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结肠特异背根神经节神经元P_2X_3受体在大鼠内脏高敏感性中的作用 被引量:4
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作者 袁莉莉 余跃 +2 位作者 蒋楠 陈凤琴 王巧民 《临床消化病杂志》 2015年第6期343-346,共4页
[目的]通过观察内脏高敏感模型大鼠结肠特异背根神经节(DRG)神经元P_2X_3受体表达和电生理特征,探讨P_2X_3受体在大鼠内脏高敏感性中的作用。[方法]10只幼鼠分为2组,经结直肠分别灌注乙酸诱导内脏高敏感模型(内脏高敏感组)、0.9%氯化钠... [目的]通过观察内脏高敏感模型大鼠结肠特异背根神经节(DRG)神经元P_2X_3受体表达和电生理特征,探讨P_2X_3受体在大鼠内脏高敏感性中的作用。[方法]10只幼鼠分为2组,经结直肠分别灌注乙酸诱导内脏高敏感模型(内脏高敏感组)、0.9%氯化钠溶液作对照(对照组);在结肠壁上注射1,1'-二(十八烷基)-3,3,3',3'-四甲基吲哚羰基花青高氯酸盐(DiI)逆行神经标记的DRG神经元为结肠特异DRG神经元,用免疫荧光技术观察其P_2X_3受体表达变化和膜片钳技术进行电生理记录。[结果]内脏高敏感组与对照组大鼠比较,结肠特异DRG神经元上P_2X_3受体免疫阳性率明显增加(45.47%∶32.15%,P<0.01)、结肠特异DRG神经元静息电位和阈电流降低(P<0.05)、动作电位频率增高(P<0.05)。AWR评分值与结肠特异DRG神经元上P_2X_3受体阳性率(r=0.86,P<0.01)、2倍阈电流刺激下动作电位频率(r=0.82,P<0.01)呈正相关,与阈电流值(r=-0.77,P<0.01)呈负相关。[结论]P_2X_3受体在结肠特异DRG神经元上表达上调且DRG神经元兴奋性增加与内脏高敏感的形成有密切关系。 展开更多
关键词 内脏高敏感 背根神经节 膜片钳 p2x嘌呤受体
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P2X嘌呤能受体通道蛋白参与实体瘤进展的研究
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作者 秦宇轩 崔心刚 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期686-694,共9页
腺苷三磷酸(adenosine triphosphate, ATP)是生物体内最普遍存在的供能物质,亦是一种重要的信号分子,肿瘤微环境中ATP的表达水平显著上调。嘌呤能受体离子通道P2X广泛分布多种组织内,微环境中ATP特异性激活P2X受体,调控门控离子通道开放... 腺苷三磷酸(adenosine triphosphate, ATP)是生物体内最普遍存在的供能物质,亦是一种重要的信号分子,肿瘤微环境中ATP的表达水平显著上调。嘌呤能受体离子通道P2X广泛分布多种组织内,微环境中ATP特异性激活P2X受体,调控门控离子通道开放,进而影响下游信号传导参与机体生理活动。而异常嘌呤能信号在肿瘤恶性进展中也发挥着重要作用。本文就P2X受体蛋白家族的结构、表达与功能特点,以及P2X受体家族参与多种实体瘤进展的机制和靶向P2X家族治疗肿瘤的研究进行了综述,以期丰富嘌呤能信号相关基础研究资料,为肿瘤临床治疗靶点的开发提供新思路和策略。 展开更多
关键词 p2x嘌呤受体蛋白 肿瘤微环境 ATp 实体瘤 靶向治疗
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P2X7R在缺血性中风发病中作用的研究进展 被引量:1
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作者 王一心 张枫帆 +2 位作者 乔翔 王金海 杜小正 《中国临床新医学》 2019年第8期922-925,共4页
由于老年人口的持续增加,脑血管病已成为中老年人死亡的主要原因之一。因此,进一步研究缺血性中风发生、发展的机制,积极开展有效的早期预防,是广大医务工作者的共同愿望。该文对P2X嘌呤能受体7(P2X7R)在缺血性中风发病中作用的研究进... 由于老年人口的持续增加,脑血管病已成为中老年人死亡的主要原因之一。因此,进一步研究缺血性中风发生、发展的机制,积极开展有效的早期预防,是广大医务工作者的共同愿望。该文对P2X嘌呤能受体7(P2X7R)在缺血性中风发病中作用的研究进展进行综述,旨在为缺血性中风的治疗提供理论依据。 展开更多
关键词 缺血性中风 p2x嘌呤受体7 发病机理
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生物信息学法分析葛根芩连汤治疗心血管系统疾病的分子机理 被引量:7
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作者 高宁 任朋英 +2 位作者 姜丽丽 葛鹏玲 程玉鹏 《华西药学杂志》 CAS CSCD 2019年第2期187-191,共5页
目的利用生物信息学法探讨葛根芩连汤治疗心血管系统疾病的分子机理。方法利用在线数据库检索葛根芩连汤组方中药所含化合物,采用Pub Chem筛选化合物对应的靶蛋白,将靶蛋白汇总后导入蛋白相互作用分析系统,分析靶蛋白涉及的心血管疾病... 目的利用生物信息学法探讨葛根芩连汤治疗心血管系统疾病的分子机理。方法利用在线数据库检索葛根芩连汤组方中药所含化合物,采用Pub Chem筛选化合物对应的靶蛋白,将靶蛋白汇总后导入蛋白相互作用分析系统,分析靶蛋白涉及的心血管疾病相关分子网络及生物学通路。结果共筛选得到了265个葛根芩连汤靶蛋白,构建得到两个与心血管疾病相关的分子网络,15条涉及心血管疾病的生物学通路,其中,显著性最高的3个生物学通路为Endothelin-1 signaling、Renin-angiotensin signaling、P2Y purigenic receptor signaling pathway。结论葛根芩连汤能够通过多靶点、多途径改善心血管系统病变,分析结果为深入阐明葛根芩连汤治疗心血管疾病的分子机理奠定基础,并提供了进一步研究的参考方向。 展开更多
关键词 葛根芩连汤 生物信息学分析 生物通路 分子网络 动脉粥样硬化 内皮素 肾素-血管紧张素 p2Y嘌呤受体
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P2X嘌呤受体及其调制 被引量:5
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作者 李之望 李超英 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 1999年第4期349-352,共4页
嘌呤受体可分为P1( 腺苷) 和P2(ATP) 受体,在后者的诸亚型中仅P2 X 受体属配体门控离子通道受体超家族成员,P2 Y 受体及其它亚型均为G 蛋白偶联受体。本文介绍有关P2X 嘌呤受体的特性、功能及其调制。
关键词 p2x嘌呤受体 神经元 变构性调制 胞内磷酸化调制
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沉默P2X4R基因对P2X4/NLRP3炎性小体通路介导的BV2小胶质细胞中肿瘤坏死因子α表达的影响 被引量:4
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作者 许文帅 薛莉 +1 位作者 蔡敏 谢安木 《中国临床神经科学》 2019年第1期1-8,共8页
目的探讨使用慢病毒(LV-P2rx4)沉默P2X4嘌呤受体(P2X4R)对活化状态小胶质细胞释放肿瘤坏死因子α(TNF-α)的影响。方法常规建立脂多糖(LPS)和三磷酸腺苷(ATP)双信号诱导的小胶质细胞活化模型,随机分为(1)空白对照组(常规DMEM培养液培养)... 目的探讨使用慢病毒(LV-P2rx4)沉默P2X4嘌呤受体(P2X4R)对活化状态小胶质细胞释放肿瘤坏死因子α(TNF-α)的影响。方法常规建立脂多糖(LPS)和三磷酸腺苷(ATP)双信号诱导的小胶质细胞活化模型,随机分为(1)空白对照组(常规DMEM培养液培养);(2)活化模型组(细胞种板后待密度接近80%后先给予LPS 1μg·m L-1处理6 h后弃原培养液,再加ATP 2 mmol·L-1处理3 h);(3)目的基因阴性对照组(种板1 d,先加入病毒处理12 h后弃培养液,再加入常规培养液,间隔12 h更换培养液);(4)目的基因阴性对照+活化模型组(种板1 d后,先加入病毒处理12 h后弃培养液,再加常规培养液,期间每隔12 h更换培养液,待细胞密度达80%后,予LPS 1μg·m L-1处理6 h后弃原培养液,再加ATP 2 mmol·L-1处理3 h);(5)空载病毒阴性对照组(处理方法同目的基因阴性对照组);(6)空载病毒阴性对照+活化模型组(处理方法同目的基因阴性对照+活化模型组)。各组均n=6。细胞处理后每组取3孔分别提取核糖核酸(RNA)和蛋白,应用Real time PCR和Western blot法分别检测NLRP3、TNF-α的mRNA及蛋白的相对表达。结果与活化模型组和空载病毒阴性对照+活化模型组比较,目的基因阴性对照+活化模型组TNF-αmRNA相对表达水平明显减少(P <0. 001,F=195. 4),TNF-α蛋白相对表达水平显著降低(P <0. 001,F=60. 10)。结论沉默小胶质细胞中的P2X4R基因,可下调细胞中TNF-α表达,继而可能削弱小胶质细胞的炎症反应。 展开更多
关键词 脂多糖 三磷酸腺苷 小胶质细胞 p2x4嘌呤受体 NLRp3炎症小体 肿瘤坏死因子Α
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P2嘌呤受体在内耳中的分布特性和功能 被引量:3
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作者 常青 龚树生 《国外医学(耳鼻咽喉科学分册)》 2005年第4期204-207,共4页
在听觉系统中,外源性三磷酸腺苷(ATP)除作为耳蜗活性物质外,还可作为神经递质或调质,参与Corti器内感觉毛细胞及支持细胞的各种生理功能,从而产生一系列效应,调节耳蜗听觉生理功能;ATP的这种作用主要是通过P2嘌呤受体介导的信号传导完成... 在听觉系统中,外源性三磷酸腺苷(ATP)除作为耳蜗活性物质外,还可作为神经递质或调质,参与Corti器内感觉毛细胞及支持细胞的各种生理功能,从而产生一系列效应,调节耳蜗听觉生理功能;ATP的这种作用主要是通过P2嘌呤受体介导的信号传导完成的,现就P2嘌呤受体在内耳的分布特点及介导的信号传导在耳蜗听功能中的生物学作用作一综述。 展开更多
关键词 p2嘌呤受体 分布特性 内耳 三磷酸腺苷(ATp) CORTI器 生理功 信号传导 感觉毛细胞 生物学作用 听觉系统 活性物质 神经递质 支持细胞 受体介导 耳蜗 外源性 听功
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炎症性肠病患者P2X7嘌呤受体及肥大细胞类胰蛋白酶表达研究 被引量:2
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作者 王丹丹 杨贝贝 +5 位作者 王许平 高闯 杜晓博 耿丽 张目涵 冯百岁 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2019年第4期439-442,共4页
目的探讨P2X7嘌呤受体及肥大细胞类胰蛋白酶在炎症性肠病(inflammatory bowel disease, IBD)患者肠组织及血清中的表达及临床意义。方法收集2016年12月至2018年3月于郑州大学第二附属医院住院的80例活动期IBD患者的肠组织活检石蜡包埋... 目的探讨P2X7嘌呤受体及肥大细胞类胰蛋白酶在炎症性肠病(inflammatory bowel disease, IBD)患者肠组织及血清中的表达及临床意义。方法收集2016年12月至2018年3月于郑州大学第二附属医院住院的80例活动期IBD患者的肠组织活检石蜡包埋标本、血清样本及粪钙卫蛋白(FC)结果,其中溃疡性结肠炎(UC)患者58例,包括轻度活动性患者15例,中度活动性患者20例,重度活动性患者23例;克罗恩病(CD)患者22例,包括轻度活动性患者7例,中度活动性患者7例,重度活动性患者8例。另外收集40例结直肠癌患者行外科手术切除的正常断端肠组织作为对照,40名健康志愿者的血清样本作为对照。采用免疫组织化学法检测肠组织中P2X7嘌呤受体的表达,ELISA法检测血清类胰蛋白酶的含量。结果轻、中、重度UC组P2X7嘌呤受体的表达均高于对照组(χ~2=7.062,P=0.008;χ~2=18.983,P<0.05;χ~2=32.216,P<0.05),且重度UC组高于轻度UC组(χ~2=7.242,P=0.007)。轻、中、重度CD组P2X7嘌呤受体的表达高于对照组(χ~2=5.223,P=0.022;χ~2=5.223,P=0.022;χ~2=11.161,P=0.001),CD各亚组比较差异无统计学意义(P>0.05)。类胰蛋白酶在各组血清中的表达差异有统计学意义(P<0.001),IBD组高于对照组,且重度IBD组高于轻、中度IBD组。另外,P2X7嘌呤受体与类胰蛋白酶呈显著正相关(UC:r=0.872,P<0.05;CD:r=0.866,P<0.05)。P2X7嘌呤受体与FC呈正相关(r=0.543,P<0.05)。结论 P2X7嘌呤受体可能通过激活肥大细胞增加类胰蛋白酶的表达参与IBD的发生和发展,检测其变化对疾病严重程度的评估具有重要临床意义。 展开更多
关键词 炎症性肠病 p2x7嘌呤受体 肥大细胞 类胰蛋白酶
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P2X4/NLRP3炎性小体通路介导小胶质细胞白细胞介素-1β的释放 被引量:2
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作者 蔡敏 薛莉 +2 位作者 王静 周畅 谢安木 《中国临床神经科学》 2018年第2期126-132,共7页
目的探讨P2X4嘌呤受体和NLRP3炎性小体对炎症反应时小胶质细胞释放白细胞介素-1β(IL-1β)的影响。方法采用脂多糖(LPS)和三磷酸腺苷(ATP)双信号干预建立小胶质细胞激活模型,将处于对数生长期生长分化状态良好的小胶质细胞用于实验,按... 目的探讨P2X4嘌呤受体和NLRP3炎性小体对炎症反应时小胶质细胞释放白细胞介素-1β(IL-1β)的影响。方法采用脂多糖(LPS)和三磷酸腺苷(ATP)双信号干预建立小胶质细胞激活模型,将处于对数生长期生长分化状态良好的小胶质细胞用于实验,按不同干预方法分为8组:正常对照组、ATP组、LPS组、LPS+ATP组、5-BDBD组、ATP+5-BDBD组、LPS+5-BDBD组和LPS+ATP+5-BDBD组。Real time PCR检测各组NLRP3、P2X4 mRNA表达水平;Western blot技术测定半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(caspase-1)蛋白表达水平;酶联免疫吸附法(ELISA)检测上清液中IL-1β释放水平。结果 2 mmol·L^(-1)ATP能够上调小胶质细胞P2X4 mRNA的表达水平,差异有统计学意义(P<0.001);用低浓度(1μg·m L^(-1))LPS初始刺激后,ATP分子能够诱导小胶质细胞中NLRP3 mRNA水平升高(P<0.001)、caspase-1蛋白水平表达上调(P<0.001)、促进IL-1β释放(P<0.01),而P2X4的特异性受体阻断剂5-BDBD抑制上清液中IL-1β水平的上调(P<0.05),差异有统计学意义。结论小胶质细胞中IL-1β的释放有赖于P2X4/NLRP3炎性小体途径。 展开更多
关键词 三磷酸腺苷 p2x4嘌呤受体 NLRp3炎性小体 小胶质细胞 白细胞介素-1Β
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P2X嘌呤受体及其调节
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作者 杨瑞瑞 司军强 王轮 《实用医学进修杂志》 2008年第1期62-64,共3页
P2受体广泛分布于全身多种组织和系统中,根据其分子结构和信号转导机制的不同分为P2X和P2Y受体,现在人们普遍认为P2X是配体门控性阳离子通道,P2Y是G-蛋白耦联受体。最初对P2X受体的研究仅局限在药理学的研究,到10世纪中期相继克隆出... P2受体广泛分布于全身多种组织和系统中,根据其分子结构和信号转导机制的不同分为P2X和P2Y受体,现在人们普遍认为P2X是配体门控性阳离子通道,P2Y是G-蛋白耦联受体。最初对P2X受体的研究仅局限在药理学的研究,到10世纪中期相继克隆出7种P2X受体亚基之后,对它的研究才突飞猛进。本文主要对近年来P2X受体的结构、分布及其调节进行综述。 展开更多
关键词 p2x嘌呤受体 调节 p2x受体 信号转导机制 分子结构 p2Y受体 阳离子通道 p2受体
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局部注射αβme-ATP对大鼠背部皮肤初级传入纤维的兴奋作用 被引量:1
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作者 张琪 赵晏 +3 位作者 田雨灵 郭媛 曹东元 王会生 《第一军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第10期1256-1260,共5页
目的探讨P2X嘌呤受体激动剂αβme-ATP对大鼠背部皮肤感受单位的兴奋和敏化作用.方法在大鼠T9~Ti3脊神经背侧皮支分离细束,进行单纤维电生理学记录,观察相应皮肤感受野注射αβme-ATP(100 μmol/L,10μl)或生理盐水对皮肤感受单位机械... 目的探讨P2X嘌呤受体激动剂αβme-ATP对大鼠背部皮肤感受单位的兴奋和敏化作用.方法在大鼠T9~Ti3脊神经背侧皮支分离细束,进行单纤维电生理学记录,观察相应皮肤感受野注射αβme-ATP(100 μmol/L,10μl)或生理盐水对皮肤感受单位机械阈值和自发放电的影响及时程变化.结果①Aδ和C类纤维的机械阈值分别是(0.384±0.018)和(0.943±0.102)mN,注射αβme-ATP后降低至(0.304±0.013)和(0.659±0.071)mN(P<0.05,P<0.01);Aβ纤维的机械阈值是(0.301±0.019)mN,注射αβme-ATP后为(0.288±0.018)mN(P>0.05).生理盐水对照组注射前后Aβ、Aδ和C类纤维的机械阈值均无显著变化(P>0.05).②注射αβme-ATP后,Aβ、Aδ和C类纤维自发放电频率增加的比例分别为7.7%、66.7%和75.0%,其中Aδ和C类纤维的反应比例显著高于Aβ纤维(P<0.01).生理盐水对照组未见自发放电频率显著增加的单位.③Aδ和C类纤维在注射αβme-ATP过程中(5 min)的平均自发放电数和注射后(5 min)的平均自发放电数与注射前相比均显著增加(P<0.05),但Aβ纤维在注射过程中平均自发放电数和注射后平均自发放电数与注射前相比无显著性差异(P>0.05).另外,还观察了αβme-ATP引起感觉神经自发放电的时程变化,发现αβme-ATP对Aδ和C类初级传入末梢的兴奋作用可见于所观察的整个时段.结论ATP的类似物αβme-ATP对大鼠背部皮肤的Aδ和C类纤维具有兴奋和敏化作用. 展开更多
关键词 αβme-ATp p2x嘌呤受体 外周神经 伤害感受单位 外周痛敏化
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P2X2嘌呤受体缺乏对糖尿病视网膜病变的保护作用
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作者 李晶 曾玉 +3 位作者 黄佳斯 程翔 王刚强 黄德斌 《南昌大学学报(医学版)》 2022年第3期22-28,共7页
目的探讨P2X2嘌呤受体在糖尿病视网膜病变过程中的变化及其缺乏对神经节细胞的保护作用。方法30只野生型(WT)和30只P2X2基因敲除(P2X2-/-)C57/Bl6雄性小鼠分为正常WT组、正常P2X2-/-组、糖尿病WT组和糖尿病P2X2-/-组,每组各15只。WT或P2... 目的探讨P2X2嘌呤受体在糖尿病视网膜病变过程中的变化及其缺乏对神经节细胞的保护作用。方法30只野生型(WT)和30只P2X2基因敲除(P2X2-/-)C57/Bl6雄性小鼠分为正常WT组、正常P2X2-/-组、糖尿病WT组和糖尿病P2X2-/-组,每组各15只。WT或P2X2-/-小鼠通过单次注射链脲佐菌素(160 mg·kg^(-1))诱发糖尿病。分别在血糖诱导前、STZ注射后1和8周,采用定量RT-PCR检测视网膜P2X2 mRNA表达,用免疫组织化学方法检测WT小鼠糖尿病视网膜病变过程中P2X2在视网膜的分布,用兔多克隆抗βⅢ微管蛋白免疫染色视网膜评估正常和糖尿病WT和P2X2-/-小鼠的视网膜神经节细胞(RGC)存活率。结果P2X2主要位于视网膜神经节细胞层(GCL)、内核层(INL)和外核层(ONL);与诱导前相比,正常WT组小鼠在各观察时点视网膜中P2X2 mRNA表达差异无统计学意义(P>0.05)。糖尿病WT组小鼠在STZ注射后1、8周视网膜中P2X2 mRNA表达显著高于诱导前和正常WT组(P<0.001)。糖尿病WT组与糖尿病P2X2-/-组小鼠的视网膜总厚度及外丛状层(OPL)、ONL、内丛状层(IPL)、INL的厚度差异无统计学意义(P>0.05)。兔多克隆抗βⅢ微管蛋白对全视网膜进行免疫染色结果显示,糖尿病显著降低了WT小鼠视网膜中RGC的总数(P<0.05),但不影响P2X2-/-小鼠视网膜中RGC的总数。与糖尿病P2X2-/-组小鼠相比,糖尿病WT组小鼠视网膜中TLR4和IL-1β免疫反应性和视神经小胶质细胞显著增加(P<0.05)。结论P2X2嘌呤受体在糖尿病早期视网膜和视神经炎性损伤中起作用,表明P2X2嘌呤受体可能是一个有吸引力的药物靶点。 展开更多
关键词 p2x2嘌呤受体 糖尿病视网膜病 视网膜神经节细胞 动物 实验 小鼠
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P2X嘌呤受体与痛觉调制 被引量:1
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作者 耿桂启 张励才 曾因明 《国外医学(麻醉学与复苏分册)》 2004年第2期68-71,共4页
嘌呤受体可分为P1和P2受体,在后者的诸亚型中仅P2X受体属配体门控离子通道受体,P2Y受体及其他亚型均为G蛋白耦联受体。P2X受体与伤害性感受器的分布相一致,并参与不同疼痛的调制。现就P2X受体以及其在不同疼痛状态中的作用作一简要综述。
关键词 p2x嘌呤受体 痛觉调制 ATp 伤害性感受器
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非洲爪蟾卵母细胞内源性及表达的P2型嘌呤受体介导的膜电流记录方法
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作者 冷明 彭碧文 +1 位作者 谢辉 李之望 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期16-18,共3页
目的 记录和区分卵母细胞内源性 P2型嘌呤受体及表达的外源性 P2型嘌呤受体介导的膜电流。方法 应用双电极电压钳技术分别在带滤泡膜及去滤泡膜后注入 RNA并经孵育的卵母细胞记录膜电流。结果 根据所用卵母细胞标本的制备 (是否去滤... 目的 记录和区分卵母细胞内源性 P2型嘌呤受体及表达的外源性 P2型嘌呤受体介导的膜电流。方法 应用双电极电压钳技术分别在带滤泡膜及去滤泡膜后注入 RNA并经孵育的卵母细胞记录膜电流。结果 根据所用卵母细胞标本的制备 (是否去滤泡膜及是否注入 RNA并孵育 )以及电流的形式及幅值 ,可将内源性 P2型嘌呤受体和表达的外源性 P2型嘌呤受体介导的膜电流区分开来。结论 应用以上方法可区分两种不同的三磷酸腺苷 ( adenosinetriphosphate,ATP) 展开更多
关键词 卵母细胞 基因表达 电压钳 p2型嘌呤受体
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三磷腺苷损伤PC12细胞的剂量和时间依赖性观察
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作者 张勇 吴春平 +1 位作者 李娜 李东亮 《新乡医学院学报》 CAS 2012年第7期485-488,共4页
目的探讨细胞外三磷腺苷(ATP)对PC12细胞损伤作用的剂量和时间依赖性特点。方法将对数生长期的PC12细胞分别用0.00、0.03、0.10、0.30、0.50、1.00、2.00、3.00、5.00、7.00和9.00 mmol·L-1ATP处理3 h后,光学显微镜下观察细胞形态... 目的探讨细胞外三磷腺苷(ATP)对PC12细胞损伤作用的剂量和时间依赖性特点。方法将对数生长期的PC12细胞分别用0.00、0.03、0.10、0.30、0.50、1.00、2.00、3.00、5.00、7.00和9.00 mmol·L-1ATP处理3 h后,光学显微镜下观察细胞形态的变化,甲氮甲唑蓝(XTT)比色法检测细胞死亡率,锥虫蓝染色检测细胞存活率。将对数生长期的PC12细胞分别在7.00 mmol·L-1ATP作用0、1、2、3、6、12、24 h时,用XTT比色法检测细胞死亡率。结果 (1)XTT比色法检测结果显示,0.03、0.10、0.30、0.50、1.00和2.00 mmol·L-1ATP组PC12细胞死亡率与0.00 mmol·L-1ATP组比较差异无统计学意义(P>0.05)。随着浓度升高,ATP诱导PC12细胞死亡作用逐渐增强,3.00、5.00、7.00和9.00 mmol·L-1ATP明显增加细胞的死亡率,与0.00 mmol·L-1ATP组比较差异有统计学意义(P<0.05)。(2)锥虫蓝染色检测结果显示,0.03、0.10、0.30、0.50和1.00 mmol·L-1ATP组细胞存活率与0.00 mmol·L-1ATP组比较差异无统计学意义(P>0.05);2.00、3.00、5.00、7.00和9.00 mmol·L-1ATP组细胞存活率与0.00 mmol·L-1ATP组比较差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。(3)XTT法检查7.00 mmol.L-1ATP处理细胞死亡率显示,1、2 h组与0 h组比较差异有统计学意义(P<0.05),3、6、12、24 h组与0 h组比较差异更显著(P<0.01),3、6、12、24 h组之间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 ATP对PC12细胞毒性作用具有剂量和时间依赖性特点。 展开更多
关键词 三磷腺苷 pC12细胞 p2x嘌呤受体
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Inhibition of P2X_7 Receptor by Extracts of Chinese Medicine
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作者 Andreas Spielmann 顾全保 +3 位作者 马春辉 黄成钢 宣利江 Wolfgang Schwarz 《Journal of Acupuncture and Tuina Science》 2008年第5期286-288,共3页
Objective: To investigate the influence of Acorus gramineus (Soland), a crude extract, SCP01, and a purified component, SCP02, and of Rosmarinus officinalis L., X0728 on human mast cells (HMC-1 Cell Line). Method... Objective: To investigate the influence of Acorus gramineus (Soland), a crude extract, SCP01, and a purified component, SCP02, and of Rosmarinus officinalis L., X0728 on human mast cells (HMC-1 Cell Line). Methods: Current-voltage of P2X7 receptors on human mast cell membrane activated by ATP was recorded by the whole-cell patch clamp technique. Results: The current at -100 mV mediated by P2X7 was inhibited by (27.6 ± 2.0) % in the presence of 40 μg/mL SCP01 and by (29.5 ± 2.2) % in the presence of 40 μg/mL SCP02, which was identified as α-asarone. 42 μg/mL of the commercially available α-asarone inhibited the P2X7-mediated current by (52.2 ± 2.0) %. In contrast to SCP01 and SCP02, 40 μg/mL X0728 provoked stimulation of the current by (28.6 ± 2.8) %. All effects were voltage- independent. Conclusion: The inhibition of P2X7 by α-asarone will inhibit intracellular calcium increase and this may account for the inhibition of reported excitotoxic cell death. The pharmacological function of P2X7 stimulation by X0728 needs further investigation. 展开更多
关键词 purinoceptor p2x1 Acorus Tatarinowii ASARONE Rosmarinus patch-Clamp Technique
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H_2S对ATP诱导小胶质细胞活化的影响
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作者 王娇娇 马洁 +3 位作者 李超堃 李璐 宋景贵 李东亮 《神经解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2017年第5期543-548,共6页
目的:研究硫化氢(hydrogen sulfide,H_2S)对三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)诱导大鼠小胶质细胞炎性因子释放的调节,并探讨小胶质细胞条件培养基对神经元样细胞凋亡的影响。方法:选定的大鼠小胶质细胞随机分4组:(1)正常对照组:... 目的:研究硫化氢(hydrogen sulfide,H_2S)对三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)诱导大鼠小胶质细胞炎性因子释放的调节,并探讨小胶质细胞条件培养基对神经元样细胞凋亡的影响。方法:选定的大鼠小胶质细胞随机分4组:(1)正常对照组:常规培养;(2)ATP组:细胞接种24 h后用ATP处理;(3)Na HS(sodium hydrosulfide,H_2S供体)+ATP组:ATP处理前用Na HS预孵育30 min,且Na HS始终存在于反应体系中;(4)KN-62(异喹啉衍生物,嘌呤受体拮抗剂)+ATP组:ATP处理前用KN-62预孵育30 min。用ELISA检测各组细胞上清液中TNF-α、IL-6的变化,用Western Blot检测各组丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)P38和JNK表达水平。用人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)研究条件培养基对神经元的影响,其方法与上述大鼠小胶质细胞处理相同。用倒置显微镜观察SH-SY5Y细胞形态变化及凋亡情况,用MTT法检测各组细胞活力。结果:当ATP浓度3 mmol/L时,大鼠小胶质细胞释放TNF-α和IL-6水平增加(P<0.05),同时上调大鼠小胶质细胞p-P38、p-JNK蛋白表达水平(P<0.05)。当ATP浓度5 mmol/L时,小胶质细胞活化后的条件培养基可以使SH-SY5Y细胞形态发生改变,其细胞活力降低(P<0.05)。ATP引起的上述变化可以通过Na HS预处理而逆转(P<0.05),其作用与P2X7R阻断剂KN-62相类似。结论:H_2S可下调被ATP诱导的p-P38和pJNK MAPK蛋白表达,减少TNF-α和IL-6等炎性因子的释放,从而对神经元产生保护作用。 展开更多
关键词 硫化氢 三磷酸腺苷 p2x7嘌呤受体 丝裂原活化蛋白激酶
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P2嘌呤受体和细胞信号转导 被引量:5
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作者 谢金燕 梁尚栋 《生物物理学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期749-756,共8页
细胞外的嘌呤(腺苷、一磷酸腺苷、二磷酸腺苷、三磷酸腺苷)和嘧啶是重要的信号分子,通过作用于细胞表面特定的嘌呤和嘧啶受体,发挥着它们的作用。细胞外核苷酸类P2嘌呤受体是比较复杂的受体家族之一,主要以两种形式存在:配体门控离子通... 细胞外的嘌呤(腺苷、一磷酸腺苷、二磷酸腺苷、三磷酸腺苷)和嘧啶是重要的信号分子,通过作用于细胞表面特定的嘌呤和嘧啶受体,发挥着它们的作用。细胞外核苷酸类P2嘌呤受体是比较复杂的受体家族之一,主要以两种形式存在:配体门控离子通道型(P2X)和G蛋白偶联代谢型(P2Y)。P2X受体与细胞信号转导之间的关系相对简单,而P2Y受体则较为复杂。本文就P2嘌呤受体介导和调节细胞内信号转导的机制进行综述。 展开更多
关键词 p2嘌呤受体 p2x受体 p2Y受体 细胞信号转导
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MEK-MAPK信号通路在P2Y嘌呤受体活化对人前列腺癌细胞效应中的作用 被引量:5
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作者 陈玲 方伟岗 +1 位作者 衡万杰 由江峰 《中华病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期146-150,共5页
目的 探讨细胞外信号调节激酶(ERK1/2)及p38通路在P2Y嘌呤受体活化对前列腺癌细胞产生的生物学效应中所起的作用。方法 脂质体法将负显性MAPK激酶1(KA-MEK1)转染高转移性前列腺癌1E8细胞;Western印迹法检测ERK1/2活化水平;应用细胞计数... 目的 探讨细胞外信号调节激酶(ERK1/2)及p38通路在P2Y嘌呤受体活化对前列腺癌细胞产生的生物学效应中所起的作用。方法 脂质体法将负显性MAPK激酶1(KA-MEK1)转染高转移性前列腺癌1E8细胞;Western印迹法检测ERK1/2活化水平;应用细胞计数、软琼脂集落形成实验、体外侵袭实验检测ERK1/2及p38通路在P2Y嘌呤受体活化对前列腺癌细胞生长、集落形成、体外侵袭效应中的作用;用流式细胞术检测ATP对凋亡的影响。结果 转染KA-MEK1抑制了细胞的ERK1/2活性。常规培养6 d时,KA-MEK1细胞的活细胞数比对照组细胞减少了约71%;以100μmoL/L ATP连续刺激6 d,KA-MEK1细胞的生长被进一步抑制17.2%;用10μmoL/L p38抑制剂SB203580预处理细胞,可以封闭ATP所诱导的额外生长抑制效应。说明持续P2Y受体活化可抑制前列腺癌细胞生长,ERK1/2和p38通路均在其中起作用。细胞凋亡并非ATP生长抑制作用的主要机制。在软琼脂集落形成实验中,KA-MEK1细胞比对照组细胞形成的集落小,而且数目减少了约75%;在抑制了ERK1/2活性后,以ATP预处理并不显著改变细胞的集落形成能力;进一步在抑制了ERK1/2活性的基础上,以SB203580处理细胞,对细胞集落形成能力也无明显影响。说明在影响癌细胞集落形成方面,主要是ERK1/2通路起作用。在体外侵袭实验中,KA- 展开更多
关键词 MEK-MApK信号通路 p2Y嘌呤受体活化 前列腺癌 生物学效应 癌细胞
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离子通道受体P2X4的结构及生物学功能 被引量:1
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作者 陈鸣 吕军 +1 位作者 向正华 焦炳华 《生命的化学》 CAS CSCD 2004年第5期403-405,共3页
P2X4受体是P2X受体家族的成员。目前 ,已从人、大鼠、小鼠、鸡胚和非洲爪蟾的组织中获得了全长cDNA。P2X4受体分布广泛 ,在被ATP及其同系物激活后 ,引起细胞内钙离子浓度显著升高 ,将信号传递给下游的信号分子。
关键词 p2嘌呤受体 p2x4受体 基因结构 蛋白质结构 生物学功
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