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Nup88通过钙调蛋白调控乳腺癌细胞侵袭能力
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作者 管明丽 孙美涛 +1 位作者 阮华娟 俞利辉 《中国优生与遗传杂志》 2023年第8期1539-1544,共6页
目的 探讨核孔蛋白88kDa(Nup88)基因影响乳腺癌细胞系BT-20细胞侵袭能力的分子机制。方法 敲低Nup88基因后,通过Transwell和划痕实验检测细胞的侵袭能力,通过TMT标记的定量蛋白质组技术,采用流式细胞术检测Nup88敲低细胞的钙离子水平,... 目的 探讨核孔蛋白88kDa(Nup88)基因影响乳腺癌细胞系BT-20细胞侵袭能力的分子机制。方法 敲低Nup88基因后,通过Transwell和划痕实验检测细胞的侵袭能力,通过TMT标记的定量蛋白质组技术,采用流式细胞术检测Nup88敲低细胞的钙离子水平,通过明胶酶谱实验检测Nup88敲低表达后,乳腺癌BT-20细胞分泌基质金属蛋白酶2(MMP2)和MMP9的情况。通过pull-down试验寻找并验证与Nup88存在相互作用的蛋白。结果 敲低Nup88基因表达后,细胞培养48h后,划痕愈合率低于对照组,穿膜细胞数量亦显著低于对照组,BT-20细胞的迁移能力减弱。蛋白质组学分析得到差异蛋白247个,其中Nup88基因敲低细胞株的Nup88蛋白表达水平降低约48%。GO分析表明,敲低Nup88的表达可能影响了钙结合相关蛋白的表达。细胞实验结果表明,细胞中钙离子含量显著降低,分泌MMP2和MMP9的活性显著低于阴性对照组细胞(P<0.05)。Pull-down结果证实Nup88与多个钙结合蛋白存在相互作用,可能通过二硫键与钙结合蛋白39(CAB39)相同作用,共同调控钙离子水平。结论 Nup88可能通过与CAB39结合,调节胞内钙离子含量,调节基质金属蛋白酶的活性,进而影响肿瘤细胞的侵袭能力。 展开更多
关键词 nup88基因 侵袭 乳腺癌 基质金属蛋白酶 钙结合蛋白
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Nup88及其在恶性肿瘤防治中的研究进展
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作者 魏绪磐 周川 +4 位作者 李文娟 张发 梁梦天 吕海迪 周逢海 《现代肿瘤医学》 CAS 2019年第13期2406-2410,共5页
恶性肿瘤在全球范围内的患病率和死亡率正逐年上升。对于恶性肿瘤早期的患者,采用手术切除治疗可取得较好效果,但生活中绝大多数肿瘤患者发现并确诊时已经错过了最佳手术时机。目前对于中晚期患者尚无有效的治疗策略,基因靶向治疗是近... 恶性肿瘤在全球范围内的患病率和死亡率正逐年上升。对于恶性肿瘤早期的患者,采用手术切除治疗可取得较好效果,但生活中绝大多数肿瘤患者发现并确诊时已经错过了最佳手术时机。目前对于中晚期患者尚无有效的治疗策略,基因靶向治疗是近年来肿瘤治疗研究的热点,也为恶性肿瘤治疗提供新的方法。基因靶向治疗的关键在于寻找特异性强的肿瘤基因,核孔蛋白88(nucleoporin88,Nup88)基因具有很好的肿瘤组织特异性,其通过参与细胞核内外物质交流以及细胞有丝分裂过程促进肿瘤进展。本文就目前在基础研究中有关Nup88分子结构、作用机制以及在口腔癌、乳腺癌、胃癌、结直肠癌、子宫颈癌和子宫内膜癌中研究现状进行综述。 展开更多
关键词 恶性肿瘤 基因治疗 靶向治疗 nup88基因
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NUP88基因变化对乳腺癌细胞系BT-20增殖侵袭生物学行为的影响 被引量:4
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作者 管明丽 周韧 +3 位作者 阮华娟 章文韵 胡晓敏 章红姣 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第9期1326-1330,1335,共6页
目的:探讨NUP88基因表达量升高或降低对乳腺癌细胞系BT-20细胞增殖能力、凋亡能力与侵袭能力的影响。方法:构建NUP88重组腺病毒表达载体以及NUP88 RNA干扰腺病毒载体,分别转染乳腺癌BT-20细胞获得NUP88过表达BT-20细胞以及NUP88低表达BT... 目的:探讨NUP88基因表达量升高或降低对乳腺癌细胞系BT-20细胞增殖能力、凋亡能力与侵袭能力的影响。方法:构建NUP88重组腺病毒表达载体以及NUP88 RNA干扰腺病毒载体,分别转染乳腺癌BT-20细胞获得NUP88过表达BT-20细胞以及NUP88低表达BT-20细胞并检测NUP88 mRNA和蛋白表达情况,随后通过CCK-8检测各组BT-20细胞增殖能力,通过流式双染检测各组BT-20细胞凋亡情况及通过Transwell侵袭实验检测各组BT-20细胞侵袭能力,并通过Western blot检测凋亡和侵袭相关蛋白表达变化。结果:成功获得NUP88 mRNA及蛋白高表达和低表达BT-20细胞;NUP88基因过表达导致细胞增殖能力和侵袭细胞数量显著高于正常BT-20细胞水平,而凋亡率则降低(P<0.05);NUP88基因低表达导致细胞增殖能力和侵袭细胞数量显著低于正常BT-20细胞水平,而凋亡率则升高(P<0.05);NUP88基因过表达导致抗凋亡蛋白Bcl-2和黏附蛋白β-catenin水平显著高于正常BT-20细胞水平,而促凋亡蛋白Bax和黏附蛋白E-cadherin显著低于正常BT-20细胞水平(P<0.05);NUP88基因低表达导致Bcl-2和β-catenin水平显著低于正常BT-20细胞水平,而Bax和E-cadherin显著高于正常BT-20细胞水平(P<0.05)。结论:NUP88基因通过调控凋亡相关蛋白Bax与Bcl-2和黏附蛋白E-cadherin与β-catenin水平调控BT-20细胞的增殖、凋亡和侵袭能力。 展开更多
关键词 nup88基因 增殖 凋亡 侵袭 乳腺癌 BT-20细胞
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