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Cdh1和Num1过表达菌株的构建
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作者 李巧巧 庞文颖 +1 位作者 海力 唐仙英 《安徽农业科学》 CAS 2019年第10期1-4,9,共5页
[目的]研究Cdh1和Num1之间是否存在相互作用,构建用于Cdh1和Num1免疫共沉淀试验的过表达菌株。[方法]首先在酵母菌株YWL630中用GAL1和3HA对CDH1进行标记,构建GAL1-3HA-CDH1NUM1-GFP菌株,再利用酵母四分体解离的方法使菌株YWL63和YWL490... [目的]研究Cdh1和Num1之间是否存在相互作用,构建用于Cdh1和Num1免疫共沉淀试验的过表达菌株。[方法]首先在酵母菌株YWL630中用GAL1和3HA对CDH1进行标记,构建GAL1-3HA-CDH1NUM1-GFP菌株,再利用酵母四分体解离的方法使菌株YWL63和YWL490分别与该菌株杂交并进行四分体解离,从而得到所需菌株。[结果]成功构建不同基因型和配型的重组酵母菌株,其中YT52成功过表达了约340kD的Num1,YT53成功过表达了340kD的Num1和75kD的Cdh1,YT57成功过表达了75kD的Cdh1。[结论]经过同源重组的方法成功标记CDH1并诱导蛋白过表达,通过酵母四分体解离的方法构建用于Cdh1和Num1互作试验的过表达菌株,为揭示APC/C是否介导Num1的降解及机制奠定基础。 展开更多
关键词 过表达 酵母四分体解离 CDH1 num1
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芽殖酵母Sik1蛋白在纺锤体定位中的功能
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作者 唐仙英 庞文颖 +3 位作者 海力 滕雪 张楠 朱顺 《中南民族大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2021年第3期252-257,共6页
为了探究芽殖酵母蛋白Sik1在有丝分裂纺锤体定位中的功能,利用同源重组技术将SIK1的内源启动子替换成GAL1启动子,得到基因组位点过表达SIK1的菌株,同时使菌株表达GFP-Tub1,以便观察纺锤体;接着在12℃低温条件下培养细胞以促进双核细胞... 为了探究芽殖酵母蛋白Sik1在有丝分裂纺锤体定位中的功能,利用同源重组技术将SIK1的内源启动子替换成GAL1启动子,得到基因组位点过表达SIK1的菌株,同时使菌株表达GFP-Tub1,以便观察纺锤体;接着在12℃低温条件下培养细胞以促进双核细胞的产生,细胞经乙醇固定、DAPI染色后在荧光显微镜下观察细胞核分裂及纺锤体定位;最后检测SIK1过表达对细胞生存能力的影响.结果表明:过表达Sik1会干扰纺锤体定位,但对细胞核迁移没有明显影响.在16℃低温胁迫条件下,过表达Sik1降低了纺锤体定位突变体kar9Δ的生长活力却部分恢复了num1Δ细胞的生长,说明Sik1可能在Dynein通路中起作用. 展开更多
关键词 芽殖酵母 纺锤体定位 Sik1 num1 核迁移
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Num1和Pil1超表达菌株构建及互作关系探究
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作者 海力 肖瑶 +2 位作者 庞文颖 滕雪 唐仙英 《安徽农业科学》 CAS 2020年第18期107-111,共5页
为了研究Num1和Pil1之间是否存在互作,构建了Pil1超表达菌株,并通过酵母四分体解离技术成功构建得到用于免疫共沉淀试验的超表达Pil1和Num1的菌株。通过免疫共沉淀试验对Num1与Pil1的互作关系进行初步研究,并对试验中遇到问题的可能原... 为了研究Num1和Pil1之间是否存在互作,构建了Pil1超表达菌株,并通过酵母四分体解离技术成功构建得到用于免疫共沉淀试验的超表达Pil1和Num1的菌株。通过免疫共沉淀试验对Num1与Pil1的互作关系进行初步研究,并对试验中遇到问题的可能原因进行了分析。这些结果为研究Pil1是否参与细胞膜上Num1簇的形成奠定了基础。 展开更多
关键词 酵母 num1 Pil1 免疫共沉淀
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老挝南公1水电站大坝填筑施工质量控制 被引量:1
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作者 田聪 汪华东 《四川水力发电》 2020年第S02期73-76,共4页
老挝南公1水电站大坝填筑施工强度大,质量要求高,施工过程中,对坝料开采、填筑碾压参数以及取样试验检测等环节进行了质量控制,同时采用合理的填筑方法和机械设备配置,通过配套的坝体填筑施工技术的应用和健全的质量管理体系,保证了大... 老挝南公1水电站大坝填筑施工强度大,质量要求高,施工过程中,对坝料开采、填筑碾压参数以及取样试验检测等环节进行了质量控制,同时采用合理的填筑方法和机械设备配置,通过配套的坝体填筑施工技术的应用和健全的质量管理体系,保证了大坝填筑压实质量达到了高标准要求。介绍了所采用的大坝填筑施工质量控制措施。 展开更多
关键词 老挝南公1水电站 面板堆石坝 大坝填筑 施工质量控制
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四川方言中“数1+打+数2+量”和“量+把+量”两种格式探析
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作者 王倩 《广西科技师范学院学报》 2017年第2期69-73,共5页
在四川方言中,存在着两种特殊的表量格式,分别为格式1"数1+打+数2+量"和格式2"量+把+量"。打和把本身都是动作动词,在历史流变中形成分别以两者为形式标志的表量结构,以"打"和"把"为形式标志... 在四川方言中,存在着两种特殊的表量格式,分别为格式1"数1+打+数2+量"和格式2"量+把+量"。打和把本身都是动作动词,在历史流变中形成分别以两者为形式标志的表量结构,以"打"和"把"为形式标志进行组合的表量结构对于量词和数词也有一定的选择和要求;两种形式有表量多少的语义偏向,与衍推序列有关。 展开更多
关键词 1+打+数2+量 量+把+量 表量 衍推
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