离得到;化合物Ⅱ～Ⅴ为首次从角蒿属植物中分离得到.生物活性表明毛子草正丁醇溶解部位和化合物Ⅰ对PC-12细胞均具有一定的营养活性. 展开更多
关键词 毛子草 化学成分 pc-12细胞 分化作用
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丁苯酞对Aβ_(25-35)诱导的PC12细胞线粒体损伤的保护作用 被引量：17
4
作者 崔玉环 张朝东 魏玉磊 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期452-455,共4页
目的探讨丁苯酞(NBP)对β淀粉样肽25-35(Aβ25-35)诱导的PC12细胞线粒体损伤的保护作用及其机制。方法对数生长期的PC12细胞分为6组:正常对照组、模型组、不同浓度(0.1,1.0,10,100μmol/L)NBP组。将不同浓度的NBP作用到经Aβ25-35诱导的... 目的探讨丁苯酞(NBP)对β淀粉样肽25-35(Aβ25-35)诱导的PC12细胞线粒体损伤的保护作用及其机制。方法对数生长期的PC12细胞分为6组:正常对照组、模型组、不同浓度(0.1,1.0,10,100μmol/L)NBP组。将不同浓度的NBP作用到经Aβ25-35诱导的PC12细胞上,MTT法分析细胞存活率,电镜观察线粒体超微结构的变化,分光光度法检测丙二醛(MAD)及超氧化物歧化酶(SOD)活性,观察细胞氧化应激。结果 MTT显示NBP组细胞存活率明显高于未经NBP预处理组(P<0.05),并且中剂量存活率最高;电镜结果显示模型组线粒体数量和形态发生了明显的改变,而NBP组线粒体数量多,结构比较完整;SOD活性NBP组较模型组细胞明显增加,而MDA活性降低。结论 NBP对Aβ25-35诱导的PC12细胞线粒体损伤有保护作用,其机制可能和NBP抑制MDA活性、降低脂质过氧化、激活SOD清除氧自由基有关。 展开更多
关键词 β淀粉样肽25-35 氧化应激 丁苯酞 pc-12细胞
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兖州卷柏的肽类化学成分及对低氧/复氧诱导的PC-12细胞损伤的保护作用 被引量：10
5
作者 龙红萍 李福双 +7 位作者 杨中保 徐康平 李静 赵兰芳 喻凯 谭蕾红 彭军 谭桂山 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期947-951,956,共6页
采用聚酰胺、硅胶柱层析、Sephadex LH-20和制备液相等分离方法对卷柏属植物兖州卷柏的化学成分进行分离纯化,根据理化性质和现代波谱技术鉴定了11个化合物：aurantiamide（1）、aurantiamide acetate（2）、Nbenzoyl-L-phenylalaninol... 采用聚酰胺、硅胶柱层析、Sephadex LH-20和制备液相等分离方法对卷柏属植物兖州卷柏的化学成分进行分离纯化,根据理化性质和现代波谱技术鉴定了11个化合物：aurantiamide（1）、aurantiamide acetate（2）、Nbenzoyl-L-phenylalaninol（3）、neoechinulin A（4）、5,7-二羟基色原酮（5）、3-（3-羟基-苯基）-丙酸（6）、3-（3-羟基-苯基）-丙酸甲酯（7）、肉桂酸（8）、（1H-indol-3-yl）oxoacetamide（9）、3-甲醛-1H-吲哚（10）、3-甲酸-1H-吲哚（11）,以上11个化合物首次从该植物中分离得到,且为首次从卷柏属植物中得到。采用Hoechst Staining法评价化合物1~4四个肽在低氧/复氧诱导的PC-12细胞损伤中的保护作用,结果表明4个肽类化合物在低氧复氧诱导的PC-12中表现出较强的抗氧化作用,并具有剂量依赖性,对低氧/复氧诱导的PC-12细胞损伤呈现出一定的保护作用。 展开更多
关键词 兖州卷柏 化学成分 二肽 低氧 复氧 pc-12细胞
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复方海蛇胶囊抗PC-12细胞凋亡研究 被引量：9
6
作者 沈悦娣 张力三 +2 位作者 姚航平 赵光树 陈炜 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期1171-1174,共4页
目的：研究复方海蛇胶囊对β-淀粉样蛋白（Aβ1～42）诱导的PC-12细胞凋亡的影响，探讨复方海蛇胶囊应用于痴呆的治疗机制。方法：采用四氮唑蓝比色法（MTr法）确定复方海蛇胶囊对神经生长因子（NGF）诱导培养PC-12细胞的安全剂量后，... 目的：研究复方海蛇胶囊对β-淀粉样蛋白（Aβ1～42）诱导的PC-12细胞凋亡的影响，探讨复方海蛇胶囊应用于痴呆的治疗机制。方法：采用四氮唑蓝比色法（MTr法）确定复方海蛇胶囊对神经生长因子（NGF）诱导培养PC-12细胞的安全剂量后，加或不加Aβ，分别用MTr法、流式细胞术（FCM术）检测不同质量浓度的复方海蛇胶囊（0．01，0．1，1，5mg·mL^-1）对PC-12细胞凋亡的影响；用蛋白免疫印迹（Western-blot）法分别检测凋亡执行酶caspase-9与caspase-3的活性。结果：复方海蛇胶囊对NGF诱导培养的PC-12细胞的安全剂量为小于10mg·mL^-1。复方海蛇胶囊各剂量组对A卢诱导的PC-12细胞的凋亡具有明显的抑制作用。各组数据（A）分别为：1．75±0．12，0．73±O．35，0．79±O．11，0．83±O．07，1．31±O．07和1．80±0．38，与空白组比较P〈0．01，流式细胞检测中凋亡细胞的百分率降低（1．93±0．41）％，（46．17±4．08）％，（35．35±4．63）％，（28．62±3．81）％，（15．13±3．15）％，（7．84±1．76）％，与空白组比较P〈0．01。另外，复方海蛇胶囊抑制了A口诱导PC-12细胞的caspase-9和caspase-3活性的增高。结论：复方海蛇胶囊可显著抑制A口诱导PC-12细胞的凋亡，其机制可能通过抑制凋亡执行酶caspase-9，caspase-3的活性实现。 展开更多
关键词 复方海蛇胶囊 pc-12细胞 细胞凋亡 CASPASE-9 easpase-3
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PNGF复合材料的神经生长因子缓释性能 被引量：8
7
作者 万志涛 殷义霞 +3 位作者 王永红 严琼姣 袁琳 李世普 《武汉理工大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期19-21,60,共4页
应用自行设计的RGD接枝的聚(羟基乙酸-L-赖氨酸-乳酸),复合聚乳酸、β-磷酸三钙和神经生长因子(NGF)制备神经生长因子缓释材料(PNGF)。在体外应用酶联免疫吸附检测法对NGF的释放量进行检测,并应用PC-12细胞培养法检测NGF活性。结果显示,... 应用自行设计的RGD接枝的聚(羟基乙酸-L-赖氨酸-乳酸),复合聚乳酸、β-磷酸三钙和神经生长因子(NGF)制备神经生长因子缓释材料(PNGF)。在体外应用酶联免疫吸附检测法对NGF的释放量进行检测,并应用PC-12细胞培养法检测NGF活性。结果显示,NGF能够持续释放达到30 d,且保留80%以上的比活性,第26 d释放的NGF依然能够显著提高PC-12细胞在无血清培养液中的存活。 展开更多
关键词 神经生长因子 缓释 ELISA pc-12细胞
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mTOR/Akt/FoxO3信号通路在人参皂苷Rg_1抗PC-12细胞OGD损伤的作用 被引量：9
8
作者 严洁萍 沈浓儿 +3 位作者 叶强 宗永辉 方晴霞 吕良忠 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期1554-1559,共6页
目的:研究人参皂苷Rg_1对PC-12细胞缺氧缺糖(oxygen-glucose deprivation,OGD)损伤的保护作用,并初步探讨与mTOR/Akt调控FoxO3核浆穿梭相关的可能的分子机制。方法:建立OGD损伤PC-12细胞模型,MTT法检测OGD对PC-12细胞存活率。人参皂苷Rg... 目的:研究人参皂苷Rg_1对PC-12细胞缺氧缺糖(oxygen-glucose deprivation,OGD)损伤的保护作用,并初步探讨与mTOR/Akt调控FoxO3核浆穿梭相关的可能的分子机制。方法:建立OGD损伤PC-12细胞模型,MTT法检测OGD对PC-12细胞存活率。人参皂苷Rg_110,20,40μmol·L^(-1)预处理PC-12细胞24 h,加OGD损伤,MTT检测细胞存活率,比色法检测乳酸脱氢酶(LDH)释放、超氧化物歧化酶(SOD)活力和丙二醛(MDA)含量。Western blot法检测mTOR,p-Akt^(ser473),p-Akt^(thr308),Akt,p-FoxO3,细胞核、细胞质FoxO3和总FoxO3蛋白表达。结果:OGD作用4~24 h显著抑制PC-12细胞增殖,呈时间依赖性。Rg_1(20,40μmol·L^(-1))预处理24 h可显著增加细胞存活率,减少LDH释放,增加SOD活力和降低MDA含量。Rg_1可抑制由OGD引起的mTOR,p-Akt^(ser473)表达降低。OGD 6 h可减少FoxO3磷酸化,并促进细胞质FoxO3进入细胞核;预处理Rg_1增加FoxO3磷酸化,促进FoxO3进入细胞质。提示Rg_1可经由调控mTOR/Akt/FoxO3信号通路抑制PC-12细胞损伤。结论:人参皂苷Rg_1可抑制OGD引起PC-12细胞损伤,作用机制可能与激活mTOR/Akt信号通路调控FoxO3核质穿梭密切相关。 展开更多
关键词 pc-12细胞 人参皂苷RG1 AKT磷酸化 MTOR FoxO3 缺氧缺糖
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雷公藤内酯醇抑制脂多糖诱导的PC-12细胞COX-2的表达 被引量：7
9
作者 陈炜 沈悦娣 +1 位作者 姚杭平 赵光树 《中国药学杂志》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第4期274-277,共4页
目的　了解雷公藤内酯醇 (TP)对PC 12细胞增殖和表达环氧化酶 2 (COX 2 )及合成前列腺素E2 (PGE2 )的影响 ,探讨TP应用于痴呆治疗的可能机制。方法　采用神经生长因子 (NGF)诱导培养PC 12细胞 ,用不同浓度的TP(0 ,0 2 8× 10 -6,2 ... 目的　了解雷公藤内酯醇 (TP)对PC 12细胞增殖和表达环氧化酶 2 (COX 2 )及合成前列腺素E2 (PGE2 )的影响 ,探讨TP应用于痴呆治疗的可能机制。方法　采用神经生长因子 (NGF)诱导培养PC 12细胞 ,用不同浓度的TP(0 ,0 2 8× 10 -6,2 8×10 -6,2 8× 10 -6mol·L-1)预处理后 ,加或不加脂多糖 (LPS) ,分别用氚 胸腺嘧啶核苷 (3 H TdR)掺入法、竞争酶联免疫吸附试验(ELISA)、半定量逆转录 聚合酶联反应 (RT PCR)法、细胞酶联免疫法及蛋白免疫印迹 (Western blot)法检测PC 12细胞的增殖活性、细胞培养上清液中PGE2 的水平、细胞COX 2mRNA及蛋白表达水平。同时提取各组细胞蛋白 ,测定其核转录因子 (NF κB)活性。结果　TP对LPS诱导的PC 12细胞的COX 2mRNA ,蛋白表达 [空白对照与不同浓度下分别为 [(0 34± 0 12 )× 10 -6,(1 92± 0 2 6 )× 10 -6,(1 78± 0 32 )× 10 -6,(1 14± 0 2 2 )× 10 -6,(0 4 8± 0 14 )× 10 -6mol·L-1,P <0 0 1]及PGE2 的合成 [分别为 (2 2 8± 0 32 )× 10 -6,(32 86± 6 2 3)× 10 -6,(31 2 8± 5 4 4 )× 10 -6,(18 4 3± 3 92 )× 10 -6,(4 18± 1 79)× 10 -6mol·L-1,P <0 0 1]具有不同程度的抑制作用 ,与TP浓度 (0～ 2 8× 10 -6mol·L-1)呈明显正相关? 展开更多
关键词 雷公藤内酯醇 pc-12细胞 环氧化酶-2 核转录因子
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咸虾花有效部位的化学成分研究 被引量：7
10
作者 梁侨丽 闵知大 《南京中医药大学学报》 CAS CSCD 2008年第3期192-193,共2页
目的分离鉴定斑鸠菊属植物咸虾花中的化学成分,为PC-12细胞生长促进剂的筛选提供样品。方法90%乙醇提取,硅胶柱层析分离,用IR,NMR和MS等方法确定结构。结果从乙酸乙酯萃取部分分得并鉴定了6个化合物,分别为豆甾醇(stigmasterol,VP-1),α... 目的分离鉴定斑鸠菊属植物咸虾花中的化学成分,为PC-12细胞生长促进剂的筛选提供样品。方法90%乙醇提取,硅胶柱层析分离,用IR,NMR和MS等方法确定结构。结果从乙酸乙酯萃取部分分得并鉴定了6个化合物,分别为豆甾醇(stigmasterol,VP-1),α-波甾醇(α-spinasterol,VP-2),豆甾醇-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(stigmasterol-3-O-β-D-glucopy-ranoside,VP-3),正十七烷醇(n-heptadecanol,VP-4),正三十四烷酸(n-tetratriacontanoic acid,VP-5)和正二十三烷酸1-甘油酯(glycerin 1-tricosanoate,VP-6)。结论这些化合物都是首次从咸虾花中分离得到,活性测试表明,它们都不能促进PC-12细胞的增殖。 展开更多
关键词 斑鸠菊属 咸虾花 α-波甾醇 pc-12细胞
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地黄中松果菊苷对皮质酮诱导PC-12细胞凋亡的抑制作用及机制研究 被引量：6
11
作者 王慧慧 卢仁睿 +5 位作者 张莉 李孟 雷鑫源 郑西雨 郑晓珂 冯卫生 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第18期2447-2450,共4页
目的观察松果菊苷对于皮质酮诱导的PC-12细胞损伤的保护作用及机制。方法将PC-12细胞分为6组:正常组,模型组(皮质酮500μmol·L^(-1)),阳性对照组(氟西汀0.3μmol·L^(-1))和低、中、高3个剂量实验组(松果菊苷:5,10,20μmol... 目的观察松果菊苷对于皮质酮诱导的PC-12细胞损伤的保护作用及机制。方法将PC-12细胞分为6组:正常组,模型组(皮质酮500μmol·L^(-1)),阳性对照组(氟西汀0.3μmol·L^(-1))和低、中、高3个剂量实验组(松果菊苷:5,10,20μmol·L^(-1))。24 h后,用噻唑蓝法检测细胞存活率,用流式细胞术检测细胞凋亡率和线粒体膜电位水平,用蛋白质印迹法检测细胞内胱天蛋白酶3(Caspase-3)、剪切的胱天蛋白酶3(Cleaved Caspase-3)、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)和B细胞淋巴瘤-2蛋白相关X蛋白(Bax)的蛋白表达水平。结果正常组、模型组、阳性对照组和低、中、高3个剂量实验组的细胞存活率分别为(100.0±3.1)%,(88.7±1.9)%,(94.3±3.4)%,(101.3±3.1)%,(102.1±1.9)%和(104.3±1.6)%。选择松果菊苷中剂量进行后续实验研究。正常组、模型组、阳性对照组和中剂量实验组的凋亡水平分别为(10.7±0.9)%,(25.5±1.3)%,(17.7±1.7)%和(19.7±0.8)%;这4组的JC-1单体比例分别为(18.7±0.6)%,(52.1±1.4)%,(25.6±0.9)%和(22.6±1.0)%;这4组的Cleaved caspase 3/Caspase 3比值分别为1.01±0.17,1.98±0.29,1.43±0.29和1.34±0.12;这4组的Bax/Bcl-2比值分别为1.23±0.21,3.01±0.81,1.64±0.39和0.91±0.29。上述指标:模型组与正常组比较,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01);阳性对照组和中剂量实验组与模型组比较,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论松果菊苷可能是通过抑制线粒体凋亡信号通路降低凋亡水平来改善皮质酮诱导的PC-12细胞损伤。松果菊苷可能是地黄发挥抗抑郁作用的物质基础之一。 展开更多
关键词 地黄 松果菊苷 pc-12细胞 皮质酮 凋亡
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葛根素对Aβ_(25-35)诱导的PC-12细胞损伤的保护作用 被引量：4
12
作者 聂靖炜 李颖 王瑞涛 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第23期2283-2285,共3页
目的研究葛根素对阿尔茨海默病(AD)的保护作用。方法实验分正常组、模型组、葛根素保护组。体外培养大鼠嗜铬细胞瘤细胞(PC-12),以不同浓度诱导PC-12细胞建立AD的细胞模型,观察葛根素对细胞活力、凋亡、异常磷酸化的tau蛋白的影响。结... 目的研究葛根素对阿尔茨海默病(AD)的保护作用。方法实验分正常组、模型组、葛根素保护组。体外培养大鼠嗜铬细胞瘤细胞(PC-12),以不同浓度诱导PC-12细胞建立AD的细胞模型,观察葛根素对细胞活力、凋亡、异常磷酸化的tau蛋白的影响。结果不同浓度的β淀粉样蛋白25-35(Aβ25-35)作用于PC-12细胞后,选用10μmol/L的Aβ25-35作用于PC-12细胞24h建立AD细胞模型,MTT法检测细胞存活率发现葛根素保护组较模型组明显升高,TUNEL法检测凋亡发现阳性细胞葛根素保护组明显少于模型组,P-tau抗体检测异常磷酸化的tau蛋白发现阳性细胞葛根素保护组明显少于模型组,均具有统计学意义。结论葛根素对AD具有保护作用。 展开更多
关键词 Β淀粉样蛋白 pc-12细胞 阿尔茨海默病 葛根素
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川芎嗪通过干预Bax/Bcl2平衡调控Caspase9途径抑制谷氨酸诱导的PC-12细胞凋亡 被引量：4
13
作者 张春兵 丁兴 詹臻 《河南中医学院学报》 2008年第2期24-27,共4页
目的:通过制作谷氨酸诱导的PC-12细胞损伤模型,进一步探讨川芎嗪影响凋亡的作用机制。方法:应用细胞毒性试验,确定细胞模型中谷氨酸浓度;进而,应用不同浓度的川芎嗪同时处理PC-12细胞,采用荧光燃料Hoechst-33258染色直接观察细胞核的改... 目的:通过制作谷氨酸诱导的PC-12细胞损伤模型,进一步探讨川芎嗪影响凋亡的作用机制。方法:应用细胞毒性试验,确定细胞模型中谷氨酸浓度;进而,应用不同浓度的川芎嗪同时处理PC-12细胞,采用荧光燃料Hoechst-33258染色直接观察细胞核的改变,采用流式细胞术检测细胞凋亡和Caspase-3,Caspase-8和Caspase-9活性,最后应用实时荧光定量RT-PCR检测Bax和Bcl2转录水平。结果:谷氨酸具有细胞毒性,其半数抑制浓度(ID50)是21.72mmol/L;川芎嗪呈剂量依赖性的提高细胞存活率。谷氨酸诱导的PC-12细胞以中晚期凋亡为主,但川芎嗪处理后,PC-12细胞凋亡率显著降低(P<0.05),且以早期凋亡为主。川芎嗪处理谷氨酸细胞模型后,Caspase-8活性未见显著改变(P>0.05),但在1mmol/L和10mmol/L川芎嗪干预组,Caspase-3和Caspase-9活性显著降低,同时伴随Bax/Bcl2比值显著降低(P<0.05)。结论:谷氨酸通过Caspase9而不是Caspase8途经活化Caspase3诱导凋亡;川芎嗪通过干预Bax/Bcl2平衡调控Caspase9途径抑制谷氨酸诱导的PC-12细胞凋亡。 展开更多
关键词 川芎嗪 谷氨酸 pc-12细胞 凋亡 Bax BCL2 Caspase
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罗布麻叶黄酮类化合物的分离提取及对体外皮质酮损伤的保护作用评价 被引量：5
14
作者 吴桂梅 刘春明 +2 位作者 张语迟 郑梅竹 李赛男 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期1012-1015,共4页
目的:应用高速逆流色谱分离提取罗布麻叶中的黄酮类化合物,并对所分离的成分进行定性和定量检测及抗抑郁活性评价。方法:以溶剂配比为乙酸乙酯-乙腈-水-醋酸(5∶0.8∶5∶0.02)作为制备型逆流色谱分离的溶剂系统,并利用高效液相色谱对所... 目的:应用高速逆流色谱分离提取罗布麻叶中的黄酮类化合物,并对所分离的成分进行定性和定量检测及抗抑郁活性评价。方法:以溶剂配比为乙酸乙酯-乙腈-水-醋酸(5∶0.8∶5∶0.02)作为制备型逆流色谱分离的溶剂系统,并利用高效液相色谱对所分离的成分进行定性和定量检测,用pc-12细胞进行抗抑郁活性评价。结果:应用高速逆流色谱技术一次性分离得到4个黄酮类单体化合物,分别为白麻苷、乙酰化金丝桃苷、三叶豆苷和紫云英苷,经高效液相色谱检测其纯度均达到95%,同时得到2个混合物组分,分别为金丝桃苷/异槲皮素组和槲皮素/山柰酚组。罗布麻叶单体黄酮及粗提物均具有抗抑郁活性。结论:应用高速逆流色谱分离单体化合物具有方法简单,方便快捷的特点,所分离的单体化合物抗抑郁活性较强,具备进一步开发的价值,且各单体化合物及组分的抗抑郁活性有一定的规律。 展开更多
关键词 高速逆流色谱 罗布麻叶 pc-12细胞 抗抑郁活性 评价
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瑞马唑仑诱导PC-12细胞炎症因子表达和凋亡 被引量：1
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作者 陈博伦 杨倩 +2 位作者 石华堂 陈新华 李轶聪 《中国医学工程》 2023年第4期36-40,共5页
目的 探讨瑞马唑仑对大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞PC-12炎症因子表达和凋亡的影响。方法 不同浓度的瑞马唑仑(25、50、125、250μmol/L)处理PC-12细胞,并设置对照组,细胞活力检测试剂盒(CCK-8)检测细胞增殖,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测肿... 目的 探讨瑞马唑仑对大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞PC-12炎症因子表达和凋亡的影响。方法 不同浓度的瑞马唑仑(25、50、125、250μmol/L)处理PC-12细胞,并设置对照组,细胞活力检测试剂盒(CCK-8)检测细胞增殖,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测肿瘤坏死因子α (TNF-α)、白细胞介素-6 (IL-6)、白细胞介素-1β (IL-1β)的水平,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测凋亡蛋白Bcl-2和Bax的表达。结果 与对照组相比,瑞马唑仑处理组的细胞增殖能力、Bcl-2蛋白表达水平明显降低(P<0.05),而炎性因子TNF-α、IL-6、IL-1β水平、细胞凋亡率、Bax蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。结论 瑞马唑仑可诱导PC-12细胞的炎症反应,并能通过调节凋亡相关蛋白的表达促进PC-12凋亡。 展开更多
关键词 瑞马唑仑 凋亡 pc-12细胞
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小剂量氯胺酮对吗啡耐受细胞δ阿片受体及NMDA受体2B亚型表达的影响 被引量：5
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作者 张秀宁 文迪 +4 位作者 徐贯杰 孟雁欣 丛斌 赵申明 马春玲 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期70-74,共5页
目的观察小剂量氯胺酮对吗啡耐受褐家鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(PC-12)δ阿片受体-1(DOR-1)和N-甲基-D-天冬氨酸受体2B亚单位(NR2B)表达的影响,探讨氯胺酮防止吗啡耐受的相关机制。方法建立PC-12吗啡耐受细胞模型,以时间分辨荧光免疫分析... 目的观察小剂量氯胺酮对吗啡耐受褐家鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(PC-12)δ阿片受体-1(DOR-1)和N-甲基-D-天冬氨酸受体2B亚单位(NR2B)表达的影响,探讨氯胺酮防止吗啡耐受的相关机制。方法建立PC-12吗啡耐受细胞模型,以时间分辨荧光免疫分析法测定cAMP含量、Re-al-Time PCR技术检测细胞DOR-1和NR2B表达,观察吗啡、氯胺酮及吗啡与氯胺酮联合作用上述指标的变化。结果①10μmol.L-1吗啡作用于PC-12细胞48 h,cAMP含量明显升高,提示成功建立了吗啡耐受细胞模型;②小剂量氯胺酮(0.5μmol.L-1)能防止吗啡耐受发生;③吗啡耐受细胞DOR-1的表达较对照组下降,NR2B的表达较对照组增加。小剂量氯胺酮(0.5μmol.L-1)对DOR-1和NR2B表达无影响,但可逆转吗啡引起的DOR-1表达下调以及NR2B表达上调。结论小剂量氯胺酮可防止吗啡耐受发生,其机制可能与抑制吗啡引起的DOR-1表达下调及NR2B表达上调有关。 展开更多
关键词 吗啡 耐受 氯胺酮 阿片受体 N-甲基-D-天冬氨酸 pc-12细胞
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博尔纳病病毒磷蛋白在PC-12细胞内的稳定表达及对其增殖的影响 被引量：3
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作者 余建萍 徐鸣明 +3 位作者 彭丹 曾志磊 张英英 谢鹏 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期123-127,共5页
【目的】建立博尔纳病病毒磷蛋白在神经源性PC-12细胞内的稳定表达体系,初步探讨博尔纳病病毒磷蛋白对PC-12细胞的生长是否有影响。【方法】培养PC-12细胞,用阳离子脂质体的方法将带有博尔纳病病毒磷蛋白基因的表达质粒转染到细胞内进... 【目的】建立博尔纳病病毒磷蛋白在神经源性PC-12细胞内的稳定表达体系,初步探讨博尔纳病病毒磷蛋白对PC-12细胞的生长是否有影响。【方法】培养PC-12细胞,用阳离子脂质体的方法将带有博尔纳病病毒磷蛋白基因的表达质粒转染到细胞内进行稳定表达,用荧光显微镜和RT-PCR的方法检测细胞内磷蛋白的表达,用MTT方法检测磷蛋白对细胞生长的影响。【结果】转染细胞经培养10代后仍然表达目的蛋白,成功建立稳定表达体系。MTT检测显示博尔纳病病毒磷蛋白对PC-12细胞的生长具有明显的抑制作用,其生长明显滞后,但粘附能力增加。【结论】通过本文建立的体系能在PC-12细胞内稳定表达博尔纳病病毒磷蛋白,该体系可用于进一步深入研究博尔纳病病毒磷蛋白的作用机制,进而为研究博尔纳病病毒持续感染中枢神经系统的机制提供基础。此外本文通过检测细胞的增殖活性发现博尔纳病病毒磷蛋白对PC-12细胞的生长具有明显的抑制作用,可能是博尔纳病病毒持续感染中枢神经系统的重要机制之一。 展开更多
关键词 博尔纳病病毒 磷蛋白 pc-12细胞 增殖
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补骨脂素对H_2O_2诱导PC-12细胞损伤的保护作用 被引量：4
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作者 管宇航 海舰 《现代药物与临床》 CAS 2016年第5期577-581,共5页
目的探讨补骨脂素对H_2O_2诱导PC-12细胞氧化损伤的保护作用,并考察其作用机制。方法 PC-12细胞分为对照组、模型组、Tempol组和补骨脂素组。对照组中未加入补骨脂素和H_2O_2;模型组中加入400μmol/L H_2O_2;Tempol组中加入100μmol/L T... 目的探讨补骨脂素对H_2O_2诱导PC-12细胞氧化损伤的保护作用,并考察其作用机制。方法 PC-12细胞分为对照组、模型组、Tempol组和补骨脂素组。对照组中未加入补骨脂素和H_2O_2;模型组中加入400μmol/L H_2O_2;Tempol组中加入100μmol/L Tempol及400μmol/L H_2O_2;补骨脂素组中加入400μmol/L H_2O_2及1、5、10、20μmol/L补骨脂素。CCK-8法测定PC-12细胞的存活率,考察对PC-12细胞形态的影响,PI/Annexin-V、Hoechst染色检测细胞凋亡率,蛋白质印迹法检测凋亡蛋白表达。结果 5、10、20μmol/L补骨脂素均可以显著提高PC-12细胞内的吸光度值(P<0.01),细胞存活率提高较明显,与模型组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。补骨脂素1、5、10、20μmol/L组凋亡率明显低于模型组(P<0.05),并且随着补骨脂素浓度的增加,PC-12细胞的凋亡率逐渐下降。随着补骨脂素作用时间的增加,各组PC-12细胞凋亡率的增加幅度相近,但明显低于模型组(P<0.05)。随着补骨脂素浓度的增加,对磷酸化Bad、Bcl-XL水平的上调作用越明显。结论补骨脂素对H_2O_2诱导PC-12细胞损伤具有保护作用,其作用机制是通过上调磷酸化Bad和Bcl-XL表达来抑制细胞凋亡。 展开更多
关键词 补骨脂素 pc-12细胞 保护作用 氧化应激 凋亡
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阿里红不同极性萃取物对Aβ_(25-35)诱导PC-12细胞损伤的保护作用 被引量：4
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作者 艾合麦提.图尔贡 帕丽达.阿不力孜 +3 位作者 哈丽旦.阿布力孜 周昱 丛媛媛 米仁沙.牙库甫 《新疆医科大学学报》 CAS 2016年第5期573-577,共5页
目的研究阿里红不同极性萃取物对β-淀粉样蛋白25-35片段(Aβ25-35)诱导大鼠肾上腺嗜络瘤细胞(PC12)损伤的保护作用。方法阿里红不同极性萃取物作用于PC12细胞,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法筛选出对PC12细胞增殖活性最强的萃取物,Aβ25-35诱导... 目的研究阿里红不同极性萃取物对β-淀粉样蛋白25-35片段(Aβ25-35)诱导大鼠肾上腺嗜络瘤细胞(PC12)损伤的保护作用。方法阿里红不同极性萃取物作用于PC12细胞,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法筛选出对PC12细胞增殖活性最强的萃取物,Aβ25-35诱导PC12细胞损伤建立阿尔茨海默病体外模型;将培养的细胞分为5组:正常对照组、模型组(Aβ25-35损伤组)、药物低剂量组(50μg/mL)、药物中剂量组(100μg/mL)、药物高剂量组(200μg/mL)。采用MTT法检测PC12细胞的存活率;AinexinV-FITC/7-AAD双染法流式细胞仪检测细胞凋亡;采用RT-PCR法检测bax和bcl-2基因mRNA的表达水平。结果在阿里红不同极性萃取物中,乙酸乙酯萃取物可促进PC12细胞的增殖,差异具有统计学意义(P<0.05);给予Aβ25-35诱导后PC12细胞存活率降低为(44.73±10.14)%,细胞凋亡率升高(19.6%);而给予阿里红乙酸乙酯萃取物处理后,高剂量组细胞存活率升高(64.36±4.00)%,细胞凋亡率降低(6.1%),阿里红乙酸乙酯萃取物高、中、低剂量组的细胞存活率差异有统计学意义。RTPCR结果表明经Aβ25-35处理后细胞的bax基因表达上调,bcl-2基因表达下调;给予阿里红乙酸乙酯萃取物处理后,bax基因表达水平明显降低,bcl-2基因表达水平明显增高。结论阿里红不同极性萃取物中乙酸乙酯萃取物对Aβ25-35诱导PC-12细胞损伤有保护作用。 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 阿里红 pc-12细胞 Β-淀粉样蛋白
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鞣花酸的抗氧化性及其对PC-12细胞氧化损伤的保护作用研究
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作者 唐玉莲 蒋新元 《中国食品添加剂》 CAS 北大核心 2023年第1期194-201,共8页
通过鞣花酸清除自由基、抑制亚油酸自氧化、还原铁离子(Fe^(3+))能力实验研究其抗氧化活性;以过氧化氢(H2O2)诱导PC-12细胞建立氧化损伤模型,探索鞣花酸对PC-12细胞氧化应激损伤的保护作用,建立鞣花酸抗氧化活性与对细胞氧化应激损伤之... 通过鞣花酸清除自由基、抑制亚油酸自氧化、还原铁离子(Fe^(3+))能力实验研究其抗氧化活性;以过氧化氢(H2O2)诱导PC-12细胞建立氧化损伤模型,探索鞣花酸对PC-12细胞氧化应激损伤的保护作用,建立鞣花酸抗氧化活性与对细胞氧化应激损伤之间的联系。结果表明,鞣花酸对羟基自由基(·OH)、超氧阴离子自由基(·O_(2)^(-))、ABTS^(+)·自由基清除的半抑制浓度分别为92.14、36.70、47.91μg/mL;对亚油酸自氧化的抑制率高达90%;对铁离子具有很强的还原能力。鞣花酸对H2O2诱导的PC-12细胞氧化损伤具有良好的保护作用,且与抗氧化活性之间具有良好的相关系。鞣花酸对细胞氧化损伤的保护作用可能与提高细胞的抗氧化能力有关。 展开更多
关键词 鞣花酸 氧化损伤 pc-12细胞 自由基清除 抗氧化性
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