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利用CRISPR/Cas9技术创建OsIPCS家族基因突变体
1
作者
彭威
廖鹏飞
+3 位作者
阎新
欧阳解秀
李绍波
王鑫
《分子植物育种》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第11期3556-3562,共7页
肌醇磷酸神经酰胺合酶(inositol phosphoryl ceramide synthase,IPCS)是植物鞘脂合成途径中的一种关键酶,在植物生长发育和逆境适应中具有重要作用。本研究在OsIPCS基因外显子区域设计带有PAM序列的靶位点,利用PCR扩增获得OsIPCS基因sg ...
肌醇磷酸神经酰胺合酶(inositol phosphoryl ceramide synthase,IPCS)是植物鞘脂合成途径中的一种关键酶,在植物生长发育和逆境适应中具有重要作用。本研究在OsIPCS基因外显子区域设计带有PAM序列的靶位点,利用PCR扩增获得OsIPCS基因sg RNA表达盒,并成功构建CRISPR/Cas9敲除载体;采用根癌农杆菌介导的遗传转化获得3个OsIPCS基因的T0代CRISPR转基因植株;通过PCR扩增和测序确定突变类型,其中2株不同突变类型的OsIPCS1突变单株,27株不同突变类型的OsIPCS2突变单株,9株不同突变类型的OsIPCS3突变单株,为进一步开展OsIPCS基因功能的研究提供科学依据。
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关键词
水稻
OsIPCS家族基因
CRISPR
载体构建
原文传递
题名
利用CRISPR/Cas9技术创建OsIPCS家族基因突变体
1
作者
彭威
廖鹏飞
阎新
欧阳解秀
李绍波
王鑫
机构
南昌大学生命科学学院江西省分子生物学与基因工程重点实验室
出处
《分子植物育种》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第11期3556-3562,共7页
基金
国家自然科学基金(31560383
31760080)资助
文摘
肌醇磷酸神经酰胺合酶(inositol phosphoryl ceramide synthase,IPCS)是植物鞘脂合成途径中的一种关键酶,在植物生长发育和逆境适应中具有重要作用。本研究在OsIPCS基因外显子区域设计带有PAM序列的靶位点,利用PCR扩增获得OsIPCS基因sg RNA表达盒,并成功构建CRISPR/Cas9敲除载体;采用根癌农杆菌介导的遗传转化获得3个OsIPCS基因的T0代CRISPR转基因植株;通过PCR扩增和测序确定突变类型,其中2株不同突变类型的OsIPCS1突变单株,27株不同突变类型的OsIPCS2突变单株,9株不同突变类型的OsIPCS3突变单株,为进一步开展OsIPCS基因功能的研究提供科学依据。
关键词
水稻
OsIPCS家族基因
CRISPR
载体构建
Keywords
Oryza
sativa
oslpcs
family
genes
CRISPR/Cas9
system
Vector
construction
分类号
Q943.2 [生物学—植物学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
利用CRISPR/Cas9技术创建OsIPCS家族基因突变体
彭威
廖鹏飞
阎新
欧阳解秀
李绍波
王鑫
《分子植物育种》
CAS
CSCD
北大核心
2018
0
原文传递
已选择
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参考文献
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