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他汀类药物对高磷介导血管平滑肌细胞成骨细胞转分化和钙化的影响 被引量:1
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作者 郑曼韬 薛骏 +2 位作者 游怀舟 包福祥 周士铿 《中国血液净化》 2008年第2期81-84,共4页
目的探讨他汀类药物对高磷介导血管平滑肌细胞成骨细胞转分化和钙化的影响。方法将体外培养的人主动脉平滑肌细胞(HASMC)分成对照组(常规Medium 231培养基)、正常磷浓度组(Pi1.5mmol/L)和高磷组(Pi2.5mmmol/L)。Real-time PCR测定干预72... 目的探讨他汀类药物对高磷介导血管平滑肌细胞成骨细胞转分化和钙化的影响。方法将体外培养的人主动脉平滑肌细胞(HASMC)分成对照组(常规Medium 231培养基)、正常磷浓度组(Pi1.5mmol/L)和高磷组(Pi2.5mmmol/L)。Real-time PCR测定干预72h后细胞的核结合因子α(cbf α)和骨桥蛋白(OPN)水平,测定干预14d后上清液的钙浓度。HASMC在浓度为0.1umol/L的阿托伐他汀和2.5mmol/L的Pi培养基中共同孵育14d后,检测HASMC的钙含量。结果培养72h后,cbf-α在Pi 2.5mmol/L组的mRNA表达明显高于对照组[(50.02±0.38)vs(1.02±0.35),P<0.001],而Pi 1.5mmol/L组与对照组无明显差别[(1.07±0.15)vs(1.02±0.35),P>0.05]。Pi 2.5mmol/L组的OPN表达亦明显高于对照组[(14.62±0.35)vs(1.05±0.16)],而Pi 1.5mmol/L组与对照组无明显差别[(0.99±0.10)vs(1.05±0.16)]。高磷组钙含量明显高于对照组[(115±2.43)vs(4.08±0.32),P<0.001],而Pi 1.5mmol/L组与对照组相比无明显变化[(5.01±0.21)vs(4.08±0.32),P>0.05]。阿托伐他汀能使高磷诱导HASMC的钙沉积明显减少[(115±2.43)vs(58±2.65)ug/mg蛋白,P<0.01]。结论高磷作用能明显增加HASMC的cbfα-1的表达,明显增加HASMC成骨细胞标志性蛋白OPN的表达,使HASMC向成骨细胞转分化,进而促进HASMC钙化;阿托伐他汀能抑制高磷诱导的HASMC的钙化作用。 展开更多
关键词 高磷 阿托伐他汀 人主动脉平滑肌细胞 成骨细胞 转分化 钙化
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特异性阻抑DKK-1对小鼠脂肪细胞向成骨细胞转分化的影响研究 被引量:6
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作者 谢小伟 康鹏德 +4 位作者 裴福兴 杨静 沈彬 刘忠堂 周宗科 《中国矫形外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期695-700,共6页
[目的]研究特异性阻抑Wnt信号通路抑制因子DKK-1对脂肪细胞向成骨细胞的转分化的影响,以进一步探讨激素性股骨头坏死的发病机制及其防治。[方法]将小鼠前脂肪细胞3T3~L1诱导分化为脂肪细胞,将分化成功的脂肪细胞分为两组:对照组在DMEM... [目的]研究特异性阻抑Wnt信号通路抑制因子DKK-1对脂肪细胞向成骨细胞的转分化的影响,以进一步探讨激素性股骨头坏死的发病机制及其防治。[方法]将小鼠前脂肪细胞3T3~L1诱导分化为脂肪细胞,将分化成功的脂肪细胞分为两组:对照组在DMEM(H)培养基培养,实验组在DMEM(H)+DKK-1抗体培养基培养。两组细胞培养3周后分别行油红O染色、ALP染色及茜素红钙结节染色;RT-PCR检测PPARγ-2、LPL、ALP、OCN及Runx-2基因mRNA的转录水平;Western-blot检测PPARγ-2、Runx-2的蛋白表达水平。[结果]与对照组相比,加入DKK-1抗体的实验组的细胞形态呈长梭形,胞浆内未见脂滴沉积,有成骨活性表达,有钙结节形成;RT-PCR结果显示实验组成骨因子Runx-2、ALP及OCN基因mRNA的表达显著高于对照组,而成脂因子PPARγ-2及LPL基因mRNA的表达显著低于对照组(P<0.05);Western-blot检测结果显示实验组PPARγ-2蛋白几乎无表达,而成骨转录分化因子Runx-2蛋白的表达则明显增强,与RT-PCR的结果一致。[结论]在一定条件下,DKK-1抗体可以促使脂肪细胞转分化为具有一定成骨活性的成骨细胞,这为防治激素性股骨头坏死提供了新的思路。 展开更多
关键词 DKK-1抗体 脂肪细胞 成骨细胞 转分化 激素性股骨头坏死
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晚期糖基化终末产物诱导大鼠主动脉平滑肌细胞转分化的研究 被引量:4
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作者 刘超 谭若芸 +1 位作者 殷长军 顾民 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期905-907,共3页
目的探讨晚期糖基化终末产物(AGEs)参与肾移植术后动脉粥样硬化形成的机制。方法原代培养SD大鼠主动脉平滑肌细胞;用AGEs或牛血清白蛋白200mg/L作用该细胞不同时程(12h~12d),采用Western blot法和间接免疫荧光法检测eL.平滑肌... 目的探讨晚期糖基化终末产物(AGEs)参与肾移植术后动脉粥样硬化形成的机制。方法原代培养SD大鼠主动脉平滑肌细胞;用AGEs或牛血清白蛋白200mg/L作用该细胞不同时程(12h~12d),采用Western blot法和间接免疫荧光法检测eL.平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、特异性核转录斟子(RUNX2)和骨桥蛋白(OPN)的表达。结果第2~5代VSMCs中α-SMA高度表达;在AGEs作用后α-SMA表达量及阳性细胞数进行性减少;RUNX2及OPN表达进行性升高。Western blot检测α-SMA依次为:1.1170±0.1080、1.1820±0.1313、1.1060±0.0738、0.8360±0.0329、0.7430±0.0504、0.5790±0.0718、0.4600±0.1007、0.2230±0.0658、0.1810±0.0427;OPN依次为:0.0320±0.0019、0.0330±0.0010、0.0380±0.0054、0.0470±0.0077、0.0380±0.0232、0.1520±0.0460、0.2220±0.0536、0.4040±0.0290、0.6730±0.0495;RUNX2依次为:0.3640±0.0477、0.3690±0.0133、0.4840±0.0462、0.5290±0.0452、0.8850±0.0788、1.1500±0.1001、1.3460±0.1216,各组间差异有统计学意义(P〈0.05)。结论AGEs可能通过上调RUNX2表达诱导VSMCs向成骨细胞转分化,进而促进肾移植术后动脉粥样硬化的进展。 展开更多
关键词 肾移植术 动脉粥样硬化 晚期糖基化终末产物 血管平滑肌细胞 成骨细胞 转分化
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微RNA-705对MC3T3-E1细胞成骨分化能力的影响 被引量:2
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作者 杨晓红 杨琨 +1 位作者 廖立 金岩 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期575-580,共6页
目的:观察微RNA(miR)-705对小鼠胚胎成骨细胞前体细胞(MC3T3-E1)成骨分化能力的影响。方法:将转染了miR-705模拟物、抑制物、对照物的Mc3T3-E1细胞加入成骨诱导液,在其成骨诱导7d时采用碱性磷酸酶(ALP)染色检测ALP的活性;在... 目的:观察微RNA(miR)-705对小鼠胚胎成骨细胞前体细胞(MC3T3-E1)成骨分化能力的影响。方法:将转染了miR-705模拟物、抑制物、对照物的Mc3T3-E1细胞加入成骨诱导液,在其成骨诱导7d时采用碱性磷酸酶(ALP)染色检测ALP的活性;在成骨诱导14d时,用RT-PCR和蛋白质印迹技术检测Runt相关转录因子2(Runx2)和骨钙素(OCN)的mRNA及蛋白表达水平;在成骨诱导21d时,以茜素红染色观察钙结节形成情况并作定量分析。结果:成骨诱导7d时,模拟物组ALP活性降低,而抑制物组ALP活性升高(均P〈0.05);成骨诱导14d时,模拟物组Runx2和OCNmRNA及蛋白表达水平较对照物组降低,而抑制物组则相反(均P〈0.05);成骨诱导21d时,模拟物组钙结节最小,结节形成量下降,抑制物纽钙结节较大且形成量较多(均P〈0.05)。结论:miR-705对Mc313-E1细胞成骨分化过程具有抑制作用。 展开更多
关键词 3T3细肜药物作用 成骨细胞/代谢 微RNAs/治疗应用 细胞转分化
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Effects of Nd^(3+) and Sm^(3+) on the proliferation,differentiation and mineralization function of primary osteoblasts in vitro 被引量:1
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作者 ZHANG JinChao SHANG MiQin +3 位作者 ZHANG DaWei LI YaPing SUN Jing CHEN Hang 《Chinese Science Bulletin》 SCIE EI CAS 2010年第23期2505-2511,共7页
A series of experimental methods including 3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2H tetrazolium bromide (MTT) test,alkaline phosphatase (ALP) activity measurement,Oil Red O stain and measurement,mineralized functi... A series of experimental methods including 3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2H tetrazolium bromide (MTT) test,alkaline phosphatase (ALP) activity measurement,Oil Red O stain and measurement,mineralized function expression and quantitive real time RT-PCR (qRT-PCR) were employed to assess the effect of Nd3+ and Sm3+ on the proliferation,differentiation and mineralization function of primary osteoblasts (OBs) in vitro at cell and molecular levels.The experimental results suggest that concentration,culture time and ion species are pivotal factors for switching the biological effects of rare earth ions from toxicity to activity,from damage to protection,or from down-regulation to up-regulation. 展开更多
关键词 成骨细胞 矿化 增殖 体外 分化 PCR检测 作者
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脂肪来源干细胞体外成骨和成脂及成神经的诱导分化研究 被引量:1
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作者 高华 王玉玲 +1 位作者 姚亚妮 杨新玲 《中国全科医学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第14期1568-1571,共4页
目的探讨脂肪组织来源干细胞(adipose stem cell,ADSC)的表面表型及向成骨、成脂和成神经多向分化的生物学特性。方法取SD大鼠的腹股沟、附睾垫和腹膜后脂肪,Ⅰ型胶原酶消化、分离培养ADSC,检测第3代ADSC的CD29、CD44和CD45的表达情况。... 目的探讨脂肪组织来源干细胞(adipose stem cell,ADSC)的表面表型及向成骨、成脂和成神经多向分化的生物学特性。方法取SD大鼠的腹股沟、附睾垫和腹膜后脂肪,Ⅰ型胶原酶消化、分离培养ADSC,检测第3代ADSC的CD29、CD44和CD45的表达情况。将ADSC加入成骨诱导剂,通过茜素红S染色鉴定成骨细胞;成脂诱导剂利用油红O染色鉴定脂肪细胞;神经干培养基诱导,免疫荧光染色鉴定诱导的神经元。结果 ADSC表达CD29(99.07±0.12)%、CD44(95.82±0.68)%和CD45(0.11±0.12)%。其经成骨诱导4周,茜素红S染色显示聚集的细胞团中央形成红色钙化结节,碱性磷酸酶染色可见到细胞的胞质内有紫红色颗粒;成脂诱导1周,油红O染色可见细胞质内有橙红色脂滴;经过神经干培养基诱导6 d后,免疫荧光染色显示诱导的细胞Nestin、NF-200及GFAP阳性表达。结论 ADSC表达间质干细胞的表面表型,体外经诱导培养后可向成骨细胞、脂肪细胞和神经元多向分化,表明ADSC具有干细胞的多向分化潜能。 展开更多
关键词 脂肪来源干细胞 细胞表型 脂细胞 成骨细胞 神经元 细胞转分化
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DyCl_3对原代培养的成骨细胞增殖、分化和矿化功能表达的影响(英文)
7
作者 张金超 杨康宁 +1 位作者 孙静 李亚平 《无机化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2010年第10期1856-1862,共7页
采用MTT法、碱性磷酸酶活性测定、油红O的染色和定量测定、矿化功能的测定以及qRT-PCR等手段在细胞和分子水平上研究了DyCl3对原代培养的成骨细胞增殖、分化和矿化功能的影响。研究结果表明,在测试浓度范围内,DyCl3均抑制成骨细胞增殖... 采用MTT法、碱性磷酸酶活性测定、油红O的染色和定量测定、矿化功能的测定以及qRT-PCR等手段在细胞和分子水平上研究了DyCl3对原代培养的成骨细胞增殖、分化和矿化功能的影响。研究结果表明,在测试浓度范围内,DyCl3均抑制成骨细胞增殖。浓度为1×10-8,1×10-6和1×10-5mol·L-1的DyCl3促进成骨细胞分化。在测试浓度范围内,DyCl3均抑制成骨细胞横向分化为脂肪细胞。浓度为1×10-5mol·L-1的DyCl3促进成骨细胞矿化结节的形成,而浓度为1×10-7mol·L-1和1×10-6mol·L-1的DyCl3抑制成骨细胞矿化结节的形成,进一步降低浓度为1×10-8mol·L-1,它则对成骨细胞矿化功能没有影响。浓度1×10-6mol·L-1的DyCl3显著降低PPAR-γmRNA表达水平,但相同浓度DyCl3则显著上调RUNX-2mRNA表达水平。实验结果提示,DyCl3对体外培养的成骨细胞增殖、分化及矿化功能的影响与浓度和作用时间有关,而且,它们是影响其生物效应从毒性到活性,从损伤到保护,从上调到下调转变的关键因素。这些结果对深入理解稀土离子对骨代谢的影响具有重要的价值。 展开更多
关键词 稀土离子 原代成骨细胞 增殖 分化 成脂横向分化 矿化
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