二硫键的形成与蛋白质的氧化折叠 被引量：15

1

作者 许成钢 范晓军 +1 位作者 付月君 梁爱华 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第S1期259-264,共6页

二硫键在稳定蛋白质构象和保持蛋白质活性方面起重要作用,但是天然二硫键的形成是许多蛋白正确折叠中的限速步骤。随着对二硫键异构酶和折叠中间体研究的深入,富含二硫键蛋白的折叠机制逐渐为人们所认识。本文着重从体内二硫键的形成和... 二硫键在稳定蛋白质构象和保持蛋白质活性方面起重要作用,但是天然二硫键的形成是许多蛋白正确折叠中的限速步骤。随着对二硫键异构酶和折叠中间体研究的深入,富含二硫键蛋白的折叠机制逐渐为人们所认识。本文着重从体内二硫键的形成和体外蛋白质的氧化折叠两个方面对二硫键蛋白的折叠机制及其在基因工程中的实践应用等做一综述,对深入研究提高富合二硫键的重组活性蛋白质的产率起重要指导意义。 展开更多

关键词 二硫键 二硫键形成相关蛋白(Dsb蛋白) 二硫键异构酶 氧化折叠

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芋螺毒素ImI的化学合成及其杀虫活性研究 被引量：9

2

作者 吴小英 安婷婷 高炳淼 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2018年第12期2203-2206,2179,共5页

为研究芋螺毒素Im I的杀虫活性,本研究采用化学方法合成芋螺毒素线性肽,经氧化折叠后质谱鉴定获得芋螺毒素Im I,采用MTT法和昆虫注射法研究其杀虫活性。结果表明采用化学合成法可以成功合成芋螺毒素线性肽,经氧化折叠后质谱鉴定形成2个... 为研究芋螺毒素Im I的杀虫活性,本研究采用化学方法合成芋螺毒素线性肽,经氧化折叠后质谱鉴定获得芋螺毒素Im I,采用MTT法和昆虫注射法研究其杀虫活性。结果表明采用化学合成法可以成功合成芋螺毒素线性肽,经氧化折叠后质谱鉴定形成2个二硫键;活性实验表明芋螺毒素Im I具有抑制昆虫细胞sf9生长的活性,半数有效量为0. 13 n M;对黄粉虫具有杀虫活性,半数致死剂量为0. 11μg/mg。通过化学合成法可以有效合成芋螺毒素Im I,其具有良好的杀虫活性,可为研发新型多肽类生物杀虫剂奠定基础。 展开更多

关键词 芋螺毒素 化学合成 氧化折叠 杀虫活性

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芋螺毒素G1.9的氧化折叠及活性

3

作者 黄翠燕 廖燕玲 高炳淼 《广东海洋大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期67-71,共5页

【目的】通过合成芋螺毒素线性肽G1.9并优化氧化折叠体系,测试其对昆虫细胞毒性,为新型多肽类杀虫剂的设计提供依据。【方法】采用固相多肽合成法(SPPS)制备含4个半胱氨酸的芋螺毒素线性肽G1.9并优化氧化折叠体系,采用一罐法氧化芋螺毒... 【目的】通过合成芋螺毒素线性肽G1.9并优化氧化折叠体系,测试其对昆虫细胞毒性,为新型多肽类杀虫剂的设计提供依据。【方法】采用固相多肽合成法(SPPS)制备含4个半胱氨酸的芋螺毒素线性肽G1.9并优化氧化折叠体系,采用一罐法氧化芋螺毒素G1.9并验证其生物活性。【结果与结论】采用SPPS法成功地合成了线性肽G1.9,优化获得芋螺毒素G1.9-G型异构体的最佳氧化折叠体系是在0.1 mol/L碳酸氢铵缓冲液(pH 8.0)中氧化36 h。MTT法实验表明G1.9-G能显著抑制昆虫细胞sf9的生长,为后续研究开发新型、安全和高效的多肽类生物杀虫剂奠定基础。 展开更多

关键词 芋螺毒素 固相多肽合成法 氧化折叠 活性

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富含二硫键的小分子肽合成研究进展 被引量：2

4

作者 蒋辉 钟明鼐 +1 位作者 陈冀胜 苗振伟 《有机化学》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1999年第3期214-223,共10页

综述了目前多肽合成领域构建2～3个二硫键的策略和对二硫键排列方式给予定位的方法。

关键词 肽 合成 多肽合成 二硫键形成 氧化折叠 酶解

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蜈蚣毒素多肽RhTx的高效化学合成及复性折叠研究 被引量：3

5

作者 王金艳 董黎颖 +6 位作者 刘雅妮 陈西同 马艳楠 尹昊 杜姗姗 齐昀坤 王克威 《有机化学》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2021年第7期2800-2809,共10页

二硫键的氧化折叠是合成二硫键构象锁定多肽的关键步骤.前人发展的二硫键氧化折叠策略主要有一次氧化折叠、多次氧化折叠和一锅法氧化折叠.目前对三种策略复性效率和收率等的比较性研究较少.分别采用三种氧化折叠策略制备目标蜈蚣毒素多... 二硫键的氧化折叠是合成二硫键构象锁定多肽的关键步骤.前人发展的二硫键氧化折叠策略主要有一次氧化折叠、多次氧化折叠和一锅法氧化折叠.目前对三种策略复性效率和收率等的比较性研究较少.分别采用三种氧化折叠策略制备目标蜈蚣毒素多肽RhTx.结果表明,两次氧化折叠策略的分离收率高于一次和一锅法氧化折叠策略,一锅法氧化折叠策略可能会导致较大比例的错误折叠.探索了数十毫克量级RhTx的高效制备方法,为进一步探索RhTx靶向TRPV1的结构机制等研究提供了工具分子.此外,对三种氧化折叠策略进行了系统比较,为二硫键构象锁定多肽的合成提供了参考. 展开更多

关键词 二硫键 二硫键构象锁定多肽 氧化折叠 RhTx 固相合成 巯基保护基

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基于DIC/Oxyma的蜘蛛毒素多肽GsMTx4的高效合成及活性评价 被引量：2

6

作者 马艳楠 刘雅妮 +7 位作者 王金艳 陈西同 尹昊 迟巧娜 贾世玺 杜姗姗 齐昀坤 王克威 《有机化学》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2022年第2期498-506,共9页

偶联试剂介导酰胺键形成,在固相多肽合成中发挥关键作用.新型DIC(N,N-二异丙基碳二亚胺)/Oxyma(2-肟氰乙酸乙酯)缩合体系具有廉价、操作安全、缩合效率高和抑制消旋等优势,在手动和自动多肽合成中得到广泛应用.但是,DIC/Oxyma缩合体系... 偶联试剂介导酰胺键形成,在固相多肽合成中发挥关键作用.新型DIC(N,N-二异丙基碳二亚胺)/Oxyma(2-肟氰乙酸乙酯)缩合体系具有廉价、操作安全、缩合效率高和抑制消旋等优势,在手动和自动多肽合成中得到广泛应用.但是,DIC/Oxyma缩合体系的理想反应比例和温和反应温度尚有待探索.Piezo通道是一种多功能的机械敏感阳离子通道,与多种遗传性疾病相关,蜘蛛毒素多肽GsMTx4是目前唯一的特异性靶向Piezo通道的抑制剂.本研究探索了DIC/Oxyma缩合体系在温和条件下的最佳反应比例,实现了线性Gs MTx4的高效手动固相合成.通过一次氧化折叠策略构建三对二硫键,得到活性的GsMTx4.利用圆二色谱和膜片钳技术等评价GsMTx4的结构和活性.本工作建立了基于DIC/Oxyma缩合体系的快速、稳健和安全的合成方法,为固相多肽合成特别是手动固相多肽合成提供了重要方法参考. 展开更多

关键词 DIC Oxyma 固相多肽合成 二硫键 氧化折叠 GsMTx4 多肽毒素

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海南产桶形芋螺蛋白质二硫键异构酶的鉴定 被引量：3

7

作者 彭超 高炳淼 +4 位作者 郑晓冬 张容鹄 长孙东亭 张本 罗素兰 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期350-355,共6页

蛋白质二硫键异构酶(PDI)是内质网新生肽链折叠中一个重要的折叠酶.在热带药用海洋生物芋螺的毒液中富含PDI酶,该酶对于毒液中芋螺毒素神经肽的体内氧化折叠至关重要.本研究主要采用凝胶过滤层析和制备型Rotofor液相等电聚焦电泳等多种... 蛋白质二硫键异构酶(PDI)是内质网新生肽链折叠中一个重要的折叠酶.在热带药用海洋生物芋螺的毒液中富含PDI酶,该酶对于毒液中芋螺毒素神经肽的体内氧化折叠至关重要.本研究主要采用凝胶过滤层析和制备型Rotofor液相等电聚焦电泳等多种方法,从海南产桶形芋螺(Conus betulinusLinnaeus)毒管中分离纯化天然的PDI酶蛋白,经电泳和MALDI-TOF MS质谱鉴定分析确证获得了高纯度的桶形芋螺PDI酶,建立了天然芋螺PDI酶分离纯化的技术方法.以芋螺毒素线性肽K412为底物进行了PDI酶活性鉴定.结果表明,该分离纯化的PDI酶能够促进K412的氧化折叠.由于芋螺毒素的氧化折叠非常复杂,且氧化折叠后具有正确二硫键连接方式的芋螺毒素才具有各种药理活性,因此,本研究结果为后续PDI酶在种类繁多的芋螺毒素氧化折叠中的应用及其作用机制研究提供了重要的物质基础. 展开更多

关键词 蛋白质二硫键异构酶 芋螺毒素 氧化折叠 凝胶过滤层析 等电聚焦电泳

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α-芋螺毒素MIA和MIB特异性阻断肌肉型乙酰胆碱受体研究 被引量：2

8

作者 吴茜茜 王柳珺 +3 位作者 朱晓鹏 长孙东亭 吴勇 罗素兰 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第3期724-730,共7页

α-芋螺毒素是从海洋软体动物芋螺毒液中发现的多肽类毒素,能够特异作用于各种不同亚型烟碱型乙酰胆碱受体(nAChRs)。nAChRs在调节神经递质释放、细胞兴奋性等方面发挥重要生理功能。因为nAChRs功能异常与多种疾病密切相关,所以α-芋螺... α-芋螺毒素是从海洋软体动物芋螺毒液中发现的多肽类毒素,能够特异作用于各种不同亚型烟碱型乙酰胆碱受体(nAChRs)。nAChRs在调节神经递质释放、细胞兴奋性等方面发挥重要生理功能。因为nAChRs功能异常与多种疾病密切相关,所以α-芋螺毒素可以开发为研究nAChRs的分子探针或直接作为先导药物进行开发。前期,研究人员从幻芋螺中发现的4种α-3/5型芋螺毒素MI、MIA、MIB和MIC,但MIA和MIB对不同亚型的nAChRs阻断活性及选择性还没有深入研究,本研究通过9-芴甲氧羰基(Fmoc)固相法合成了α-芋螺毒素MI、MIA、MIB和MIC,并利用电生理技术对它们抑制不同亚型鼠源nAChRs的活性进行系统测定,结果表明MIA和MIB是肌肉型乙酰胆碱受体拮抗剂,半阻断剂量(IC_(50))分别是14.45和72.78 nmol·L^(-1),稍弱于MI与MIC,且对其他神经型nAChRs阻断活性微弱。分子对接研究显示, MIA和MIB与肌肉型nAChRs作用机制类似, N-端氨基酸序列差异是其活性差异的主要原因。本研究表明,芋螺毒素MIA和MIB有潜力发展成为检测肌肉型nAChRs功能以及诊断或治疗相关疾病的工具药物。 展开更多

关键词 幻芋螺 α-芋螺毒素 9-芴甲氧羰基固相合成法 氧化折叠 肌肉型乙酰胆碱受体 分子对接

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一种含两对密集二硫键的模拟肽 被引量：3

9

作者 吴巧玲 刘珠果 +2 位作者 付超 林原斌 戴秋云 《有机化学》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2010年第10期1517-1520,共4页

利用α-芋螺毒素的骨架(CC—C—C)及天然堂皇芋螺毒素的氨基酸组成,设计了一个由11个氨基酸组成的线性短肽NTLCCEGCMCY-COOH.该肽在缓冲溶液中氧化折叠后二硫键只形成一种连接方式[C(1)—C(4),C(2)—C(3)],区别于大部分的α-芋螺毒素的... 利用α-芋螺毒素的骨架(CC—C—C)及天然堂皇芋螺毒素的氨基酸组成,设计了一个由11个氨基酸组成的线性短肽NTLCCEGCMCY-COOH.该肽在缓冲溶液中氧化折叠后二硫键只形成一种连接方式[C(1)—C(4),C(2)—C(3)],区别于大部分的α-芋螺毒素的二硫键连接方式[C(1)—C(3),C(2)—C(4)],且该肽具有镇痛活性.这是目前合成的二硫键最密集的α-芋螺毒素样模拟肽,可作为药物分子设计的模板. 展开更多

关键词 模拟肽 多肽合成 两对二硫键 氧化折叠

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海洋多肽CTx-btg01的制备及其杀虫活性研究 被引量：2

10

作者 黄翠燕 彭超 高炳淼 《毒理学杂志》 CAS CSCD 2020年第6期441-444,453,共5页

目的合成海洋多肽CTx-btg01研究其杀虫活性。方法采用多肽固相合成法(SPPS)合成线性肽CTx-btg01,利用两步法氧化折叠线性肽后质谱鉴定和高效液相色谱(HPLC)纯化,再利用MTT法、昆虫注射法和电生理实验研究其杀虫活性。结果采用SPPS法成... 目的合成海洋多肽CTx-btg01研究其杀虫活性。方法采用多肽固相合成法(SPPS)合成线性肽CTx-btg01,利用两步法氧化折叠线性肽后质谱鉴定和高效液相色谱(HPLC)纯化,再利用MTT法、昆虫注射法和电生理实验研究其杀虫活性。结果采用SPPS法成功地合成了CTx-btg01,其纯度>95%;MTT实验表明CTx-btg01能抑制昆虫细胞sf9的生长,其半数有效量为0.16 nmol/L;昆虫注射法实验表明CTx-btg01能够有效的杀死黄粉虫,半数致死剂量为0.55μg/mg;电生理实验结果表明10μmol/L CTx-btg01对鼠源乙酰胆碱α2β3无阻断活性,对α3β4具有较弱的阻断活性。结论海洋多肽CTx-btg01具有良好的抑制昆虫细胞生长,高效的杀虫活性和较弱的哺乳动物毒性作用,可为研发新型、安全和高效的多肽类生物杀虫剂奠定基础。 展开更多

关键词 海洋多肽 固相合成法 氧化折叠 杀虫活性 电生理

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蝎子毒素多肽WaTx的高效化学合成及氧化折叠研究 被引量：1

11

作者 尹昊 陈西同 +7 位作者 付邢言 马艳楠 徐以梅 张特 梁帅 杜姗姗 齐昀坤 王克威 《化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2022年第4期444-452,共9页

相比于1-羟基-7-氮杂苯并三氮唑(HOAt)、1-羟基苯并三唑(HOBt)等传统偶联试剂,新型多肽偶联试剂2-肟氰乙酸乙酯(Oxyma)具有安全、偶联效率高、消旋率低等优势,在多肽合成特别是微波固相合成中得到广泛应用.但是,不同反应温度(例如28、50... 相比于1-羟基-7-氮杂苯并三氮唑(HOAt)、1-羟基苯并三唑(HOBt)等传统偶联试剂,新型多肽偶联试剂2-肟氰乙酸乙酯(Oxyma)具有安全、偶联效率高、消旋率低等优势,在多肽合成特别是微波固相合成中得到广泛应用.但是,不同反应温度(例如28、50和75℃)对N,N’-二异丙基碳二亚胺(DIC)/Oxyma的偶联效率以及对甲硫氨酸(Met)等易氧化氨基酸的影响尚有待研究.瞬时受体电位锚蛋白1(TRPA1)通道在感受温度、听觉和炎症痛中发挥重要作用.蝎子毒素多肽芥末受体毒素(WaTx)是一种新型、非共价结合的TRPA1特异性激动剂.本研究利用6-氯苯并三氮唑-1,1,3,3-四甲基脲六氟磷酸酯(HCTU)/N,N’-二异丙基乙胺(DIEA)和DIC/Oxyma缩合体系,首次探索了不同温度下线性WaTx的合成效率以及Met残基的氧化情况.通过一次氧化折叠和两次氧化折叠策略,实现了WaTx的体外快速复性折叠,利用圆二色谱和钙荧光检测等技术评价WaTx的结构和活性.本研究建立了WaTx的温和、高效合成以及复性折叠方法,为固相多肽合成特别是手动固相合成WaTx等含有易氧化基团的二硫键构象锁定多肽提供了重要参考. 展开更多

关键词 N N’-二异丙基碳二亚胺(DIC) Oxyma 固相多肽合成 二硫键 氧化折叠 芥末受体毒素(WaTx) 多肽毒素

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虎纹捕鸟蛛毒素IV突变体K27A-HWTX-IV的合成和复性及其生物学活性研究 被引量：1

12

作者 陈再冉 王贤纯 梁宋平 《湖南师范大学自然科学学报》 EI CAS 北大核心 2003年第3期67-72,共6页

用芴甲氧羰基(Fmoc)固相多肽合成的方法在固相多肽合成仪上合成了用丙氨酸代替虎纹捕鸟蛛毒素 IV的第27位的赖氨酸的突变体K27A HWTX IV,通过反相HPLC对不同条件下突变体的氧化复性结果进行监测,摸索出其最佳氧化复性条件为:0.1mol LTri... 用芴甲氧羰基(Fmoc)固相多肽合成的方法在固相多肽合成仪上合成了用丙氨酸代替虎纹捕鸟蛛毒素 IV的第27位的赖氨酸的突变体K27A HWTX IV,通过反相HPLC对不同条件下突变体的氧化复性结果进行监测,摸索出其最佳氧化复性条件为:0.1mol LTris HCl,pH8.0,GSH1mmol LGSSG0.1mmol L的复性缓冲液,样品浓度为0.1mg mL.复性产物经HPLC纯化并用基质辅助激光解吸飞行时间质谱法进行鉴定,相对分子质量为4050.63Da.生物学活性实验小鼠离体膈神经 膈肌标本测活实验表明:10μg mL天然HWTX IV阻断小鼠离体膈神经 膈肌接头传递时间为16min,10μg mL复性后的突变体阻断小鼠离体膈神经 膈肌接头传递时间为120min,残基的替换导致突变体生物学活性比天然毒素少,证明了第27位的赖氨酸为虎纹捕鸟蛛毒素 IV活性相关的残基. 展开更多

关键词 虎纹捕鸟蛛毒素—Ⅳ 突变体 K27A—HWTX-Ⅳ 固相多肽合成法 氧化复性 生物学活性 肽类毒素

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芋螺毒素B179的化学合成及其氧化折叠的研究 被引量：1

13

作者 安婷婷 吴勇 +1 位作者 长孙东亭 罗素兰 《中国海洋药物》 CAS CSCD 2010年第6期1-6,共6页

目的合成新型芋螺毒素B179,并对其氧化折叠进行研究。方法采用Fmoc固相合成法合成芋螺毒素多肽B179,研究了不同的氧化缓冲液、谷胱甘肽浓度、还原型与氧化型谷胱甘肽的比例、以及温度对氧化折叠的影响。结果采用Fmoc固相合成法可以成功... 目的合成新型芋螺毒素B179,并对其氧化折叠进行研究。方法采用Fmoc固相合成法合成芋螺毒素多肽B179,研究了不同的氧化缓冲液、谷胱甘肽浓度、还原型与氧化型谷胱甘肽的比例、以及温度对氧化折叠的影响。结果采用Fmoc固相合成法可以成功合成线性肽,其氧化折叠产物中主要为含一对二硫键的产物,但还出现了其他副产物,可能是含有分子间二硫键的折叠产物;在高浓度还原型谷胱甘肽环境下,折叠副产物更易形成;随着氧化反应温度升高,折叠反应速率加快。结论固相合成法可以有效合成芋螺毒素B179,且不同因素对其二硫键的形成有着较大的影响,本研究结果可为新型芋螺毒素的合成及其氧化折叠提供借鉴。 展开更多

关键词 固相多肽合成 氧化折叠 芋螺毒素 二硫键

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海南产T-超家族芋螺毒素B8．1T合成及活性分析 被引量：1

14

作者 吴勇 吴潇洒 +1 位作者 长孙东亭 罗素兰 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期184-188,共5页

从海南产桶形芋螺中发现了一个新的T-超家族芋螺毒素B8.1T,其氨基酸序列为DCCPESPPCCH,具有两对二硫键,其连接方式为Cys2-Cys9,Cys3-Cys10。首先采用N-9-芴甲氧羰基(Fmoc)固相合成法合成了B8.1T线性肽,根据采用半胱氨酸保护基团的不同,... 从海南产桶形芋螺中发现了一个新的T-超家族芋螺毒素B8.1T,其氨基酸序列为DCCPESPPCCH,具有两对二硫键,其连接方式为Cys2-Cys9,Cys3-Cys10。首先采用N-9-芴甲氧羰基(Fmoc)固相合成法合成了B8.1T线性肽,根据采用半胱氨酸保护基团的不同,探索了3种不同的氧化方法 :(1)两步氧化法;(2)One-pot方法 ;(3)自由氧化法。同时对提高芋螺毒素氧化折叠效率的条件进行了优化,对B8.1T的生物活性进行了初步的研究。结果表明,3种方法都可合成正确折叠的芋螺毒素B8.1T,其中两步氧化法和One-pot法合成效率高于自由氧化法,自由氧化折叠条件的优化表明,折叠反应添加物等能提高正确折叠产物的积累效率。B8.1T的动物活性试验显示,当对小鼠进行颅内给药时,对其行为活动产生抑制效应,而对肌肉给药的金鱼无明显影响。 展开更多

关键词 T-超家族芋螺毒素 固相多肽合成 氧化折叠 二硫键形成

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芋螺毒素氧化折叠研究进展 被引量：1

15

作者 吴勇 罗素兰 长孙东亭 《生物技术通报》 CAS CSCD 2006年第5期49-53,71,共6页

芋螺毒素(conotoxin,CTX)是当今生物毒素研究的热点之一,已经成为研究药理学和神经科学的重要工具。因此,芋螺毒素如何在体内和体外进行氧化折叠形成天然构象,获得有生物活性的芋螺毒素,越来越为人们所关注。根据当前研究状况,概述了芋... 芋螺毒素(conotoxin,CTX)是当今生物毒素研究的热点之一,已经成为研究药理学和神经科学的重要工具。因此,芋螺毒素如何在体内和体外进行氧化折叠形成天然构象,获得有生物活性的芋螺毒素,越来越为人们所关注。根据当前研究状况,概述了芋螺毒素氧化折叠的一般过程,并总结了二硫键、PDI(二硫键异构酶)、前体肽等在芋螺毒素氧化折叠中所发挥的作用。此外,还就芋螺毒素氧化重折叠的研究前景和方向进行了展望。 展开更多

关键词 芋螺毒素 氧化折叠 二硫键 二硫键异构酶

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谷胱甘肽对α-芋螺毒素LtIA氧化折叠的影响

16

作者 王蕊 吴勇 +1 位作者 罗素兰 长孙东亭 《中国海洋药物》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期17-22,共6页

目的探究氧化型谷胱甘肽(GSSG)与还原型谷胱甘肽(GSH)不同比例对α-芋螺毒素LtIA氧化折叠过程的影响。方法本实验采用Fmoc固相合成法,合成线性α-芋螺毒素LtIA,而后在Tris-HCl缓冲液中氧化折叠,形成含有天然结构的毒素肽。在氧化折叠过... 目的探究氧化型谷胱甘肽(GSSG)与还原型谷胱甘肽(GSH)不同比例对α-芋螺毒素LtIA氧化折叠过程的影响。方法本实验采用Fmoc固相合成法,合成线性α-芋螺毒素LtIA,而后在Tris-HCl缓冲液中氧化折叠,形成含有天然结构的毒素肽。在氧化折叠过程中,我们设置了氧化型谷胱甘肽与还原型谷胱甘肽不同的比例,观察其对LtIA氧化折叠过程的影响。结果氧化型谷胱甘肽对折叠反应影响明显,能够显著提高折叠反应的速率和产率。结论随着还原型谷胱甘肽比例增加,天然肽的折叠产率有一定程度降低。 展开更多

关键词 谷胱甘肽 氧化折叠 α-芋螺毒素LtIA

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α-芋螺毒素LvIA氧化折叠研究

17

作者 朱晓鹏 张章 《广州化工》 CAS 2016年第17期89-90,114,共3页

Lv IA是在海南产疣缟芋螺当中发现的一种新型α-芋螺毒素(α-Conotoxin,α-CTx)。Lv IA是α3β2乙酰胆碱受体(n AChRs)亚型的选择性抑制剂。Lv IA的氨基酸序列为:GCCSHPACNVDHPEIC#(#,C-末端酰胺化),只有通过正确的氧化折叠,Cys1-Cys3,C... Lv IA是在海南产疣缟芋螺当中发现的一种新型α-芋螺毒素(α-Conotoxin,α-CTx)。Lv IA是α3β2乙酰胆碱受体(n AChRs)亚型的选择性抑制剂。Lv IA的氨基酸序列为:GCCSHPACNVDHPEIC#(#,C-末端酰胺化),只有通过正确的氧化折叠,Cys1-Cys3,Cys2-Cys4之间形成二硫键,Lv IA才能形成其活性形式。分别采用一步氧化法和两步氧化法,对Lv IA的氧化折叠进行了研究。结果表明:两步氧化法的效率优于一步氧化法。 展开更多

关键词 α-芋螺毒素 多肽固相合成 氧化折叠

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脯氨酸羟基化促进芋螺毒素lt3a的氧化折叠

18

作者 王磊 曾夏芸 任政华 《中山大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期103-109,共7页

毒素lt3a是从信号芋螺毒管中分离鉴定到的一种天然多肽,天然来源的lt3a的第6位脯氨酸发生了羟基化修饰。为深入研究脯氨酸羟基化的生物学意义,以lt3a中第6位脯氨酸为研究目标,采用固相化学合成的方法分别合成了不含羟基化修饰的多肽lt3... 毒素lt3a是从信号芋螺毒管中分离鉴定到的一种天然多肽,天然来源的lt3a的第6位脯氨酸发生了羟基化修饰。为深入研究脯氨酸羟基化的生物学意义,以lt3a中第6位脯氨酸为研究目标,采用固相化学合成的方法分别合成了不含羟基化修饰的多肽lt3a和具有羟脯氨酸的多肽lt3a[P6O],并对其氧化折叠速率、热稳定性和功能进行了研究,发现在GSSG/GSH溶液中,lt3a[P6O]的氧化折叠速率是lt3a的两倍,但两者的折叠终产率相当,进一步实验表明羟脯氨酸的存在不影响lt3a的热稳定性和对神经干复合动作电位的作用。说明羟脯氨酸促进了lt3a的氧化折叠速率,但对其生物学活性没有显著影响。该研究一方面为芋螺多肽翻译后修饰研究奠定了基础,另一方面对芋螺毒素的结构改造提供理论依据。 展开更多

关键词 脯氨酸羟基化 芋螺毒素 氧化折叠

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芋螺毒素Lv68的一步氧化及其对乙酰胆碱受体的阻断活性

19

作者 李丞 张雨 +3 位作者 罗安 鞠双 符影 罗素兰 《热带生物学报》 2020年第2期125-131,共7页

本研究通过固相合成法合成芋螺毒素Lv68线性肽,研究并优化了其主要异构体的一步氧化折叠条件,并通过电压膜片钳技术对主异构体产物进行了多种乙酰胆碱受体亚型(α3β4,α6β4,α4β2,α9α10,α1β1γδ,α1β1δεnAChRs)的活性测试,... 本研究通过固相合成法合成芋螺毒素Lv68线性肽,研究并优化了其主要异构体的一步氧化折叠条件,并通过电压膜片钳技术对主异构体产物进行了多种乙酰胆碱受体亚型(α3β4,α6β4,α4β2,α9α10,α1β1γδ,α1β1δεnAChRs)的活性测试,旨在为以烟碱型乙酰胆碱受体为靶点的先导药物分子的发现奠定基础,同时为该类其他芋螺毒素的氧化折叠方法、生物活性研究以及深入开发利用提供参考和借鉴。结果表明,芋螺毒素Lv68的一步法氧化折叠最优条件为反应体系组成为0.1 mol·L^−1 Tris-HCl,1 mmol·L^−1 EDTA,GSH/GSSG 1 mmol·L^−1/1 mmol·L^−1,线性肽浓度为50μmol·L^−1,反应时间为2 h,产率高达18.14%,Lv68折叠肽在1μmol·L^−1浓度下对α9α10 nAChR具有较好的阻断作用(阻断率约80%)。本研究明确了芋螺毒素Lv68的一步氧化折叠条件,证实了Lv68对α9α10乙酰胆碱受体亚型具有阻断活性,拓宽了含半胱氨酸框架Ⅲ的M超家族芋螺毒素的作用靶点范围。 展开更多

关键词 芋螺毒素 二硫键 氧化折叠 α9α10乙酰胆碱受体

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含二硫键多肽药物在肿瘤治疗中的研究进展

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作者 高冰 李凌木 +1 位作者 程志刚 郭叶 《药物生物技术》 CAS 2020年第3期269-273,共5页

含二硫键多肽药物是一类多肽序列中至少含有一对二硫键的药物,它们在治疗代谢性、消化系统等疾病中发挥着不可替代的作用。已有研究证实二硫键的存在对于维持多肽的结构和功能起着至关重要的作用。二硫键不仅赋予了多肽多种多样的生物活... 含二硫键多肽药物是一类多肽序列中至少含有一对二硫键的药物,它们在治疗代谢性、消化系统等疾病中发挥着不可替代的作用。已有研究证实二硫键的存在对于维持多肽的结构和功能起着至关重要的作用。二硫键不仅赋予了多肽多种多样的生物活性,而且使多肽结构被锁定具有强的化学稳定性、酶稳定性、热稳定性。目前,已有数十种化学合成含二硫键多肽上市用于治疗肿瘤、糖尿病、中枢性尿崩症、肠道易激综合症等重大疾病,更多的含二硫键多肽也处于临床研究阶段。文章总结了近年来对治疗、诊断肿瘤起到重要作用的5个化学合成含二硫键多肽药物的发现、结构及活性优化、药用机制以及合成方法,希望为今后多肽类肿瘤药物的研发提供理论参考。 展开更多

关键词 含二硫键多肽 氧化折叠 化学合成 多肽药物 肿瘤治疗 生长抑制素

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