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铁蓄积性骨量下降小鼠微小RNA筛选及靶基因预测
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作者 朱和平 周建刚 +3 位作者 蒋建农 张雷炎 王强 徐又佳 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第7期1308-1311,共4页
目的探讨铁蓄积小鼠骨量下降与微小RNA（miRNA，miR）差异性表达的关系。方法12周龄雄性ICR小鼠（n=12）随机分为两组：铁蓄积组（FAC组）及对照组（Con组），分别腹腔注射枸橼酸铁胺（FAC）及等量生理盐水，干预8周后检测血清铁蛋白，... 目的探讨铁蓄积小鼠骨量下降与微小RNA（miRNA，miR）差异性表达的关系。方法12周龄雄性ICR小鼠（n=12）随机分为两组：铁蓄积组（FAC组）及对照组（Con组），分别腹腔注射枸橼酸铁胺（FAC）及等量生理盐水，干预8周后检测血清铁蛋白，微计算机断层扫描技术（Micro-CT）检测小鼠股骨骨量，并分析相关骨结构参数。小鼠全血分离自细胞提取RNA，进行Taqman miRNA芯片检测表达谱差异，实时荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）检测验证差异miRNA。利用Targetscan及miRDB数据库预测差异miRNA的下游靶基因，并对预测的下游靶基因进行生物信息学分析，包括细胞成分、生物过程、分子功能和京都基因和基因组百科全书（KEGG）通路分析。结果FAC组干预8周后，血清铁蛋白[（218．2±29．5）μg/L]相较于对照组[（30．6±9．9）μg/L]明显升高（P=0．000）。股骨三维重建示铁蓄积小鼠骨质结构破坏，骨量、骨小梁厚度（Tb．Th）及骨体积分数（BV／TV）显著下降（P=0．001、0．005、0．021），而骨小梁间隙（Th．Sp）升高（P=0．000）。miRNA芯片结果：初步筛选出20个miRNA表达上调：mmu-miR-29b-3p、mmu-miR-324-3p、mmu-miR-133a-5p、mmu-miR-214-5p、mmu-miR-22-3p、mmu-miR-34a-5p、mmu-miR-31-5p，mmu-miR-143-5p，mmu-miR-423-3p、mmu-miR--223、mmu-miR-155、mmu-miR-106a、mmu-miR-2861、mmu-miR-148a、mmu-miR-96、mmu-miR-449a-5p，mmu-miR-423-5p、mmu-miR-204-5p、mmu-miR-211、mmu-miR-23b及7个miRNA表达下调：mmu-miR-18a．3p、mmu-miR-223-3p、mmu-miR-199a-5p、mmu-miR-196a-5p、mmu-miR-30c-5p、mmu-miR-15b、mmu-miR-130b。其中mmu-miR-423-5p表达差异最为显著，q-PCR验证结果显示miR-423-5p的表达趋势与测序结果一致。Targetsean和miRDB预测并筛选miR-423-5p下游靶基因共91个。生物信息学分析表明miR-423-5p的靶基因在磷脂酰肌醇3激酶（P13K）-蛋白激酶B（Akt）、Rap1、Ras及丝裂原活化蛋白激 展开更多
关键词 铁蓄积 骨质疏松 微小RNA
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