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水稻rab5B基因在大肠杆菌中的表达、纯化和GTP结合分析
被引量：
3
1
作者
林慧贤
刘筱斌
+1 位作者
梁承邺
刘良式
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2002年第3期434-438,共5页
Rab5B类蛋白因为其编码产物的N端具有特殊结构而被认为是一类特殊的蛋白质 .水稻rab5B基因Osrab5B是这类蛋白质基因在单子叶植物中的首例发现 .将Osrab5B基因的编码序列按正确读码框重组到具有谷胱甘肽硫转移酶 (glutathioneS transfera...
Rab5B类蛋白因为其编码产物的N端具有特殊结构而被认为是一类特殊的蛋白质 .水稻rab5B基因Osrab5B是这类蛋白质基因在单子叶植物中的首例发现 .将Osrab5B基因的编码序列按正确读码框重组到具有谷胱甘肽硫转移酶 (glutathioneS transferase,GST)融合标签的 pGEX 4T1表达载体中 ,转化大肠杆菌 ,获得了稳定表达目标融合蛋白的菌株 ,经GSTrapTM 柱纯化 ,获得了纯化的目标融合蛋白 .GTP结合试验表明 ,在原核细胞中表达出的GST
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关键词
水稻
ra
b
5
b
基因
大肠杆菌
表达
纯化
GTP结合分析
osrab
5
b
小GTP蛋白
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职称材料
水稻小G蛋白OsRab5b的亚细胞定位研究
被引量：
1
2
作者
邵军丽
龙跃生
徐增富
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第11期139-145,共7页
旨在研究水稻Os Rab5b亚细胞定位及第二位甘氨酸在蛋白定位中的作用。利用药物、细胞器标记物和示踪染料处理Os Rab5b-GFP与Os Rab5b(Gly2Ala)-GFP的转基因BY-2细胞,然后用激光共聚焦显微镜观察。结果表明,Os Rab5b-GFP转基因细胞呈现...
旨在研究水稻Os Rab5b亚细胞定位及第二位甘氨酸在蛋白定位中的作用。利用药物、细胞器标记物和示踪染料处理Os Rab5b-GFP与Os Rab5b(Gly2Ala)-GFP的转基因BY-2细胞,然后用激光共聚焦显微镜观察。结果表明,Os Rab5b-GFP转基因细胞呈现出大量的分散点状结构和少量细胞质弥散信号;wortmannin处理可以使Os Rab5b-GFP标记的点状结构膨胀成小的环状结构;采用100μg/m L布雷菲德菌素A(BFA)处理可使Os Rab5b-GFP标记的结构聚集。大部分的Os Rab5b-GFP信号都可以与前液泡区标记蛋白VSRAt-1共定位。在内吞示踪染料FM4-64摄取的第60 min,Os Rab5b-GFP标记的结构大部分被FM4-64标记。突变体Os Rab5b(Gly2Ala)-GFP弥散分布于细胞核和细胞质内,而且不受wortmannin或BFA药物处理的影响。Os Rab5b定位于BY-2细胞的前液泡区,Gly2在蛋白准确定位方面发挥重要作用。
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关键词
osrab
5
b
亚细胞定位
前液泡区
内吞体
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职称材料
题名
水稻rab5B基因在大肠杆菌中的表达、纯化和GTP结合分析
被引量：
3
1
作者
林慧贤
刘筱斌
梁承邺
刘良式
机构
中山大学生物工程研究中心
中国科学院华南植物研究所
出处
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2002年第3期434-438,共5页
基金
国家高技术"863"计划资助项目 (BH 0 1 0 2 0 3 )
中国科学院华南植物研究所所长基金资助项目 (10 0 0 3 12 ) .~~
文摘
Rab5B类蛋白因为其编码产物的N端具有特殊结构而被认为是一类特殊的蛋白质 .水稻rab5B基因Osrab5B是这类蛋白质基因在单子叶植物中的首例发现 .将Osrab5B基因的编码序列按正确读码框重组到具有谷胱甘肽硫转移酶 (glutathioneS transferase,GST)融合标签的 pGEX 4T1表达载体中 ,转化大肠杆菌 ,获得了稳定表达目标融合蛋白的菌株 ,经GSTrapTM 柱纯化 ,获得了纯化的目标融合蛋白 .GTP结合试验表明 ,在原核细胞中表达出的GST
关键词
水稻
ra
b
5
b
基因
大肠杆菌
表达
纯化
GTP结合分析
osrab
5
b
小GTP蛋白
Keywords
osrab
5
b
small GTP-
b
inding protein
GTP-
b
inding assay
分类号
Q943 [生物学—植物学]
Q946.1
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职称材料
题名
水稻小G蛋白OsRab5b的亚细胞定位研究
被引量：
1
2
作者
邵军丽
龙跃生
徐增富
机构
广东医学院公共卫生学院
中山大学基因工程教育部重点实验室有害生物控制与资源利用国家重点实验室
广州医科大学附属第二医院神经科学研究所
中国科学院西双版纳热带植物园热带植物资源可持续利用重点实验室
出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第11期139-145,共7页
基金
国家高技术研究发展计划("863"计划)(2007AA02Z102)
文摘
旨在研究水稻Os Rab5b亚细胞定位及第二位甘氨酸在蛋白定位中的作用。利用药物、细胞器标记物和示踪染料处理Os Rab5b-GFP与Os Rab5b(Gly2Ala)-GFP的转基因BY-2细胞,然后用激光共聚焦显微镜观察。结果表明,Os Rab5b-GFP转基因细胞呈现出大量的分散点状结构和少量细胞质弥散信号;wortmannin处理可以使Os Rab5b-GFP标记的点状结构膨胀成小的环状结构;采用100μg/m L布雷菲德菌素A(BFA)处理可使Os Rab5b-GFP标记的结构聚集。大部分的Os Rab5b-GFP信号都可以与前液泡区标记蛋白VSRAt-1共定位。在内吞示踪染料FM4-64摄取的第60 min,Os Rab5b-GFP标记的结构大部分被FM4-64标记。突变体Os Rab5b(Gly2Ala)-GFP弥散分布于细胞核和细胞质内,而且不受wortmannin或BFA药物处理的影响。Os Rab5b定位于BY-2细胞的前液泡区,Gly2在蛋白准确定位方面发挥重要作用。
关键词
osrab
5
b
亚细胞定位
前液泡区
内吞体
Keywords
osrab
5
b
su
b
cellular localization
prevacuolar compartment（PVC）
endosome
分类号
Q943.2 [生物学—植物学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
水稻rab5B基因在大肠杆菌中的表达、纯化和GTP结合分析
林慧贤
刘筱斌
梁承邺
刘良式
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2002
3
下载PDF
职称材料
2
水稻小G蛋白OsRab5b的亚细胞定位研究
邵军丽
龙跃生
徐增富
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2015
1
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职称材料
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参考文献
引证文献
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